肿瘤患者外周血Th1/Th2的检测及意义

目的 检测恶性肿瘤患者机体的Th1/Th2细胞产生的相关细胞因子含量,讨论Th1/Th2的平衡与肿瘤发生发展的关系。方法 利用有丝分裂原ConA刺激人体外周血单个核细胞(PBMC)体外无菌培养适当时间,提取上清液后以ELISA测定IFN-γ和IL-4在培养液中的浓度,共研究了40例肿瘤患者和30例正常人。结果 恶性肿瘤患者的IFN-γ和IL-4分别是687.1±794.6 pg/ml和379.4±144.9 pg/ml,而正常对照组的IFN-γ及IL-4为1 665.8±1 041.6 pg/ml和294.9±73.1 pg/ml。肿瘤患者的IFN-γ明显降低(P<0.005),而IL-4却显著升高(P<0.05)。结论 肿瘤患者的Th1/Th2平衡被打破,使之向Th2漂移,检测肿瘤患者的IFN-γ和IL-4有助于恶性肿瘤病情发展的监测。     

腹膜透析患者透出液IL-6和IL-8的变化

目的探讨白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)在腹膜透析(PD)患者透出液中变化的意义.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定35例PD患者透出液IL-6和IL-8水平.结果 PD患者腹膜炎发作期透出液IL-6[(60.8±11.8)pg/ml]和IL-8[(51.8±2.1)pg/ml]均明显高于透析稳定期[(7.0±5.3)pg/ml和(10.8±4.9)pg/ml],P<0.001.透析>3年组透出液IL-6[(20.5±4.3)pg/ml]和IL-8[(20.8±6.8)pg/ml]明显高于透析<1年组[(7.9±6.1)pg/ml和(12.8±5.7)pg/ml],P<0.01.结论 PD患者透出液IL-6和IL-8可能参与腹膜损伤的发病机制,其增高提示可能有腹膜炎发作.     

类风湿关节炎患者Th1/Th2细胞因子分泌模式与疾病活动程度的关系

目的:用全血在单个细胞水平上研究类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)患者Th1/Th2细胞因子分泌模式及其与疾病活动程度的关系。方法:用三色流式细胞术检测20例活动期RA患者的外周血单个核细胞及10例正常人的PBMC细胞内细胞因子干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)的表达情况。结果:RA患者外周血IFN-γ+细胞百分率及IFN-γ+/IL-4+细胞比值比健康人明显增高犤分别为(45.8±10.1)%和(15.2±8.5)%,t=9.07,P<0.01和(10.6±3.8)%和(5.5±3.1)%,t=5.67,P<0.01犦,IFN-γ+/IL-4+比值与患者Stoke指数呈正相关(r=0.8610,P<0.01)。结论:RA患者外周血中细胞因子分泌模式朝Th1偏移,IFN-γ+/IL-4+比值与疾病活动性相关,Th1/Th2平衡在RA发病机制及疾病进程中起重要作用。     

急性ITP患儿外周血 CD4+ CD25+ T细胞及相关细胞因子的研究

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(TR)及相关细胞因子的变化,探讨它们在ITP发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测外周血TR细胞的数量,ELISA法检测血浆中相关细胞因子的含量。结果ITP患儿外周血TR细胞的百分率显著低于正常对照组[(2.83±1.05)%vs(5.07±0.59)%,P<0.05];ITP患儿血清中IL-10、TGF-β1的含量也显著低于正常对照组[IL-10:(29.48±13.69)pg/mlvs(43.10±14.95)pg/ml;TGF-β1:(170.04±91.58)pg/mlvs(254.75±130.41)pg/ml,P<0.05]。ITP患儿外周血TR细胞在CD4+细胞中所占比例与血清中IL-10、TGF-β1的含量均呈正相关(r1=0.54,r2=0.66,P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血中TR细胞数量的减少及相关细胞因子含量的降低可能与急性ITP患儿的细胞免疫失调有关。     

