可乐定对慢性神经病理性痛大鼠背根神经节GAP-43 mRNA表达的影响

目的 探讨可乐定对慢性神经病理性痛大鼠生长相关蛋白(GAP-43)mRNA表达的影响.方法 雄性成年SD大鼠36只,体重180～220 g,随机分为假手术组(S组)、慢性压迫性损伤组(CCI组)和可乐定组(CL组),每组12只.采用结扎坐骨神经法制备慢性压迫性损伤模型,S组仅暴露坐骨神经,不结扎.CL组于坐骨神经结扎术后3～14 d每天腹腔注射可乐定1 mg/kg.S组和CCI组腹腔注射生理盐水1 ml.于术前、术后3、7、14 d时测定机械痛阈和热痛阈,术后3、7、14 d测定痛阈后随机取4只大鼠断头处死,取腰段脊髓(L_(4～6))及背根神经节,采用RT-PCR法检测GAP-43 mRNA的表达水平.结果 与S组比较,CCI组和CL组术后机械痛阈和热痛阈降低,背根神经节GAP-43 mRNA表达上调(P<0.05);与CCI组比较,CL组术后7、14 d时机械痛阈和热痛阈升高,背根神经节GAP-43 mRNA表达下调(P<0.05).结论 坐骨神经结扎术后3～14 d每天腹腔注射可乐定1 mg/kg可有效减轻大鼠慢性神经病理性痛,其机制可能与其抑制背根神经节GAP-43 mRNA表达上调有关.     

嗅鞘细胞移植联合FK506对脊髓损伤后GAP-43和NogoA表达的影响

脊髓损伤常导致不可逆性的感觉及运动功能丧失,主要表现为损伤平面以下感觉、运动功能的完全丧失和大小便失禁,因高致残率和死亡率而成为医务工作者的极大困惑。近年来,髓内细胞移植治疗SCI取得了令人鼓舞的初步效果,为脊髓损伤的治疗带来了新的希望。所有的这些细胞中,嗅鞘细胞（olfactoryensheathingcells,OECs）的效果较好,嗅鞘细胞移植能降解有关抑制轴突再生分子,分泌不同种类的神经营养因子和支持因子,     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的 探讨大鼠脊髓损伤后坐骨神经表达GDNFmRNA的变化及其意义。方法 Allen’s方法致伤大鼠T13段脊髓,造成不完全性脊髓损伤,截取坐骨神经,以β-Actin(β-肌动蛋白)为内参照物,应用半定量RT-PCR方法,观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDNFmRNA表达变化。结果 脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达,脊髓损伤后24小时表达增加4倍,72小时增加15倍,7天增加3倍,10天仍高于正常水平。结论 脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNF,是神经元通过“胞体—轴突—靶器官”途径自我保护的一种反应形式,GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠损伤脊髓GAP-43 mRNA表达的影响

目的：研究大剂量甲基强的松龙（ＭＰ）对大鼠脊髓损伤后ＧＡＰ－４３ ｍＲＮＡ的表达,采用计算机图像分析技术进行定量分析。结果：术后７ｄ大剂量ＭＰ组ＧＡＰ－４３ ｍＲＮＡ的表达,采用计算机图像分析技术进行定量分析。结果：术后７ｄ大剂量ＭＰ组ＧＡＰ－４３ ｍＲＮＡ蛋白表达比单纯损伤组增加约１倍,大剂量ＭＰ组损伤脊髓高表达ＧＡＰ－４３ ｍＲＮＡ持续到术后４周,单纯损伤组仅持续到术后１周。增加的ＧＡＰ－４３     

