隔药灸对克罗恩病大鼠结肠黏膜巨噬细胞M1/M2型极化的影响

目的:观察隔药灸对克罗恩病(CD)大鼠结肠黏膜巨噬细胞M1/M2型极化及炎性因子表达的影响,探讨其作用机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、隔药灸组,每组10只。采用2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠法制备CD模型。造模成功后隔药灸组大鼠给予隔药饼灸“天枢”“气海”,每次每穴灸2壮,每日1次,共10 d。西药组大鼠给予美沙拉嗪灌胃,每日2次,共10 d。治疗结束后取各组大鼠结肠上皮组织,分离、纯化和培养结肠黏膜固有层巨噬细胞。HE染色法观察结肠组织病理变化;透射电镜观察结肠组织超微结构;Western blot法检测结肠黏膜巨噬细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)、核因子κB(NF-κB) p65、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平;流式细胞术检测结肠黏膜组织M1、M2型巨噬细胞的数量;免疫荧光法检测结肠黏膜组织M1、M2型巨噬细胞的表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织呈现巨大溃疡及炎性表现,结肠上皮细胞连接疏松,细胞器结构破坏;结肠黏膜巨噬细胞α7nAChR表达水平降低(P<0.01),NF-κB p65和TNF-α表达水平升高(P&l...     

NLRP3炎症小体与炎症性肠病的关系及针灸调节作用研究进展

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一组慢性非特异性肠道炎症性疾病,包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD)。炎症小体作为一种大分子复合蛋白,在炎症发生发展与机体固有免疫中发挥了重要作用。其中NLRP3在IBD的发生发展与维持肠道稳态的作用机制中起到了双向调节的作用。该文综述了NLRP3炎性小体在IBD中的研究进展以及针灸对其的调节作用及可能机制,以期为针灸治疗炎症性肠病的临床和机制研究提供新思路。     

隔药灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜IL-17及IL-23表达的影响

目的:观察隔药灸对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠结肠黏膜中白细胞介素-17(interleukin-17,IL~(-1)7)及白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)表达的影响,探讨隔药灸治疗对UC大鼠Th17细胞因子的调控机制。方法:将44只SD大鼠随机分为正常组12只和造模组32只。采用免疫法加局部刺激造模,将造模成功的30只大鼠随机分为模型组、隔药灸组和西药组,每组各10只。正常组及模型组按照隔药灸组的固定方式固定大鼠,隔药灸组取天枢(双)、气海、中脘等穴位给予隔药灸,西药组灌胃给药柳氮磺胺吡啶。采用免疫组织化学技术法检测各组UC大鼠结肠黏膜中IL~(-1)7、IL-23的表达水平。结果:模型组、隔药灸组和西药组大鼠结肠黏膜中IL~(-1)7、IL-23的水平高于正常组,差异具有统计学意义(P0.05)。隔药灸组和西药组大鼠结肠黏膜中IL~(-1)7、IL-23水平低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05)。隔药灸组在下调大鼠结肠黏膜中IL~(-1)7、IL-23的表达水平明显优于西药组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:隔药灸能够调控UC大鼠结肠黏膜中IL~(-1)7、IL-23的表达水平,进而调节UC大鼠结肠黏膜Th17细胞因子平衡。     

隔药灸对克罗恩病肠纤维化大鼠结肠成纤维细胞CTGF、FN、Smad表达的影响

目的观察隔药灸对克罗恩病肠纤维化大鼠结肠成纤维细胞(conlonic fibroblast,CFB)CTGF、FN蛋白和Smad3、Smad7 mRNA表达的影响,探讨隔药灸治疗克罗恩病肠纤维化的作用机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组和西药组。在成功制备克罗恩病肠纤维化大鼠模型的基础上,隔药灸组取天枢穴(双)、气海穴进行治疗,西药组以美沙拉嗪灌胃治疗。各组治疗干预结束后,留取结肠组织,分离并体外培养大鼠CFB。采用免疫细胞化学法观察各组大鼠CFB的CTGF、FN蛋白表达,应用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠CFB的Smad3、Smad7 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠CFB的CTGF、FN蛋白表达升高(均P0.01);与模型组比较,隔药灸组CFB的CTGF、FN蛋白表达降低(均P0.01)。各组大鼠比较,CFB的Smad3和Smad7 mRNA表达变化均不显著(均P0.05)。结论隔药灸能下调克罗恩病肠纤维化大鼠肠成纤维细胞CTGF、FN的蛋白表达。     

