狭基线纹香茶菜水提部位对免疫肝损伤小鼠NF-kB蛋白表达水平及核转位的影响

目的：研究狭基线纹香茶菜水提部位对免疫肝损伤小鼠核因子KB（NF—KB）蛋白表达水平及核转位的影响。方法：小鼠尾静脉注射刀豆蛋白A（ConA）25mg·kg。复制肝损伤模型,免疫组化法检测NF-kB在肝组织的表达,以及NF．KB从细胞浆向细胞核转位的情况。结果：复制模型4、8h后小鼠NF．KB蛋白表达显著增加（P〈0．01）,吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）和狭基线纹香荼菜水提部位9．2g·kg。在4、8h均可显著降低模型小鼠NF．1（El的蛋白表达量（P〈O．01）。ConA能显著促进NF—KB自细胞浆向细胞核转位（P〈O．01）。PDTC和狭基线纹香茶菜提取物9．2g·kg-1。能显著减少NF-kB在细胞核表达,使其在细胞浆表达显著增多（P〈0．01）。结论：狭基线纹香茶菜可抑制免疫肝损伤小鼠NF-kB蛋白的表达,并抑制NF-kB的核转位。狭基线纹香茶菜对抗免疫肝损伤的作用机制可能与其抑制核NF-kB的激活有关。     

狭基线纹香茶菜的化学成分

目的对唇形科香茶菜属植物狭基线纹香茶菜(Isodon lophanthoides(Buch.Ham.ex D.Don)Haravar.gerandianus(Benth.)Hara)即中药溪黄草的化学成分进行研究。方法体积分数为95%乙醇提取物的水混悬液经环己烷、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取,再对乙酸乙酯层运用硅胶、D101大孔树脂S、ephadex LH 20、ODS等柱层析手段并配合HPLC进行分离、纯化;通过化学方法及波谱分析鉴定其结构。结果分离得到并鉴定了6个化合物:既6去羟基迷迭香酸甲酯(methyl 6 dehy-droxyl rosmarinate,1)、迷迭香酸甲酯(methyl rosmarinate,2)、咖啡酸(caffeic acid,3)、6,7二羟基香豆素(6,7 dihydroxycoumarin,4)、槲皮素(quercetin,5)、蓟黄素(cirsimaritin,6)。结论化合物1为新天然产物,化合物4为首次从该属中分离得到,化合物3、6为首次从该植物中分离得到。     

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对H2O2致LO2细胞损伤的保护作用

摘 要 目的：探讨狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮(WSTF)对氧化应激损伤LO2细胞的保护作用。方法: 通过细胞毒性实验确定给药范围,建立过氧化氢（H2O2）致LO2细胞损伤模型,用含不同浓度WSTF的培养液与急性损伤肝细胞共孵育不同时间,采用MTT比色法测定细胞活力,检测谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST） 和丙二醛（MDA）的水平,评价WSTF对肝细胞损伤的保护作用。检测细胞线粒体膜电位和细胞内活性氧簇（ROS）水平,分析WSTF抑制H2O2诱导LO2细胞凋亡情况。结果:0.3 mmol·L^-1 H2O2处理LO2细胞4 h构建H2O2损伤LO2细胞模型,确定0.031 2~0.125 mg·mL^-1 WSTF为保护LO2细胞损伤的给药浓度范围。WSTF可抑制H2O2对肝细胞的损伤,并明显降低H2O2致急性损伤肝细胞的 ALT、AST 释放量和 MDA 水平,逆转H2O2诱导LO2肝细胞线粒体膜电位去极化和细胞内ROS升高。结论:WSTF体外给药对肝细胞损伤有保护作用。     