神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后BDNF与GAP-43基因表达的影响

目的：研究海马源性神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后生长相关蛋白43(GAP-43)及脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达的影响，探讨神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的机制。方法：NSCs提取自新生胎鼠的海马区，经过培养及鉴定。实验分为3组：NSCs移植组、DMEM填充组、正常对照组。大鼠SCI后第7d移植NSCs，应用RT-PCR法观察NSCs移植后，大鼠脊髓损伤区GAP-43和BDNF基因表达的变化。结果：NSCs移植组较单纯损伤组明显增强了GAP-43mRNA与BDNFmRNA的表达。结论：NSCs移植后改变脊髓损伤区的微环境，上调BDNFmRNA，促进GAP-43mRNA的表达，是修复脊髓损伤的机制之一。     

神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后BDNF与GAP-43基因表达的影响

目的:研究海马源性神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后生长相关蛋白43(GAP-43)及脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达的影响,探讨神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的机制.方法:NSCs提取自新生胎鼠的海马区,经过培养及鉴定.实验分为3组:NSCs移植组、DMEM填充组、正常对照组.大鼠SCI后第7d移植NSCs,应用RTPCR法观察NSCs移植后,大鼠脊髓损伤区GAP-43和BDNF基因表达的变化.结果:NSCs移植组较单纯损伤组明显增强了GAP-43mRNA与BDNFmRNA的表达.结论:NSCs移植后改变脊髓损伤区的微环境,上调BDNFmRNA,促进GAP-43mRNA的表达,是修复脊髓损伤的机制之一.     

骨髓基质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后BDNF与GAP-43基因表达的影响

[目的]研究骨髓基质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后生长相关蛋白43(GAP-43)及脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达的影响,探讨骨髓基质干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的机制.[方法]大鼠SCI后第7 d移植MSCs,应用RT-PCR法观察MSCs移植后,大鼠脊髓损伤区GAP-43和BDNF基因表达的变化.[结果]MSCs移植组较单纯损伤组明显增强了GAP-43 mRNA、BDNFmRNA的表达.[结论]MSCs移植后改变脊髓损伤区的微环境,上调BDNFmRNA,促进GAP-43 mRNA的表达,是修复脊髓损伤的机制之一.     

大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓GAP-43 mRNA表达的影响

目的观察大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓 GAP－ 43 mRNA表达和大鼠后肢功能恢复的影响。方法成年 Wistar大鼠 66只,随机被分为脊髓半切洞损伤应用胚胎脊髓移植组 (脊髓移植组, 30只 )、单纯脊髓半切洞损伤明胶海绵填充组 (单纯损伤组, 30只 )、正常对照组 (6只 )。术后第 1、 3、 7、 14、 28 d,对大鼠进行 Tarlov评分和斜板试验检查后肢功能。应用原位杂交的方法观察 GAP－ 43 mRNA的表达,记录阳性细胞数,采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果脊髓损伤后第 1 d,在脊髓移植组和单纯损伤组的损伤脊髓灰质中都可见到 GAP－ 43 mRNA的表达。于损伤后迅速增加,第 7 d时达到高峰。脊髓移植组 GAP－ 43 mRNA蛋白表达为 39.24± 6.83,约是单纯损伤组 (21.48± 7.83)的 2倍 (P< 0.05)。胚胎脊髓移植后可使损伤的脊髓中 GAP－ 43 mRNA持续高表达至术后第 28 d,而单纯损伤组仅持续到术后第 14 d。增加的 GAP－ 43 mRNA阳性细胞数与神经功能的改善平行。结论胚胎脊髓移植后可使损伤大鼠脊髓高表达 GAP－ 43 mRNA,并促进大鼠功能的恢复。     