艾灸对克罗恩病大鼠结肠NF-κB p65及TNF-α、IL-1β调节作用的研究

目的：通过观察隔药灸对克罗恩病大鼠结肠NF-κB p65及炎症因子TNF-α、IL-1β表达的影响,探讨艾灸治疗克罗恩病的效应机制。方法：清洁级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、隔药灸组和西药组,采用三硝基苯磺酸（TN-BS）合乙醇溶液灌肠制备克罗恩病大鼠模型,模型制备成功后,隔药灸组取天枢穴（双）、气海穴进行隔药灸治疗,西药组采用美沙拉秦灌胃治疗。治疗结束后,采用HE染色,光镜下观察各组大鼠结肠组织病理学变化,应用免疫组织化学技术观察各组大鼠结肠NF-κB p65与TNF-α、IL-1β的表达,并进行图像分析。结果：与正常组比较,模型组大鼠结肠组织呈现裂隙状溃疡及炎症表现,部分大鼠结肠在黏膜下层可见肉芽肿形成,结肠NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的表达均显著增高（均P〈0.01）;与模型组比较,隔药灸组、西药组大鼠结肠形态结构改善,肠道炎症减轻,结肠NF-κB p65与TNF-α、IL-1β的表达均显著降低（均P〈0.01）;相关性分析结果显示,TNF-α、IL-1β的表达与NF-κB p65的表达均呈正相关性。结论：隔药灸能下调克罗恩病大鼠结肠NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的表达;艾灸（隔药灸）可能通过抑制克罗恩病大鼠结肠NF-κB p65的表达,进而减少其下游炎症因子TNF-α、IL-1β的表达,从而减轻肠道炎症,改善结肠组织形态结构,发挥治疗作用。     

隔药灸对亚健康状态的调节作用

目的观察隔药灸治疗亚健康状态的疗效及对体液免疫、细胞免疫、血液流变学的影响。方法采用中医健康评估的方法,选出研究对象,根据不同的发生原因、症状、临床表现,辨证取穴、隔药施灸,同时监测治疗前后各项理化指标及临床症状的变化。结果隔药灸后临床症状有明显改善,NK细胞活性、血小板聚集性均有明显变化,与灸前比较差异均有统计学意义(P<0.05)。同时治疗后体液免疫中补体C3、补体C4含量下降,免疫球蛋白IgG含量上升,与治疗前比较均有统计学意义(P<0.05)。结论隔药灸能调节亚健康人体的脏腑气血功能,使机体阴阳平衡,精足气充神旺,从而改善亚健康状态,并提示对亚健康人体的体液免疫、细胞免疫及血液流变有调节作用。     

隔药灸和电针对克罗恩病大鼠结肠IGF-I、IGF-IR、IGFBP-5表达的影响

目的 研究隔药灸和电针对克罗恩病大鼠结肠IGF-I、IGF-IR、IGFBP-5蛋白及IGF-I mRNA的调节作用,探讨针灸治疗大鼠克罗恩病肠纤维化的作用机制.方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组、电针组和药物组.采用三硝基苯磺酸制备大鼠克罗恩病模型,应用HE染色、Masson染色光镜下观察结肠病理组织学变化及胶原纤维增生情况;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测结肠IGF-I mRNA的变化;采用免疫组织化学Envision法检测结肠IGF-I、IGF-IR、IGFBP-5蛋白表达变化.结果 与正常组比较,模型组大鼠结肠组织胶原增生,IGF-I、IGF-IR、IGFBP-5蛋白表达均显著增加,IGF-I mRNA表达显著增加.经治疗后,与模型组比较隔药灸组、电针组、药物组大鼠结肠胶原增生均显著减少,隔药灸组较电针组作用显著.隔药灸组、电针组、药物组大鼠IGF-I、IGF-IR、IGFBP-5蛋白表达均显著降低;隔药灸组对IGF-I、IGFBP-5蛋白的下调作用优于电针组.隔药灸组、药物组IGF-I mRNA表达均显著降低,电针组变化不明显.结论 隔药灸和电针能够下调结肠IGF-I、IGF-IR、IGFBP-5蛋白的异常表达,该作用可能是隔药灸和电针改善克罗恩病肠纤维化的重要机制.隔药灸能够下调IGF-I mRNA表达,对IGF-I、IGFBP-5蛋白的下调作用优于电针,该作用可能是其改善克罗恩病肠纤维化优于电针的机制之一.     