肝细胞癌变过程中NF-κB的异常表达

目的 探讨肝细胞肝癌(HCC)形成过程中核转录因子κB(NF-κB)的表达机制及对HCC诊断的临床价值.方法 雄性SD大鼠以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲制备HCC模型,经病理组织学分析肝细胞的形态学变化,在癌变不同时期以免疫组织化学法研究NF-κB在肝脏组织的胞内分布情况,并定量分析了癌变过程中肝组织NF-κB的表达水平.结果 病理组织学检查发现大鼠在喂饲2-FAA后,正常肝细胞在诱癌早期发生颗粒样变性,中期阶段肝组织中出现不典型增生,后期可见大量癌巢结节,均为高分化HCC;变性、癌前及癌变组的肝细胞核中均可见NF-κB阳性的棕黄色颗粒,其阳性率分别为81.8%、83.3%及100%,各组阳性率无显著性差异,但都明显高于正常肝组织(低表达);同时随着肝细胞组织形态的变化,肝NF-κB表达逐渐增强,均显著高于正常对照组(P＜0.01).结论 HCC变早期NF-κB信号转导途径即被激活,NF-κB的异常表达与HCC发生有关.     

PKR及NF-κB在子宫颈癌中的表达

目的:探讨双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)及核因子-κB(NF-κB)在子宫颈癌中的表达水平及临床意义.方法:采用免疫组化SABC法检测37例子宫颈癌、10例正常子宫颈组织中PKR和NF-κB表达水平,并分析其与子宫颈癌临床病理特征间的相关性.结果:子宫颈癌组织中PKR阳性表达率为64.9%(24/37),正常子宫颈组织为10.0%(1/10),PKR在子宫颈癌中的表达水平较正常子宫颈组织增高(χ<'2>=9.52,P<0.01).子宫颈癌组织中NF-κB阳性表达率为72.97%(27/37),而正常子宫颈组织中无NF-κB阳性表达,子宫颈癌组织中NF-κB表达较正常子宫颈组织增高(P=0.00).PKR表达与子宫颈癌患者年龄、病理类型、临床分期、肿瘤组织分化及患者预后无关;而NF-κB表达与临床分期、肿瘤组织分化有关,而与患者年龄、病理类型及患者预后无关.结论:NF-κB异常表达与子宫颈癌的发生、发展有关.     

直肠癌组织中核因子-κB的表达及临床意义

目的研究核因子-κB(NF-κB)在直肠癌组织中的表达及其与肿瘤细胞分化、浸润、淋巴结转移及远处转移等生物学行为的关系。方法应用Envision二步法检测60例直肠癌及30例癌旁组织石蜡标本中NF-κBp65蛋白的表达水平。结果 NF-κB在癌组织的表达明显高于癌旁组织,低分化癌组织较高分化、中分化组织中NF-κB的表达高;有淋巴结转移的组织较无转移的表达高;浸润程度越深,表达越高;有远处转移的组织较无转移的表达高。结论 NF-κBp65蛋白在直肠癌中有高表达,并且其在直肠癌的发生、转移过程中发挥重要作用,可能成为直肠癌治疗的一个新靶点。     

核因子-κB在乳腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨核因子-κB（NF-κB）在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化Envision法检测87例乳腺癌及癌旁乳腺组织中NF-κB（P65）的表达状况.结果 NF-κB（P65）在乳腺浸润性导管癌中的表达与组织学分级（x2=5.869,6.716,均P＜0.05）、淋巴结转移（x2=6.594,P＜0.05）、TNM分期（x2=9.408,P＜0.05）和人表皮生长因子受体-2（HER-2）的状态（x2=6.228,P＜0.05）均有显著相关性;与肿瘤直径的大小、年龄以及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的状态无明显相关性.结论 NF-κB（P65）的表达可能是乳腺浸润性导管癌预后较差的危险因素.     