类风湿关节炎患者血清sFas、sFasL和IL-18水平及意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血中可溶性Fas(sFas)、可溶性Fas配体(sFasL)和白细胞介素-18(IL-18)水平及意义.方法应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)和速率散射比浊法检测70例RA患者血中sFas、sFasL、IL-18和类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)含量.结果 RA患者sFas、sFasL、IL-18、RF、CRP含量分别为(3.75±1.79) ng/ml、(1 215±1 017) pg/ml、(66.6±49.6) pg/ml、(487±661) IU/ml、(2.75±4.14) mg/dl,与对照组[(2.37±1.29) ng/ml、(443±245) pg/ml、(32.2±20.5) pg/ml、<30 IU/ml、<0.01 mg/dl]相比,差异有显著性(P<0.05).sFasL与CRP、RF呈正相关(r=0.536,r=0.394,P<0.05),sFas与IL-18呈正相关(r=0.808,P<0.01).结论 sFas、sFasL、IL-18与RA的发病过程有关.     

慢性荨麻疹儿童血清IFN-γ、IL-10水平检测

目的检测慢性荨麻疹患儿血清IFN-γ、IL-10水平,初步探讨慢性荨麻疹患儿免疫相关发病机制。方法用ELISA法检测78例慢性荨麻疹患儿(观察组)及42例健康儿童(正常对照组)血清中IFN-γ、IL-10水平。结果观察组血清IFN-γ(9.32±2.91,pg/ml)显著低于正常对照组(49.89±9.48,pg/ml);而血清IL-10(7.48±1.81,pg/ml)则明显高于正常对照组(2.96±0.39,pg/ml)。结论慢性荨麻疹儿童存在免疫失衡,表现为免疫抑制状态,使病情反复且迁延不愈。     

男性不育患者支原体感染与精浆IL-4、IFN-γ关系探讨

目的 探讨男性不育患者中支原体感染情况及精浆白细胞介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)水平关系.方法 采用支原体培养方法了解支原体感染情况,生物素双抗体ELISA夹心法测定IL-4、IFN-γ含量.结果 31例男性不育症患者有20例感染支原体、感染率64.5%(20/31),其IL-4和IFN-γ含量分别为7.8+0.9pg/ml和49.1&#177;16.4pg/ml,较男性正常生育组(3.4&#177;1.62pg/ml、30.4&#177;12.8pg/ml)为高(P&lt;0.01).结论 男性不育与支原体感染密切相关;IL-4和IFN-γ检测有助于男性不育症支原体感染与否的诊断和治疗.     

腹膜透析患者透出液IL—6和IL—8的变化

目的　探讨白介素 6 (IL 6 )和白介素 8(IL 8)在腹膜透析 (PD)患者透出液中变化的意义。方法　采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定 35例PD患者透出液IL 6和IL 8水平。结果　PD患者腹膜炎发作期透出液IL 6 [(6 0 .8± 11.8) pg/ml]和IL 8[(5 1.8± 2 .1) pg/ml]均明显高于透析稳定期 [(7.0± 5 .3) pg/ml和 (10 .8±4 .9) pg/ml],P <0 .0 0 1。透析 >3年组透出液IL 6 [(2 0 .5± 4 .3)pg/ml]和IL 8[(2 0 .8± 6 .8) pg/ml]明显高于透析 <1年组 [(7.9± 6 .1) pg/ml和 (12 .8± 5 .7) pg/ml],P <0 .0 1。 结论　PD患者透出液IL 6和IL 8可能参与腹膜损伤的发病机制 ,其增高提示可能有腹膜炎发作     