艾灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠Ubiquitin及NLRP3蛋白的调节作用

目的:观察艾灸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠炎症和泛素(ubiquitin)、核苷酸结合寡聚化结构域(Nod)样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达的影响,探讨艾灸治疗UC的抗炎机制。方法:清洁级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常组、模型组、艾条灸组和西药组。采用自由饮用35g/L葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液制备大鼠UC模型。艾条灸组取双侧天枢穴,给予温和灸治疗;西药组给予美沙拉嗪溶液灌胃治疗。正常组和模型组不进行任何治疗,只做与艾条灸组相同的抓取和固定。治疗结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察结肠组织病理损伤并评分;采用免疫荧光法测定结肠ubiquitin蛋白的表达;运用兔疫组织化学法检测结肠白细胞介素(IL)-1β和NLRP3蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织损伤严重,病理评分明显升高(P<0.01),结肠ubiquitin、NLRP3及IL-1β蛋白表达均显著增强(均P<0.01)。与模型组比较,艾条灸组及西药组大鼠结肠损伤有所修复,炎症反应减轻,病理评分均降低(均P<0.01);ubiquitin、NLRP3及IL-1β蛋白的表达减少(均P<0.01)。相关分析显示,结肠组织ubiquitin蛋白与结肠病理评分、NLRP3蛋白的表达之间存在相关性(r=0.677,P<0.01;r=0.536,P<0.05).结论:艾灸能下调UC大鼠结肠ubiquitin、NLRP3和IL-IP蛋白的表达,该作用可能是其促进结肠炎性损伤修复、发挥抗炎作用的机制之一。     

牡丹花总黄酮对痛风性肾病大鼠NLRP3炎症小体及炎症因子表达的影响

目的：探究牡丹花总黄酮对大鼠痛风性肾病模型保护作用的可能机制。为治疗痛风性肾病的药物研究提供科研数据支撑。方法：使用腺嘌呤合并乙胺丁醇复制大鼠痛风性肾病模型,大鼠随机每12只分为空白组、模型组、别嘌醇组(42 mg·kg^-1)、阳性药痛风舒片组(600 mg·kg^-1)、牡丹花总黄酮高、中、低剂量组(TFPF,260、130、65 mg·kg^-1);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肾脏组织匀浆中转化生长因子-β1(TGF-β1)、IL-1β含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织细胞形态变化;原位末端标记法(TUNEL)观察肾脏组织细胞DNA损伤情况;免疫组化法观察肾脏NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾脏组织中NLRP3、Cas...     

四逆散对抑郁大鼠NLRP3炎症小体及抑郁样行为的作用

目的：观察四逆散对慢性温和不可预知应激(CUMS)诱导的抑郁症大鼠行为学及NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症小体的作用,进一步探讨四逆散抗抑郁的作用机制。方法：将50只雄性大鼠随机分为正常组、模型组、NLRP3抑制剂(MCC950)组、四逆散低、高剂量,每组10只。除正常组外,均采用为期42 d的CUMS诱导各组大鼠抑郁。造模第22天开始药物干预,四逆散低、高剂量每天以四逆散(2.5、5 g·kg^-1)进行灌胃,MCC950组以每天腹腔注射MCC950(10 mg·kg^-1)。同时,除MCC950组外,余下4组腹腔注射10 mg·kg^-1生理盐水;而模型组、正常组、MCC950组灌胃3 mL生理盐水。21 d后进行糖水偏好实验、旷场实验;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠海马组织NLRP3、相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、离子钙结合衔接蛋白1(Iba1)、CD68蛋白表达量。酶联免疫吸附测定法(E...     

