猪血小板衍生生长因子的提取和纯化

目的 :建立简单、有效的猪血小板衍生生长因子 (p PDGF)纯化方法。方法 :采用超声裂解、酸醇抽提、离子交换色谱、凝胶色谱等方法提纯 p PDGF,用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其相对分子质量 ,并检测其生物学活性。结果 :纯化的 p PDGF相对分子质量为 (2 .879～ 3.0 78)× 10 4,纯化倍数为 75 82倍 ,活性回收率为 3% ,比活性为 3.41176× 10 5 U/ mg。 结论 :提取和纯化 p PDGF的方法简单 ,且达到较好的结果 ,为进一步研究 PDGF的理化性质及生物学特性打下基础。     

血小板衍化生长因子及其受体与疾病关系研究进展

血小板衍化生长因子(PDGF)是生长因子家族成员之一,是最早发现的原癌基因之一,被认为在间质细胞的迁移和增殖中起着重要的作用。PDGF及其受体还在胚胎形成时期的血管发生,肾脏、脑、心血管、肺泡的发育中扮演着重要的角色,现在的临床研究也显示,PDGF及其受体的异常表达与肿瘤、冠状动脉粥样硬化、肺纤维化、系膜增生性肾炎、创伤等疾病有关。     

血小板衍化生长因子与缺血性脑血管病

血小板衍化生成因子（PDGF）是一种由多种细胞合成和分泌的多功能蛋白质，对胶质细胞和间质细胞具有促有丝分裂和趋化作用，PDGF及其受体（PDGFR）在神经系统中广泛表达，与缺血性脑血管病的发生密切相关，章综述了PDGF及其PDGFR的结构，分布，生物学活性，以及与缺血性脑血管病的关系和作用机制。     

血小板衍化内皮细胞生长因子在肝癌中的表达及干预治疗

目的 了解血小板衍化内皮细胞生长因子（ＰＤ－ＥＣＧＦ）在肝癌中的表达,探讨与其相关的卡培他滨（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ,ＣＡＰ）治疗对肝癌生长和转移的作用。方法 用免疫组织化学法检测６１例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者地组织中ＰＤ－ＥＣＧＦ蛋白水平。应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ法对其中２８例ＨＣＣ组织中ＰＤ－ＥＣＧＦ ｍＲＮＡ水平作相对定量分析。用２４只裸鼠人肝癌高转移模型ＬＣＩ－Ｄ２０,于肿瘤种植后第     

血小板衍化内皮细胞生长因子在胃癌中的表达及其预后意义

目的:研究TP/PD-ECGF在胃癌中的表达情况,并对其与胃癌患者临床病理特征和预后的关系进行探讨.方法:采用免疫组化EnVision两步法检测107例胃癌组织中TP/PD-ECGF的表达,并分析其与胃癌患者临床病理特征及预后的关系.结果:胃癌患者中TP/PD-ECGF阳性表达率为71.0%.TP/PD-ECGF表达与肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移及分化程度呈正相关.TP/PD-ECGF阳性与阴性表达患者3年、5年总生存率分别为69.04%、18.12%和88.87%、75.20%,二者差异有统计学意义(P=0.0383).Cox比例风险模型多因素分析显示,肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移及TP/PD-ECGF均是影响胃癌预后独立的危险因素.结论:TP/PD-ECGF在胃癌组织中呈高表达,与胃癌生长和浸润转移关系密切,可作为胃癌独立的预后因素.     

血小板衍化生长因子对离体牙周膜细胞增殖的影响

目的：探讨血小板衍化生长因子-β（Platelet-derived growth factor-β，PDGF-β）对离体人牙周膜细胞（periodontal ligament cells,PDLCs)增殖的影响。方法：体外培养人PDLCs，与不同浓度的的PDGF-β作用，用噻唑蓝（MTT）比色法进行观察。结果：PDGF-β作用后PDLCs的增殖较对照组有明显的升高，而且具有浓度效应。结论：PDGF-β可促进离体人PDLCs的增殖。     

