HSP70在严重烧伤大鼠心肌中的表达及其保护作用的研究

目的 研究热休克蛋白70(HSP70)在严重烧伤大鼠心肌中的表达变化规律，并观察诱导热休克反应对烧伤后心肌损害的保护作用。方法 72只Wistar大鼠随机分为单纯烫伤组(B组)、亚砷酸钠预处理组(SA组)，于致伤前及30％TBSAⅢ度烫伤后3、6、12、24、48h检测血清心肌钙蛋白Ⅰ含量变化，Western blot检测心肌组织HSP70蛋白表达情况。结果 大鼠严重烧伤后3h心肌组织HSP70蛋白表达显著升高，伤后48h达高峰。大鼠烫伤后3h血清心肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量即开始明显升高，伤后12h达高峰。亚砷酸钠预处理可显著诱导机体的热休克反应，SA组伤后多数时相点血清cTnⅠ含量显著低于B组，且波动幅度较小。结论 严重烧伤早期即可引起心肌组织HSP70蛋白表达显著增强，HSP70蛋白可能在烧伤后早期心肌损害中发挥其内源性抗损伤机制。     

改良肺动脉灌注在发绀型先天性心脏病体外循环术中的应用

目的研究体外循环中经肺动脉灌注低温组胺酸-酮戊二酸-色氨酸灌注液(HTK)对发绀型先天性心脏病患儿的肺保护作用。方法 30例发绀型先天性心脏病患儿随机分为灌注组和对照组。灌注组体外循环期间肺动脉灌注低温HTK,对照组常规体外循环。围手术期检测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。征得患儿家长同意,取右下肺组织活检,观察病理变化。检测围手术期动脉血气分析及体外循环(CPB)时间、主动脉阻断时间、呼吸机辅助时间、住监护室(ICU)时间、术后住院时间。结果 2组CPB时间、主动脉阻断时间及术后住院时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。灌注组呼吸机辅助时间、住ICU时间均显著低于对照组(P<0.05)。返回ICU后0、12、24和48 h,灌注组氧合指数均明显高于对照组,肺泡-动脉氧分压差明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。体外循环前,灌注组血浆TNF-α与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);返回ICU后0、12、24和48 h灌注组血浆TNF-α与对照组比较明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学观察显示,灌注组体外循环术后肺泡轻度水肿,肺泡内炎症细胞浸润减少;对照组体外循环术后肺泡水肿,肺泡内见大量中性粒细胞浸润。结论改良肺动脉灌注低温HTK可以明显减轻发绀型先天性心脏病体外循环术后肺内炎症反应和改善肺功能。     

HSP60 HSP70 HSP90α在结直肠癌癌旁组织的表达及与病理分级的关系

目的研究结直肠癌、癌旁正常组织中HSP60、HSP70、HSP90α蛋白的表达情况,并分析其与病理分级的关系。方法采用免疫组化法测定49例结直肠癌及其癌旁组织HSP60、HSP70、HSP90α的表达情况。结果免疫组化结果表明结直肠癌组织中HSP60、HSP70和HSP90α表达率及过表达率较其癌旁组织中均有明显差异。HSP60、HSP70、HSP90α在结直肠癌高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌的表达率和过表达率均无明显差异。结论HSP60、HSP70、HSP90α三种蛋白表达水平在结直肠癌组织均明显高于癌旁组织,但是其与病理分级无相关关系,证明这三种蛋白在结直肠癌的发病机理中具有普遍意义,为进一步探索HSPs在结直肠癌发病中作用及机制提供了依据。     

热休克蛋白70及其在心肌保护中的作用

热休克蛋白(heat shock proteins，HSPs)，也称应激蛋白，是一类在结构上高度保守的蛋白，广泛存在于原核生物和真核生物中。因Ritossa首先从果蝇在热应激环境中诱导合成而命名，随后的研究发现除高温外，缺血、低氧、重金属盐及大多数病理状态下都能诱导细胞产生HSPs，而且不同相对分子质量的HSPs也相继被报道。根据HSPs同源程度及相对分子     

人肝癌组织热休克蛋白70的表达

为探讨人肝癌组织热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达及意义 ,采用SABC法检测人肝癌组织HSP70的表达 ,图像分析HSP70在癌组织中的表达特点。结果显示 :2 5例肝癌组织中均存在HSP70的表达 ,不同癌组织存在胞质、胞膜和胞核表达强度及部位的差异。证实人肝癌组织存在HSP70的表达异质性 ,呈现了胞质、胞膜和胞核的表达差异 ,HSP70在人肝癌组织的表达特点为今后肿瘤抗原肽瘤苗的提取和实验研究作了铺垫。     