隔药灸和电针对大鼠克罗恩病肠纤维化血清学指标的影响

目的:观察隔药灸和电针对克罗恩病(Crohn's Disease,CD)肠纤维化大鼠血清透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)、Ⅲ型前胶原(Procollagen Ⅲ,PC Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ,C Ⅳ)的影响,探讨针灸抗CD大鼠肠纤维化的作用与机制.方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组、电针组和药物组.采用三硝基苯磺酸制备大鼠CD模型,应用Masson染色光镜下观察结肠胶原纤维增生情况,采用放射免疫分析技术检测大鼠血清HA、PC Ⅲ、CⅣ含量.结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织胶原纤维增生,血清HA、PCⅢ、CⅣ含量增加;与模型组比较,隔药灸组、电针组及西药组胶原纤维表达减少,血清中HA、PCⅢ、CⅣ含量降低,与电针组、西药组比较,隔药灸组胶原纤维表达减少,血清CⅣ含量降低.结论:隔药灸和电针均可改善CD大鼠肠纤维化病理状态,降低血清HA、PCⅢ、CⅣ含量.

Abstract：

Objective:To observe the impact of herb-partitioned moxibustion and electroacupuncture on hyaluronic acid(HA),procollagen Ⅲ(PC Ⅲ)and collagen Ⅳ(CⅣ)of intestinal fibrosis in rats with Crohn's disease(CD),and discuss the effect and the mechanism of acupuncture on treating intestinal fibrosis of rats.Methods:SD rats were randomly divided into control group,model group,herb-partitioned moxibustion group,electroacupuncture group and medicine group.The model of CD was developed by trinitrobenzene sulfonic acid.Masson stain was used to observe the collagen fibers hyperplasia in colon and radioimmunoassay was adopted to detect the content of HA,PC Ⅲ and C Ⅳ in serum.Results:Compared with the control group,the proliferation of colonic collagen fibers,as well as the HA,PC Ⅲ and CⅣ in serum increased in the model group.Compared with the model group,the expression of collagen fibers,serum HA,PC Ⅲ and C Ⅳ decreased in the herb-partitioned moxibustion group,electroacupuncture group and medicine group.The expression of collagen fibers serum HA,PC Ⅲ and C Ⅳ in the herb-partitioned moxibustion group were lower than in the electroacupuncture group and medicine group.Conclusion:Herb-partitioned moxibustion and electroacupuncture effectively improved the pathological state of intestinal fibrosis in rats with CD and reduced the content of HA,PC Ⅲ and C Ⅳ in serum.     

隔药灸对大鼠溃疡性结肠炎IL-1β、TNF-α影响

溃疡性结肠炎 ( Ulcerative colitis,UC)是一种非特异性炎症性肠病 ,其病因尚未清楚 ,但其发病与免疫功能紊乱有关已得到普遍认可。由活化淋巴、单核 -巨噬细胞所分泌的作为免疫调节剂的促炎性细胞因子 IL-1 β、TNF- α等参与了肠粘膜炎症形成的起始阶段和发展过程 ,在正常或异常的肠道免疫反应中都起重要的作用。本文通过观察大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织中 IL- 1β、TNF-α表达的变化 ,探讨了隔药灸治疗溃疡性结肠炎的作用机理。材料与方法1 .实验动物雄性 Sprauge- Dawley大鼠 ,清洁级 ,体重 1 40± 2 0 g,由上海中医药大学实验…     