类风湿关节炎患者Th细胞亚群的检测及其临床意义

目的：探讨类风湿关节炎（RA）患者外周血和关节液中Th1、Th2型细胞在患者病情演变中的特点及临床意义。方法：用流式细胞术检测RA患者及健康人外周血单个核细胞（PBMC）和关节液单个核细胞（SFMC）中IFN-γ、IL-4阳性细胞比例。结果：RA患者外周血和关节液中以IFN-γ阳性细胞百分率和IFN-γ阳性细胞/IL-4阳性细胞比值明显增高 早期RA患者以IFN-γ阳性细胞百分率和IFN-γ阳性细胞/IL-4阳性细胞比值增高为主,非早期RA患者以IL-4阳性细胞百分率增高为甚。IFN-γ阳性细胞百分率与血沉、晨僵、休息痛、STOKE指数呈正相关关系。IL-4阳性细胞百分率与类风湿因子显著正相关。结论：RA患者外周血及关节液中存在Th细胞亚群比例失调。早期RA及关节液表现为Th1亚群细胞增多,而非早期RA以Th2亚群细胞增多。Th1、Th1/Th2与RA临床症状及活动指标密切相关,药物干预Th1/Th2失衡是RA治疗新的途径。     

类风湿关节炎血清和滑液Th1／Th2细胞因子的水平及意义

目的初步探讨类风湿关节炎患者免疫功能紊乱的机制.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测类风湿关节炎患者血清和关节滑膜液中Th1细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-10的水平.结果类风湿关节炎患者血清及滑膜液中IL-2、IFN-γ的水平与正常对照组相比明显升高,差异具有显著性(p＜0.01或p＜0.05),而IL-6、IL-10的水平降低,差异具有显著性(p＜0.01或p＜0.05).结论在类风湿关节炎患者血清及滑膜液中Th1/Th2细胞分泌的细胞因子水平存在着明显失衡,两者以Th1细胞分泌细胞因子占优势,这可能与其发病机制密切相关.     

滑膜成纤维细胞环氧化酶-2和诱导型一氧化氮合酶在类风湿性关节炎中的表达

目的　研究类风湿性关节炎 (RA)患者关节滑膜成纤维细胞环氧化酶 2 (COX 2 )、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)及其诱导产物前列腺素E2 (PGE2 )、一氧化氮 (NO)的表达水平 ,探讨它们在RA致病过程中的作用。方法　分离滑膜成纤维细胞 ;用酶联免疫吸附法和酶还原法检测正常人关节滑膜液和滑膜细胞培养上清液中PGE2 、NO的含量 ;采用半定量逆转录 聚合酶联反应法检测滑膜组织及滑膜细胞COX 2、iNOSmRNA表达 ;并用细胞酶联免疫法检测细胞COX 2、iNOS蛋白表达水平。结果　RA患者关节滑膜组织COX 2、iNOSmRNA表达及滑膜液PGE2 、NO的水平分别为 0 42 ,0 83和(4 82± 1 74) μg/L、(80 4± 2 3 2 ) μmol/L ,明显高于正常对照组的 0 0 8,0 1 4和 (0 64± 0 1 3) μg/L、(2 6 2± 1 4 4) μmol/L(P <0 0 1 ) ;在炎性细胞因子刺激下RA患者滑膜成纤维细胞COX 2、iNOSmRNA水平 (0 48,0 98)、蛋白表达水平 (0 92± 0 1 8,0 78± 0 1 3)以及培养上清液中PGE2 、NO含量 [(2 1 44±4 2 6) μg/L ,(1 2 6 6± 32 2 ) μmol/L]均显著高于正常对照组 (P <0 0 1 )。 结论　滑膜成纤维细胞COX 2、iNOS的过度表达及PGE2 、NO的大量合成 ,可能是RA关节病变的一个重要因素     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中Tim-1表达增高及其意义