大鼠急性脊髓损伤后血小板衍化生长因子-B的表达

目的:探讨血小板衍化生长因子-B(PDGF-B)在脊髓损伤(SCI)后对脊髓功能恢复的作用。方法:健康雌性SD大鼠48只随机分为免疫组化组(30只)和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)组(18只)。麻醉后,用改制的Ⅱ型纽约大学装置建立大鼠脊髓急性损伤模型。用免疫组化检测急性SCI后不同时段PDGF-B在脊髓中的表达,用RT-PCR检测PDGF-B的mRNA在急性SCI后不同时段表达的变化。结果:①PDGF-B蛋白表达:急性SCI后24 h,PDGF-B在损伤区周围神经元的表达开始增加(5.92±3.23),并于7 d后维持在一定水平,14 d后PDGF-B阳性细胞数增多,28 d达高峰(85.00±13.49),主要表达于坏死区增生的神经胶质细胞。②PDGF-B mRNA表达:SCI后1 d,PDGF-B mRNA表达降低,3 d接近正常,随后略有下降,14 d后mRNA表达升高,28 d基本回到正常。结论:急性SCI后,PDGF-B对损伤脊髓的功能恢复有重要作用。     

血小板源性生长因子(PDGF)、血清反应因子(SRF)和波形蛋白在人脑胶质瘤中表达的临床意义

 目的 研究血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)、血清反应因子(serum response factor,SRF)和波形蛋白(vimentin)在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化染色法检测13例正常脑组织和70例人脑胶质瘤组织中PDGF-B、SRF和波形蛋白的表达并分析其临床意义。结果 PDGF B、SRF和波形蛋白在人脑胶质瘤组织中高表达,阳性表达率分别为67.14%、48.57%和81.43%,差异有统计学意义(P<0.05);三者在脑胶质瘤中的表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤大小无关(P>0.05)。随着胶质瘤恶性程度增加,三者表达逐渐上调,其中PDGF B、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达与肿瘤分级相关;相关性分析显示PDGF-B与SRF、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达有相关性(P<0.05)。结论 PDGF B、SRF和波形蛋白在脑胶质瘤的发生、发展中可能起到重要的调节作用,与肿瘤恶性程度具有一定的相关性。     

牛血小板衍生生长因子的提取及其生物活性研究

从新鲜牛血中提取出部分纯化的血小板衍生生长因子(PDGF),对其生物活性进行了观察。收集新鲜牛血小板,用加热100℃处理和CM—SephadexC—50离子交换层析法提取出PDGF,并用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析,发现PDGF有四种主要成分,分子量分别为70、30、27和15KD。植入兔角膜后见该PDGF可刺激毛细血管生长和成纤维细胞增殖,是一种耐热、耐酸、易被胰蛋白酶破坏、灭活的阳离子多肽。     

苦参碱抑制血小板衍生生长因子诱导的小鼠皮肤成纤维细胞增殖

目的：探讨苦参碱对血小板衍生生长因子－ＢＢ（ＰＤＧＦ－ＢＢ）诱导的小鼠成纤维细胞增殖的影响。方法：取新生ＩＣＲ小鼠皮肤细胞培养成纤维细胞。用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法和细胞计数法分析细胞增殖情况。结果：５０￣２５０μｇ／ｍｌ的苦参碱能剂量依赖地降低血清刺激的细胞增殖,撤除苦参碱后抑制作用能完全逆转。苦参碱（１００￣５００μｇ／ｍｌ）亦能剂量依赖地抑制ＰＤＧＦ－ＢＢ诱导的细胞增殖。结论：苦参碱显示了     

苯那普利减轻大鼠肾小球硬化及对血小板源性生长因子表达的影响

目的　进一步探讨血管紧张素转化酶抑制剂 (ACEI)减轻肾小球硬化的机理。方法　 3 6只雄性大鼠分为对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组行单侧肾切除大鼠加阿霉素注射 ,治疗组再给予每日苯那普利 6mg .kg- 1 灌胃 1次 ,共 12周。免疫组化法检测肾组织血小板源性生长因子 BB(PDGF BB)的表达 ,并进行半定量分析。计算不同组别肾小球硬化指数。结果　模型组较对照组肾小球硬化明显 ,PDGF BB表达明显增强 (P <0 .0 11) ;苯那普利治疗组肾小球硬化较模型组明显减轻 ,PDGF BB表达亦减弱 (P <0 .0 1)。结论　大鼠阿霉素肾病肾小球硬化时 ,PDGF BB表达增强 ,PDGF BB参与肾小球硬化的进展 ;ACEI可能通过降低PDGF BB在肾组织表达发挥其延缓肾小球硬化的作用     