穴位埋线调控NLRP3炎症小体及IL-27表达对溃疡性结肠炎大鼠的黏膜保护作用

目的：观察穴位埋线对溃疡性结肠炎(UC)大鼠NLRP3炎症小体及IL-27表达的调控作用,探讨其治疗UC的作用机制。方法：SD大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、药物组和穴位埋线组,每组各10只。除空白组外,其余各组采用葡聚糖硫酸钠 (DSS) 法制备UC大鼠模型。药物组给予柳氮磺胺吡啶(SASP)连续灌胃14 d,穴位埋线组给予穴位简易埋线,每7 d 干预1次,共3次。观察各组大鼠一般状况,记录疾病活动度指数(DAI)、黏膜损伤指数(CMDI)和结肠长度变化;HE 染色观察大鼠结肠组织病理形态改变;ELISA测定大鼠血清IL-18、IL-1β、IFN-γ、IL-27炎性因子水平;Western-blot及RT-PCR检测大鼠结肠组织中NLRP3、caspase-1及IL-27的蛋白和mRNA表达。 结果：与模型组比较,穴位埋线治疗可有效改善 UC大鼠一般状况,降低DAI和CMDI评分,增加大鼠结肠长度,并减轻结肠组织病理损伤;同时降低了大鼠血清中IL-18、IL-1β、IFN-γ水平,升高IL-27的水平(P＜0.05);下调结肠组织中NLRP3、 caspase-1的蛋白和mRNA表达,上调了IL-27的表达(P＜0.05)。 结论：穴位埋线疗法对DSS所诱导的UC大鼠模型具有明显的治疗作用,其机制可能是通过上调IL-27的表达,抑制NLRP3炎症小体通路激活及炎性细胞因子的表达,从而减轻UC肠黏膜炎性损伤。     

隔药灸对克罗恩病大鼠结肠p38MAPK、ERK1/2及c-fos调节作用的研究＊

目的 观察隔药灸对克罗恩（Crohn s Disease，CD）大鼠结肠p38MAPK、ERK1/2、c-fos的影响，探讨隔药灸治疗CD的作用机制。方法 将清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组和假灸组4组。采用TNBS合50%乙醇溶液灌肠制备大鼠CD模型。模型制备成功后，隔药灸组取天枢穴（双）、气海穴进行隔药饼灸治疗；假灸组取穴、操作与隔药灸组相同，但不点燃艾炷。治疗结束后，采用HE染色，光镜下观察大鼠结肠组织形态学变化；采用实时荧光定量PCR技术检测结肠p38MAPK mRNA表达；应用ELISA技术检测结肠p38MAPK、c-fos蛋白含量，Western blot技术检测结肠ERK1/2蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠结肠组织损伤严重，可见全壁性炎症、裂隙状溃疡，部分大鼠结肠可见纤维化；与模型组、假灸组比较，隔药灸组大鼠结肠形态结构改善，肠道炎症减轻；假灸组大鼠结肠损伤程度、炎症反应与模型组类似。与正常组比较，模型组p38MAPK mRNA表达增加（P < 0.01），p38MAPK、ERK1/2、c-fos蛋白含量均增加（均P < 0.05）；与模型组比较，隔药灸组p38MAPK mRNA表达降低（P < 0.05），p38MAPK、ERK1/2、c-fos蛋白含量均降低（均P < 0.05）；假灸组均无显著变化（均P > 0.05）。结论 隔药灸能下调克罗恩病大鼠结肠p38MAPK、ERK1/2、c-fos的表达，改善炎症、促进肠道组织修复。     

莪术醇对肝星状细胞NLRP3炎症小体作用的实验研究

目的 研究莪术醇对NLRP3炎症小体的作用,为莪术醇抗肝纤维化提供科学依据.方法 将肝星状细胞分为空白组,模型组以及莪术醇组.用WB和 RT-PCR检测各组细胞NLRP3信号通路上关键分子NLRP3和Caspase1以及IL-1β的表达和含量,用免疫荧光检测各组细胞NLRP3的表达情况.结果 RT-PCR检测发现莪术醇...     

