海洋低温BS041208菌株选育及发酵培养基的研究(Ⅰ)

以从渤海和黄海分离出的400株在低温条件下生长良好的菌株为出发菌株,利用常规筛选方法筛选出2株低温蛋白酶产生菌(Bacillussubtilis)。经UV、DES、NTG、EMS、LiCl单独及复合诱变,选育出一株(BS041208)蛋白酶高产突变株。通过单因素实验,确定了BS041208菌株蛋白酶发酵培养基为:玉米淀粉糖0.7%,豆饼粉1.6%,K2HPO40.8%,KH2PO40.6%。该突变株低温蛋白酶产量为867.5U/mg。     

高效发酵啤酒酵母融合菌株的低温发酵实验研究

以啤酒酵母b和啤酒酵母c为供试菌株,通过递归原生质体融合技术得到高效发酵啤酒酵母融合菌株。通过测定其发酵速度和TVDK含量进行初筛,选取5株融合菌株进行低温发酵实验测定发酵度、凝聚性、乙醛、风味物质等理化指标进行复筛。并对高效发酵融合菌株进行遗传稳定性实验。结果表明:通过原生质体递归融合得到的融合菌株与供试菌株相比,表现出降糖速度提高43.3%,TVDK含量降低35%~50%之间,发酵度符合优良菌株的要求,且具有较好的凝聚性能,风味得到改善,遗传稳定性较佳。     

低温快速发酵酵母菌的选育

经紧外线诱变处理,从法国酵母中筛选到一株在较低温度(20℃)下快速发酵的面包酵母U.V-45。在相同测定条件下,U.V-45比目前市售活性最高的美国酵母发酵力高29～40%;比出发苗株高24～28%。研究中还采用了原生质体融合育种方法,但未得到优于U.V—45的生产菌株。     

产低温蛋白酶酵母菌株的筛选及发酵培养基优化

该研究从新疆本地分离获得的200株酵母菌中筛选产低温蛋白酶的菌株,并通过形态观察、生理生化试验及分子生物学方法 对菌株WLY1、WLY2和MLY1进行鉴定,最后通过响应面法对20 ℃条件下蛋白酶活力高的菌株的发酵培养基配方优化。 结果表明, 共筛选到14株产低温蛋白酶菌株,其中3株（WLY1、WLY2和MLY1）于20 ℃条件下仍具有较强的产低温蛋白酶能力,其蛋白酶酶活 力依次为69.03 U/mL、34.20 U/mL、29.70 U/mL;鉴定菌株WLY1、WLY2和MLY1分别为双倒卵形红冬孢酵母（Rhodosporidium diobo- vatum）、Cryptococcus adeliensis、Barnettozyma californica;其中菌株WLY1产低温蛋白酶能力强,且其最佳产蛋白酶培养基配方为酵 母浸粉1.64%、蛋白胨1.21%、干酪素1.48%。在此最优条件下,菌株WLY1的蛋白酶活力达到251.51U/mL,约为优化前的4倍,同比其 他产蛋白酶功能菌具有较大的工业应用潜力。     

产低温淀粉酶海洋细菌HYM-7发酵条件研究

采用平板初筛和摇瓶复筛等方法,从秦皇岛渤海海域的海水样品中,分离获得产淀粉酶活力较高的菌株HYM-7,初步鉴定为解淀粉类芽孢杆菌（Paenibacillus.amylolyticus）,设计单因素和正交实验,确定该菌的最佳发酵条件。结果表明:在装液量50mL液体培养基的250mL三角瓶中,采用单因素实验得最佳接种量为1%,最适产酶时间为48h,最适碳源为玉米淀粉,氮源为大豆粉,Ca2+和Mg2+可显著提高产酶量;采用正交实验得最适发酵培养基配方（g/L）:玉米淀粉4、大豆粉10、可溶性淀粉2、MgSO40.2、CaCl20.4。对优化的发酵培养基进行验证,测得酶活力为34.62U·mL-1,较基础培养基酶活提高60.8%。      

产中性蛋白酶菌株发酵条件的研究

本文对一株产中性蛋白酶枯草芽孢杆菌的发酵条件进行了研究,考察不同因素条件下对产酶的影响.结果表明:该菌株发酵产酶的最适条件:碳源为2%玉米粉,氮源为1%牛肉膏,添加0.2%NaH2PO4、发酵初始pH＝6、接种量为6%、250ml三角瓶装液量为50ml.     