人血小板衍化生长因子-B真核表达质粒的构建

目的：构建含人血小板衍化生长因子—B(hPDGF—B)基因的真核表达质粒，为深入研究hPDGF-B在组织修复中的作用及其在皮肤组织工程中的应用提供物质基础。方法：从原代培养的人脐静脉内皮细胞中提取总RNA，通过逆转录—聚合酶链反应扩增出hPDGF-B目的DNA片段。通过连接酶连入真核质粒pcDNA3.1中，经大肠杆菌DH5α扩增和筛选，构建出重组真核质粒pcDNA.1—hPDGF-B。结果：重组质粒通过BamH I和Hind Ⅲ酶切后，电泳图显示0．6kb的hPDGF-B的目的片段和5．5kb的载体片段，证明重组质粒连接正确。经测序显示核苷酸及相应氨基酸序列正确无误。结论：含hPDGF-B基因的真核表达质粒被成功构建。     

猪血小板衍生生长因子的高效液相色谱分析及对血管内皮细胞DNA合成的影响

目的：测定猪血小板衍生生长因子的相对分子质量和纯度并观察其对培养的人血管内皮细胞DNA合成的影响。方法：用高效液想象以谱凝胶过滤柱,标准蛋白制备标准曲线,测定猪血小板衍生生长因子的相对分子质量和纯度;采用培养的人脐静脉血管内皮细胞,应用^3H-TdR掺入的方法。观察猪血小板衍生生长因子对血管内皮细胞DNA合成的影响。结果：测得的猪血小板衍生生长因子的相对分子质量为29120,纯度为89.46%;猪血小板衍生生长因子可促进处于静止状态的人血管内皮细胞DNA的合成,在40ng/ml的质量浓度时DNA的全盛最为明显,且于血小板衍生生长因子作用48h时合成最为显。结论：猪血小板衍生生长因子的相对分子质量为29120,可明显促进培养的血管内皮细胞DNA的合成。     

人胰腺癌血小板活化生长因子及其受体基因表达

目的：观察胰腺和癌变标本中血小板活化生长因子ＰＤＧＦ及其受体ＰＤＧＦＲ基因表达的变化关系，探讨ＰＤＧＦ及其ＰＤＧＦＲ在肿瘤袭和转移过程中的作用。方法：用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法，采用ｃＤＮＡ探针（ＰＤＧＦ Ａ、Ｂ，ＰＤＧＦＲ－α、－β）对两株胰腺癌细胞（ＰａＴｕ８９８８、ＰａＴｕ８９０２）、１５例胰腺癌手术切除标本和８例正常胰腺组织标本进行了分子杂交检测。结果：正常胰腺组织中，在ＲＮＡ水平，ＰＤＧ     

血小板源性生长因子对人视网膜色素上皮细胞的作用

目的　观察血小板源性生长因子 (PDGF)对人视网膜色素上皮细胞 (hRPE)增殖和移行能力的影响 .方法　将体外培养的第 46代人视网膜色素上皮细胞分为DMEM组(改良型Eagle培养液 )和含有 2 0mL·L-1小牛血清的DMEM组(2 0 g·L-1DMEM ) ,每组分别加入不同浓度 (0 .1,1,5 ,10 ,5 0和 10 0 μg·L-1)的PDGF ,然后采用MTT比色法观察分析其对hRPE的增殖作用 ;应用hRPE损伤模型 ,计数进入缺损区的细胞 ,定量观察PDGF对hRPE移行的影响 .结果　①增殖作用 :0 .110 0 μg·L-1的PDGF均能促进hRPE的增殖 ,DMEM组 10 μg·L-1时促增殖作用最明显 ,增殖率达15 3% ;2 0 g·L-1DMEM组 5 0 10 0 μg·L-1的增殖率为 174% ,作用最强 .②移行作用 :PDGF能够显著促进hRPE的移行 ,并呈剂量依赖性 ,5 0 10 0 μg·L-1时促移行能力最强 ,DMEM组移行率为 5 10 % ,2 0mL·L-1FBS +DMEM组达 6 40 % .结论　PDGF能够促进hRPE的增殖和移行 ,有血清时可以加强这种作用 ,提示它在PVR的发病过程中可能发挥了重要作用