猪圆环病毒病的研究进展

猪圆环病毒(PCV)是圆环病毒科圆环病毒属成员,是迄今发现最小的动物病毒。PCV有Ⅰ型(PCV1)和Ⅱ型(PCV2)两个基因型。其中PCV1无致病性,而PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原体。PCV2主要侵袭猪的免疫系统,干扰和破坏免疫抗体的产生,导致PCV2与其他多种病原混合感染而     

猪圆环病毒病原生物学研究进展

猪圆环病毒是单链环状DNA病毒,有2种不同的血清型:猪圆环病毒1型和猪圆环病毒2型.现有研究表明PCV1暂无致病性,PCV2则被认为是引起猪圆环病毒病的主要病原.许多国家养猪业的经济效益因此受到重大的影响.对PCV病原生物学的研究进展进行了综述.     

猪圆环病毒2型分子生物学研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病因。目前流行的PCV2被分为PCV2a和PCV2b两个亚群。北美和其他国家PCVAD的暴发通常与主要基因型从PCV2a转变为PCV2b有关。本文对圆环病毒2型的分子结构及其表达产物的生物学活性的研究进展进行了综述,最后对分子差异和致病性进行了讨论。     

猪圆环病毒病的分析诊断和治控措施

<正>猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起猪的一种传染病,在屠宰前表现多种多样,包括引起仔猪断奶衰竭综合征、猪皮炎与肾病综合征和母猪的繁殖障碍等,还可导致猪群严重的免疫抑制。1流行与传播不论有无猪圆环病毒病(包括PMWS)的国家,PCV2都被认为是一种普遍存在的病毒。PCV2和PMWS的感染也存     

猪圆环病毒2型的流行特点和综合防治措施

<正>20世纪90年代,许多国家在一些猪体内检测到了一种新型猪圆环病毒(PCV)。PCV发病率可达50%,死亡率可能因猪场条件、继发感染情况而不同,一般在5%⁷0%[1]。该病对养猪业的危害较为严重,现就猪同环病毒的有关情况介绍如下,供广大养殖户参考,以增强其对该病的防治意识。1病原猪圆环病毒病的病原为PCV,隶属网环病毒科圆环病毒属,是目前已知动物病的毒中最小。PCV分为2种血清型,即猪圆环病毒1型(PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2),其中PCV1无临床致病性,广泛存在于正常猪体内;PCV2对各品种、各年     

嵌合猪圆环病毒的构建

[目的]为了构建猪圆环病毒1型(PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)的嵌合病毒,并为PCV2疫苗研究奠定基础.[方法]以PCV1基因组为骨架,将其衣壳基因替换为PCV2衣壳基因,来构建嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)DNA克隆,将PCV1-2 DNA克隆转染PK-15细胞以获得拯救病毒PCV1-2,并测定PCV1-2在PK-15细胞中的增殖特性.[结果]酶切和序列测定显示成功构建出PCV1-2 DNA克隆;免疫荧光试验和PCR检测显示成功获得拯救病毒PCV1-2,其效价达到1060 TCIDs0/mL以上;一步生长曲线显示PCV1-2在PK-15细胞中的增殖特性与其亲本病毒近似.[结论]成功构建了1种具有较高体外增殖能力的嵌合猪圆环病毒.     

猪2型圆环病毒福建株的分离与鉴定

根据猪圆环病毒GenBank中登录的猪圆环病毒2型(PCV2)特征,设计引物对福建省某地疑似PCV2感染病例进行检测。对阳性病料进行猪圆环病毒分离鉴定,得到一株PCV2,命名为FJ11株。     

猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)分离培养与鉴定

猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)病毒在国内外广泛流行,该病毒能降低猪体免疫力,引起其他病原微生物的继发或并发感染。猪圆环病毒病给世界养猪业造成巨大的经济损失,严重影响养猪业发展。为提高猪圆环病的防治率,本实验采用从病料中分离猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2),并接种于PK-15细胞,经过3次传代培养,至进一步纯化病毒株,为后续研究奠定基础。     

断奶仔猪多系统衰竭综合征的诊治

<正>猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)是圆环病毒-2型(PCV-2)感染猪的一种病毒性疾病,近几年来给养猪业发达的国家造成了相当大的经济损失,已成为危害养猪生产的主要疾病之一。1病原猪圆环病毒(PCV)属圆环病毒科、圆环病毒属病毒。该病毒科是国际病毒分类学会第6次病毒分类报告的新增病毒科。目前PCV有两个血清型,即PCV-1和PCV-2,其中后者为主要的致病型。     