热休克蛋白70心肌保护研究进展

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是所有原核细胞和真核细胞在高温或应激情况下由热休克基因编码产生的一组序列高度保守的细胞蛋白,又称应激蛋白。参与细胞的损伤与修复。因R itossa[1]首先从果蝇在热应激环境中诱导合成而命名,随后的研究发现除高温外,缺血、低氧、重金属盐及大多数病理状态下都能诱导细胞产生HSP。根据分子量大小和同源程度可分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60、小分子量HSP等几个家族,每个家族又有多个成员。HSP70是HSP中最保守、最主要、含量最丰富的一类。近年来国内外许多学者一直在探索HSP70的特性及…     

热休克蛋白70与心肌保护

热休克蛋白（heat shock proteins，HSPs），也称应激蛋白，是生物体或离体培养细胞在应激状态下产生的一类内源性保护蛋白，因Ritossall^[1]首先从果蝇在热应激环境中诱导合成而命名。     

发绀型先天性心脏病心肌线粒体生物合成观察

目的观察发绀型和非发绀型先天性心脏病心肌线粒体生物合成的特点,探讨慢性缺氧状态下心肌线粒体的适应性改变。方法选取发绀型和非发绀型先天性心脏病各10例,取手术中切除的右室流出道心肌组织,运用透射电镜观察心肌组织线粒体超微结构并进行定量分析,运用实时荧光RT-PCR技术检测心肌组织中线粒体生物合成相关基因过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α(peroxisome-proliferator-activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)和线粒体DNA编码的细胞色素c氧化酶亚单位Ⅰ(cytochrome c oxidase subunitⅠ,COXⅠ)的mRNA表达水平。结果发绀型先心病患者右室流出道心肌线粒体体密度(Vv)和数密度(Nv)明显高于非发绀组(P<0.05)。发绀型先心病患者右室流出道心肌中PGC-1α和COXⅠ的mRNA表达水平均高于非发绀组(P<0.01)。结论发绀型先天性心脏病患者右室流出道心肌线粒体生物合成增强,可能为心肌在慢性缺氧状态下的代偿性改变。     

热休克蛋白70在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:观察热休克蛋白70(HSP70)在人骨肉瘤组织中的表达。方法:采用免疫组化SP法检测55例骨肉瘤组织,其中骨母细胞型24例,软骨母细胞型20例,纤维母细胞型11例,以及30例正常骨组织中HSP70的表达情况。结果:HSP70在正常骨组织与骨肉瘤组织中的表达率分别为20%(6/30)及96.4%(53/55),平均阳性细胞率分别为0.53%和95.57%,两者差异具有统计学意义(P<0.01),在骨母细胞型、软骨母细胞型与纤维母细胞型中阳性表达率分别为98.65%,92.37%,90.36%,三者之间差异无统计学意义。HSP70在骨肉瘤中的表达与病理分级有明显相关性(P<0.05),与临床分期无关(P>0.05)。结论:HSP70在人骨肉瘤组织中高表达,可作为判断恶性程度的重要指标以及肿瘤免疫的重要靶位。     

HSP70和HSP90α在人膀胱癌中的表达及意义

目的　探讨热休克蛋白70(heat- shockprotein70,HSP70)和热休克蛋白90α(heat shockprotein90α,HSP90α)在 膀胱癌中的表达及临床意义。方法　应用免疫组化技术检测HSP70、HSP90α和增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearan tigen,PCNA)在50例膀胱癌组织和14例正常膀胱粘膜组织的表达。结果　膀胱癌中HSP70、HSP90α阳性表达率分别为 56%(28 50)和66%(33 50)。HSP70和HSP90α在膀胱癌病理分级、临床分期、生存率等方面具有显著性差异(P<0.05)。 HSP70、HSP90α和PCNA在膀胱癌中表达呈正相关。结论　HSP70、HSP90α与膀胱癌细胞分化,肿瘤的浸润深度有关,在膀 胱癌发生和发展中起重要作用。HSP70、HSP90α可以作为判断膀胱癌预后的新指标。     

多巴胺对缺血再灌注大鼠心肌热休克蛋白表达的影响

目的：检测心肌细胞缺血再灌注（IR）过程中热休克蛋白70（HSP70）的表达，探讨多巴胺对HSP70表达的影响。方法：不同时间阻断Wistar大鼠冠状动脉的前降支，用合多巴胺或生理盐水的灌注液再灌注5h后，取出心脏前降支支配区的全层心肌组织；用Westen Blot方法检测HSP70的表达。结果：心肌细胞的HSP70袁达随缺血时间的延长而增加。缺血30min时表达最高，其后逐渐减少；灌注液含多巴胺的实验组较相同缺血时间的灌注生理盐水的对照组HSP70衷达均有明显增加（P〈0．05）。结论：心肌HSP70表达与心肌缺血相关，且呈时间依赖性，最走缺血耐受时间为30min左右。多巴胺在心肌缺血再灌注过程中促进HSP70的表达。     