谷氨酰胺对COPD外周血NF-κB及HSP70表达的影响

目的探讨谷氨酰胺(Gln)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中核因子-κB(NF-κB)和热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法选择30例COPD急性加重期(AECOPD)患者为研究对象,设为AECOPD组,将治疗10~20 d后处于稳定期的上述患者设为SCOPD组,分别以Gln干预,收集干预前后各组外周血PBMC,并以健康人为正常对照组。采用Real-time PCR法检测各组PBMC中NF-κB P65 mRNA和HSP70 mRNA的表达水平。结果 AECOPD和SCOPD组NF-κB P65、HSP70的表达高于正常对照组(P<0.05),且急性期增高更为显著;AECOPD组和SCOPD组中,用Gln干预的较未用Gln的PBMC中HSP70表达升高(P<0.05),而NF-κB P65表达下降(P<0.01)。结论 Gln可抑制COPD患者炎症因子NF-κB的活性,升高HSP70的表达。     

可舒胶囊对酒精性肝损伤大鼠血清中NF-κB和TNF-α的影响

目的探讨可舒胶囊对酒精所致大鼠急性肝损伤的保护作用及机制。方法采用酒精灌胃辅以高脂饲料法复制急性酒精性肝损伤大鼠模型。50只雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组、急性酒精肝损伤模型组、可舒胶囊低、中及高剂量(3.06、6.12、12.24 g/kg)组,每组10只。测定并比较各组大鼠血清中核转录因子-κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果治疗后,与模型组比较,可舒胶囊各剂量组急性酒精性肝损伤大鼠血清NF-κB和血清TNF-α的含量降低(P<0.01)。结论舒胶囊通过抑制NF-κB和TNF-α,降低炎性因子水平,对酒精性肝损伤的肝功能具有保护作用。     

核因子κB活化在脓毒血症急性肝损伤发病中的作用机制

目的 探讨核因子κB(NF-κB)活化在脓毒血症所致大鼠急性肝损伤发病中的作用机制.方法 采用盲肠结扎穿孔(CLP)制作脓毒血症急性肝损伤模型,将大鼠随机分为3组:CLP组、二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC) CLP组、假手术组,观察术后24 h肝组织的病理损伤及肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(STB)、非结合胆红素(UCB)的变化,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织中NF-κB p65的表达和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量变化.结果 CLP可致大鼠肝急性病理损伤,模型组ALT、AST、STB、UCB显著高于假手术组,NF-κB p65的表达及TNF-a含量明显高于假手术组,PDTC干预组肝组织NF-κB p65的表达及TNF-a含量明显下降,ALT、AST、STB、UCB相应降低.结论 CLP所致脓毒血症能显著增强肝组织NF-κB的表达进而启动TNF-a等炎症因子表达增加而参与大鼠急性肝损伤发生;用PDTC抑制NF-κB活性能够降低肝组织中TNF-a表达,且能改善脓毒血症所致大鼠急性肝损伤.     

NF-κB、villin蛋白的表达与胃癌临床病理特征及患者预后的相关性

目的 研究NF-κB、villin蛋白的表达与胃癌临床病理特征及患者预后的相关性.方法 收集36例胃癌患者组织和对应的癌旁组织36例,每年对患者进行随访,采用免疫组化和蛋白印迹法检测胃癌组织和癌旁组织中NF-κB、villin蛋白的表达,将NF-κB、villin蛋白的表达与胃癌患者临床病理特征及预后情况进行相关性分析...     

藻蓝蛋白对脑缺血再灌注后NF-κB和IL-6表达及神经细胞凋亡的影响

目的研究藻蓝蛋白对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑保护作用的可能机制。方法大鼠60只，采用改良线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注（MCAO／R）模型，应用藻蓝蛋白进行治疗，现察脑缺血再灌注后神经细胞棱因子-κB，IL-6免疫表达和神经细胞凋亡变化，以及藻蓝蛋白对上述指标的影响。结果脑缺血再灌注6h开始，皮质区和纹状体区神经细胞NF-κB表达逐渐增强，于再灌注1d达高峰，之后逐渐下降。IL-6表达部位和变化规律与NF-κB相似，但其表达高峰在再灌注2d。神经细胞凋亡于脑缺血再灌注6h开始逐渐增加，在皮质区和纹状体区分别与再灌注1d和2d达到高峰，其变化规律与NF-κB和IL-6表达一致。应用藻蓝蛋白后，神经细胞NF-κB和IL-6表达显著减低，神经元调亡明显减少。结论藻蓝蛋白具有抑制脑缺血再灌注后神经细胞凋亡、下调NF-κB和IL-6表达的作用。     