海洋低温α-淀粉酶菌株Bacillus thuringiensis dsh 19-1发酵条件研究

α-淀粉酶是催化淀粉水解的酶类,其广泛应用于食品、医学等领域。该研究利用响应面法设计试验,优化了海洋低温α-淀粉酶菌株Bacillus thuringiensis dsh 19-1的发酵条件。其最佳发酵条件为发酵时间42.4 h,发酵温度20.6 ℃,接种量4.1%。在上述优化条件下α-淀粉酶酶活可达3.06 U/mL,较优化前提高17.69%。     

壳聚糖酶高产菌株选育及发酵条件研究

以自筛曲霉CJ2 2 -3为出发株 ,经紫外线和6 0 Co诱变处理 ,获得 1株壳聚糖酶高产菌株CJ2 2 -3 2 6,经正交实验初步优化了其液态产酶培养基 :壳聚糖 1 5 % ,麸皮 2 % ,(NH4 ) 2 SO4 0 2 % ,KH2 PO4 0 2 % ,MgSO4 0 0 5 % ,Tween -80 0 0 5 % ,pH5 5。优化的发酵条件为 :装液量 75mL/ 2 5 0mL三角瓶 ,摇床转速 1 5 0r/min ,发酵温度为 3 0℃ ,发酵时间为 96h。在此条件下 ,CJ2 2 -3 2 6产酶活力为3 0 6U/mL。     

产中性蛋白酶菌株发酵条件的研究

对一株产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌的发酵条件进行了优化，确定其最适培养基配方为豆饼粉3％、玉米粉3％、麸皮2,5％、KH2PO4 0.05％、Na2HPO4 0．4％，最适摇瓶培养条件为种龄8h、接种量2％、装液量50mL／250mL、摇床转速180r／min、32℃培养33h，中性蛋白酶的摇瓶发酵单位最高可达4830U／mL。     

产蛋白酶海洋细菌的筛选、鉴定及发酵培养基的研究

采用酪蛋白培养基,对来源于中国南海的深海海泥进行微生物的富集与筛选,分离出18株产蛋白酶海洋细菌,从中筛选出一株产蛋白酶活力最高的菌株C-7,结合生理生化实验及16S rDNA基因序列鉴定为苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）。该菌株所产蛋白酶的最适反应温度为50℃,最适pH7,属于中温中性蛋白酶,该蛋白酶在15%NaCl条件下仍能保持原有酶活的43%,具有良好的耐盐性。优化后该菌株产蛋白酶培养基为:葡萄糖5.0g,蛋白胨10.0g,KH2PO40.5g,MgSO4·7H2O 0.3g,NaCl 10.0g,CaCl20.5g,吐温-80 1.5g,蒸馏水1L,pH7.2。      

海洋溶菌酶高产菌株发酵条件探讨及培养基优化

对海洋溶菌酶高产菌株R-J-101液体发酵的主要影响因子进行了单因素实验探讨,确定了最佳培养条件:初始pH为7.5,温度为30℃,转速为200r/min,接种量为6%。采用二次回归正交设计法优化发酵培养基各组分的配比,结果表明,最优培养基组合为:玉米粉0.200%、蛋白胨0.773%、牛肉膏0.132%、NaCl 0.320%、MgSO40.759×10-5mol/L。实验验证优化结果,所得发酵液酶活力为2965U/mg,比未优化前提高了64%。      

果胶酶高产菌株的激光选育及发酵条件的优化

利用氦氖激光诱变原生质体筛选到了一株产果胶酶性能稳定且酶活明显提高的突变株ZH-2。其最适发酵条件为：以2％桔皮粉＋1％乳糖作碳源，以1％（NH4）2SO4＋0．3％酵母膏作氮源，在起始pH7．0，33℃摇床发酵32h左右达产酶高峰。分析ZH-2所产果胶酶的性质得出，酶作用最适条件为：pH6．5，50℃，以聚半乳糖醛酸为底物，酶的热稳定性实验显示，50℃保温60min后，酶活力基本不变。     

C. pasteurianum高产1,3-丙二醇菌株发酵条件的研究(Ⅱ)

确定了 1,3 丙二醇高产菌株 (Clostridium pasteurianum简写为CpN 3 8) 1,3 PD厌氧发酵最适 pH值、温度、时间、接种量分别为 7 0、3 0℃、40h、8% ;在最适发酵条件下 ,3 0L发酵罐中CpN 3 8菌株 1,3 PD产量为 49 0 7g/L ,生产率为 2 9 3 8g/ (L·d)。     

