成纤维细胞活化蛋白(FAP)的研究进展

成纤维细胞活化蛋白(Fibroblast Activation Protein,FAP)存在于肿瘤基质成纤维细胞中,在细胞表面发挥作用,是一种膜丝氨酸肽酶,是Ⅱ型丝氨酸蛋白酶家族成员之一,具有二肽肽酶及胶原酶活性,在肿瘤的生长中具有双重功能.FAP的蛋白水解酶活性可以增强肿瘤细胞对细胞外基质的侵袭力,同样也能促进肿瘤的生长和增殖.故以FAP作为靶点的分子成像以及作为肿瘤基质标志物的病理诊断、肿瘤基因治疗或免疫治疗将成为可能.近年来对FAP的研究进展进行如下综述.     

成纤维细胞活化蛋白（FAP）的研究进展

成纤维细胞活化蛋白（Fibroblast Activation Protein,FAP）存在于肿瘤基质成纤维细胞中,在细胞表面发挥作用,是一种膜丝氨酸肽酶,是II型丝氨酸蛋白酶家族成员之一,具有二肽肽酶及胶原酶活性,在肿瘤的生长中具有双重功能。FAP的蛋白水解酶活性可以增强肿瘤细胞对细胞外基质的侵袭力,同样也能促进肿瘤的生长和增殖。故以FAP作为靶点的分子成像以及作为肿瘤基质标志物的病理诊断、肿瘤基因治疗或免疫治疗将成为可能。近年来对FAP的研究进展进行如下综述。     

乳腺癌组织FAP表达病理生物学意义的研究

目的:探讨乳腺癌成纤维细胞活化蛋白(FAP)的表达与乳腺癌临床病理因素和生物学预后因子(ER、PR、p53、c-erbB-2、Ki-67)的相关性,评价FAP在乳腺癌的表达意义。方法:选取经病理确诊的乳腺癌患者82例,免疫组织化学法检测乳腺癌组织FAP的表达。收集乳腺癌患者的临床病理信息,分析FAP与乳腺癌临床病理因素和生物学预后因子的表达水平的关系。结果:FAP表达与患者年龄、肿瘤部位、肿瘤大小与FAP的表达无相关性(P>0.05),临床分期与FAP表达呈正相关(r=0.922,P=0.000),病理分级与FAP表达呈弱正相关,r=0.360,P=0.001。FAP表达在有无淋巴结转移组间差异统计学意义,t=11.003,P=0.00。FAP表达与p53(r=0.498,P=0.000)、c-erbB-2(r=0.326,P=0.004)、Ki-67(r=0.449,P=0.000)的表达呈正相关,FAP表达与ER、PR的表达无相关性,P>0.05。结论:FAP在女性乳腺癌发生、发展、侵袭转移方面起到了重要的作用。FAP可作为预测乳腺癌预后的重要因子。     

缝隙连接蛋白26在肺腺癌相关成纤维细胞中的表达及临床意义

目的 探讨缝隙连接蛋白26(connexin 26,Cx26)在肺腺癌相关成纤维细胞中的表达及其临床意义.方法 收集2018年11月至2019年5月于广西医科大学附属肿瘤医院6例手术切除肺腺癌癌组织及相应癌旁组织,分离原代肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)和正常肺...     

bFGF单克隆抗体抑制小鼠Lewis肺癌转移及血管新生

背景与目的:碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是一种具有广泛生物学功能的细胞因子,在肺癌等多种肿瘤组织高表达,并参与其发生、发展进程.本研究旨在探讨bFGF单克隆抗体对C57 BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移及血管新生的抑制作用.方法:采用皮下接种肿瘤细胞的方法,建立Lewis肺癌自发转移小鼠模型,随机分为PBS组、bFGF单克隆抗体MabF7治疗组,以及正常小鼠IgG阴性对照组,每组8只.自接种第9天开始给药,每3天1次,连续6次.同时观察Lewis肺癌小鼠健康状况,游标卡尺测量皮下移植瘤体积,给药6次后处死小鼠,称瘤质量,取肺组织计数各组小鼠肺表面转移瘤结节数,并用免疫组化法检测CD31的表达,以计算肿瘤组织微血管密度(microvessel density,MVD).结果:MabF7治疗组小鼠肿瘤体积与PBS组相比生长缓慢,小鼠瘤质量为(2.6±1.0)g,较PBS组的(5.1±1.3)g显著降低(P＜0.05);MabF7组小鼠肺表面转移瘤结节数为(3.0±2.1)个,显著低于PBS组的(12.3±2.4)个(P＜0.05).另外MabF7组可显著抑制肿瘤组织MVD表达水平.结论:bFGF单抗可明显抑制C57 BL/6小鼠Lewis肺癌生长及转移,其作用与抑制肿瘤增殖及微血管生成相关.     