缬沙坦对自发性高血压大鼠肾脏核因子-κB蛋白表达的影响

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)肾组织NF-κB原位表达变化以及AT1受体阻断剂缬沙坦对其的影响。方法:16只SHR随机分成SHR组和SHR加缬沙坦药物干预组(1 mg.kg-1.d-1),另8只WKY大鼠为正常对照组。分别在实验第2、4、6、8周末测定大鼠尾动脉收缩压(SBP);实验结束取各组大鼠血浆测定血浆中肾素、血管紧张素II(AngII)水平;取出各组大鼠两侧肾脏组织,分别运用免疫组化原位测定肾组织中NF-κB蛋白表达,并进行半定量分析。结果:SHR组SBP和血浆中肾素活性以及AngII水平与WKY大鼠相比显著增高,缬沙坦治疗组SBP显著降低,但血浆中肾素活性以及AngII水平明显高于SHR组和WKY组。在蛋白水平,WKY组大鼠肾组织中NF-κB表达较低,SHR组肾小球和肾小管中NF-κB高度表达;使用缬沙坦干预后,NF-κB表达显著降低。结论:在蛋白水平对NF-κB表达的调控可能参与缬沙坦的降血压效应和肾保护作用。     

甲状腺癌组织中NF-κB p65、NF-κB p50及HMGB1表达及意义

目的 探讨甲状腺癌组织中核因子-κB (NF-κB) p65、NF-κB p50及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平及临床意义.方法 选择解放军171医院2013年1月-2015年12月切取的甲状腺组织标本212例进行研究,其中甲状腺癌组织122例,甲状腺腺瘤组织30例,甲状腺肿组织30例,正常甲状腺组织30例,比较各组NF-κBp65、NF-κB p50及HMGB1表达,并分析其与甲状腺癌临床特征的关系,以及三者之间的相关性.结果 甲状腺癌组、甲状腺腺瘤组和甲状腺肿组的HMGB1、NF-κB p50和NF-κB p65阳性率均高于正常甲状腺组(P＜0.01),甲状腺癌组和甲状腺腺瘤组均高于甲状腺肿组(P＜0.01),甲状腺癌组高于甲状腺腺瘤组(P＜0.01).肿瘤直径≥1.0 cm和有淋巴结转移的甲状腺癌组织中NF-κB p65、NF-κB p50及HMGB1表达阳性率高(P＜0.01,P＜0.05).NF-κB p65、NF-κB p50及HMGB1三者间呈显著正相关(r=0.356、0.645和0.275,P＜0.05).结论 甲状腺癌组织中NF-κB p65、NF-κB p50及HMGB1均呈高表达,并且与肿瘤直径和淋巴结转移有关.     

NF-κB核转位的转基因细胞模型的建立

目的建立NF-κB转基因细胞模型。方法 RT-PCR方法扩增P65基因片段;分子克隆技术构建哺乳动物细胞表达载体;脂质体法转染不同细胞;Western blotting验证蛋白表达;利用荧光可视化技术观察p65核转位的情况。结果成功获得与绿色荧光蛋白(GFP)融合的载体;并建立p65转基因细胞模型;转基因组中p65蛋白表达量明显高于对照组,给予LPS刺激BV-2后能够促进p65向细胞核转位;而转染后的PC12细胞,p65的核定位现象则呈现不均一性。结论:成功建立p65转基因细胞模型,针对不同细胞建立的模型,可用于相关化合物的筛选。     

抑制NF-κB的活化对免疫性肝损伤小鼠CYP3A代谢活力的影响

<正>免疫性肝损伤通常由生物因素引起,重要的特征是肝组织内大量的炎症细胞浸润,从而产生免疫-炎症应答~([1])。因此,现代医学认为免疫性肝损伤的发病机制与免疫应答和免疫调节紊乱有关~([2-3])。肝脏免疫系统包含众多的固有天然免疫细胞,如巨噬细胞、NK细胞和NKT细胞。这些细胞群体大量聚集在肝脏中,能够为机体提供抵抗外来抗原入侵的免疫监视及保护作用。如果这些免疫细胞功能表现异常,会破坏肝脏内原有的免疫平衡,从而诱发一系列的肝脏病理损     

阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化中NF-κB/IκB和炎症因子表达的影响

目的探讨高脂饮食诱发兔动脉粥样硬化中核因子-κB(NF-κB)的活化与其抑制因子IκB的表达,以及阿托伐他汀对NF-κB/IκB信号途径、ICAM-1和P选择素的影响。方法24只新西兰♂家兔随机分为正常对照组、高胆固醇组和阿托伐他汀组,应用W estern b lot方法检测动脉中胞核NF-κB p65亚基和胞浆IκBα表达变化;免疫放射法检测血清P选择素水平,免疫组织化学检测血管壁ICAM-1的表达。结果高胆固醇组与对照组比较胞核NF-κB p65和血管壁ICAM-1表达明显增强、血P选择素明显升高(P<0.05),胞浆中IκBα表达明显减弱(P<0.05);阿托伐他汀组与高胆固醇组比较NF-κB p65和血管壁ICAM-1明显表达较弱、血P选择素明显减少(P<0.05),胞浆IκBα的表达增强(P<0.05)。结论NF-κB/IκB信号途径在动脉粥样硬化中起重要作用,阿托伐他汀可以减少P选择素、ICAM-1的表达。     

建立NF-κB核转位的转基因细胞模型

目的建立NF-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)转基因细胞模型。方法 RT-PCR方法扩增p65基因片段;分子克隆技术构建哺乳动物细胞表达载体;脂质体法转染不同细胞;Western blot验证蛋白表达;利用荧光可视化技术观察p65核转位的情况。结果成功获得与绿色荧光蛋白(GFP)融合的载体;并建立p65转基因细胞模型;转基因组中p65蛋白表达量明显高于对照组,给予LPS刺激BV-2后能够促进p65向细胞核转位;而转染后的PC12细胞,p65的核定位现象则呈现不均一性。结论成功建立p65转基因细胞模型,针对不同细胞建立的模型,可用于相关化合物的筛选。     

丹参对实验性肺纤维化小鼠病理变化和核因子-κB表达的影响

目的　探讨丹参水煎液对实验性肺纤维化形成的影响。方法　通过气管内注射博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型 ,给予丹参水煎液治疗后 ,以肺指数、肺组织病理学变化及形态学定量测量 ,并用免疫组织化学方法测定肺组织中NF κB的表达 ,以观察丹参水煎液对肺纤维化形成的影响。结果　丹参水煎液能抑制实验性肺纤维化小鼠的肺指数及肺组织中NF κB的异常升高 ,减轻其肺部的病理损害。结论　丹参水煎液能缓解博莱霉素所致的肺纤维化     

雷公藤对豚鼠哮喘模型核因子-κB表达的作用

目的　探讨雷公藤对核因子 κB(NF κB)在豚鼠哮喘模型中表达的影响。方法　豚鼠用 10 %卵白蛋白 (OA)溶液1ml腹腔注射致敏 ,2wk后用 1%OA溶液超声雾化吸入致其哮喘发作 ,每日 1次 ,共 1wk ;测定肺功能并观察气道壁嗜酸性粒细胞 (EOS)浸润情况 ;用免疫组织化学染色方法观察NF κB在豚鼠肺组织中的表达变化。结果　NF κB主要表达在气道壁内的细胞 ,对照组、模型组、雷公藤内酯醇 ( 10 0mg·kg-1ip)组的胞核阳性的细胞数占气道上皮细胞数百分比分别为 14 3 %± 2 6%、3 2 5 %± 5 8%和 19 7%±2 1%。结论　雷公藤内酯醇能显著抑制哮喘豚鼠气道壁内细胞NF κB的表达 ,可能是雷公藤治疗哮喘的作用机制之一。