艾灸对克罗恩大鼠结肠RoRγt、Foxp3调节作用研究

目的：观察隔药灸对克罗恩大鼠结肠Th17特异性转录因子维甲酸相关孤核受体γt（RoRγt）和Treg特异性转录因子叉头蛋白P3（Foxp3）的表达调节作用,探讨灸法治疗克罗恩病的可能效应机制。方法：SPF级雄性SD大鼠40只,完全随机分为4组,每组10只：正常组、模型组、隔药灸组和西药组（美沙拉嗪）,采用三硝基苯磺酸（TNBS）溶液灌肠制备大鼠克罗恩疾病模型,隔药灸组取穴：天枢（双）、气海穴,西药组：美沙拉嗪灌胃治疗。治疗干预结束后,采用HE病理染色、免疫组织化学和Real-time PCR方法观察大鼠结肠降部组织病理学变化、Foxp3 mRNA的表达情况。结果：模型大鼠结肠组织出现克罗恩病的典型病理表现：裂隙状溃疡、黏膜层炎症伴肉芽肿,Th17特异性转录因子RoRγt蛋白在模型大鼠结肠黏膜及黏膜下层表达高于正常组大鼠（P<0.01）,隔药灸和美沙拉嗪对RoRγt蛋白具有下调作用（P<0.01）,且美沙拉嗪的调节作用强于隔药灸（P<0.01）;Treg细胞特异性转录因子Foxp3及其mRNA在模型大鼠结肠黏膜及黏膜下层表达均低于正常组大鼠（P<0.01）,隔药灸和美沙拉嗪对Foxp3及其mRNA都具有上调作用（P<0.01）,但两组间比较无统计学差异（P>0.01）。结论：隔药灸可能通过调节克罗恩病模型大鼠结肠黏膜Th17/Treg细胞平衡中特异性转录因子RoRγt、Foxp3的表达来发挥改善结肠组织溃疡,缓解肠道炎症的治疗作用。     

不同灸量隔药灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织病理学的影响

目的:观察隔药灸不同灸量对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠损伤的作用差异,从组织病理学角度筛选隔药灸干预UC大鼠的最佳灸量组合。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、隔药灸1组、隔药灸2组、隔药灸3组、隔药灸4组,每组9只。采用抗原免疫加局部化学刺激法制备UC模型。隔药灸各组选取双侧"天枢"穴给予不同灸量组合(每日1壮、每日2壮、隔日1壮、隔日2壮)隔药灸治疗。观察大鼠一般情况,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织形态变化,过碘酸雪夫(PAS)染色观察结肠黏蛋白分泌情况,高铁二胺-阿辛蓝(HID-AB)染色观察结肠黏蛋白硫酸化程度。结果:与正常组比较,模型组大鼠便稀,肛周脓血分泌,体质量增加缓慢(P0.01);巨检显示模型大鼠结肠充血明显,严重者局部存在数个浅小溃疡;HE染色镜检显示结肠浅表性溃疡连续分布,腺腔不规则,黏膜固有层、黏膜下层水肿伴大量炎性细胞浸润,组织损伤评分显著升高(P0.01);PAS染色、HID-AB染色显示结肠肠腺黏蛋白明显减少(P0.01)。与模型组比较,西药组及隔药灸各组大鼠均体质量增加(P0.01,P0.05),大便成形,结肠组织损伤改善,表现为黏膜愈合和炎性反应减轻,损伤评分明显降低(P0.01);PAS染色、HID-AB染色显示隔药灸各组大鼠结肠腺体分泌黏蛋白增加(P0.01)。两因素两水平析因分析结果显示,隔日灸对组织学评分的改善作用优于每日灸(P0.05),隔日灸2壮对黏蛋白硫酸化程度的调节效应优于1壮(P0.01)。隔药灸壮数与频次对结肠组织评分、黏蛋白分泌均有交互作用,共同影响灸效。结论:隔药灸"天枢"穴具有促进UC大鼠结肠损伤修复及黏液分泌作用,隔日2壮灸为最佳灸量组合。     

