中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织AQP-4 mRNA表达的影响

目的探讨中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织水通道蛋白mRNA(AQP-4mRNA)表达的影响.方法采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型,于脑缺血12,24,48,72,96 h观察模型大鼠AQP-4 mRNA表达的动态变化,并在脑缺血48 h观察中风康对AQP-4 mRNA表达及脑水肿的影响.结果与假手术组比较,局灶性脑缺血12h,模型组脑组织AQP-4 mRNA表达开始增加,至72 h达到高峰(P＜0.01),与48 h模型组比较,各治疗组脑组织AQP-4 mRNA表达和脑组织含水量均有不同程度降低(P＜0.05或P＜0.01).结论中风康可降低脑梗塞大鼠脑组织AQP-4 mRNA表达,减轻脑水肿.     

健神利水方对脑出血大鼠水通道蛋白AQP-4表达的影响

目的:明确健神利水方对脑出血大鼠水通道蛋白-4 (AQP-4)表达的影响。方法:实验大鼠分为空白组、假手术组、模型组、健神利水组,空白组不予任何处理,健神利水组和模型组采用胶原酶制作脑出血大鼠模型,假手术组以等量生理盐水代替胶原酶造模,模型组以生理盐水灌胃,健神利水组给予健神利水方灌胃,取相应时间点(6 h、24h、3 d、7 d)的各组大鼠,断头取脑,根据脑组织干湿重测算脑组织水含量,并采用免疫印迹(Western blot)检测AQP-4表达水平,观察各组大鼠各个时间点AQP-4表达水平。结果:①空白组、假手术组未出现脑组织含水量变化,其余各组脑组织含水量从6h时起均逐渐增多;模型组和健神利水组于3 d时脑组织含水量达到顶峰。健神利水组6 h、24 h、3 d、7 d时间点脑组织含水量均低于模型组(P 0. 05)。②空白组、假手术组未出现AQP-4上调,其余各组AQP-4从6 h时起均逐渐升高;模型组和健神利水组于3 d时AQP-4表达值达到顶峰。健神利水组6 h、24 h、3 d、7 d时间点AQP-4表达均低于模型组(P 0. 05)。结论:健神利水方可以减少脑出血大鼠脑组织含水量,可抑制AQP-4表达。     

全脑缺血再灌注大鼠脑组织水通道蛋白-4mRNA的表达及药物对其影响

目的观察实验药物对大鼠脑组织水通道蛋白-4(AQP-4)mRNA表达的影响,探讨芳香开窍药对缺血性中风的作用机理,为临床上运用芳香开窍法提供实验依据。方法按Pulsinelli的4-VO法改良后建立大鼠全脑缺血再灌注模型,采用半定量RT-PCR方法检测大鼠脑组织中AQP-4mRNA表达。结果芳香开窍中药能降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量;模型组AQP-4mRNA表达显著增加,其次是尼莫通组,芳香开窍中药组轻微减少。结论AQP-4可能参与缺血性脑血管病脑水肿的发生发展过程,AQP-4抑制剂可减轻脑水肿。尼莫通对AQP-4mRNA表达影响不大,芳香开窍药可降低AQP-4表达,从而减少脑水肿,这可能是其芳香开窍的机理之一。     

心脑通络液对MCAO大鼠脑水含量及AQP-4蛋白表达的影响

目的:研究心脑通络液对MCAO大鼠脑水含量及AQP-4蛋白表达的影响,探讨其对减轻缺血性脑损伤后脑水肿抑制机制,为心脑通络液的临床应用开发提供理论依据。方法:将健康SD大鼠随机分成5组。用线栓法制备MCAO大鼠模型,分别在造模成功后24h和7d实验。采用干湿比重法进行脑组织含水量测定;采用免疫组化法检测脑组织AQP-4蛋白表达。结果:心脑通络液能显著降低大鼠脑缺血后脑组织含水量,减轻缺血导致的脑组织水肿;心脑通络液各剂量组对缺血24h和7d脑组织中AQP-4蛋白表达有不同程度降低,尤以心脑通络液高剂量组表现最为明显。结论:心脑通络液能够显著降低脑组织含水量,减轻脑组织水肿;心脑通络液能通过抑制脑组织AQP-4蛋白表达,减轻脑水肿,保护血脑屏障,起到脑保护的作用。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9及TIMP-1蛋白表达的影响