目的 检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血Tim-1,IFN-γ和IL-4的表达水平,分析其相关性,初步探讨Tim-1在PBC诊治中的临床意义。方法 收集2013年6月～2015年11月来长海医院就诊的32例PBC患者和32例同期就诊的健康成人的外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测PBMC中Tim-1 mRNA,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆中Tim-1蛋白表达量,对Tim-1和IFN-γ,IL-4之间的关系进行Pearson相关性分析。结果患者组和对照组Tim-1 mRNA分别为0.63±0.40和0.36±0.32,差异具有统计学意义(t=3.005,P=0.003,P<0.01)。患者组与对照组Tim-1蛋白表达水平分别为62.72±38.60和35.66±30.55 pg/ml(t=3.11,P=0.002 8),IFN-γ表达水平分别为200.81±18.06和79.23±20.02 pg/ml(t=25.51,P<0.000 1),IL-4表达水平分别为99.22±14.67和30.18±20.56 pg/ml,差异均具有统计学意义(t=15.46,P<0.000 1)。Pearson相关分析结果提示Tim-1与IFN-γ呈负相关(r=-0.552,P=0.001 1),与IL-4呈正相关(r=0.652,P<0.000 1)。结论Tim-1可能参与了PBC的发病机制,是该病潜在的标志物和治疗靶点。     

输卵管支原体感染不孕妇女输卵管液中TNF-α、IFN-γ和IL-6的水平

【目的】研究支原体感染导致的输卵管不孕患者输卵管液中TNF-α、IFN-γ和IL-6水平。【方法】对179例不孕妇女,应用微量肉汤稀释法检测输卵管液支原体感染情况,双抗体夹心酶联免疫吸附法检测TNF-α、IFN-γ和IL-6含量。【结果】179例不孕妇女中显示支原体阳性者97例,其中Uu阳性者91例,Mh阳性者23例,两种支原体均阳性者17例,未检测出支原体者82例。支原体阳性患者血清TNF-α含量为(171.1±21.4)ng/ml,阴性者血清TNF-α含量为(113.7±35.5)ng/ml;阳性患者血清IFN-γ含量为(70.4±11.2)pg/ml,阴性者血清IFN-γ含量为(38.9±12.9)pg/ml;阳性患者血清IL-6含量为(48.9±5.2)pg/ml,阴性者血清IL-6含量为(26.4±4.7)pg/ml;阳性者血清TNF-α、IFN-γ、IL-6均高于阴性者,差异有显著性(P<0.05)。且阳性组TNF-α和IL-6含量成正相关(r=0.893,P<0.05)。【结论】认为支原体感染引起的输卵管炎症导致不孕可能与TNF-α、IFN-γ和IL-6升高有关。     

白细胞介素-18和白细胞介素-12在儿童1型糖尿病酮症酸中毒中的作用

目的探讨白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ(INF-γ)在儿童1型糖尿病酮症酸中毒(DKA)中的作用。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测61例儿童1型糖尿病(T1DM)患儿(其中28例伴DKA,33例无DKA)和30例正常对照者IL-18、IFN-γ和IL-12的血清水平。结果(1)T1DM患儿中血清IL-18水平明显比对照组高[(691．99±381．42) pg/ml vs(310．02±265．32)pg/ml,P=0．03],而两组间IFN-γ和IL-12水平则无差别。(2)DKA组患儿中IL-18和IFN-γ血清水平明显高于无DKA组[(759．25±353．82)pg/ml vs(634．93±399．79)pg/ ml,P=0．001和(9．35±8．06)pg/ml vs(5．21±6．47)pg/ml,P=0．044],而两组间IL-12血清水平则无差别。(3)IL-18和IFN-γ呈相关趋势,而与IL-12正相关。结论DKA患儿IL-18和IFN-γ血清水平明显升高,提示其可能在DKA的发生、发展中起重要作用。     