慢性应激对大鼠主动脉超微结构与热休克蛋白70表达的影响

目的:研究慢性应激对大鼠主动脉超微结构与热休克蛋白70(NSP70)表达的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为对照组11只和实验组12只。实验1￣21d,实验组接受各种不同的应激,单笼喂养。对照组群养,不给任何刺激。实验第22d取主动脉组织,透射电镜观察超微结构,免疫组化法检测热休克蛋白70(HSP70)表达。结果:实验组体质量明显下降,水平穿越格数、直立次数、修饰次数减少,粪便粒数、中央格停留时间增加。实验组大鼠主动脉组织出现明显的超微结构改变:部分内皮脱落,平滑肌细胞由收缩表型向合成表型转化,向内膜迁移,线粒体变性。对照组主动脉超微结构基本正常。实验组主动脉HSP70表达高于对照组(P<0.05)。结论:慢性应激可引起主动脉细胞超微结构改变。引起主动脉HSP70表达增强。HSP70既是一种保护因素,也是机体正在经历应激损伤的标志。     

热休克蛋白70对兔未成熟心肌和心肌间质的影响

目的: 探讨热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌和心肌间质的影响. 方法:健康新生长耳大白兔12只随机分为2组. 对照组(C组):ip生理盐水0.4 mL,24 h后取离体心脏,常规建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注15 min转为工作心15 min后停灌45 min,恢复灌注15 min改为工作心30 min;实验组(E组):ip去甲肾上腺素, 24 h后取离体心脏,方法同对照组. 测定心肌细胞中HSP70含量、血流动力学指标、心肌含水量(MWC)、心肌肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET) 含量、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性及其Ca2 含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m,心肌超微结构. 结果:E组HSP70含量明显高于C组(P<0.01);MWC低于C组(P<0.05);ATP含量、SOD活性、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性、[ATP]m, HP含量优于C组(P<0.01),MDA含量、CK, LDH漏出率、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 含量、ET含量低于C组(P<0.01),心肌超微结构损伤较C组明显减轻. 结论:HSP70对缺血再灌注未成熟心肌和心肌间质具有明显的保护作用.     

去甲肾上腺素诱导热休克蛋白70保护心肌细胞的机制

目的探讨去甲肾上腺素预处理心肌细胞后诱导心肌热休克蛋白70(HSP70)的表达及其对心肌细胞保护作用机制。方法 Wistar大鼠乳鼠心肌细胞培养,分为3组:对照组:心肌培养3～5天未施加任何因素;缺氧/复氧组:心肌细胞培养3～5天后,模拟缺氧(加入饱和氮气pH 6.8 D-Hank’s液培养细胞)3 h,复氧(用含20%新生牛血清的DMEM液培养细胞)孵育6 h;去甲肾+缺氧/复氧组:模拟缺氧前30 min加入100 nmol/L去甲肾,其它同缺氧/复氧组。测定心肌HSP70和bcl-2以及相关的细胞凋亡指标。结果 HSP70和bcl-2的表达在去甲肾+缺氧/复氧组明显高于缺氧/复氧组,去甲肾+缺氧/复氧组的细胞凋亡率明显低于缺氧/复氧组。结论去甲肾上腺素预处理可能通过诱导心肌组织HSP70和bcl-2高表达,发挥其对供心的保护作用。     

人热休克蛋白70基因在大肠杆菌中的表达及纯化

目的:构建人热休克蛋白70(HSP70)的原核表达载体,诱导其表达并纯化.方法:应用PCR技术从人胆管癌组织中扩增出HSP 70基因片段,经T-A克隆连接到末端经平滑处理后的pMD18-T Simple质粒并测序.利用双酶切技术构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-HSP 70,并转化大肠杆菌JM 109,经IPTG诱导后表达得到HSP70融合蛋白.应用Glutathione-Sepharose4B亲和层析柱提纯融合蛋白,用生物素化凝血酶分离并纯化目的蛋白,最后行Wsetern blot鉴定.结果:PCR扩增结果与预计目的基因大小一致;序列分析与GeneBank中收录完全一致;重组表达载体pGEX-4T-1-HSP 70构建成功;Western blot结果显示目的蛋白可以与兔抗人的HSP70单克隆抗体特异性结合.结论:HSP 70编码序列已经成功克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,并在大肠杆菌JM 109中获得表达.     