目的:观察蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响,探讨蛭龙活血通瘀胶囊对脑组织的保护作用机制。方法:将45只SD大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,蛭龙活血通瘀胶囊高、中、低剂量组,各组又分为12 h、48 h、72 h 3个亚组。采用自体尾部血注入法制备脑出血大鼠模型,Western blot法检测AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白的表达。结果:与模型组比较,蛭龙活血通瘀胶囊各剂量组AQP-4、MMP-9蛋白表达均有不同程度的降低,TIMP-1蛋白表达均有不同程度的升高,具有显著性差异(P0.01);蛭龙活血通瘀胶囊各剂量组之间比较,低、中剂量组在各时间点脑组织AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白表达与高剂量组差异有显著性意义(P0.01)。结论:蛭龙活血通瘀胶囊能够明显降低脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9蛋白的表达,并升高TIMP-1蛋白的表达,该作用存在一定的量效关系,蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组作用最为明显。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9表达的影响

目的:通过观察蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠脑出血后AQP-4、MMP-9蛋白及基因表达的影响,探讨蛭龙活血通瘀胶囊对脑组织的保护作用机制。方法:将45只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊高、中、低剂量组,各组又分为12 h、48 h、72 h三个亚组,采用自体尾部血注入法制备脑出血大鼠模型,Western blot法检测AQP-4、MMP-9蛋白,RT-PCR法检测AQP-4、MMP-9 mRNA的表达。结果:与模型组比较,ZL各剂量组AQP-4、MMP-9蛋白及基因表达均有不同程度的降低,具有显著性差异(P0.01);ZL各剂量组之间比较,以高剂量组为对照,低、中剂量组在各时间点脑组织AQP-4、MMP-9表达具有显著性差异(P0.01)。结论:蛭龙活血通瘀胶囊能够明显降低脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9蛋白及基因的表达,该作用存在一定的量效关系,ZL高剂量组作用最为明显。     

针刺联合川芎嗪处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察针刺联合川芎嗪处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。方法取健康SD大鼠18只,以线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型。随机分为假手术即正常对照组（A组,n=6）、缺血再灌注损伤对照组（B组,n=6）和针刺联合川芎嗪干预组（C组,n=6）。再灌注24 h后取脑,固定切片,染色。用大鼠行为学改变、病理形态学变化、凋亡细胞数三个指标对干预效果作出评价。结果成功复制大鼠鼠脑缺血再灌注损伤模型;针刺联合川芎嗪干预组效果显著,可明显改善缺血再灌注所致的神经元损伤。结论针刺联合川芎嗪处理能够有效抑制大鼠脑缺血再灌注损伤中神经细胞的凋亡,对大鼠有较好的脑保护作用。     

芳香开窍对缺血再灌注大鼠水通道蛋白－4mRNA表达的影响

目的：观察芳香开窍药对脑组织水通道蛋白4(AQP-4)的影响，以探讨芳香开窍法对缺血性中风的治疗作用机理，为临床运用芳香开窍法提供实验依据。方法：Pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型．采用半定量RT—PCR方法检测大鼠脑组织中AQP一4mRNA的表达。结果：模型组AQP-4mRNA表达显著增加，其次是尼莫通组，芳香开窍中药组轻微增加。结论：AQP-4可能参与缺血性脑血管病脑水肿的发生和发展过程，AQP-4抑制剂可减轻脑水肿。芳香开窍药可降低AQP-4表达，从而减少脑水肿，这可能是其芳香开窍的机理之一。     

头针联合川芎嗪对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织MyD88和皮层神经元损伤的影响

目的:观察头针联合川芎嗪(TMP)对脑缺血再灌注模型大鼠神经功能缺损、脑梗死体积、皮层神经元损伤及MyD88表达的影响,探讨头针联合川芎嗪对脑缺血再灌注模型大鼠的脑保护作用及可能的作用机制。方法:165只大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、头针组(C组)、TMP组(D组)、头针+TMP组(E组)五组。每组根据再灌注时间分为IR1d(n=13)、IR3d(n=10)、IR7d(n=10)三亚组。采用改良的Zea Longa线栓法,制备右侧大脑中动脉缺血2 h再灌注(MCAO/R)大鼠模型;A组不中断大脑中动脉血流。C组和E组大鼠在右侧头部百会至曲鬓穴线进行透刺治疗;D组和E组分别给予腹腔注射TMP 20 mg/kg/次,每日一次。各组大鼠相应时间点进行神经功能评分测定;TTC染色检测再灌注1 d大鼠脑梗死体积;HE染色观察皮层神经元损伤及炎性细胞浸润情况;免疫组化、Western blot技术检测各组大鼠缺血侧脑组织MyD88表达水平。结果:E组大鼠在再灌注1 d、3 d、7 d,神经功能缺损程度均较其余四组明显减轻(P0.05)。在再灌注1 d,E组大鼠相对脑梗死体积最小,与其余四组比较有统计学差异(P0.05)。再灌注各个时间点,E组大鼠缺血侧皮层神经元损伤程度及炎性细胞浸润情况均较其余四组明显减轻;且缺血侧脑组织中MyD88阳性细胞数和相对蛋白含量均较其余四组明显降低(P0.05)。结论:头针联合川芎嗪治疗可显著改善MCAO/R大鼠神经功能缺损,减少梗死体积,减轻皮层神经元损伤、炎性细胞浸润,具有脑保护作用,其机制可能与抑制缺血侧脑组织中MyD88蛋白表达、降低脑缺血再灌注后的炎症级联反应有关。     

