γ-干扰素对平滑肌细胞增殖与凋亡及基质金属蛋白酶活性的影响

目的 :通过研究γ 干扰素对平滑肌细胞增殖和凋亡以及对基质金属蛋白酶 (MMPs)活性的影响 ,了解其对粥样斑块稳定性的影响。　　方法 :①大鼠血管平滑肌细胞体外培养 ,加入不同浓度的γ 干扰素 (10U/ml、10 0U/ml、2 0 0U/ml) ,四甲基偶氮唑唑 (MTT)方法检测细胞的增殖 ,流式细胞仪检测细胞的凋亡。②大鼠腹腔巨噬细胞培养 ,加入不同浓度的γ 干扰素 ,用以明胶为底物的聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法测定上清液中MMPs的活性。　　结果 :γ 干扰素可以抑制平滑肌细胞增殖 ,促进其凋亡 ,其作用随着浓度的增加而增强。γ 干扰素可使巨噬细胞产生的MMPs活性增强。　　结论 :粥样斑块中γ 干扰素由活化的T淋巴细胞产生 ,可以通过减少斑块内平滑肌细胞数量和增加纤维帽中细胞外基质的降解增加粥样斑块的不稳定性。     

弹性蛋白酶抑制剂对动脉损伤后血管平滑肌细胞增生作用的研究

目的　探讨弹性蛋白酶抑制对平滑肌细胞向内膜迁徙及增生的作用。方法　 2 0 0 2 - 0 8～ 2 0 0 3- 0 5 ,用 2F球囊导管损伤Wistar大鼠颈总动脉内皮 ,给弹力蛋白酶抑制剂 ,做损伤动脉组织染色及免疫染色 ,测定内膜及中膜的BrdU阳性细胞率、细胞数及面积。结果　球囊损伤后 ,弹力蛋白酶抑制剂给药 10d明显抑制内膜BrdU阳性细胞率、细胞数及面积 ,尽管给药 5d对上述指标无明显抑制作用。结论　弹性蛋白酶抑制剂通过降低内膜平滑肌增生抑制内膜肥厚 ,有可能成为用于治疗内膜增生的新药物。     

血管损伤致平滑肌细胞增殖的兔耳动脉狭窄模型及应用

为研究经皮冠状动脉腔内成形术后血管再狭窄的发生机理，本文选用新西兰家兔耳中央动脉，以物理性创伤诱发出血管壁平滑肌细胞增殖，从而造成实验性动脉管腔狭窄模型。利用该模型观察了血管内皮细胞生长因子和水蛭素联合应用对动脉再狭窄的影响。结果发现该模型血管狭窄程度、平滑肌细胞增殖、内膜增生及血栓形成等均与在体动脉再狭窄的病理改变一致。内皮细胞生长因子与水蛭素联合运用能防止血栓形成，但对平肖肌细胞增殖无影响。     

基质金属蛋白酶与动脉损伤后再狭窄

心血管动脉系统在损伤后,包括经皮腔内血管成形术后血管再狭窄率较高,严重影响了手术的治疗效果。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组能特异地降解细胞外基质成分的依赖锌的酶家族,在组织重构中起重要作用。了解MMPs表达和动脉损伤后再狭窄的关系有助于在机制上认识狭窄的动脉再成形术的再狭窄问题,从而为临床上治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病提供新的途径。     

基质金属蛋白酶与血管平滑肌细胞的增殖和迁移

基质金属蛋白酶是一种Zn^2 依赖性的内肽酶所组成的酶家族，通过调节细胞外基质的降解影响血管平滑肌细胞的增殖和迁移。其激活，活性调节机制十分复杂，本文对近年来相关研究作一综述。     