猪瘟和猪圆环病毒2型混合感染流行病学调查

2017年龙海市收集35头病死猪的扁桃体、肺脏、脾脏等组织,送到福建农林大学动物科学学院实验室,运用分子生物学技术分别对猪瘟病毒(CSFV)和猪圆环病毒2型(PCV2)进行检测。结果显示,送检的35份样品中猪瘟病毒(CSFV)单一感染阳性6份,阳性率为17.14%;猪圆环病毒2型(PCV2)单一感染阳性9份,阳性率25.71%;猪瘟病毒与猪圆环病毒2型混合感染13例,混合感染率为37.14%。猪瘟病毒(CSFV)总阳性19份,总阳性率为54.28%;猪圆环病毒2型(PCV2)总阳性22份,总阳性率为62.85%。可见,龙海市部分猪场存在猪瘟病毒与猪圆环病毒2型感染,且此两种病毒的混合感染较为严重,相关业者务必加以重视。     

Preparation and Identification of Specific Monoclonal Antibody against Porcine Circovirus Type 2

以人工合成 PCV2 Cap蛋白表位的串联多肽作为抗原免疫 BALB/c小鼠,利用淋巴细胞瘤杂交技术获得了1株稳定分泌抗PCV2-rCap 蛋白的杂交瘤细胞株,命名为670#。该株杂交瘤细胞诱导同品系小鼠产生的腹水抗体效价为l∶100000。 Western blot结果显示,该株单抗可与表达原核 PCV2 PET32a-ORF2重组蛋白、真核表达 ORF1-ORF2串联蛋白及 PCV2全病毒细胞培养物反应;间接 ELISA证明该单核可与 ORF1-ORF2串联蛋白结合;IFA结果表明,该单抗可与天然PCV2病毒结合。该单抗的制备为 PCV2抗原表位分析及分子诊断提供了技术手段。     

猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

参照GenBank收录的猪圆环病毒2型(PCV2)基因组全序列选择保守区域设计合成了引物及其探针,并对其进行了筛选;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqM an荧光定量PCR检测方法.用建立的检测方法对临床采集的组织病料进行了检测,并与常规PCR检测方法作比较.结果显示,所建立的方法灵敏度可达3×101拷贝.μL-1,比常规PCR检测方法灵敏度高10倍,而与猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)没有交叉反应,具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,适合于PCV2的流行病学调查和临床诊断.     

猪圆环病毒病Ⅱ型感染的研究进展

猪圆环病毒病是最近10多年来才发现的一种新的猪病。研究表明,Ⅱ型猪圆环病毒（PCV-2）不仅是断奶仔猪多系统衰竭综合症（PMWS）的病原,而且能够引起多种猪病。近年来,由PCV-2引起的疾病主要有PMWS、猪皮炎及肾病综合征、猪增生性坏死性肺炎等。随着规模化养殖业的不断发展,由PCV-2引起的疫病呈上升趋势,给养猪业带来了巨大的经济损失。为了探讨有效控制该病的方法,特对该病的病原学、流行病学、临床表现、诊断及防制措施的研究情况进行综述。     

猪圆环病Ⅱ型及鉴别诊断技术研究进展

猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科,该病毒有2个血清型:PCV1和PCV2.PCV1广泛存在于猪体内,无致病性;PCV2能直接或间接导致一系列猪的综合性疾病,如猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV),断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),猪呼吸道疾病综合征(PRDC)和成年猪皮炎肾病综合征(PDNS)等,对养猪业危害严重.为了深入了解PCV2致病因素,建立快速鉴别诊断技术,综述了PCV2的猪圆环病毒病及其相关致病因素和目前应用诊断技术研究情况,为研究探讨PCV2的发生和诊断提供借鉴.     

猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法的建立

猪圆环病毒2型（porcine circovirus 2, PCV2）,是感染猪Sus scrofa domestica的一种单链DNA病毒。建立一种快速、灵敏的检测方法,对于PCV2感染猪的筛选和疾病预防非常重要。根据PCV2 ORF2基因保守区,设计了荧光定量聚合酶链式反应（PCR）引物,利用SYBR Green作为荧光染料建立了一种定量检测PCV2的PCR方法。结果表明:该方法具有灵敏度高、特异性强和重复性好的优点,每微升的最低检测限低至101拷贝DNA。利用该方法对34份PCV2阳性临床样本进行检测,检测符合率为100%,明显高于普通PCR方法的50.0%。因此,本研究建立的PCV2实时荧光定量PCR检测方法为该疾病的预防和控制提供一种有效的检测工具。图4表4参26     