活血、利水中药对脑出血大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α、核转录因子-κB及水通道蛋白-4表达的影响

目的探讨活血、利水中药对脑出血急性期大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-al-pha,TNF-α)、核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)及水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP-4)表达的影响及其治疗脑水肿的可能机制。方法自体股动脉血注入脑尾状核建立大鼠脑出血模型,SD雄性大鼠随机分为假手术组(42只)、模型组(42只)、活血组(42只)和利水组(42只),其中活血组予活血中药复方(每毫升含生药量分别为:大黄0.2g、水蛭0.02g、三七0.3g)10mL/kg灌胃,1次/日;利水组予利水中药复方(每毫升含生药量分别为:茯苓0.2g、泽泻0.2g、石菖蒲0.2g)10mL/kg灌胃,1次/日。模型组和假手术组予生理盐水4.0mL/kg灌胃,1次/日。1、3、5d取材,免疫组织化学染色法和实时荧光定量PCR法检测大鼠脑组织TNF-α、NF-κB p65和AQP-4mRNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠各时间点脑组织TNF-α、NF-κBp65和AQP-4蛋白及mRNA表达明显增加(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,活血组和利水组各时间点AQP-4和TNF-α表达显著降低(P<0.05);活血组NF-κB p65表达亦明显低于模型组(P<0.05),利水组NF-κB p65表达差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,活血组和利水组各时间点脑组织含水量均有不同程度的降低,活血组与利水组间比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论活血、利水中药均可抑制炎性因子TNF-α的释放,下调AQP-4的表达,减轻大鼠血肿周围脑水肿,但作用强度和作用环节有差异。     

补肾活血汤对慢性心衰大鼠心功能及AQP-2的影响

目的:探讨补肾活血汤对慢性心衰大鼠的疗效及心肾靶向功能的作用机制。方法:采用32周龄以上自发性高血压大鼠(SHR)为慢性心衰大鼠,分为补肾活血汤高、中、低剂量组(5.7,2.85,1.43 g.kg-1),卡托普利组0.05 g.kg-1、模型对照组,Wistar大鼠为正常对照组,予以相应药物干预,8周后检测超声心动指标及肾脏组织水通道蛋白2(AQP-2)的水平。结果:补肾活血汤可延缓心衰大鼠的左室重构进程,左室后壁厚度(LVAWT)由2.93 mm降至2.72 mm、左室舒张末期内径(LVEDD)由7.65 mm降至7.57 mm、左室收缩末期内径(LVESD)由3.87 mm降至3.68 mm、短轴缩短率(LVFS)由0.44提高至0.48、左室射血分数(LVEF由0.42提高至0.47),药物高、中、低剂量组较模型组有统计学意义(P<0.05);可降低心衰大鼠肾脏组织AQP-2的表达,平均由2.1%降至1.63%(P<0.05),其作用均与药物浓度呈正相关。结论:补肾活血汤可改善慢性心衰大鼠的心功能,并通过降低肾脏组织AQP-2的水平,从而发挥利水改善心室重构的作用。     