热休克蛋白70在食道鳞状细胞癌中表达及其可能对凋亡的调控

目的 研究热休克蛋白70（HSP70）在食道鳞状细胞癌中的表达与意义。方法 采用鼠抗人HSP70单克隆抗体及免疫组织化学SABC法。结果 在60例食道鳞状细胞癌中，HSP70表达46例（76．7％）。HSP70在食道鳞状细胞癌I级中表达强于在食道鳞状细胞癌Ⅲ级中的表达（P＜0．05）。结论 HSP70在大部分食道鳞状细胞癌中有不同程度表达，HSP70可能参与食道鳞状细胞癌的凋亡调变；其表达与食道鳞状细胞癌分化有关。     

人食管癌组织中热休克蛋白70和糖调节蛋白94的表达

为探讨人食管癌组织中热休克蛋白 70 (HSP70 )和糖调节蛋白 94( grp94)的表达及意义 ,采用SABC法检测人食管癌组织HSP70和grp94的表达 ,镜下观察HSP70和 grp94在癌组织及癌旁组织中的表达特点。结果 :92 .6%( 5 0 /5 4)食管癌组织中存在HSP70的表达 ,癌细胞存在胞质、胞核表达强度及部位的差异 ;而 grp94的表达阳性率为70 .4% ( 3 8/5 4) ,以胞质表达为主 ,而癌旁组织表达较少。提示 :人食管癌组织存在HSP70和 grp94的表达异质性 ,呈现了胞质、胞核的表达差异 ,HSP70和 grp94在人食管癌组织的表达特点为以后肿瘤抗原肽肿瘤疫苗的提取和实验奠定了基础。     

Expression of Heat Shock Protein 70 and 27 in Non-small Cell Lung Cancer and Its Clinical Significance

The heat shock proteins （HSPs） 70 and HSP 27 expression in patients with non-small cell lung cancer （NSCLC） was studied and the relation.ship between HSP 70 and HSP 27 with the clinicopathological features of NSCLC was investigated. The expression of HSP 70 and HSP 27 was detected in tumor tissues from 60 patients with NSCLC by S-P immunohistochemistry. The findings were analyzed in combination with the histological types, histopathological differentiation, lymph node metastasis, patients＇ clinical stages, smoking history and gender. The results showed that of the 60 NSCLC tissue specimens studied, the immunoreactivity of HSP 70 and HSP 27 was detected in 47 （78.3 %） and 43 （71.7 %） specimens, respectively. A positive correlation was found between the overexpression of HSP 70 and HSP 27. The histopathological differentiation, lymph node metastasis, clinical stages and smoking history were correlated to the expression of HSP 70, but not to the expression of HSP 27. No statistical significance was observed in histological types and gender with respect to both HSP 70 and HSP 27 expression. It is suggested that the HSP 70 expression is a powerful and significant prognostic indicator and is related to histopathological differentiation, lymph node metastasis, patients＇ clinical stages, smoking history, whereas HSP 27 expression is not.     

次声作用后大鼠脑中热休克蛋白70的表达和分布

观察次声作用后大鼠脑中热休克蛋白ＨＳＰ７０的表达和分布。方法：ＳＤ大鼠接受频率为８Ｈｚ和１６Ｈｚ,声压为９０ｄＢ和１２０ｄＢ次分别作用１,３,７,１４,２１ｄ后,采用免疫组织化学方法观察大鼠脑中ＨＳＰ７０的表达和分布。结果：各参数次声作一定时间后,ＨＳＰ７０阳性神经元主要布在下丘脑,边缘系统,听觉中枢,皮质,海马等脑区,各脑区出现阳性反应的时间不同,且随次声频率增高、声压增强及作用次数增加,ＨＳＰ     

慢性萎缩性胃炎热休克蛋白70(HSP70)表达的相关研究

目的 探讨热休克蛋白70(heat shock proteins 70,HSF70)在人胃粘膜组织中的表达.方法 采用免疫组化SABC方法检测HSP70在浅表性炎、慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃窦腺癌组织中的表达.结果 HSP70在浅表性炙、慢性萎缩性胃炎伴高级别上皮内瘤变(CAG和H-IN)、胃癌组织中的阳性率分别为27%、49%、67%,过表达率分别为3%、37%、58%,细胞核内阳性过表达率分别为0%、14%、55%.结论 HSP70在胃癌、CAG和H-IN中过度表达,可能在其致病过程中起着重要的作用,进一步研究其分子机制将为胃癌的防治提供理论依据.