番石榴叶水提取物对糖尿病小鼠小肠α-葡萄糖苷酶活性的影响

目的 研究番石榴叶水提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用.方法 蒸馏水浸提、浓缩、干燥制备番石榴叶水提取物.昆明小鼠链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型,以小鼠小肠粘膜生理盐水匀浆液作为α-葡萄糖苷酶,与双糖底物孵育,比色法测定葡萄糖产量代表α-葡萄糖苷酶的活性.比较正常小鼠和糖尿病小鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶活性,以及番石榴叶水提取物对小肠粘膜α-葡萄糖苷酶活性的影响,Lineweaver-Burk作图判断水提物对α-葡萄糖苷酶抑制作用类型.结果 番石榴叶水提取物对小肠α-葡萄糖苷酶活性具有较强的抑制作用,并呈剂量效应关系;对蔗糖酶和麦芽糖酶的半数抑制浓度(IC50)分别为1.0 g/L和3.0 g/L,抑制作用类型为竞争性和非竞争性混合型.结论 番石榴叶水提取物具有抑制糖尿病小鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶作用.     

苍耳子水提液对过敏性鼻炎小鼠的治疗作用及机制研究

[目的] 探讨苍耳子(Xanthii Fructus，XF)水提液对过敏性鼻炎(allergic rhinitis，AR)小鼠的治疗作用及机制。[方法] 36只BALB/c小鼠随机分为正常对照(normal control，NC)组、AR组、低剂量XF水提液(low-dose XF，L-XF)组(4 mg·kg-1)、中剂量XF水提液(medium-dose XF，M-XF)组(8 mg·kg-1)、高剂量XF水提液(high-dose XF，H-XF)组(16 mg·kg-1)和地塞米松(dexamethasone group，DXM)组(5 mg·kg-1)，每组6只。除NC组外，余下各组小鼠均用卵清白蛋白(ovalbumin，OVA)致敏进行AR造模，随后治疗14 d。治疗结束后，记录小鼠搔鼻和喷嚏次数，并进行鼻炎症状评分；取小鼠鼻腔组织，行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色和糖原(periodic acid-schiff，PAS)染色观察小鼠鼻腔组织学形态变化并评分，中性红染色观察肥大细胞脱颗粒情况，并计算各组药物脱颗粒抑制率；酶联免疫吸附试验检测小鼠血清白三烯C4、组胺及β-氨基己糖苷酶A水平；免疫印迹法检测鼻腔组织T细胞激活连接蛋白(linker for activation of T cell，LAT)、磷酸化LAT(phospho-LAT，p-LAT)、磷脂酶Cγ1(phospholipase Cγ1，PLCγ1)、磷酸化PLCγ1(phospho-PLCγ1，p-PLCγ1)、蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)、磷酸化PKC(phospho-PKC，p-PKC)蛋白的表达。 [结果] 与NC组比较，AR组小鼠的搔鼻、打喷嚏次数显著增加，鼻炎评分显著升高，HE评分以及PAS评分均显著升高，血清白三烯C4、组胺、β-氨基己糖苷酶A水平显著升高，肥大细胞脱颗粒率显著升高，p-LAT/LAT、p-PLCγ1/PLCγ1、p-PKC/PKC的蛋白表达显著升高(P＜0.01)。与AR组比较，各组小鼠搔鼻、打喷嚏次数，以及肥大细胞脱颗粒率显著减少(P＜0.05，P＜0.01)；M-XF组、H-XF组、DXM组的鼻炎评分显著下降，HE评分以及PAS评分显著降低，血清白三烯C4、组胺、β-氨基己糖苷酶A水平显著下降(P＜0.05，P＜0.01)；M-XF组、H-XF组、DXM组的药物脱颗粒抑制率显著高于L-XF组(P＜0.05，P＜0.01)。免疫印迹显示，与AR组比较，各组小鼠鼻腔组织的p-PKC/PKC蛋白表达显著下降(P＜0.05，P＜0.01)，M-XF组、H-XF组、DXM组小鼠鼻腔组织的p-LAT/LAT、p-PLCγ1/PLCγ1的蛋白表达显著下降(P＜0.05，P＜0.01)。 [结论] XF水提液可能通过抑制LAT/PLCγ1/PKC信号通路的表达，抑制肥大细胞脱颗粒，从而改善小鼠AR症状。     

