附子中生物碱含量与在胆巴液中浸泡时间变化规律的研究

目的:采用高效液相色谱法检测在胆巴溶液中浸泡不同时间的附子中6种生物碱的含量,分析附子中生物碱成分随浸泡时间的变化规律。方法:采用Waters sunfire C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速0.8 mL·min-1,柱温30℃,检测波长235 nm,流动相乙腈-四氢呋喃(25∶15)和0.1 mol·L-1醋酸铵溶液(每1 000 mL加冰醋酸0.5 mL),梯度洗脱。结果:泥附子洗净后在胆巴溶液中浸泡,新乌头碱、次乌头碱、乌头碱和苯甲酰新乌头原碱的含量逐渐降低,浸泡20 d后,成分变化趋于平缓。浸泡20 d样品与生品比较,其降低率分别为60.39%,73.84%,72.57%和88.46%。结论:泥附子洗净后在胆巴溶液中浸泡,能达到防止腐烂的目的,浸泡20 d以后胆附子质量稳定,同时双酯型和单酯型生物碱总量均流失70%左右,为保证临床用药的安全和有效,有必要改进泥附子产地加工方法。     

不同浓度胆巴液浸泡下附子中生物碱含量变化研究

目的:为了规范附子加工工艺,研究附子在胆巴液浸泡过程中6种酯型生物碱的含量变化。研究方案设定了胆巴液的浓度及浸泡时间,为优化附子的泡胆过程提供依据。方法:采用高效液相色谱法测定附子中6种酯型生物碱的含量。流动相为乙腈-四氢呋喃(A,25∶15)和0. 1 mol·L~(-1)醋酸铵溶液(B),洗脱梯度为0～48 min,15%～26%A; 48～49 min,26%～35%A; 49～58 min,35%A; 58～65 min,35%～15%;检测波长为235 nm。结果:胆巴液浓度≥15%时,采挖后的泥附子中苯甲酰新乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的含量均呈下降趋势,且浓度越高,下降越明显。整体下降趋势在18 d以后趋于平缓,在浸泡第18 d后分别下降60%～80%,20%～50%,75%～85%,20%～60%。结论:不同浓度的胆巴液浸泡下,附子的质量变化不同。其中,在10%浓度的胆巴液中浸泡,质量不稳定,在20%及以上浓度的胆巴液中泡胆,附子的质量相对稳定。在胆巴液浸泡过程中附子药材的效/毒比也在发生变化,在18～24 d期间,呈现出活性成分较高,而毒性成分较少的状态,有利于实际生产。     

陕产附子泡胆工艺的改进和优化研究

目的 探讨氯化钙代替胆巴进行陕产附子泡胆的可能性和科学性,并对泡胆工艺参数进行优选。方法 以单/双酯型生物碱的含量为指标,进行胆巴溶液浸泡与氯化钙溶液浸泡陕产附子的泡胆工艺平行比较研究,然后以效/毒为评价指标,通过单因素试验结合Box-Behnken响应面法,研究浸泡时间(分别浸泡6、12、18、24、30天,)、氯化钙浓度(分别加入浓度为10%、15%、20%、25%、30%的氯化钙溶液)、料液比(分别按料液比为1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6加入25%的氯化钙溶液)对泡胆结果的影响,优选最佳泡胆工艺,并进行验证。结果 陕产附子分别经过较长时间的胆巴溶液、氯化钙溶液浸泡后生物碱总量均有所下降,且下降趋势一致。响应面最优工艺为：浸泡时间为19天、料液比为1∶4、氯化钙浓度为25%。验证试验中,平均效/毒为(0.069±0.012),在理论值0.071的误差范围内。结论 采用有药典标准的氯化钙代替胆巴作为附子防腐、加工和炮制的辅料。运用星点设计—效应面法,优选的陕产附子氯化钙泡胆工艺操作简便、稳定可靠,可为陕产附子的进一步炮制研究奠定基础。     