猪圆环病毒2型201105ZJ分离株的遗传变异分析

[目的]了解我国部分地区猪圆环病毒2型（PCV2）的遗传变异特性。[方法]使用细胞传代的方法对 PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料进行病毒分离,并通过 PCR、IFA进行初步鉴定,并特异性扩增出该分离病毒的全基因组,并进行同源性和系统进化树分析。[结果]该研究成功分离出1株 PCV2毒株,并命名为201105ZJ株;该分离株能在 PK15细胞上增殖,特异性 PCR检测可扩增出特异性片段,经 PCV2阳性血清作用后,呈现特异性免疫荧光,其 TCID50偏低,为102.67;基因组全长1768bp,与13株参考毒株的序列同源性介于94.1%～96.8%;与 AF055392PCV2a的同源性最高,为96.8%;分离株201105ZJ 和AF055392属于基因型 PCV2a,与 PCV2c基因型亲缘关系较远。[结论]该研究中201105ZJ分离株的遗传变异特征对于疫苗的研发、PCV2致病机理的研究和华东地区 PCVAD的防控提供了理论依据。     

中国部分地区高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学研究

 【目的】对来自2006年猪病流行爆发地的组织样品进行多种病毒的检测,确定引起本次流行的致病病原及PRRSV的分子流行病学特征。【方法】利用（RT-）PCR对采集的样品进行PRRSV北美型和欧洲型、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪血凝性脑脊髓炎病毒（PHEV）、日本乙型脑炎病毒（JEV）以及瘟病毒的检测,对PRRSV阳性的进行ORF5的序列测定并分析。【结果】检测到16份PRRSV北美型阳性样品,PCV2阳性样品2份,其它病毒均未检到。PRRSV ORF5序列分析表明笔者分离到的PRRSV株可分为2个群。【结论】（1）PRRSV与2006年肆虐中国养猪业的猪病流行有直接关系;（2）2006年PRRSV流行株主要是以JX0612株为代表,但不同遗传特征的PRRSV也在流行。     

猪圆环病毒2型的PCR快速检测及其临床应用

根据GenBank中发表的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)基因组序列,设计了2段特异性核苷酸引物.通过对已知PCV2和对照病毒(PCV1、伪狂犬病毒、猪细小病毒)的PCR扩增,证明所设计的引物可用于PCV2的特异性PCR检测.采集来自江苏扬州和泰州地区的157头份临床门诊病料(每头份均为脾脏和腹股沟淋巴结双份病料)进行PCR检测,发现仅从腹股沟淋巴结检出PCV2的占21.65%,仅从脾脏检出PCV2的占7.64%,从脾脏和淋巴结均可检出PCV2的占41.40%,其中扬州市地区感染率为73.47%,泰州地区感染率为66.10%.通过对扬州某屠宰场的32份腹股沟淋巴结的检测,结果表明临床健康猪的PCV2隐性感染率也高达71.88%.     

广西猪圆环病毒2型的遗传进化分析

【目的】了解广西各地当前流行的猪圆环病毒2型（PCV2）基因型差异、出现的时间、致病性及其今后流行趋势。【方法】根据GenBank中已发表的PCV2核苷酸全序列设计1对引物,从广西不同市（县）采集的猪组织样本（脾脏、肺脏、淋巴结、流产胎儿）中成功克隆获得34株PCV2 ORF2基因序列,并对其进行遗传进化分析。【结果】获得的34株PCV2中有9株ORF2基因全长为705bp,1株为696bp,其余的为702bp;经遗传进化分析,发现PCV2可以分为PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e5个基因型,在34株PCV2ORF2基因中,有7株属于PCV2d型,1株属于PCV2e型,25株属于PCV2b型,未发现PCV2a和PCV2c型,而新发现的GXHP-2不归属于任何一个基因型。【结论】广西目前流行的PCV2有PCV2b、PCV2d、PCV2e3个基因型,其中以PCV2b为主。     

猪繁殖障碍性疫病多重PCR诊断方法的建立及其应用

根据GenBank已发表的猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的序列,经DNAstar生物学软件和BLAST序列分析,利用Oligo6.0软件分别设计并合成了4对特异性扩增引物.在初步优化单项PCR反应退火温度和反应体系的基础上,建立了同时检测CSFV、PCV2、PRRSV和PRV的多重PCR诊断方法.结果表明:该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性;对30份临床样品进行检测,结果发现,CSFV、PRRSV、PCV2和PRV的阳性率分别为46.7%、43.3%、53.4%、10.0%,其中,PRV与PCV2、CSFV与PCV2和CSFV与PRRSV混合感染的阳性率分别为6.7%、36.7%和10.0%;PRV、PCV2和PRRSV单一感染的阳性率分别为3.3%、10.0%和33.3%.说明所建立的多重PCR诊断方法,可以应用于CSFV、PRRSV、PCV2和PRV混合感染所引起的猪繁殖障碍性疫病的临床鉴别诊断.