成纤维细胞活化蛋白在乳腺癌组织的表达特征及临床意义

目的：观察基质成纤维细胞活化蛋白（fibroblast activation protein,FAP）在乳腺癌组织的分布特点、表达特征及其变化规律,探讨FAP在乳腺癌发生发展过程中的作用。方法：对术后病理证实为乳腺癌组织的82例病例进行回顾性分析,应用免疫组织化学法检测FAP的表达,探讨FAP在各临床病理参数组的表达分布特征。结果：免疫组化分析显示乳腺癌肿瘤细胞无FAP表达,FAP主要表达于肿瘤细胞周围基质成纤维细胞内。FAP表达与乳腺癌临床分期呈显著正相关（r=0．922,P=0．000）。非浸润性乳腺癌与浸润性乳腺癌FAP表达具有显著统计学差异（t=17．085P=0．000）。有淋巴结转移组较无淋巴结转移组FAP表达量高（t=11．003,P〈0．01）。结论：FAP特异性表达于乳腺癌瘤周基质成纤维细胞,FAP在女性乳腺癌发生、发展、侵袭转移方面起到了重要的作用。     

成纤维细胞活化蛋白在乳腺癌组织的表达特征及临床意义

目的:观察基质成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在乳腺癌组织的分布特点、表达特征及其变化规律,探讨FAP在乳腺癌发生发展过程中的作用。方法:对术后病理证实为乳腺癌组织的82例病例进行回顾性分析,应用免疫组织化学法检测FAP的表达,探讨FAP在各临床病理参数组的表达分布特征。结果:免疫组化分析显示乳腺癌肿瘤细胞无FAP表达,FAP主要表达于肿瘤细胞周围基质成纤维细胞内。FAP表达与乳腺癌临床分期呈显著正相关(r=0.922,P=0.000)。非浸润性乳腺癌与浸润性乳腺癌FAP表达具有显著统计学差异(t=17.085P=0.000)。有淋巴结转移组较无淋巴结转移组FAP表达量高(t=11.003,P<0.01)。结论:FAP特异性表达于乳腺癌瘤周基质成纤维细胞,FAP在女性乳腺癌发生、发展、侵袭转移方面起到了重要的作用。     

乳腺癌相关成纤维细胞与成纤维活化蛋白北大核心CSCD

0引言肿瘤基质中具有大量增殖性成纤维细胞[1],这些细胞具有鼓形纺锤形间充质结构,锯齿状的核[2],分泌更多的细胞外基质（extracellular matrixc,ECM）组分,有收缩的特性[3]。这些细胞能产生相关的信号介质,例如生长因子、细胞因子、化学因子和其他的免疫调节物,在肿瘤形成中起到了显著的作用,被称为肿瘤相关成纤维细胞（cancer associat-ed fibroblasts,CAFs）[4-5]。     

基质成纤维细胞活化蛋白α在肺腺癌中的表达及其临床意义

目的:通过探讨肺腺癌成纤维细胞活化蛋白α(FAPα)的表达与腺癌中临床病理因素的相关性,评价FAP α在腺癌中的表达意义.方法:选取经病理准确诊断为腺癌的肺癌患者85例,应用免疫组织化学方法检测腺癌组织FAP α的表达,收集腺癌患者的临床病理信息,分析FAPα与肺腺癌临床病理因素表达水平之间的关系.结果:FAPα主要表达在肺腺癌间质中基质成纤维细胞中,正常对照肺组织及腺癌细胞中均未检测到FAP α表达.脉管浸润阳性组FAP α表达阳性率明显高于无脉管浸润组(U=512.500,P=0.004),伴淋巴结转移组FAP α表达阳性率明显高于无淋巴结转移组(U=670.500,P=0.040),FAP α表达与肿瘤长径呈显著正相关(r =0.307,P=0.004),FAPα表达与临床分期呈显著正相关(r=0.232,P=0.033);FAP α的表达与患者年龄(r=-0.139,P=0.204)、性别(P=0.419)、肿瘤位置(U=338.000,P=0.091)无关.结论:FAP α在肺腺癌早期发生、发展、侵袭转移方面起到了重要的作用,可能作为肺腺癌诊断及治疗的潜在靶点.     

