2,4-表油菜素内酯对葡萄果实采后灰霉病的抑制作用机理

为研究2,4-表油菜素内酯（2,4-epibrassionolide,EBR）处理对‘巨峰’葡萄果实采后灰霉病的抑制效果及作用机制,将葡萄果实经5 μmol/L EBR溶液处理12 h后刺伤接种灰葡萄孢（Botrytis cinerea）病原菌,然后置于25 ℃下贮藏60 h。结果显示：EBR处理有效抑制了葡萄采后灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与单一接种病原菌和EBR处理相比,先用EBR处理后接种B. cinerea葡萄果实展现出更强、更快的抗病反应,表现为几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和苯丙氨酸解氨酶等抗病相关酶活力及总酚含量显著提高（P＜0.05）,H2O2积累及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶活力提高,同时VvCHI、VvGNS和VvPAL-like抗病基因表达显著增加（P＜0.05）;体外实验发现,EBR处理可显著抑制B. cinerea孢子的萌发,但对芽管伸长长度没有显著影响。结论：EBR处理主要是通过敏化反应机制诱导提高葡萄果实的抗病性,从而减轻灰霉病的发生。     

采前水杨酸处理对红地球葡萄潜伏侵染及采后灰霉病的防控效果

为明确采前水杨酸处理对葡萄潜伏侵染及采后灰霉病的影响,本研究首先分离并鉴定红地球葡萄生长过程中的主要潜伏侵染真菌,并研究水杨酸（salicylic acid,SA）对灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）的抑菌效果及对果实抗性基因的诱导作用。本文以新疆红地球葡萄为试材,选取0（对照）、0.5、1.0、2.0 mmol/L水杨酸（SA）在膨大期、转色期和采收前2 d （预收期）喷施处理葡萄果穗,采用组织分离法分离不同时期潜伏侵染果实的病原真菌,通过形态学和分子生物学方法,对病原菌进行分类鉴定,明确主要潜伏侵染真菌的种类,统计果实采后损伤接种Botrytis cinerea后病斑直径和发病率的变化,并分析果实相关抗性基因的表达情况。结果表明:采前SA处理可以显著降低果实生长期间潜伏真菌率,对葡萄果实不同部位的潜伏侵染控制效果显著,1.0 mmol/L SA处理组优于其它组,其中对果实底部和果蒂潜伏侵染的控制效果优于顶部和果梗。此外,生长期果实共鉴定出4种主要潜伏病原真菌,分别为灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、互隔交链孢霉（Alternaria alternate）、变色青霉（Penicillium discolor）和黑曲霉（Aspergillus niger）。1.0 mmol/L SA处理能显著抑制B.cinerea侵染造成灰霉病发病率上升和病斑直径的扩大,SA处理可在贮藏前期诱导采后葡萄果实VvPAL1、VvChi4D和VvGlu1基因的表达,中期后期诱导VvPAL2、VvPAL7和VvPAL15的基因表达,起到提高果实抗病性。因此,SA采前处理能提高红地球葡萄对潜伏侵染病害的抗性,对采后灰霉病也有较显著的抑制效果。     

酸性硫酸钙对红地球葡萄采后灰霉病的抑制

灰霉病是引起葡萄采后贮藏运输过程中的主要病害之一,为了探究酸性硫酸钙(ACS)对鲜食葡萄采后灰霉病的抑制及品质的影响。以红地球葡萄为试材,采用ACS(p H=5.45)喷洒处理20 s,在8±2℃条件下贮藏,分析ACS处理对果实灰霉病(Botrytis cinerea,B. cinerea)病斑面积、发病率和菌落直径的抑制效果;测定果实硬度、失重率、可溶性固形物、可滴定酸和电导率的变化,研究ACS处理对葡萄采后灰霉病抑制作用和品质参数的影响。结果表明,ACS处理能够显著抑制B. cinerea的生长,在贮藏期15 d时,病斑面积、发病率和菌落直径显著低于对照处理(p0.05),分别降低了67.02%、56.55%、98.16%,抑菌率达到96.06%。ACS处理能显著降低损伤接种灰霉病的病斑面积和发病率,在体外培养时对灰霉病发生也有显著的抑制作用。ACS处理能降低葡萄果实失重率,保持果实硬度,抑制果实可溶性固形物含量的下降,维持葡萄采后品质。ACS作为FDA和USDA认证的一种新型高效杀菌防腐剂,为鲜食葡萄采后保鲜技术的研究提供了新的方法。     

