益康唑诱导白血病细胞凋亡的实验研究

目的为了研究益康唑(Econazole)诱导鼠粒单核白血病细胞WEHI-3凋亡的机制。方法利用Annexin-V/PI双染实验测定细胞凋亡,Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i),并抽取WEHI-3 细胞内质网部分蛋白,利用Western blot测定Caspase-7、Caspase-12的蛋白表达。结果Econazole作用后WEHI-3出现典型的凋亡改变。细胞内游离[Ca2 ]i较对照明显升高,Western blot结果显示随着细胞内钙离子浓度的提高,Caspase-12和Caspase-7表达逐渐增加。结论Econazole能诱导WEHI-3细胞凋亡,Caspase-12在此过程中起重要作用。     

益康唑诱导HL-60白血病细胞内质网应激反应性细胞凋亡

Objective： To investigate the anti-leukemic function of econazole （Ec）, an azole anti-fungal drug. Methods： We compared efficacy of econazole to induce apoptosis in HL-60 cells with two other known endoplasmic reticulum （ER） stress inducer thapsigargin （Tg） and tunicamycin （Tu）. Results： Cells treated with Ec showed typical morphology of apoptosis following 24 h incubation, parallel to the morphological changes, the expression of molecular chaperone GRP 78 was up-regulated in all cases and the caspase 12, an ER resident caspase was activated. Conclusion： Ec induced ER stress related apoptosis in HL-60 cells; the underlying mechanisms are protein synthesis inhibition through eIF20α phosphorylation and caspase 12 activation.     

倍半萜烯内酯诱导WEHI-3细胞凋亡的实验

目的探讨内质网Ca2+-ATP酶抑制剂Thapsigargin的抗白血病作用机制。 方法利用Annexin-Ⅴ/PI双染实验和琼脂糖凝胶电泳、TUNEL染色测定鼠白血病细胞株（WEHI-3）细胞凋亡,Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度（［Ca2+］i）,并检测在此过程中Caspase-12的表达。结果0.5、1、2 μmol/L Thapsigargin 作用于WEHI-3细胞后,分别用Annexin-V/PI双染实验、琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法测定WEHI-3凋亡率结果均较对照组显著升高（如Annexin-V/PI双染实验测定凋亡率分别为(25.3±3.2)%、(46.7±3.9)%、(70.2±2.3)%较对照组(7.6±0.4)%显著升高(F=26.52,P＜0.01)）,且凋亡率呈剂量依赖性。Thapsigargin 作用后［Ca2+］i分别为（156.5±10.3）nmol/L、(180.3±15.6) nmol/L和(210.7±15.3)nmol/L,均较对照组(78.3±11.2)nmol/L显著升高（F=21.26,P＜0.01）。Caspase-12 mRNA的表达随着Thapsigargin 作用剂量增加而增加。结论Thapsigargin通过Ca2+超载后诱发内质网应激诱导了WEHI-3细胞凋亡,Ca2+可能成为抗肿瘤药物作用新靶点。     

雄黄诱导白血病细胞凋亡的研究

目的探讨雄黄对白血病细胞凋亡及Bc l-2表达水平的影响。方法以阿霉素作用组为阳性对照组,通过四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定药物作用下细胞株的细胞活力(OD值),采用原位细胞凋亡检测法(TUNEL)观察凋亡细胞的形态学改变,用流式细胞仪法(FCM)测定药物作用下细胞株Bc l-2蛋白阳性表达率的变化。结果与ADR相比,雄黄作用组OD值和Bc l-2阳性表达率更低(P<0.05),凋亡率更高(P<0.05)。结论雄黄诱导白血病细胞凋亡的效果较好,且Bc l-2蛋白表达水平的变化能显著改变药物诱导细胞凋亡的能力。     

18β-甘草次酸诱导人乳腺癌细胞凋亡及与细胞内Ca~(2+)释放的关系(英文)