清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠水通道蛋白7、9表达的影响

  目的：观察清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠水通道蛋白7、9(AQP-7、9)表达的影响。  方法：采用高脂饲料喂养复制模型大鼠,第8周分别处死正常组大鼠5只和模型组大鼠10只,模型组剩余大鼠再分为高脂饲料组、易善复组和清肝化痰活血方组,给药5周后,处死大鼠,留取血清、肝组织标本,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)及肝组织中AQP-7、9的表达;另肝组织经HE染色光镜下观察肝组织病理学变化。  结果：第8周时,模型组大鼠脂肪变性程度和炎症活动度计分与正常组比较有显著性差异(P<0.01)。第13周时,高脂饲料组大鼠肝细胞脂肪变性和炎症活动度计分与正常组、西药组和中药组相比有显著性差异(P<0.05,P<0.01),肝组织中AQP-7、AQP-9 mRNA的含量与正常组、西药组和中药组相比差异有统计学意义(P<0.01);清肝化痰活血方组大鼠肝组织脂肪变性程度和炎症活动度计分与高脂饲料组比较差异有统计学意义(P<0.05),血清AST、ALT、TG、TC的含量与高脂饲料组比较明显下降(P<0.01),肝组织中AQP-7含量较高脂饲料组明显上升(P<0.01),AQP-9含量较高脂饲料组明显下降(P<0.01)。  结论：AQP-7、9与非酒精性脂肪性肝炎的发病有关,清肝化痰活血方可能通过调节AQP-7、9的表达进而改善肝细胞脂质代谢起到防治非酒精性脂肪性肝炎的作用。     

大蒜素对脂多糖诱导的大鼠肺组织水通道蛋白-1表达的影响

目的研究大蒜素对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（Au）大鼠肺组织中水通道蛋白（AQP）-I表达的变化,探讨AQP-1表达与ALI的关系。方法30只SD大鼠随机分为LPS组、大蒜素组和对照组,每组10只,在用药后6h检测肺组织AQP-1表达情况。结果与对照组比较,LPS组AQP-1蛋白和mRNA表达明显降低．大蒜素干预后AQP-1蛋白和mRNA表达明显上升。结论大蒜素可能通过抑制LPS诱导的大鼠肺组织AQP-1表达的降低达到改善ALI的作用。     

五苓散对肾阳虚型口干燥症小鼠颌下腺AQP-5的分布表达研究

目的通过研究五苓散对肾阳虚模型小鼠颌下腺AQP-5分布表达的作用,探究五苓散治疗肾阳虚型小鼠口干燥症的机制。方法将27只ICR小鼠随机分为空白组、模型组、五苓散组,除空白组外,其余各组采用肌肉注射氢化可的松诱导联合限制日摄食量法建立气虚基础上的肾阳虚模型。造模后给予相应的药物干预10d,空白组、模型组均灌胃0.2mL/10g蒸馏水,五苓散组以每日0.2mL/10g灌胃五苓散汤剂,观察给药后的小鼠一般情况,测量小鼠的饮水量、唾液流量,检测颌下腺形态及AQP-5分布表达。结果与空白组相比,模型组出现颌下腺萎缩,饮水量减少,唾液流量减少,AQP-5主要表达在基底膜和顶膜中,较空白组染色较弱;相比于模型组,五苓散组颌下腺萎缩减少,饮水量增加,唾液流量,并且一定程度上AQP-5表达分布染色较模型组强。结论五苓散能抑制颌下腺萎缩,增加饮水量和唾液流量,可能通过改变AQP-5的分布表达改善小鼠在气虚基础上的肾阳虚证引起的口干症状。     

通窍活血汤对脑梗死急性期大鼠MTL及GAS的调节作用

目的 研究通窍活血汤对脑梗死急性期大鼠胃动素及胃泌素的影响.方法 制备大鼠大脑中动脉梗死模型,随机分为脑梗死组、通窍常规剂量组、通窍低剂量组、西咪替丁组、假手术组、并设正常组.分别给予生理盐水、通窍活血汤常规剂量、通窍活血汤低剂量、西咪替丁、生理盐水灌胃,并于4、7d后测定胃动素（MTL）、胃泌素（GAS）含量.结果 脑梗死组4、7d时MTL、GAS含量较相应正常组、假手术组及通窍常规剂量组大鼠有明显升高（P＜0.01）;与通窍低剂量组相比,通窍常规剂量组更能明显降低MTL、GAS水平（P＜0.01）.4d时西咪替丁组、通窍常规剂量及低剂量MTL、GAS水平较7d时明显偏高（P＜0.05）.结论 通窍活血汤能有效调节脑梗死急性期胃动素及胃泌素的表达,并且与剂量成正比关系,此可能为其治疗脑梗死后胃肠功能障碍的机制.     