大鼠坐骨神经损伤后脊髓及坐骨神经中睫状神经营养因子及其受体mRNA的表达

目的　探讨不同年龄大鼠坐骨神经损伤再生过程中 ,脊髓及坐骨神经睫状神经营养因子 (CNTF)及其受体α(CNTFRα)mRNA变化。方法　幼年、成年及老年大鼠各 96只 ,随机分为正常组 (1 2只 )和实验组 (84只 ) ,实验组大鼠切除右侧长 6mm的坐骨神经 ,分为伤后 1、3d和 1、2、4、8、1 2周组。利用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)及原位杂交法检测脊髓及坐骨神经中CNTF、CNTFRαmRNA的表达变化。结果　原位杂交及RT PCR结果显示 ,各年龄组大鼠伤后损伤侧脊髓和伤侧神经CNTFR及CNTFRαmRNA表达均较正常组及未伤侧显著升高 (P <0 .0 5) ,4周达最高峰 ;伤侧近、远端神经中CNTFmRNA 1d～ 1周表达较正常组及未伤侧减低 (P <0 .0 5) ,2周后开始升高 ,4周达高峰 (近端 :1 .59± 0 .1 3、1 .1 9± 0 .1 7和 0 .69± 0 .0 4 ,远端 :1 .1 3±0 .1 6、0 .84± 0 .0 6和 0 .57± 0 .0 3 ,P <0 .0 5)。其中幼年鼠变化最大 ,成年鼠次之 ,老年鼠最弱 ,近端较远端神经有变化大的趋势。结论　不同年龄大鼠坐骨神经损伤后脊髓、神经中CNTF及CNTFRαmRNA表达显著升高。     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的：探讨大鼠脊髓损伤后GDNFmRNA在坐骨神经的表达变化及其意义。方法：Allen's方法致大鼠T13段脊髓不完全损伤后，以β-Actin为内参照物，应用半定量RT-PCR方法，观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDFNmRNA表达变化。结果：脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达，脊髓损伤后24h表达增加4倍，72h增加15倍，7d增加3倍，10d仍高于正常水平。结论：脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNFmRNA，是神经元通过“胞体--轴突--靶器官”途径自我保护的一种反应形式，GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药以获得最佳效果。     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的探讨大鼠脊髓损伤后坐骨神经表达GDNFmRNA的变化及其意义.方法 Allen's方法致伤大鼠T13段脊髓,造成不完全性脊髓损伤,截取坐骨神经,以β-Actin(β-肌动蛋白)为内参照物,应用半定量RT-PCR方法,观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDNFmRNA表达变化.结果脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达,脊髓损伤后24小时表达增加4倍,72小时增加15倍,7天增加3倍,10天仍高于正常水平.结论脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNF,是神经元通过"胞体-轴突-靶器官"途径自我保护的一种反应形式,GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药.     

碎化的自体坐骨神经脊髓内移植对损伤脊髓再生的影响

将碎化的自体坐骨神经植入大鼠的半横断损伤脊髓内，用辣根过氧化物酶逆行示踪技术及组织学方法，检查了移植术后脊髓的再生能力。结果表明，自体坐骨神经脊髓内移植能明显增加损伤脊髓的再生，而且移植的神经组织与脊髓相互融合，并形成新的纤维性连接。     

大鼠坐骨神经损伤修复后吻合处力学性能的动态观察

目的探讨大鼠坐骨神经断裂修复后吻合处不同时期的力学性能变化。方法以大鼠坐骨神经为实验对象,离断后端端外膜缝合,于术后即刻、1、3、6周采用拉伸实验进行生物力学测试,观察神经吻合处的拉伸最大强度的变化。结果大鼠坐骨神经横断修复后仍具有正常神经相似的负荷位移曲线,经t检验,术后即刻组同术后1周和3、6周组的拉伸最大负荷差异有统计学意义(t值分别为t术后即刻-1周=5.577,t术后即刻-3周=5.747,t术后即刻-6周=8.931,P均<0.01)。术后1、3、6周组间差异无统计学意义(t术后1周-3周=0.259,t1周-6周=0.677,t3周-6周=0.364;P均>0.05)。术后即刻组、1、3、6周组同正常坐骨神经差异有统计学意义(t值分别为20.701,6.357,5.890,7.016,P均<0.01);术后即刻组的拉伸最大负荷仅为正常神经的9%,术后1周拉伸最大负荷为正常神经的48%,而到术后6周为54%。结论大鼠坐骨神经损伤修复后仍具有粘弹性的特点,神经重获结构强度的速度非常快,且主要在神经修复后的1周内获得,并能在6周内维持拉伸最大强度的相对稳定。     