目的探讨18β-甘草次酸对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖抑制和诱导凋亡的作用,并探讨凋亡诱发与细胞内 Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]i)变化的关系。方法 50～250 μmol/L 浓度梯度的18β-甘草次酸处理 MCF-7细胞24小时,用 MTF 比色法测定细胞增殖能力。100 μmol/L,150μmol/L 和200 μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24小时,用末端脱氧核苷转移酶介导 dUTP 末端标记法和 Annexin V 流式细胞仪法检测凋亡细胞。150 μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24小时,用 Fura-2荧光负载方法测定[Ca~(2+)]i 的变化。结果从100 μmol/L 18β-甘草次酸浓度起对 MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.05和 P<0.01),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC_(50))为234.33 μmol/L.100 μmol/L、150 μmol/L 和200 μmol/L18β-甘草次酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.01);18β-甘草次酸处理组的[Ca~(2+)]i 也明显高于对照组(P<0.05)。结论 18β-甘草次酸具有抑制 MCF-7细胞增殖和诱导凋亡的作用,其诱导凋亡可能依赖于细胞内 Ca~(2+)水平上调。     

SeO_2诱导肺癌细胞凋亡中Bcl-2和P53表达及细胞内活性氧和Ca~(2+)水平影响的研究(英文)

目的探讨 SeO_2对三种肺癌肿瘤细胞 A549.GLC-82和 PC 的增生.凋亡,Bcl-2和 p53表达,活性氧和 Ca~(2+)水平的影响。方法本实验采用流式细胞术测定了细胞的凋亡率,细胞中活性氧和 Ca~(2+)的水平以及 Bcl-2和 p53的表达。结果 10 μmol/L 的 SeO_2作用48 h 就能诱导47.8%的 A549和40.8%的 GLC-82细胞凋亡,而30 μmol/L 的 SeO_2也能诱导37.8%的 PG 细胞凋亡。用不同浓度(3～30 μmol/L)的 SeO_2处理细胞48 h,在 A549细胞中,代表细胞 Bcl-2表达的平均荧光强度从65.8下降至9.6,而在其它两种细胞中,Bcl-2的表达下降都不明显。P53的表达在三种细胞中都有不同程度的上升,在 A549细胞中,从3.5上升至7.1,在 GLC-82细胞中,从4.7上升至7.4,在 PG 细胞中,从7.8上升至9.0。SeO_2能显著降低三种细胞内活性氧和Ca~(2+)水平。结论 SeO_2对三种肺癌肿瘤细胞均有诱导凋亡的作用,在凋亡过程中涉及到 Bcl-2下调和 p53上调,以及细胞内活性氧和 Ca~(2+)水平下降。     

槲皮素诱导K562细胞凋亡机制探讨

目的: 研究槲皮素(quercetin)作用于白血病K562细胞后,诱导K562细胞发生凋亡,并探讨此过程中Caspase-3酶活性的变化. 方法: 体外培养K562细胞,应用MTT比色试验测定IC50,观察槲皮素的细胞毒性作用;应用Hoechst33342/PI双荧光染色观察细胞核形态变化;应用CaspACETM分析试剂检测槲皮素诱导K562细胞凋亡时Caspase-3酶活性变化. 结果: quercetin浓度为2×10-5mol/L、4×10-5mol/L、8×10-5mol/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;不同浓度quercetin处理K562细胞48h后,应用MTT比色试验计算IC50为4×10-5mol/L;Hoechst3334/PI双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞凋亡的形态学改变;Caspase-3酶活性明显升高(P<0.05),且升高程度与给药剂量呈正相关. 结论: quercetin通过诱导白血病细胞凋亡发挥其抗肿瘤作用,Caspase-3途径诱导白血病细胞凋亡是其作用机制之一.     

小檗胺诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的实验研究

[目的]研究小檗胺诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的机制。[方法]MTT法测人白血病Jurkat细胞IC50值及细胞毒作用,Hoechst33258荧光染色法观察小檗胺凋亡小体形成,流式细胞仪Annexin-Ⅴ FITC-PI法检测细胞凋亡发生率,PI染色法检测凋亡峰及细胞周期,同时流式细胞仪检测细胞caspase-3蛋白表达。[结果]小檗胺能选择性抑制人白血病Jurkat细胞生长且呈浓度依赖关系,作用48hJurkat细胞IC50值为6.6±0.5μg/ml;小檗胺能诱导Jurkat细胞凋亡,使细胞周期阻滞于S期;同时细胞caspase-3蛋白表达增高。[结论]小檗胺能激活caspase-3蛋白表达,诱导人白血病Jurkat细胞凋亡且呈时效关系。     