γ-氨基丁酸对胰腺癌细胞增殖及转移作用的实验研究

目的 观察γ-氨基丁酸(GABA)对胰腺癌SW1990细胞增殖、细胞周期及基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9表达的影响.方法 应用不同浓度(0～320 μmol/L)GABA干预SW1990细胞,采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期.RT-PCR检测细胞MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果 GABA促进胰腺癌SW1990细胞的生长,使G0/G1细胞减少,S期和G2/M细胞增多.320μmol/L的GABA干预细胞后的A570值为1.11±0.03,较无GABA干预组的0.56±0.01显著增加(P<0.01);G0/G1细胞为(46.18±1.12)%,较无GABA干预组的(87.29±1.34)%显著减少(P<0.01);MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA及蛋白表达分别为8.6、6.8、10.5、8.4,较0～40μmol/L组显著增加(P<0.05).结论 GABA能促进SW1990细胞增殖和MMPs的表达.     

γ干扰素对兔血管内膜损伤后平滑肌细胞c-myc癌基因表达和增生的影响

目的：阐明γ干扰素抑制血管内膜增生和防治再狭窄的体内机制。　　方法：建立兔再狭窄血管模型。将６０只新西兰纯种兔分为实验组（ｎ＝ ３０）术前１ 天给予重组γ干扰素和对照组（ｎ＝３０）术前不给干扰素。每组分别于术后１周、２ 周和４周处死动物，每次１０只。动态观察给予重组γ干扰素对损伤后不同时期内膜血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）原位表达ｃ－ｍ ｙｃ信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）和增殖细胞核抗原的影响。　　结果：γ干扰素显著抑制１ 周和４周时内膜ＶＳＭＣ增殖细胞核抗原的表达，抑制率分别为８８．５０％ 和５８．８９％ ；显著抑制新生内膜ＶＳＭＣｃ－ｍ ｙｃｍ ＲＮＡ的表达，抑制率分别为１周９１．４５％ 、２ 周９３．６６％ 和４ 周５２．９２％ 。　　结论：γ干扰素抑制内膜ＶＳＭＣ增殖和再狭窄伴ｃ－ｍ ｙｃ癌基因表达的下调，为防治再狭窄提供了一条途径     

血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖和细胞外基质降解作用的研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对血管平滑肌细胞(VSMCs)基质金属蛋白酶2(MMP2)活性的影响及其与细胞增殖的关系。方法体外培养大鼠主动脉VSMCs,用AngⅡ进行刺激,采用明胶酶图法检测MMP2的活性。结果经AngⅡ处理12、24、48h后,VSMCs的MMP2活性分别为未处理组的237、196、158倍(P<005)。但AngⅡ对VSMCs增殖的促进作用在刺激3h时较明显(P<005)。结论AngⅡ提高VSMCs的MMP2活性晚于促进VSMCs增殖作用,显示AngⅡ这两种作用具有时相差异。     

血清基质金属蛋白酶-9和干扰素-γ在急性冠脉综合征中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9和干扰素(IFN)-γ联合检测在判断急性冠脉综合征(ACS)的发生及冠脉病变严重程度中的意义.方法 选取ACS患者63例[急性心肌梗死(AMI)30例,不稳定性心绞痛(UAP)33例],稳定性心绞痛(SAP)患者25例及健康人(N)36例的血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测IFN-γ与MMP-9的水平,同时对危险程度及IFN-γ、MMP-9水平的相关性进行分析.结果 Acs组IFN-γ及MMP-9的水平均高于SAP组和正常对照组(P<0.05);ACS组中AMI组IFN-γ及MMP-9的水平均高于UAP组(P<0.01);SAP组和正常对照组IFN-γ及MMP-9的水平无统计性差异.IFN-γ与MMP-9的水平呈正相关(r=0.691,P<0.05).相对危险度(RR值)ACS组(AMI组及UAP组),SAP组对正常对照组IFN-γ为3.71、2.821、1.194,MMP-9为4.507、3.261、1.101.结论 ACS患者血清中IFN-γ和MMP-9水平不同程度的升高可以提示冠脉粥样斑块的不稳定及冠脉病变的严重程度,有利于对ACS患者进行危险程度分层及病情预测.     