双氢青蒿素对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨双氢青蒿素(DHA)对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑瘤效应及其作用机制.方法:C57BL/6J小鼠皮下接种3LL细胞(2×106)50只,随机分为5组,分别为生理盐水组、阳性对照顺铂(DDP)组和DHA高、中、低剂量组,检测各组小鼠的体质量变化和抑瘤率,应用流式细胞术进行瘤细胞的DNA倍体分析.结果:生理盐水组小鼠体质量比DHA高、中剂量增加明显,DHA低剂量抑瘤率为7.01%,较生理盐水组差异无统计学意义(t=0.872,P=0.395),中高剂量组抑瘤率分别为53.50%及59.24%,与生理盐水组比较差异有统计学意义(t=8.541,P=0..000;t=13.566,P=0.000),但抑瘤率均低于DDP组的92.36%,差异有统计学意义(t=-6.871,P=0.000;t=-9.667,P=0.000).流式细胞术检测DHA能诱导肿瘤细胞凋亡,并能影响肿瘤的细胞周期,G0/G1期及G2/M期细胞数大量减少,细胞被阻滞在S1期,与生理盐水组比较,差异均有统计学意义,P值均为0.000.结论:在一定剂量范围内,口服DHA对Lewis小鼠肺癌有明显的抑制作用,可促进肿瘤细胞凋亡.     

茶多酚对Lewis肺癌的生长抑制、抗氧化及免疫调节作用的研究

目的：研究茶多酚对小鼠肺癌的生长抑制、抗氧化及免疫调节作用。方法：以接种Lewis肺癌的C57BL/6J小鼠为模型，灌服茶多酚。结果：125 mg/kg， 250 mg/kg组抑瘤率分别为27.2%，18.8%，前者与荷瘤对照组比较有显著差异(P<005）。接种Lewis肺癌后的小鼠，胸腺重量及其指数减轻，脾指数增高，血清MDA含量明显增高，对SOD，GSHPx活性影响不明显。茶多酚可显著降低荷瘤小鼠血清MDA含量，提高SOD，GSHPx活性。同时降低其胸腺指数和脾指数，表现出免疫抑制。结论：茶多酚可抑制Lewis肺癌生长，其抗癌作用机制与抗氧化作用有关。     

Avasimibe对Lewis肺癌小鼠抗肿瘤作用研究

摘 要：［目的］ 观察Avasimibe对Lewis肺癌小鼠模型肿瘤生长及转移的抑制作用,探索其可能的作用机制。［方法］ 选择24只C57BL/6小鼠,左前肢腋下接种Lewis肺癌细胞（LLC）构建Lewis肺癌小鼠模型,随机分成对照组、环磷酰胺（CTX）组、Avasimibe组、CTX+Avasimibe四组,每组6只。于接种肿瘤后第10d分别向Lewis肺癌小鼠模型腹腔注射生理盐水、CTX溶液、Avasimibe、CTX+Avasimibe溶液。至造模后35d,观察各组小鼠生存状态及移植瘤生长情况,称量小鼠体重、瘤重、胸腺重,计算抑瘤率、胸腺指数,观察肝肺转移情况,Western blot检测瘤组织ACAT-1的表达。［结果］ 与对照组比较,小鼠未出现体重减轻,各组瘤重均降低,CTX+Avasimibe组瘤重低于CTX组及Avasimibe组。 四组抑瘤率分别为0、53.45%、51.51% 和62.22%,与对照组比较,其余三组抑瘤率升高;与CTX组及Avasimibe组比较,CTX+Avasimibe组抑瘤率升高;与对照组比较,CTX组胸腺重显著性降低,Avasimibe组胸腺重显著性升高,CTX组胸腺指数显著性降低,与CTX组相比,Avasimibe组及CTX+Avasimibe组的胸腺重及胸腺指数均显著性增加。 对照组小鼠出现肝肺转移,CTX组、Avasimibe组及CTX+Avasimibe组未见肝肺转移情况;与对照组和CTX组比较,Avasimibe组及CTX+Avasimibe组ACAT-1蛋白表达降低。［结论］ Avasimibe在Lewis肺癌小鼠体内可有效发挥抑制肿瘤生长及转移的作用,而且还可以提高小鼠的免疫功能,这为肺癌治疗提供一个新靶点。     