阿克拉霉素诱导原代白血病细胞凋亡的实验研究

目的　研究阿克拉霉素 (ACM)体外抑制原代急性白血病 (AL)细胞的生长及其机理。方法　MTT法研究 37例初发AL细胞的生长抑制。DNA片段原位末端标记 (TUNEL)法检测 2 0例AL细胞的凋亡率。结果　ACM体外能明显抑制原代AL细胞的生长 ;细胞形态学、DNA琼脂糖凝胶电泳均证实ACM能诱导原代AL细胞凋亡 ;与空白对照相比 ,ACM在体外与原代AL细胞共同培养 15小时后 ,TUNEL阳性细胞率明显增高 ,差异有统计学意义 (30 89± 15 90 %对 14 85± 15 90 %;P <0 0 1) ;且TUNEL阳性细胞率与MTT抑制率呈正相关 (r =0 32 6 ,P =0 0 4)。结论　诱导细胞凋亡是ACM抑制原代AL细胞增殖的重要机制之一。     

益气养阴方诱导急性白血病细胞凋亡的实验研究

目的：观察益气养阴方诱导急性白血病模型小鼠细胞凋亡的作用。探讨益气养阴方治疗急性白血病的作用机制。方法：以L7212白血病小鼠为研究对象，用益气养阴方浓缩液给小鼠灌胃8d后处死，利用光学显微镜，DNA琼脂糖凝胶电泳等手段观察益气养阴方对急性白血病的作用。结果：形态学观察可见细胞凋亡特征，DNA琼脂糖凝胶电泳图谱显示细胞凋亡现象。结论：本研究提示诱导白血病细胞凋亡是益气养阴方治疗急性白血病的重要机制之一。     

全反式维甲酸诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的初步研究

[目的]研究全反式维甲酸（ATRA）体外诱导人肝癌细胞株HepG2的凋亡及其作用机制。[方法]ATRA处理HepG2细胞。MTT法分析细胞增殖反应;Hoechst染色法检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞中caspase-9、caspase-3和NF-κB蛋白表达情况。[结果]A-TRA可抑制HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡,可上调细胞中caspase-9、caspase-3表达水平（P〈0.05）。[结论]ATRA可抑制HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与cas-pase-9、caspase-3表达上调有关。     

抗CD44抗体HI44a诱导THP-1细胞凋亡作用的研究

背景与目的：研究抗CD44抗体HI44a体外诱导白血病细胞THP-1凋亡的作用及其机制。材料与方法：应用Annexin-Ⅴ/PI染色法、原位凋亡检测试剂盒及透射电镜分别检测形态学变化及其凋亡情况,RT-PCR及western-blot方法检测原癌基因c-myc mRNA及蛋白水平的表达,JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化,流式细胞仪检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果：采用多种方法均可证实,HI44a对THP-1细胞有明显的诱导凋亡作用。HI44a明显抑制THP-1细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达（P﹤0.05）;同时c-myc在mRNA及蛋白水平的表达水平均明显降低;并可诱导细胞线粒体膜电位的改变。结论：HI44a能够有效诱导THP-1细胞凋亡。其作用机制可能是与调节相关癌基因及抗凋亡蛋白的表达,降低线粒体膜电位有关。     

硒-甲基硒代半胱氨酸诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用

[目的]探讨硒-甲基硒代半胱氨酸(MSC)对肝癌HepG2细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用.[方法]用不同浓度的MSC处理培养的HepG2细胞,MTT法和流式细胞仪分别检测其对细胞生长和细胞凋亡的影响,并检测半胱氨酸蛋白酶3,8,9(caspase-3,8,9)的活性.[结果]25μmol/L的MSC处理HepG2细胞24 h后,细胞生长受到明显抑制,出现细胞凋亡,呈现浓度和时间依赖关系.caspase-3,8,9的活性检测显示,25μmol/L MSC处理HepG2细胞24h,48 h后,caspase-3的活性分别升高38.50%和119.72%,caspase-8活性分别升高28.86%和89.42%,caspase-9活性分别升高31.94%和74.28%.50μmol/L的MSC处理24h,48h后,caspase-3活性分别升高82.56%和155.79%,caspase-8活性分别升高48.95%和167.84%,caspase-9活性分别升高55.94%和126.58%.[结论]MSC抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡,其凋亡与caspase-3,8,9的活性增强有关.     