γ-干扰素与结核病

据估计,全球约有1/3的人感染过结核分枝杆菌（M.tb）,然而,在感染人群中仅有1/10发病.也就是说,全球将近18亿人口感染过M.tb却不发展为结核病.既便在发患者群中也有一部分未经任何治疗而自愈.这就表明机体存在着有效的保护性免疫反应.这种保护性免疫反应主要是由Th1细胞介导的,而γ-干扰素（IFN-γ）则是保护性免疫中的关键细胞因子。     

纯阳子对兔髂动脉球囊损伤后Ⅰ型胶原纤维的影响

纯阳子,又名赤阳子,主要成分维生素C,E和β-胡萝卜素,具有明显的抗氧化作用[1],有研究表明,细胞外基质重建在再狭窄的发生中是一个主要因素,而再狭窄发生早期,氧化还原反应作为基因序列表达的信号传递过程,这个过程会影响最终的创伤修复[2].基于以上这些研究,本研究观察了纯阳子对兔髂动脉球囊损伤后Ⅰ型胶原纤维的影响. 1 材料和方法 1.1 动物分组 32只日本大耳兔随机分为4组,每组8只.A组:左侧髂动脉为假手术组,右侧髂动脉为正常对照组;B组:双侧髂动脉球囊成形术组;C组:球囊成形术加维生系C,E(维生素C 45 mg*kg-1*d-1,维生素E 16 mg*kg-1*d-1);D组:球囊成形术加纯阳子治疗组(相当于生药10 g*kg-1*d-1).术前7 d开始给药,一直持续到处死动物前.     

低频电磁场对兔动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用研究

目的 :探讨不同场强、不同作用时间的低频电磁场对兔主动脉平滑肌细胞增殖的调控作用 ,以观察磁场是否能用于PTCA支架后冠脉再狭窄的防治。方法 :用含 10 %小牛血清的 RPMI- 16 40培养液体外培养新西兰白兔的主动脉平滑肌细胞至 3～ 7代 ,将含 5 %小牛血清的RPMI- 16 40培养液与动脉平滑肌细胞的混悬液 10 0μl加入96孔培养板中培养。按照实验分组 ,每日磁场作用一次 ,共二日。用 MTT法检测动脉平滑肌细胞的增殖数量。结果 :磁场作用时间大于 10分钟时 ,2 0 m T、40 m T和 6 0 m T磁场对动脉平滑肌细胞的增殖均有显著的抑制作用 (P<0 .0 5 ) ,其中作用时间为 30分钟的 40 m T磁场对动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用最显著 (P<0 .0 0 1)。结论 :磁场对动脉平滑肌细胞增殖有显著的抑制作用 ,磁场的这种抑制作用具有强度敏感性、时间依赖性和空间距离性 ;磁场对 PTCA支架后的冠脉再狭窄可能具有防治作用     

动脉损伤后基质金属蛋白酶-3的变化

目的　观察基质金属蛋白酶 3(MMP 3)在动脉球囊损伤后的动态变化 ,探讨MMP 3在再狭窄形成中的作用。方法　建立大鼠腹主动脉球囊损伤模型 ,设立对照组 ,术后第 3d、7d、14d、2 1d、2 8d取材检验 ,应用免疫组织化学法观察MMP 3在血管壁的表达情况。结果　球囊损伤组MMP 3于术后第 3d表达增加 (1 73± 0 2 3) % ,14d达高峰(19 30± 0 32 ) % ,以后逐渐减弱 ;与对照组比较 ,球囊损伤组各时间点均有统计学差异。结论　MMP 3于动脉球囊损伤术后合成、分泌增多 ,在早期再狭窄形成过程中发挥作用     