柿叶水提物对高脂诱导的糖尿病小鼠心肌损伤的改善作用及可能机制

目的 探讨柿叶水提物对高脂诱导的糖尿病小鼠心肌损伤的改善作用及可能机制。方法 将75只昆明小鼠随机分为健康对照组、模型组,以及低、中、高剂量柿叶水提物组,每组15只。除健康对照组外,其他组采用高脂饲料喂养建立糖尿病小鼠模型,建模成功后分别给予低、中、高剂量柿叶水提物组小鼠10 g/kg、20 g/kg、40 g/kg的柿叶水提物灌胃,给予健康对照组和模型组小鼠等量生理盐水灌胃,连续干预10 d。干预结束后检测各组小鼠空腹血糖、HbA1c、空腹胰岛素水平,计算肥胖指数、稳态模型胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数;采用ELISA检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶(CK)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL)-4、IL-10水平;采用HE染色法观察心肌组织的病理学变化,采用TUNEL染色法观察心肌细胞凋亡情况,采用Western blot检测心肌组织的iNOS和IL-10蛋白表达水平。结果 与健康对照组相比,模型组小鼠的肥胖指数、空腹血糖水平、HbA1c水平及HOMA-IR指数,血清IL-4、IL-10、TNF-α...     

转Nurr1基因联合全反式维甲酸及银杏提取物诱导的神经干细胞治疗帕金森病大鼠模型

目的探讨核受体相关因子(Nurr1)基因修饰联合全反式维甲酸(ATRA)及银杏提取物(Egb)诱导的神经干细胞(NSCs)移植治疗帕金森病动物模型的疗效及作用机制。方法将建模成功的帕金森病SD大鼠模型分为4组,将溴尿嘧啶(Brdu)标记的单纯胚胎NSCs(NSCs组)、RA/Egb诱导分化的NSCs(RA/Egb组)、单纯转Nurr1基因的NSCs(Nurr1组)和转Nurr1基因联合RA/Egb诱导分化的NSCs(Nurr1 RA/Egb组)分别注入模型鼠右侧纹状体。观察其病理性旋转行为的改善,采用免疫组化染色方法检测酪氨酸羟化酶(TH)、Nurr1、神经丝巢蛋白(nestin)表达及Brdu标记情况,观察移植的NSCs在体内的存活、迁移与分化,并进行TH阳性细胞计数研究脑内多巴胺含量的变化。结果各组动物脑内移植后动物旋转行为较前均有改善,尤以Nurr1 RA/Egb组改善最明显,RA/Egb组次之。免疫组化可见各组移植区均有TH阳性细胞表达,其中Nurr1 RA/Egb组TH染色细胞数更密集,形态更成熟,病理学改善最明显。在Nurr1组和Nurr1 RA/Egb组移植区可见有Nurr1散在表达,在NSCs组和RA/Egb组移植区未见Nurr1明显表达。nestin检测未见有明显阳性表达。结论转Nurr1基因联合全反式维甲酸及银杏提取物诱导的神经干细胞脑内移植后可以存活、迁移、分化并表达TH和Nurr1,部分地改善PD模型旋转行为,增加脑内TH表达。     

赤芍水提物药物血清促HSC-T6细胞凋亡作用的实验研究

目的 应用流式细胞法,研究灌服赤芍水提物后的犬血清对乙醛造模后的肝星状细胞的促凋亡作用.方法 采用乙醛造模后的肝星状细胞株(HSC-T6)作为体外研究模型;以赤芍水提物给彼格犬1次性灌胃,取给药前的血清、给药后2,3 h血清作为实验药物血清.以流式细胞法检测以上采血时间点上2%浓度的血清对乙醛造模后的HSC-T6作用72 h后的促凋亡作用.结果 2,3 h两个时间点的含药血清能明显促进HSC-T6细胞的凋亡,和同样条件下用空白血清培养的HSC-T6细胞相比其凋亡比例(apoptosis,APOP)显著性增加(P＜0.05).在药物血清的作用下两个时间点组的HSC-T6细胞在G0/G1期细胞比例明显上升(P＜0.05);而S期细胞显著减少(P＜0.05);但G2/M期并没有一致性的变化.结论 两个时间点的药物血清对HSC-T6细胞都有显著的促凋亡作用,且能显著增加HSC-T6细胞在G0/G1期的比例及显著降低S期的比例,这可能是其抑制HSC-T6细胞增殖及促凋亡的原因之一.