类风湿关节炎患者Th1／Th2细胞因子分泌模式与疾病活动程度的关系

目的：用全血在单个细胞水平上研究类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者Th1／Th2细胞因子分泌模式及其与疾病活动程度的关系。方法：用三色流式细胞术检测20例活动期RA患者的外周血单个核细胞及10例正常人的PBMC细胞内细胞因子干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)和白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)的表达情况。结果：RA患者外周血IFN-γ^+细胞百分率及IFN-γ^+／IL-4^+细胞比值比健康人明显增高[分别为(45．8&;#177;10．1)％和(15．2&;#177;8．5)％，t=9．07，P&;lt;0．01和(10．6&;#177;3．8)％和(5．5&;#177;3．1)％，t=5．67，P&;lt;0．01]，IFN-γ^+／IL-4^+比值与患者Stoke指数呈正相关(r=0．8610，P&;lt;0．01)。结论：RA患者外周血中细胞因子分泌模式朝，Th1偏移，IFN-γ^+／IL-4^+比值与疾病活动性相关，Th1／Th2平衡在RA发病机制及疾病进程中起重要作用。     

类风湿性关节炎患者血清中sICAM-1与细胞因子的研究及临床意义

目的 研究类风湿性关节炎(RA)患者血清中可溶性细胞间黏附分子-1(siCAM-1)与IL-1,IL-6,TNF-a,IFN-γ水平和临床意义,并探讨这些免疫分子在RA发生和发展中的作用,为评价该病惠者的病理状况和预后提供临床依据.方法 采用定量酶联免疫吸附试验(ELLSA)检测RA患者与健康对照者血清中siCAM-1,IL-1,IL-6,TNF-a及IFN-γ水平,使用SPSS 10.00软件包进行统计学分析.结果 ①活动期组RA患者(49例)血清siCAM-1,IL-1,IL-6,TNF-a及IFN-γ水平(分别为861.1±263.5 ng/ml,105.2±33.1 pg/ml,37.1±12.9 pg/ml,47.2±13.9 pg/ml,12.9±4.6 pg/ml)均显著高于正常对照组(42例)(分别为295.6±75.7 ng/ml.32.4±10.1 pg/ml,11.8±2.9 pg/m1.11.4士3.0 pg/ml,4.1±1.1 Pg/m1)(t=14.35,14.60,13.38,17.61,13.12,P<0.01);也均显著高于稳定期组(15例)(分别为325.9±87.6 ng/ml,55.6±11.2 pg/ml,14.1±4.2 pg/ml,15.3±4.3 pg/ml,5.6±1.6 pg/ml)(t=12.19,8.94,10.82,14.10,9.53,P<0.01).②sICAM-1与IL-1,TNF,IFN-γ水平呈正相关,相关系数r分别为0.742,0.667,0.449,P<0.05.结论 活动期RA患者血清中sICAM-1,IL-1,IL-6,TNF-a及IFN-γ水平均明显升高,不同的检测指标与病情的相关程度不同,临床上应该同时测定多项指标,以便更加准确地对疾病进行诊断和疗效的判断.     

心力衰竭患者血浆白细胞介素-12、白细胞介素-18和γ-干扰素水平变化及意义

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-18(IL-18)及γ-干扰素(IFN-γ)在心力衰竭发生与发展中的作用及相互关系。方法应用酶联免疫吸附法测定36例心力衰竭患者和20例正常人血浆IL-12、IL-18和IFN-γ水平,并分析他们之间的相互关系以及与心力衰竭病情程度的关系。结果心力衰竭患者血浆IL-12、IL-18及IFN-γ水平分别为(181.5±38.5)ng/L、(378.4±185.3)ng/L及(1.86±0.52)ng/L,均显著高于正常人水平[(22.4±4.5)ng/L、(228.5±77.5)ng/L、(0.08±0.03)ng/L](P<0.01),而三者相互呈密切正相关(P<0.05或P<0.01),且3种细胞因子水平在不同心功能的心力衰竭患者间亦有显著性差异(P<0.05或P<0.01),并随心功能的恶化而升高(P<0.05或P<0.01)。结论IL-12、IL-18和IFN-γ可能共同构成一局部网络,并可能参与心力衰竭的发生及发展过程。监测三者的血浆水平可能对判断心力衰竭病情有一定的参考价值。     