CaCl2处理对草莓采后品质及灰霉病害的影响

选用CaCl2溶液处理新鲜草莓,研究其对草莓采后品质的影响及对贮期灰霉病的抑制作用.研究结果表明CaCl2处理具有较好地保持采后草莓品质的能力,尤其是经10％浓度CaCl2处理的草莓果实在贮藏期间品质最好.CaCl2处理还可以抑制灰葡萄孢的菌丝生长与孢子萌发,并显著地降低草莓果实贮藏期间灰霉病的发病率,且该抑菌效果与CaCl2使用浓度呈正相关.此外,CaCl2处理会影响草莓果实抗病相关物质的含量.经10％、5％浓度CaC12处理的草莓果实在贮藏早期(1d)其木质素含量和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均显著地高于对照;而在贮藏中后期(6～12d和9～12d),其过氧化氢酶(CAT)及过氧化物酶(POD)活性也均显著地高于对照.由此可见,CaCl2处理可以诱导采后草莓抗病性相关物质的积累并进而提高草莓果实对于灰霉病的防御能力.     

L-半胱氨酸处理对采后李果实褐腐菌的抑制作用

为探究L-半胱氨酸对采后李果实褐腐菌的抑制作用,本实验通过离体实验探究不同质量浓度（1、10、100、1000 mg/L）L-半胱氨酸对李果实褐腐菌Monilinia fructicola的抑制效果及可能的抑菌机制;采用损伤接种的方法评价L-半胱氨酸处理对李果实采后褐腐病的防治效果。结果表明：在所选的4 个L-半胱氨酸处理质量浓度中,只有1 000 mg/L L-半胱氨酸处理与对照相比可以显著延缓褐腐菌孢子的萌发,抑制菌丝体的生长,增加褐腐菌菌丝体胞外电导率和核酸物质的释放量,破坏褐腐菌孢子细胞膜的完整性（P＜0.05）;且在果实损伤接种实验中,1000 mg/L L-半胱氨酸处理可显著降低李果实的损伤接种发病率和病斑直径（P＜0.05）,而1、10、100 mg/L L-半胱氨酸处理对采后李果实褐腐病无明显控制效果。     

纳他霉素对葡萄采后交链孢菌的抑制作用

交链孢菌(Alternaria sp.)是导致鲜食葡萄采后腐烂变质的主要病原菌。以葡萄采后交链孢菌为病原菌,采用生长速率法、悬滴法及活体接种法,研究了不同浓度纳他霉素抑菌液对菌丝生长、孢子萌发的抑制作用以及对果实的防病效果。结果表明,适宜浓度的纳他霉素对葡萄采后交链孢菌的抑制效果明显,对菌丝生长及孢子萌发的抑菌中浓度(EC50)分别为83.48和89.47mg/L;当抑菌液浓度达200mg/L时,对菌丝生长和孢子萌发的抑制率均达到80%以上。活体接种实验结果表明,浓度为200mg/L的纳他霉素抑菌液可显著(p<0.05)抑制葡萄采后交链孢菌引起的霉烂变质。综上,纳他霉素处理对葡萄采后交链孢菌具有较好的抑制活性,可作为葡萄采后绿色保鲜剂的潜在资源。     

绿原酸对苹果采后灰霉病抗性的影响

绿原酸是苹果中含量最高的酚类物质,为探究外源绿原酸对苹果灰霉病的影响,本研究首先通过体外抑菌实验证实绿原酸可抑制灰葡萄孢（Botrytis cinerea）生长,并确定了最佳抑菌质量浓度（300 μg/mL）。以此质量浓度的绿原酸浸泡富士苹果30 min,24 h后损伤接种灰葡萄孢,以清水浸泡30 min的富士苹果作为对照,同时测定相关代谢酶活力及总酚、类黄酮和木质素含量。结果表明：与对照组相比,300 μg/mL绿原酸处理能显著降低苹果灰霉病发病率且减缓病斑扩展（P＜0.05）;提高几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活力,诱导酚类代谢途径中多种酶类的响应,具体表现为显著提高苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸-4-羟化酶以及4-香豆酰辅酶A连接酶活力（P＜0.05）,促进苹果果实总酚、类黄酮和木质素等抗性物质的积累,从而减缓灰霉病的发展。研究可为绿原酸在苹果采后灰霉病防治中的应用提供理论依据。     

肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其对品质的影响

为研究肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其对番茄果实品质的影响,在离体条件下分别研究肉桂醛对
灰葡萄孢菌菌丝生长、孢子萌发的抑制作用,采用人工活体接种法研究肉桂醛对番茄果实灰霉病斑的控制作用,及
其对番茄自然发病果实的品质的影响。结果表明,肉桂醛对灰葡萄孢菌的菌丝生长和孢子萌发均有较好的抑制作
用,对菌丝生长的EC50值为95.6 μg/mL,质量浓度为60 μg/mL时对孢子萌发抑制率为100%;活体条件下肉桂醛能够
有效地抑制番茄果实采后灰霉病病斑的扩展,以4 000 μg/mL效果最好,且在此质量浓度条件下,对于降低果实质
量损失率,维持番茄硬度、可溶性固形物、可滴定酸和VC含量均具有较好的效果。4 000 μg/mL肉桂醛处理能够有
效地控制番茄采后灰霉病的发生及延长其保鲜期。     

橄榄假丝酵母控制苹果果实青霉病的效果及机制

通过橄榄假丝酵母与扩展青霉同孔和异孔接种实验、平板对峙实验以及酵母挥发性物质抑菌实验,结合苹 果组织伤口处酵母生长情况及伤口周围组织抗病相关酶活力的变化,阐明橄榄假丝酵母对苹果采后青霉的控制效果 及其可能存在的抑菌机理。结果表明：橄榄假丝酵母处理果实的发病率和病斑直径显著低于对照组（无菌水处理） 果实（P＜0.05）;橄榄假丝酵母不能产生抑菌的次生代谢产物,其挥发性物质对青霉菌的生长无显著抑制作用 （P＞0.05）;橄榄假丝酵母具有较强的繁殖生长和定殖能力,能在苹果果皮定殖、扩增,从而抑制果实接种发病 率和病斑直径的增加;同时,橄榄假丝酵母还能显著诱导果实过氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活力增加 （P＜0.05）。综上所述,橄榄假丝酵母抑制苹果扩展青霉发病的机制包括诱导果实抗病性以及与病原菌的营养和 空间竞争。     

生防菌KD-16J的鉴定及其对番茄灰霉病的抑制作用

通过离体和活体筛选,确定一株生防菌KD-16J对果实灰霉病的抑制效果。经形态学鉴定、生理生化试验和内源转录间隔区序列分析鉴定,确定其为膜醭毕赤酵母菌(Pichia membranifaciens)属。在平板抑菌试验中发现,在105 CFU/mL~108 CFU/mL之间,酵母菌的应用浓度越高,对灰葡萄孢菌的抑制效果越好,1×108 CFU/mL的生防菌对灰葡萄孢菌菌丝生长的抑制率为85.53%,同时能够完全抑制孢子的萌发;显微镜观察发现与酵母菌共培养能够导致灰葡萄孢菌菌丝肿胀,内部物质泄漏。活体试验(番茄果实)结果表明,该菌株能够显著抑制番茄果实的自然发病率和有伤接种灰葡萄孢菌果实的灰霉病发病率,而且喷洒该菌的时间越早对果实灰霉病的抑制效果越好,当生防菌KD-16J先于灰霉菌36 h处理时,番茄果实的发病率仅为29.12%。     

根皮苷对苹果采后灰霉病的影响

为探究苹果特有酚类物质根皮苷对灰霉病的影响,以培养基体外接种灰霉菌确定抑菌效果,预实验筛选得 到活体实验的最佳质量浓度。以此质量浓度根皮苷溶液浸泡处理‘粉红女士’苹果20 min,诱导12 h,损伤接种灰 霉孢,定期统计发病情况并取样测定抗性相关指标,以清水浸泡为对照。结果表明：根皮苷可直接抑制灰霉菌的体 外生长,1.0 g/L的根皮苷处理可显著降低采后果实的发病率和抑制病斑直径的扩展（P＜0.05）,并诱导果肉苯丙 氨酸解氨酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活力的升高,促进总酚、类黄酮和木质素的积累,同时降低了H2O2的含量, 果实抗性提高。结果可为根皮苷对采后病害抗性的机理研究提供理论依据。     