麦门冬汤对大鼠骨髓间充质干细胞向肺泡上皮细胞分化的影响

[目的]观察麦门冬汤含药血清对促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向肺泡上皮细胞分化的影响。[方法]分别予麦门冬汤大鼠血清、肺纤维化模型大鼠血清、肺纤维化模型大鼠+麦门冬汤血清对绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞(GFP-BMSC)进行干预14 d,通过免疫组化、实时荧光定量聚核酶链反应(qPCR)方法,检测各组GFPBMSC细胞肺表面活性蛋白(SP-C)、水通道蛋白-5(AQP-5)蛋白及mRNA的表达。[结果]模型组、模型+麦门冬汤组SP-C、AQP5蛋白表达明显高于DMEM对照组、麦门冬汤组(P0.01),其中模型+麦门冬汤组SP-C、AQP5表达明显高于模型组(P0.01)。[结论]麦门冬汤在肺纤维化环境中可促进GFP-BMSC向肺泡上皮细胞分化,该作用可能是其改善肺纤维化的重要机制。     

黄芪注射液对高糖腹透液作用下人腹膜间皮细胞AQP-1表达的影响

目的:探讨高糖腹透液对人腹膜间皮细胞(HPMC)水通道蛋白1(AQP-1)表达的影响及黄芪注射液的干预作用。方法:采用HPMC体外培养模型,将HPMC分为5组:空白组、模型组、黄芪高、中、低剂量组。分别培养6、24、48h。Western blot法测定AQP-1蛋白的表达;RT-PCR检测24h时间段AQP-1 mRNA的表达。结果:Western Blot结果显示:给药6h后各组AQP-1蛋白表达无明显差异;24h后发现黄芪高、中剂量组能明显上调AQP-1蛋白表达,48h后发现仅黄芪高剂量组能上调AQP-1蛋白表达。RT-PCR结果显示:与模型组相比黄芪高、中、低剂量组AQP-1 mRNA的表达均明显上调(P<0.01),黄芪高剂量组作用更显著。结论:黄芪注射液能上调高糖环境下HPMC AQP-1的表达。     

黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1和水通道蛋白-5表达的影响

目的探讨补气中药黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)和水通道蛋白-5(AQP-5)表达的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组各10只,予以每ml相当于0.25g黄芪生药的煎剂干预后,使用凝胶电泳测条带积分光密度值来检测确定肺组织AQP-1和AQP-5的表达情况。结果中药组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.572±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.278±0.068),中药组高于模型组(P<0.01)。中药组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.812±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.525±0.045),中药组高于模型组(P<0.05)。中药组与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论黄芪可能是通过促进肺组织AQP-1、AQP-5的表达,从而起到对模型大鼠急性肺损伤的防治作用。     

补阳还五汤对实验性脑缺血大鼠水通道蛋白-4表达的影响

目的：观察补阳还五汤对大鼠脑缺血后AQP-4表达和患肢恢复功能的影响。方法：100只SD大鼠分为损伤组和中药组,均手术致脑缺血。中药组术后即给予补阳还五汤口服液灌胃;损伤组给予等量蒸馏水灌胃。术后1、3、7、14及21天分别对大鼠进行BBB评分和斜板实验检查患肢功能,然后处死,应用免疫组织化学技术检测脑组织AQP-4的表达。结果：脑缺血后第1天,两组受损伤脑灰质、白质中可见到AQP-4的表达明显增加;第3天时达到高峰,损伤组更明显（P〈0.05）;第7、14及21天,中药组AQP-4表达的减少几乎与神经功能的改善平行,与损伤组比较差异有非常显著性（P〈0.01）。结论：补阳还五汤可能通过抑制脑缺血后AQP-4表达,消除脑水肿,减轻脑损伤,从而使残存脑组织保存并促进肢体功能恢复。     

胎盘中水通道蛋白9的表达水平与子痫前期发病的关系

【目的】本实验目的在于观察子痫前期患者胎盘中AQP-9蛋白表达,探讨子痫前期患者AQP-9在胎盘中表达量的变化及其与子痫前期发病间的关系。【方法】选择2009年7月-2009年11月晚期妊娠并行剖宫产术的子痫前期产妇20例（轻度子痫前期组10例,重度子痫前期组10例）,无其它妊娠合并症及并发症。随机选择同期无妊娠合并症及并发症的正常产妇10例为对照组。免疫组织化学（Immunohimchemistry;IHC）sp法观察正常组及子痫前期胎盘组织中AQP-9蛋白表达。【结果】免疫组化显示AQP-9在胎盘合体滋养细胞有表达,并随着病情的加重,表达量呈上升趋势,差异有统计学意义。【结论】通过免疫组化可知AQP-9分布于细胞膜,正常组AQP-9轻微表达于细胞膜,轻度子痫前期组AQP-9表达强于正常组,重度子痫前期组AQP-9较正常组,轻度子痫前期组表达升高,说明AQP-9在正常胎盘组织有表达,为维系胎儿的健康发育发挥重要作用。但在妊娠期高血压疾病中AQP-9表达增高,并与子痫前期的轻重程度成正相关。