嗜碱性芽孢杆菌产高碱碱性蛋白酶发酵培养基及发酵条件的研究

碱性蛋白酶是指在碱性条件下水解蛋白质肽键的酶类。本实验对一株高产高碱碱性蛋白酶的嗜碱性芽孢杆菌的发酵培养基及发酵工艺进行了优化。确定了发酵培养基所采用的棉籽饼粉最适粒度为80目，麦芽糊精的最佳DE值为30％。并确定了该菌株的最适发酵培养基配方为(g／100ml)：棉籽饼粉3、酵母浸粉1．758、麦芽湖精10、柠檬酸钠0．3、CaCl20．3、K2HPO41；最适摇瓶发酵条件为：     

产碱性蛋白酶的嗜热菌株筛选及发酵条件研究

在河南商丘盐碱地堆肥土壤样中分离到1株产碱性蛋白酶的嗜热菌株SR-15,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。摇瓶发酵研究表明,其适宜培养条件为:玉米粉40g/L,黄豆粉40g/L,MgSO40.5g/L,NaCl10g/L,K2HPO41.0g/L,起始pH10.0,培养温度45℃,摇瓶转速190r/min,250mL三角瓶的装液量100mL,48h后发酵液酶活为1180U/mL。     

低温酸性淀粉酶在酒精发酵中的应用

低温酸性淀粉酶可以将液化过程中没有水解的生淀粉颗粒直接进行水解。试验研究低温酸性淀粉酶在酒精发酵中的应用,发现将低温酸性淀粉酶添加到发酵环节可以提高原料出酒率。     

丁醇高产菌株诱变育种及发酵条件优化研究

利用低温等离子体和亚硝基胍(NTG)对兼性厌氧产丁醇芽孢杆菌(Bacillus sp.)C2菌株进行复合诱变,分离筛选得到3株丁醇和总溶剂产量均有明显提高的突变菌株,其发酵7%玉米醪液后丁醇和总溶剂产量分别达到12.59g/L、12.44g/L、12.74g/L和20.36g/L、20.14g/L、20.79g/L,比出发菌株分别提高21.6%～24.5%和15.4%～19.1%.对编号为414的突变菌株发酵条件进行优化,在100mL三角瓶发酵体系中,该菌株的最适发酵条件为装液量100mL,种龄24h,接种量10%,pH 7(自然),37℃静置发酵72h,在此条件下,414菌株发酵7%玉米醪液产丁醇和总溶剂量分别达到12.58g/L～13.77g/L和21.25g/L～22.27g/L.     

共轭亚油酸高产菌株选育及其发酵条件的研究

以嗜酸乳酸杆菌PB1 (Lactobacillusacidophilus )为出发菌株 ,经紫外线、亚硝基胍单独处理和复合处理 ,获得一株CLA高产菌株U N f3 4,通过单因子和正交试验对该菌株生产共轭亚油酸的发酵条件进行了优化 ,优化的发酵条件是 :培养温度 43℃ ,pH值 7 5 ,培养时间 48h ,在优化条件下 ,U N f3 4可以生产共轭亚油酸达 42 0 5 μg/mL。     

自选育黑曲霉产酸性蛋白酶发酵条件初步研究

本文以黑曲霉作为出发菌株,以农产品的加工副产物米糠、玉米粉等作为培养基主要物料,采用固体发酵生产酸性蛋白酶,对发酵培养基组成及发酵条件进行了初步研究。试验结果表明,该菌发酵产酶的最适培养基和条件为：米糠20g,玉米粉2%,豆饼粉1%,硝酸铵0.5%,含水量为45mL,调初始pH值7,以6%的接种量接种,在温度35℃下,发酵72h,摇瓶产酶达到990.0U/mL,比基础固体培养基提高了2.6倍。     

β—葡聚糖酶高产菌株的选育及发酵条件的研究

从土样中筛选到一株产β－聚精酶的曲霉ＦＳ６８野生菌株,经ＵＶ,ＮＴＧ等五代诱变,获得变株ＦＳＵＮ－５１。对该菌株产酶条件优化实验结果表明：最佳培养基配方（％）：大麦粉５,黄豆饼粉 ２, ＦｅＳＯ_４· ７Ｈ_２Ｏ ０． ０１, Ｎａ_２ＨＰＯ_４ ０． １, ＣａＣＯ_３ ０． ５, ＭｇＳＯ_４ ０． ０３, ＮａＮＯ_３ ０． ４;最适的发酵条件为产酶ｐＨ为６．５,温度为３１℃,在２５０ｍｌ三角瓶中装量为２５ｍｌ,发酵周期为７２ｈ,摇瓶相对酶活比野生菌株提高６９％。