γ-干扰素含量测定对结核性胸膜炎的诊断价值

目的检测结核性胸膜炎及恶性胸膜炎患者血清与胸水中γ-干扰素(IFN-γ)水平,探讨IFN-γ对结核性胸膜炎诊断及鉴别诊断的临床价值。方法采用双抗体夹心酶链免疫吸附法检测40例结核性胸膜炎、40例恶性胸膜炎患者血清及胸水和40例健康对照组血清的IFN-γ水平;应用受试者工作特征曲线评价IFN-γ在结核性胸膜炎诊断中的价值。结果①结核性胸膜炎组与恶性胸膜炎组胸水中IFN-γ浓度分别为(448.96±191.97)pg/ml和(47.77±27.67)pg/ml,结核性胸膜炎组的IFN-γ浓度水平显著高于恶性胸膜炎组(P<0.01);结核性胸膜炎组与恶性胸膜炎组血清中IFN-γ浓度分别为(42.63±18.35)pg/ml和(38.43±18.80)pg/ml,与健康对照组血清中IFN-γ浓度(39.19±17.96)pg/ml比较无显著差异(P>0.05)。②受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析结果,IFN-γ在结核性胸腔积液诊断中的最佳临界值是145.9 pg/ml,敏感性、特异性、准确性分别为92.5%、100%和93%。结论IFN-γ在结核性胸膜炎诊断中有重要的作用,可为临床鉴别结核性和恶性胸腔积液提供有效的参考指标。     

夏枯草提取物对MDR-MTB感染小鼠细胞免疫功能的影响

目的探讨夏枯草提取物对耐多药结核分枝杆菌(multiple drugs resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-MTB)感染小鼠免疫功能的调节作用。方法将30只健康雄性小鼠随机分为3组,每组10只。2组用MDR-MTB菌液尾静脉注射,建立小鼠MDR-MTB感染病理模型,分别为模型组和夏枯草灌胃模型组,另1组为正常对照组。用ELISA法检测小鼠血清中IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12含量的变化;用RT-PCR法检测单个核细胞中IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-12及颗粒裂解肽(granulysin,GLS)的mRNA变化。结果夏枯草灌胃模型组与模型组比较,小鼠血清中IFN-γ[(1.98±0.67)pg/mL vs(1.18±0.38)pg/mL,P<0.05]、IL-12[(3.02±0.86)pg/mL vs(2.19±0.57)pg/mL,P<0.05]含量明显升高;IL-10[(12.13±3.43)pg/mL vs(16.10±2.21)pg/mL,P<0.05]含量明显下降。与正常对照组比较,IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的含量变化差异无统计学意义(P>0.05)。在mRNA表达水平,夏枯草灌胃模型组IFN-γ、IL-12和GLS表达明显升高,IL-10 mRNA表达明显下降(P<0.05),IL-4变化不明显。结论夏枯草提取物可通过上调基因转录水平增强小鼠的细胞免疫功能,为临床应用夏枯草治疗耐多药结核病提供了理论依据。     

流式细胞术检测国人外周血6种细胞因子水平

目的 检测国人血清中6种细胞因子水平可作为研究疾病状态下6种细胞因子变化的对照。方法 以流式细胞术和CBA试剂盒同时分别检测6种细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-5、IL-4及IL-2)水平。结果 70例正常人血清中6种细胞因子水平分别为IFN-γ(12.06±5.1 9pg/ml)、TNF-α(10.64±11.02pg/ml)、IL-10(3.69±1.16pg/ml)、IL-5(1.76±0.44pg/ml)、IL-4(2.42±0.53pg/ml)及IL-2(2.59±1.01pg/ml)。不同性别与年龄中的6种细胞因子的水平差别均无显著性意义。结论 以流式细胞术同时检测6种细胞因子具有快速、简便、准确的特点。70例正常人数据可以作为在研究国人疾病状态下6种细胞因子水平变化的参考。