黑顺片中胆巴残留量的测定

目的：测定黑顺片中胆巴的残留量,考察不同中药饮片企业生产的黑顺片中胆巴残留量差异,为附子质量控制提供科学依据。方法：采用Na2EDTA滴定法测定。结果：不同中药饮片生产企业的黑顺片中胆巴残留量差异显著,其中最高为10．36％,最低为4．38％。结论：所建立的测定方法操作简单,重复性好,结果准确可靠,可用于附子饮片中胆巴的限量控制。     

市售黑顺片口尝味道与生物碱及胆巴含量的关系探讨

目的：探讨黑顺片中生物碱含量及胆巴残留量与其味觉的关系,为黑顺片质量控制标准的完善提供参考。方法：高效液相色谱法（HPLC）检测黑顺片中6种生物碱成分的含量;Na2EDTA络合滴定法检测胆巴残留量,结合人工口尝对黑顺片味道的测评,综合分析市售黑顺片样品间味道差异与两类成分的关系。结果：32批市售黑顺片中,单酯型生物碱总量均符合《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）2015年版规定;26批黑顺片的双酯型生物碱含量符合《中国药典》2015年版规定,有6批样品质量分数为0.021%~0.030%,合格率为81%,口尝麻舌感明显的黑顺片样品双酯型生物碱含量偏高;胆巴质量分数为1.85%~8.95%,咸味明显的黑顺片样品胆巴残留量偏高;收集的样品中黑顺片味道差异较大,符合《中国药典》2015年版“味淡”要求的约占16%。结论：收集的样品中黑顺片大多符合《中国药典》2015年版中生物碱的质控标准,但味道不合格的比较普遍,双酯型生物碱含量与黑顺片口尝麻舌感有关联性;胆巴含量与咸味有关联性,建议制定相应的胆巴残留量化标准。     

附子总生物碱含量测定方法比较

目的　比较滴定法和紫外分光光度 (U V)法在测定附子总生物碱中差异 ,探讨适宜附子总生物碱的含量测定方法。方法　用两种方法测定相同样品 ,比较测定结果差异 ,并考察操作步骤对测定结果的影响。结果　两种不同的测定方法对附子总生物碱含量测定结果有较大的影响 ,滴定法的加样回收率为 97.7% ,而U V法为 75 .6 % ,滴定法测定结果更准确。水分及萃取静置时间对 UV法测定结果有一定影响。结论　附子总生物碱含量测定以滴定法 (药典法 )为宜 ,紫外分光光度法用于其测定有待于进一步改进     

不同采收期附子多糖含量的比较研究

目的:研究附子多糖的最佳提取工艺及不同采收期附子多糖含量的变化。方法:采用硫酸-蒽酮比色法测定附子粗多糖的含量。结果:附子多糖的最佳提取工艺为料水比1∶40,提取温度90℃,提取时间2h,pH8;以附子多糖含量为指标的最佳采收期为6月下旬到7月上旬。结论:附子中多糖的含量因采收期不同差异较大,在生长后期含量较高。     

蒸制和烘制对附子生物碱成分含量的影响研究

研究蒸制和烘制对附子生物碱含量的影响, 采用UPLC-MS/MS方法, 多反应监测模式(MRM)同时测定附子中13种生物碱成分的含量。结果表明蒸制过程中附子双酯型生物碱含量迅速降低, 单酯型生物碱含量先升后降, 于40 min时达到最高峰, 原碱中乌头原碱、新乌头原碱、次乌头原碱快速增加, 附子灵、宋果灵、多根乌头碱和去甲猪毛菜碱含量相对稳定或略有降低。烘制过程中生物碱成分的动态变化趋势与蒸制过程有明显差异, 双酯型生物碱降解速度比蒸制稍慢, 单酯型生物碱、原碱和总生物碱被不同程度破坏, 含量显著低于同时间点蒸制附片。该研究揭示了附子蒸制或烘制过程中生物碱成分的动态变化规律, 2种炮制方法均能有效去除毒性成分并保留有效成分, 工艺简便易行, 方法可控, 具有推广和应用价值。     