臭氧对葡萄灰霉病的抑制效果

研究不同臭氧处理方式对离体及接种在活体葡萄上的灰霉菌的抑制作用,为降低采后葡萄贮藏过程中灰霉病带来的损失提供理论依据。在(20±1)℃条件下用不同剂量的臭氧(0、30、60、90μL/L)对离体灰霉菌分别处理不同时间(5、10、15 min),通过测定菌丝生长长度、孢子形成抑制率、孢子细胞膜完整性及扫描电镜观察来探究臭氧对其抑制效果。用上述4种剂量的臭氧分别对接种了灰霉菌的‘红地球’葡萄处理15 min后(20±1)℃条件下存放5 d。通过测定发病率、病斑直径及相关酶活性来观察臭氧对葡萄灰霉病的控制效果。结果表明:在离体实验中,与对照相比,不同剂量的臭氧对离体灰霉菌处理不同时间后,灰霉菌菌丝的生长均受到了不同程度抑制,随贮藏时间延长抑制效果逐渐减弱;灰霉菌的产孢子率显著下降,部分孢子的细胞膜完整性被破坏,臭氧剂量越高、处理时间越长,效果越好。在接种了灰霉菌的活体实验中,与对照组相比,用60μL/L和90μL/L剂量臭氧处理接种灰霉菌的葡萄果实后,灰霉菌在果实上的生长明显受到抑制;臭氧处理可以使果实丙二醛含量积累减慢,维持较高的抗氧化酶活性。综合分析,臭氧通过抑制灰霉菌菌丝在葡萄果实上的生长和诱导葡萄果实提高抗性来抵抗灰霉菌的侵染,采用90μL/L剂量臭氧处理15 min对离体条件下和接种在‘红地球’葡萄活体上的灰霉菌抑制效果均为最好。     

BABA处理对葡萄果实采后灰霉病的影响及机理

以‘巨峰’葡萄果实为实验材料,研究β-氨基丁酸（β-aminobutyric acid,BABA）处理对葡萄果实灰霉病、抗病相关酶活性和总酚含量的影响。葡萄果实先用75 mmol/L的BABA溶液处理后刺伤接种灰霉葡萄孢菌,然后转入25 ℃贮藏60 h。结果发现,BABA处理有效抑制了‘巨峰’葡萄果实的腐烂和病斑的扩展;同时BABA处理还诱导了果实中几丁质酶、β-1,3葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶、4-香豆酸辅酶A连接酶和肉桂酸羟化酶等抗病相关酶活性以及总酚含量的提高。结果表明,BABA可诱导葡萄果实产生抗病性,从而减少灰霉病的发生。     

In vitro inhibition of postharvest pathogens of fruit and control of gray mold of strawberry and green mold of citrus by aureobasidin A

Aureobasidin A (AbA), an antifungal cyclic depsipeptide antibiotic produced by Aureobasidium pullulans R106, has previously been shown to be effective against a wide range of fungi and protozoa. Here we report the inhibitory effects of AbA on spore germination, germ tuber elongation and hyphal growth of five pathogenic fungi including Penicillium digitatum, P. italicum, P. expansum, Botrytis cinerea and Monilinia fructicola, which are major pathogens causing postharvest diseases of a variety of fruits. AbA inhibited five pathogenic fungi by reducing conidial germination rates, delaying conidial germination initiation, restricting elongation of germ tuber and mycelium, as well as inducing abnormal alternations of morphology of germ tubes and hyphae of these fungi. The sensitivity of these fungi to AbA was pathogen species-dependent. P. digitatum was the most sensitive and M. fructicola the least. Importantly, AbA at 50 microg/ml was effective in controlling the citrus green mold and in reducing the strawberry gray mold incidence and severity, caused by P. digitatum and B. cinerea, respectively, after artificial inoculation. AbA and/or its analogs, therefore, hold promise as relatively safe and promising fungicide candidates to control postharvest decays of fruits, because AbA targets the inositol phosphorylceramide (IPC) synthase, an enzyme essential for fungi but absent from mammals.     