吲哚-3-甲醇诱导人鼻咽癌细胞凋亡作用及机制的初步研究

背景与目的： 了解吲哚-3-甲醇在体外对人鼻咽癌CNE细胞增殖的影响及其诱导CNE细胞凋亡的作用及其可能机制。 材料与方法： 采用WST-1法检测吲哚-3-甲醇在体外对人鼻咽癌CNE细胞增殖的抑制作用;用Hochest33258荧光染色法及TUNEL法观察吲哚-3-甲醇诱导CNE细胞的凋亡;用Western blotting方法检测凋亡相关信号分caspase-9、caspase-3蛋白表达情况,实验同时设空白对照组及溶剂对照组。 结果： 吲哚-3-甲醇在体外可以明显抑制人鼻咽癌细胞增殖,诱导细胞凋亡并呈剂量依赖性,且在细胞凋亡过程中,半胱天冬酶家族成员caspase-9和caspase-3 活化片段表达阳性。 结论： 吲哚-3-甲醇在体外可抑制人鼻咽癌CNE细胞增殖并诱导其发生凋亡,且凋亡的发生可能与caspase-9、caspase-3活化有关。     

caspase-6基因诱导成骨肉瘤细胞凋亡

目的：探讨caspase6对成骨肉瘤细胞株的凋亡诱导作用。方法：应用RTPCR方法检测成骨肉瘤细胞株SOSP9607中caspase6基因的表达水平。以腺病毒adv5作载体，构建含caspase6基因的转基因载体，用脂质体包裹法转染SOSP9607细胞株， 用RTPCR方法检测转染后SOSP9607细胞中caspase6基因的表达。用MTT法检测转染caspase6对SOSP9607细胞株生长的影响。结果：成骨肉瘤细胞株SOSP9607中未检出caspase6表达。RTPCR法证实转染caspase6后SOSP9607中caspase6表达显著增强，MTT检测显示对SOSP9607细胞的生长有抑制作用，形态学观察及DNA电泳证实转染后的细胞株存在细胞凋亡特征。结论：caspase6对成骨肉瘤细胞的生长有抑制作用，并可诱导成骨肉瘤细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导K562／ADM细胞凋亡过程中对bcl-2、survivin、ROS表达的影响

[目的]探讨As2O3诱导白血病K562／ADM耐药细胞凋亡的分子机制。[方法]采用MTT比色法检测K562／ADM增殖活性：细胞形态学和Annexin Ⅴ／PI双染色检测细胞凋亡：RT—PCR检测bcl-2、survivin和caspase-3基因mRNA的表达水平；流式细胞法（FCM）测定bcl-2、caspase-3蛋白表达。激光共聚焦显微镜（LCSM）观察细胞内活性氧（ROS）产生情况。[结果]As2O3显著抑制K562／ADM细胞的增殖；经As2O3处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变，AnnexinⅤ／PI双染显示凋亡细胞明显增加：凋亡抑制基因bcl-2、survivin mRNA及bcl-2蛋白表达下调，caspase-3 mRNA表达和caspase-3活性显著增强，ROS活性下降。[结论]As2O3诱导K562／ADM耐药细胞凋亡，与bcl-2和survivin表达下调，caspase-3活化有关，而与活性氧的氧化损伤无关。     

紫杉醇诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的实验研究

目的 :研究紫杉醇 (Taxol)对肝癌细胞SMMC 772 1的生长抑制和诱导凋亡的作用。方法 :应用MTT法观察紫杉醇对SMMC 772 1的生长抑制作用 ,通过瑞氏染色、荧光显微镜、透射电镜 ,流式细胞仪和TUNEL染色研究紫杉醇对SMMC 772 1诱导凋亡的作用。结果 :紫杉醇对肝癌细胞SMMC 772 1有明显的生长抑制作用 ,其IC50 为 2 1.6nmol/L。紫杉醇作用细胞后 ,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化 ,细胞核固缩、染色质凝集成新月型紧贴于核膜周边 ,核碎裂、染色质片断化、凋亡小体形成等。流式细胞仪上可见S期和G2 /M期和DNA含量增加 ,并出现典型的亚二倍体“凋亡小峰”。TUNEL染色显示。紫杉醇作用于SMMC 772 1后 ,随药物浓度增加和作用时间延长 ,凋亡指数增加。结论 :紫杉醇对SMMC 772 1有明显的生长抑制作用 ;紫杉醇对SMMC 772 1有诱导凋亡的作用。