附子理中丸中制附子的6种生物碱成分含量测定

目的:建立高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-QQQ-MS)法同时测定附子理中丸中制附子6种生物碱成分含量的方法。方法:采用Thermo Accucore RP-MS色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相,流速0.3 m L·min-1,柱温30°C。质谱条件:采用电喷雾电离源(ESI),正离子检测模式,扫描方式为多反应离子监测模式(MRM),定量分析离子分别为苯甲酰新乌头碱m/z 105.0,苯甲酰乌头碱m/z 105.0,苯甲酰次乌头碱m/z 542.3,新乌头碱m/z 572.3,乌头碱m/z 586.3,次乌头碱m/z 556.3。结果:苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱、新乌头碱、乌头碱、次乌头碱线性范围分别在0.184 80~1.848 ng(r=0.999 6),0.035 36~0.353 6 ng(r=0.999 6),0.129 60~1.296 ng(r=0.999 8),0.011 65~0.116 5 ng(r=0.999 8),0.002 95~0.029 5 ng(r=0.999 8),0.036 96~0.369 6 ng(r=0.999 8),6种生物碱的含量在一定范围内线性关系良好(r0.999 6)。加样回收率在91.93%~106.70%,RSD均6.00%。结论:该方法简单、准确、灵敏、重复性好,可用于附子理中丸中制附子生物碱成分的含量测定。     

大黄附子汤加丹参治疗胆心综合征的疗效评价

目的:观察并评价大黄附子汤加丹参治疗胆心综合征的临床疗效。方法:采用随机数与就诊顺序相结合方法,将符合入选标准的108例患者随机分为观察组(A组)54例和对照组(B组)54例。观察组给予大黄附子汤加丹参治疗;对照组给予舒胆通和参麦注射液,严重者给予氧氟沙星。两组均治疗15天后评价疗效。结果:与B组比较,A组在总有效率,症状缓解时间,症状、体征及心电图改善方面均有明显差异(P0.05,P0.01);复发率方面明显低于B组,差异具有统计学意义(P0.05)。大黄附子汤加丹参治疗胆心综合征的OR=3.95,OR95%CI=2.69~8.25;RR=0.35,RR95%CI=0.18~0.66;RRR=65.0%,RRR95%CI=34.0%~82.0%;ARR=34.0%,ARR95%CI=8.0%~40.0%;NNT=4,NNT95%CI=3~12(例)。两组在观察期间均未出现不良事件,治疗后检查肝、肾功能均无异常。结论:大黄附子汤加丹参治疗胆心综合征,无论近期,还是远期疗效均较好,且稳定。     

附子不同炮制方法比较分析△

目的:采用高效液相色谱法分析附子不同炮制品中6个生物碱的含量,研究《中国药典》炮制法、蒸制法、炒制法之间的差异。方法:采用《中国药典》2010年版附子含量测定项下方法检测;运用SPSS17.0统计分析软件进行数据处理。结果:各成分分离良好;蒸附片、炒附片、黑顺片、白附片、淡附片、炮附片中双酯型生物碱的量都得到有效降低,但蒸附片和炒附片中单酯型生物碱的含量明显增加。结论:蒸制法、炒制法与《中国药典》炮制法一样,具有相同的炮制减毒能力,但蒸制法和炒制法又能增加毒性小、疗效好的单酯型生物碱类的量,优于《中国药典》炮制法。     

附子神经毒性研究进展

传统中药的安全性是指导其临床应用的坚实基础。附子为"百药之长",具有多种功效,但对机体也表现出明显的神经毒性。附子以酯型生物碱为主要毒性物质基础,可作用于中枢神经系统和周围神经系统,其毒作用机制主要涉及离子通道、神经递质、信号转导和能量代谢等。为提高附子临床应用的安全性,降低神经不良反应,本文基于临床研究和动物实验,从附子毒性物质基础、神经毒作用靶器官和神经毒作用机制3个方面具体阐述附子神经毒性的研究现状。     