槲皮素联合白藜芦醇对小鼠Lewis肺癌细胞生长的抑制作用

目的观察槲皮素联合白藜芦醇对小鼠Lewis肺癌细胞生长的作用及机制。方法建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,随机分为对照组、槲皮素组、白藜芦醇组和联合用药组,每组10只,连续用药20天,于接种后第24天处死全部小鼠,比较各组肿瘤体积、肿瘤质量和抑瘤率,并用免疫组织化学、Western blot、TUNEL分别检测血管内皮生长因子 (VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达及凋亡指数(AI)。结果各用药组肿瘤的生长明显受到抑制,肿瘤体积和肿瘤质量明显低于对照组(P<0.05或0.01),联合用药组较单独用药组抑瘤作用显著增强(P<0.05)。各用药组较对照组VEGF、MMP-2表达降低(P<0.05或0.01),AI升高(P<0.05或0.01)。与单独用药组比较,联合用药组VEGF、MMP-2表达下调,AI升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论槲皮素联合白藜芦醇对小鼠Lewis肺癌细胞生长具有明显的抑制作用,其机制可能与下调VEGF和MMP-2表达、促进细胞凋亡有关。     

白藜芦醇对小鼠Lewis肺癌细胞生长的抑制作用及其机制

目的探讨白藜芦醇（Res）对小鼠Lewis肺癌的抑瘤效应及其作用机制。方法将32只接种Lewis肺癌细胞的C57BL小鼠随机分为4组：对照组、Res低剂量组、Res高剂量组和顺铂组（阳性对照）,每组8只,用药干预14天,于接种后第20天起处死,剥离皮下瘤,称瘤重,计算抑瘤率,通过Western blot检测移植瘤巨噬细胞移动抑制因子 (MIF)表达,并用原位末端标记法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果Res低剂量组、Res高剂量组和顺铂组抑瘤率分别为11.54%、54.58%、62.32%,Res高剂量组和顺铂组瘤重显著低于对照组（P<0.01）;Res高剂量组和顺铂组较对照组MIF蛋白表达水平降低,而凋亡指数增加,差异均有统计学意义（P<0.01）。结论白藜芦醇具有抑制小鼠Lewis肺癌生长的作用,其机制可能与抑制MIF蛋白表达和诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

双氢青蒿素对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用

[目的]探讨双氧青蒿素对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用。[方法]C57BL/6J小鼠皮下接种3LL细胞（2×10^6／ml）50只．随机分为5组．分别为生理盐水组、阳性对照顺铂组、双氢青蒿素高、中、低剂量组,检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率,瘤组织HE染色观察病理学变化,应用流式细胞术进行瘤细胞的TUNEL分析.[结果]双氢青蒿素中、高剂量组体重无生理盐水组增加明显．其抑瘤率分别为53．50％及59．24％：肿瘤组织HE染色发现：中、高剂量组瘤组织大片坏死．瘤组织内及其周围微血管少见。流式细胞术TUNEL检测结果显示,双氢青蒿素抑制肿瘤细胞增殖。[结论]口服双氢青蒿素对Lewis小鼠肺癌有明显的抑制作用;其可能是通过诱导肿瘤细胞凋亡及细胞毒作用而抑制肿瘤细胞增殖的。     

补肾抗癌方对 TAM 诱导的小鼠 Lewis 肺癌中 VEGF表达影响

目的：探讨补肾抗癌方对不同活化表型的肿瘤相关巨噬细胞（ TAM）诱导的肺腺癌小鼠移植瘤模型中血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法构建不同活化表型TAM的肺腺癌小鼠移植瘤模型,将50只C57BL／6J小鼠随机分成5组：空白组;TAM模型对照组;TAM中药组;活化TAM模型对照组;活化TAM中药组。于接种后给予相应药物干预,第21天处死各组小鼠,剥离皮下肿瘤,流式细胞仪检测TAM的数量;采用免疫组织化学法检测小鼠皮下移植瘤组织中VEGF表达。结果在建模第21天,各中药组小鼠移植瘤体积明显小于各模型对照组,TAM模型对照组小鼠移植瘤体积明显小于活化TAM模型对照组,各中药组小鼠移植瘤组织中CD206表达水平显著低于各模型对照组,各中药组小鼠移植瘤组织中VEGF表达水平低于各模型对照组。结论补肾抗癌方可能通过抑制TAM和VEGF表达从而达到抗肿瘤的效果。     