干扰素-γ对大鼠肝组织中的MMP-13与TIMP-1表达的干预作用

目的 探讨干扰素-γ对实验性大鼠肝组织中的基质金属蛋白酶-13(MMP-13)与金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响.方法 SD大鼠22只,随机分为3组:正常组(7只)、模型组(6只)和干扰素-γ组(9只);用四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,在10周末处死各组大鼠,取肝脏进行HE染色,并运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中MMP-13 mRNA与TIMP-1 mRNA的表达量.结果 MMP-13 mRNA的表达,与正常组对比,模型组和干扰素-γ组的MMP-13 mRNA的表达量增高(P<0.01),但模型组和干扰素-γ组之间还不能认为有统计学差别(P>0.01);而TIMP-1 mRNA表达与正常组相比,模型组和干扰素-γ组中的TIMP-1 mRNA的表达都升高(P<0.01),而且模型组中的TIMP-1 mRNA表达量比干扰素-γ组高(P<0.01).在肝纤维化病理学观察的量化秩和分析中,各组之间的差别明显(P<0.005).结论 干扰素-γ逆转肝纤维化的机制可能是减少肝纤维化大鼠肝脏中的TIMP-1 mR-NA的表达,从而逆转肝纤维化.     

γ-干扰素对大鼠血管平滑肌细胞增殖及增殖细胞核抗原表达的影响

为观察γ 干扰素对血管平滑肌细胞增殖的影响及探讨其作用机制 ,培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 ,以γ 干扰素 (5 0 0ku L)刺激血管平滑肌细胞 2 4h后 ,通过氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法及Western杂交印迹法观察γ 干扰素作用 2 4h对大鼠血管平滑肌细胞DNA合成及增殖细胞核抗原表达的影响。结果发现γ 干扰素明显抑制 10 %胎牛血清刺激血管平滑肌细胞引起的增殖细胞核抗原表达增多及氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷掺入增高 (P <0 .0 1) ,表明γ 干扰素具有较强的抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用。     

氧化修饰低密度脂蛋白对大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶—2和骨桥蛋白基因表达及细胞增殖的影响

目的 探讨氧化修饰低密度脂蛋白（oxLDL)和天然低密度脂蛋白（nLDL)促血管平滑肌细胞（VSMC）增殖是否与细胞外基质（ECM）降解及粘附蛋白合成有关。方法 应用Northern印迹和^3H-TdR掺入的方法,观察两种脂蛋白对VSMC表达基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和骨桥蛋白（OPN）的影响,以及ECM代谢与VSMC增殖之间的关系。结果 10μg/ml oxLDL作用于细胞24h可使MMP－2和OPN基因表达活性增加1倍左右;nLDL对两种基因表达的诱导作用较弱,高浓度的oxLDL对MMP－2和OPN表达不产生明显的影响。在一定浓度和时间范围内,LDL促细胞增殖作用显示量－效与时－效依赖关系。结论 oxLDL和nLDL可在多位点上发挥促进VSMC增殖和迁移的作用。     

特异性组织型基质金属蛋白酶抑制物与动脉损伤后再狭窄

基质金属蛋白酶组织抑制物（tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs）通过抑制基质金属蛋白酶在正常细胞外基质（extracellular matrix,ECM）改建,在多种病理过程中发挥重要作用.动脉损伤后血浆中基质金属蛋白酶的含量增加,提示基质金属蛋白酶表达与血管损伤术后再狭窄的形成有关.基质金属蛋白酶活性能被TIMPs抑制,进而降低其表达.现已成为防治血管成形术后再狭窄的主要研究目标.     

特异性组织型基质金属蛋白酶抑制剂与动脉损伤后再狭窄

基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs）是近年来发现的有抑制胶原酶即基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）活性的一组多功能因子家族，它通过对MMPs的抑制，在正常细胞外基质（extracellular matrix，ECM）改建和各种病理过程中发挥重要作用。研究表明动脉损伤术后血浆中MMPs的含量增加，提示MMPs的表达与血管损伤术后再狭窄的形成有关。MMPs活性能被TIMPs抑制，进而降低MMPs的表达。现已成为防治血管成形术后再狭窄的主要目标。