附子水溶部分对心律失常的影响

附子水溶部分静注、口服、十二指肠给药均能预防和治疗乌头碱诱发大鼠的心律失常,且作用强度随剂量增加而加强。     

附片质量标准研究

目的:研究提高附片的质量标准。方法:按照2010年版《中国药典》方法测定附片中总灰分和酸不溶性灰分;采用RP-HPLC法测定附片中双酯型生物碱和单酯型生物碱的含量。色谱条件为Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.1 mol.L-1醋酸铵溶液(每1 000 mL加0.5 mL冰醋酸)为A相,乙腈-四氢呋喃(25∶15)为B相,梯度洗脱,检测波长235 nm。结果:附片中总灰分、酸不溶性灰分含量差异很大;单酯型生物碱总量较为稳定,而双酯型生物碱总量相差较大,提示应制定附片中双酯型生物碱的含量幅度范围。结论:本法操作简便、可行,结果稳定,为附片质量控制提供参考方法。     

生附子中次乌头碱的含量测定及其道地性研究

目的:探讨附子(川乌)产量、主成分含量与降雨、光照、土壤等生态因素的关系,研究附子道地性形成机制.方法:采用江油、成都、雅安三点试验测定比较不同产地附子的株高、产量等农艺性状;利用HPLC测定不同产地生附子中次乌头碱含量,分析气候、土壤等因素与附子道地性之间的关系.结果:江油、成都、雅安附子块根次乌头碱含量分别为1.099,1.087,0.755 mg·g-1;产量分别为65.288,59.028,48.190 kg/hm2.结论:生态因子对附子的生物产量及有效成分次乌头碱含量均有影响,其中日照时数、降雨量及土壤pH等因素显著影响附子的道地性.     

附子品质评价及影响因素研究进展＊

附子为常用的大宗传统药材，其质量关系到用药安全性和有效性。本文对古代及现代附子的品质评价和影响因素进行了系统综述。研究发现，加工过程炮制不规范，以及相关标准缺乏，存在过度炮制，是导致附子饮片质量差异较大的原因；同时附子的质量控制标准不完善，如在附子重金属、农残、二氧化硫等有害物质，以及去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱等强心成分的质量控制方面均较为薄弱，应进一步加强相关研究，建立附子炮制质量规范；此外，种质、产地、栽培方式、采收、加工、贮藏及商品规格等均是影响附子品质的重要因素，这些因素与成分及功效的相关性尚需进一步深入，上述问题的阐明，是附子品质提升和科学评价体系建立的基础。     

基于毒效整合分析的附子药动学、药效学研究

中药成分复杂,大多数中药药效的发挥需要在经胃肠道吸收进入到体内与靶点相互作用后发生。而中药的品种、炮制、剂量、配伍等因素均会影响到药物的体内过程。研究中药在体内动态变化过程对于其毒效研究至关重要。课题组将药动学应用于中药减毒增效研究中,并探索了中药药动学/药效学整合分析的思路与方法。     

盐附子去盐方法及其工艺研究

目的:研究盐附子去盐方法和工艺。方法:以附子总生物碱、多糖及析盐量为指标,并与原去盐工艺相比较,优化盐附子去盐工艺。结果:新方法去盐后附片总生物碱、多糖的含量与原工艺无明显差异,且去盐时间由原来的7天(168 h)缩短至1.5 h。结论:新的去盐方法显著缩短去盐时间,节省用水量,并保证去盐产品的质量;本实验研究对盐附子去盐方法及其工艺进行了填补,另外,本实验采用总生物碱含量、多糖含量及析盐量多指标优选附子去盐方法,为附子其他炮制研究提供思路和方法,为附子炮制品质量评价提供依据。