拮抗酵母菌挥发物单体对草莓灰霉病的防治效果

为研究葡萄汁有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）挥发物单体对草莓灰霉病的防治作用,研究了21 种挥发物单体离体条件下对灰葡萄孢的抑制作用,以及活体条件下3-羟基己酸乙酯、癸酸乙酯、桂皮醛和辛酸乙酯对草莓果实灰霉病的防治作用。结果表明：除月桂酸外,其余20 种单体均对灰葡萄孢菌丝生长和孢子萌发有抑制作用,其中桂皮醛剂量为62.5 μL/L时完全抑制菌丝生长,625 μL/L时可以完全抑制孢子萌发;活体条件下,4 种单体均能有效地抑制草莓果实采后灰霉病的发生,保持草莓色泽,延缓草莓可溶性固形物质量分数、可滴定酸质量分数、硬度等质构特性的下降,其中桂皮醛防治草莓灰霉病效果最好,具有商业开发前景。     

山梨酸盐与钙胁迫对甜樱桃灰霉病抗性的诱导作用

以‘秦樱1号’樱桃为试材,研究不同质量浓度山梨酸钾（1、3、5、7 g/L）、CaCl2（5、10、15、 20 g/L）处理对离体灰霉菌的抑制效果,通过菌丝生长抑制率、扫描电子显微镜观察芽管生长及孢子萌发抑制率 筛选出最佳处理质量浓度。结果表明：与对照组相比,山梨酸钾、CaCl2处理均能不同程度地抑制灰霉菌菌丝的生 长,抑制灰霉菌芽管的伸长,降低孢子的萌发率,抑制效果随质量浓度的升高逐渐加强,20 g/L CaCl2、5 g/L山梨 酸钾处理抑制效果最好。以无菌水为对照,用采前喷20 g/L CaCl2、采后5 g/L山梨酸钾处理及二者复合处理接种灰 霉菌的甜樱桃,在（23±1）℃下存放5 d,通过测定发病率、病斑直径及相关酶活力探究不同处理对甜樱桃灰霉病 的抑制效果。在活体接种实验中,与对照组相比,20 g/L CaCl2、5 g/L山梨酸钾单独及复合处理均能有效抑制接种 到甜樱桃果实上灰霉菌的生长,减缓病斑的扩展,CaCl2与山梨酸钾处理能显著抑制樱桃果实中MDA含量上升,诱 导果实合成与积累抗性相关酶（多酚氧化酶、过氧化物酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶）在接种1 d后或接种3 d后的 活力提高,以5 g/L山梨酸钾与20 g/L CaCl2复合处理抑制效果最好,该研究为降低由灰霉菌侵染引起的病害及采后 甜樱桃果实防腐保鲜提供了参考。     

Effects of Pre- and Postharvest Chitosan Treatments to Control Storage Grey Mold of Table Grapes

ABSTRACT: The effectiveness of pre- and postharvest treatments with chitosan (0.1, 0.5, and 1.0%) to control Botrytis cinerea on table grapes was investigated. In postharvest treatments, small bunches dipped in chitosan solutions and inoculated with the pathogen showed a reduction of incidence, severity, and nesting of grey mold, in comparison with the control. Single berries artificially wounded, treated with the polymer, and inoculated with B. cinerea showed a reduced percentage of infected berries and lesion dia. Higher chitosan concentrations demonstrated greater decay reduction. All preharvest treatments significantly reduced the incidence of grey mold, as compared to the control. Table grapes treated with 1.0% chitosan showed a significant increase of phenylalanine ammonia-lyase (PAL) activity. Consequently, besides a direct activity against B. cinerea , chitosan produces other effects contributing to reduce decay.     

6种农药和2种拮抗菌对葡萄灰霉病的防治试验

对目前生产上常用的6种农药和实验室分离的2株拮抗菌进行了室内和田间葡萄灰霉病防治效果试验,以明确目前常用药剂和2株拮抗菌的防效,为葡萄灰霉病的防治提供科学的依据。结果发现:这些药剂和拮抗菌对葡萄灰霉病的防效测定结果基本一致,对葡萄灰霉病均表现一定程度的防病效果,其中,速克灵、施佳乐、多抗霉素和百泰效果最好,宁南霉素、F2和BJ-6次之,武夷菌素的效果相对较差。