电刺激对鼠坐骨神经横断后脊髓运动神经元凋亡的影响

目的 观察直流电场对鼠坐骨神经横断后脊髓运动神经元凋亡的影响。方法 鼠坐骨神经横断后,实验组在相应的脊髓节段立即置入直流电刺激器,对照组置入无输出电流的刺激器,分掇于术后1、4、7、14、28d取材,应用HE染色,光镜下进行形态学观察,对脊髓运动神经元计数半进行立体定量分析,用TUNEL染色,对脊髓运动神经元中阳性细胞计数。结果 坐骨社会横断后4、7、14、28d,实验组脊髓运动神经元数量明显多于对照组,术后7、14、28d,实验组脊髓运动神经元体积在于对照组,运动神经元TUNEL染色阳性数明显小于对照组。结论 直流电刺激对坐骨神经横断引起的脊髓运动神经元凋亡具有防治作用。     

坐骨神经损伤后脊髓前角神经元形态学的观察

目的 研究大鼠坐骨神经损伤后，脊髓前角运动神经元胞体形态学的变化，以探讨其主要死亡性质。方法 切断大鼠右侧坐骨神经，再原位吻合，手术后不同时间取腰4--腰6(L4-L6)节段脊髓，作石蜡切片，通过苏木素—伊红(HE)染色，光镜下观察脊髓前角运动神经元胞体的形态学变化特征；作超薄切片，电镜下观察脊髓前角运动神经元胞体超微结构的变化情况。结果 右侧脊髓前角运动神经元胞体尼氏体和细胞核染色质浓缩(光镜下)；电镜下，细胞膜内陷，将细胞分割成凋亡小体，然后裂解、细胞体消失；而左例脊髓前角运动神经元胞体均一、无变化。结论 坐骨神经损伤后，脊髓前角运动神经元有死亡，死亡性质主要是细胞凋亡。     

坐骨神经切断后GDNF mRNA在两侧断端的表达变化

目的探讨大鼠坐骨神经切断后,GDNFmRNA在两侧断端的表达变化及其意义。方法切断SD大鼠左侧坐骨神经,在不同时间、应用半定量RT-PCR方法观察两侧断端GDNFmRNA的表达变化。结果坐骨神经切断前,GDNFmRNA在两侧坐骨神经微量表达,坐骨神经切断后远断端表达逐渐增加(1、7、14、28d分别增加20%、60%、85%、90%),近断端表达逐渐减少(1、7、14、28d分别减少10%、38%、45%、52%)。结论坐骨神经切断后断端GDNFmRNA表达变化是由于“胞体-轴突-靶器官”轴中断造成的。此结论为应用外源性GDNF治疗脊髓损伤提供了理论依据。     

不同类型坐骨神经损伤对相应脊髓节段基因表达的影响

目的：比较坐骨神经夹伤与坐骨神经结扎后神经元胞体基因表达的差异,探讨外周神经损伤后再生与否与基因表达差异的关系。方法：根据坐骨神经损伤基因表达谱分析的结果,选择部分表达变化的基因;通过RT-PCR的相对定量的方法检测其在坐骨神经夹伤与坐骨神经结扎后相应脊髓节段的表达水平。结果：比较两种模型差异表达的基因类别可以发现,可再生神经元胞体上调表达的基因与组织细胞的增殖(PCNA)、生长(FRAGl,NCAM)及抗凋亡(Bcl-2)有关;而不可再生的神经元胞体这些基因的表达下调。结论：外周神经元胞体对不同类型神经损伤的反应存在差异,这种差异可能与神经再生能力的不同有关。