加味桃核承气汤对糖尿病心肌病大鼠NLRP3炎症小体的影响

目的 探讨加味桃核承气汤对糖尿病心肌病大鼠NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体激活的影响。方法 选取3~4周龄SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常组和造模组。造模组大鼠采用高脂饲料喂养4周后,给予链脲佐菌素（STZ）腹腔注射（35 mg·kg^-1）制备糖尿病大鼠模型,再按照空腹血糖随机分为模型组、加味桃核承气汤低、高剂量组（11.7、23.4 g·kg^-1）、盐酸二甲双胍组（67.5 mg·kg^-1）。各组连续灌胃给药8周后经超声成像平台检测大鼠心脏功能及结构。股动脉取血检测大鼠空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TC）、总胆固醇（TG）;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠心肌病理形态学改变;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清白细胞介素-1β（IL-1β）及白细胞介素-18（IL-18）水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织NLRP3、ASC、Caspase-1、p-NF-κB p65蛋白表达的影响。结果 与正常组比较,模型组大鼠FBG、TC、TG水平显著升高（P<0.01）,左室射血分数（EF）、左室短轴缩短率（FS）明显降低（P<0.05）,HE染色可见心肌细胞肥大、心肌纤维化,血清中IL-1β、IL-18含量及心肌组织NLRP3、ASC、Caspase-1、p-NF-κB p65蛋白表达均显著增高（P<0.01）。与模型组比较,加味桃核承气汤低、高剂量组及二甲双胍组可有效降低大鼠FBG、TC、TG水平（P<0.05）,EF、FS均明显改善（P<0.05）,大鼠心肌组织病理学损伤明显改善,同时血清IL-1β、IL-18含量及心肌组织NLRP3、ASC、Caspase-1、p-NF-κB p65蛋白表达均明显降低（P<0.05）,其中加味桃核承气汤高剂量组改善更明显。结论 桃核承气汤加味可通过抑制NLRP3炎症小体激活从而发挥保护心肌作用。     

艾灸对克罗恩病大鼠结肠黏膜免疫炎症因子的影响

目的:观察艾灸对克罗恩病(CD)大鼠结肠黏膜IL - 10、IL - 12、INF -γ、IL -4 mRNA表达以及结肠组织病理学的影响,探讨艾灸防治CD的作用机制.方法:将40只SD大鼠随机分成正常组、模型组、艾灸组和西药SASP组,每组10只,采用三硝基苯磺酸(TNBS)液灌肠制备大鼠CD模型,造模后每组随机取1只进行模型判定.艾灸组采用艾条温和灸双侧“天枢”穴10 min,每日1次,共灸治14日.西药组采用柳氮磺胺吡啶(SASP)溶液灌胃治疗,每日2次,共灌胃14日.治疗结束后断颈处死大鼠,剖取结肠组织,苏木精-伊红染色(HE)法观察大鼠结肠组织病理学变化;RT -PCR法检测CD大鼠结肠黏膜IL - 10、IL - 12、INF - γ、IL -4 mRNA表达.结果:每组取9只进入结果分析.①正常组大鼠结肠黏膜完好,黏膜下及肌层组织形态结构正常;模型组大鼠结肠黏膜上皮严重受损,黏膜下大量纤维细胞增生,炎性细胞浸润,伴有肉芽肿形成,各层组织结构形态紊乱;西药组大鼠结肠黏膜下可见少量纤维细胞增生和炎性细胞浸润,肌层组织排列稍欠齐;艾灸组大鼠结肠黏膜下仅见少量炎性细胞,黏膜、黏膜下及肌层组织形态结构基本正常.②模型组大鼠结肠黏膜IL - 12、IFN -γ mRNA表达上升(P＜0.01),结肠黏膜IL -4、IL - 10 mRNA表达下降(P＜0.01);艾灸和西药SASP治疗均能明显降低CD大鼠结肠黏膜IL - 12、IFN -γ mRNA表达(P ＜0.01,P＜0.05),提升IL-4、IL - 10 mRNA表达(P＜0.01,P＜0.01),艾灸组作用优于西药SASP组.结论:艾灸可能通过调节结肠黏膜IL - 12、IFN -γ mR-NA、IL -4、IL- 10 mRNA表达从而减轻CD肠道炎症.     

NLRP3炎症小体与炎症性肠病及中医药干预的现状

在介绍NLRP3(nod-like receptor protein 3)炎症小体概况的基础上,综述NLRP3的活化及调控机制、NLRP3与炎症性肠病及中医药干预溃疡性结肠炎NLRP3的现状.