易普利姆玛对Lewis肺癌小鼠体内PTHrP表达的影响及与癌细胞衰老的关系

目的 建立Lewis肺癌小鼠模型,观察Ipilimumab对荷瘤小鼠体内PTHrP及MCT1表达的影响并探讨与癌细胞衰老的关系.方法 取C57BL/6小鼠共30只,建立Lewis肺癌小鼠模型,随机分为对照组、低剂量处理组、高剂量处理组,每组10只.开始给药,给药剂量与方法:低浓度Ipilimumab处理组3mg/kg,高浓度Ipilimumab处理组5 mg/kg,共给药5次,对照组给予等量生理盐水.采用免疫组织化学法检测3组中PTHrP、MCT1的表达.结果 3组动物细胞PTHrP蛋白的分泌及MCT1的阳性表达率高度一致,且随Ipilimumab浓度的增高而增高,第3组表达水平较第2组和第1组明显升高,有统计学意义(P＜0.05),第2组表达水平较第1组明显升高,有统计学意义(P＜0.05).且2个指标阳性表达率均与细胞衰老相关基因βGal的表达呈显著负相关性(P＜0.05).结论 Ipilimumab处理后的荷瘤小鼠通过上调PTHrP、MCT1的表达,延缓癌细胞的衰老,最终引起癌细胞侵袭或转移.     

Stromal Activation Associated with Development of Prostate Cancer in Prostate-Targeted Fibroblast Growth Factor 8b Transgenic Mice

Expression of fibroblast growth factor 8 (FGF-8) is commonly increased in prostate cancer. Experimental studies have provided evidence that it plays a role in prostate tumorigenesis and tumor progression. To study how increased FGF-8 affects the prostate, we generated and analyzed transgenic (TG) mice expressing FGF-8b under the probasin promoter that targets expression to prostate epithelium. Prostates of the TG mice showed an increased size and changes in stromal and epithelialmorphology progressing fromatypia and prostatic intraepithelial neoplasia (mouse PIN, mPIN) lesions to tumors with highly variable phenotype bearing features of adenocarcinoma, carcinosarcoma, and sarcoma. The development of mPIN lesions was preceded by formation of activated stroma containing increased proportion of fibroblastic cells, rich vasculature, and inflammation. The association between advancing stromal and epithelial alterations was statistically significant. Microarray analysis and validation with quantitative polymerase chain reaction revealed that expression of osteopontin and connective tissue growth factor was markedly upregulated in TG mouse prostates compared with wild type prostates. Androgen receptor staining was decreased in transformed epithelium and in hypercellular stroma but strongly increased in the sarcoma-like lesions. In conclusion, our data demonstrate that disruption of FGF signaling pathways by increased epithelial production of FGF-8b leads to strongly activated and atypical stroma, which precedes development of mPIN lesions and prostate cancer with mixed features of adenocarcinoma and sarcoma in the prostates of TG mice. The results suggest that increased FGF-8 in human prostate may also contribute to prostate tumorigenesis by stromal activation.     

Suppression of Tumor Growth in Mice by Rationally Designed Pseudopeptide Inhibitors of Fibroblast Activation Protein and Prolyl Oligopeptidase

Tumor microenvironments (TMEs) are composed of cancer cells, fibroblasts, extracellular matrix, microvessels, and endothelial cells. Two prolyl endopeptidases, fibroblast activation protein (FAP) and prolyl oligopeptidase (POP), are commonly overexpressed by epithelial-derived malignancies, with the specificity of FAP expression by cancer stromal fibroblasts suggesting FAP as a possible therapeutic target. Despite overexpression in most cancers and having a role in angiogenesis, inhibition of POP activity has received little attention as an approach to quench tumor growth. We developed two specific and highly effective pseudopeptide inhibitors, M83, which inhibits FAP and POP proteinase activities, and J94, which inhibits only POP. Both suppressed human colon cancer xenograft growth > 90% in mice. By immunohistochemical stains, M83- and J94-treated tumors had fewer microvessels, and apoptotic areas were apparent in both. In response to M83, but not J94, disordered collagen accumulations were observed. Neither M83- nor J94-treated mice manifested changes in behavior, weight, or gastrointestinal function. Tumor growth suppression was more extensive than noted with recently reported efforts by others to inhibit FAP proteinase function or reduce FAP expression. Diminished angiogenesis and the accompanying profound reduction in tumor growth suggest that inhibition of either FAP or POP may offer new therapeutic approaches that directly target TMEs.Abbreviations: FAP, fibroblast activation protein; POP, prolyl oligopeptidase; TME, tumor microenvironment; DPPIV, dipeptidyl peptidase IV; ECM, extracellular matrix; IHC, immunohistochemistry; CAFs, cancer-associated fibroblasts; MMPs, matrix metalloproteinases