三氧化二砷诱导类风湿性关节炎滑膜细胞凋亡机制的体外研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人成纤维样滑膜细胞( HFLS) 凋亡的可能机制.方法:用As2O3作用于类风湿性关节炎(RA)患者HFLS后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测凋亡过程中Caspase-3水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Caspase-3和Bcl-2 mRNA表达.结果:凋亡早期细胞色素C(CytC)水平升高,不同浓度As2O3作用HFLS后不同时间胞浆中CytC含量差别有统计学意义(F浓度=2 541.065,F时间 =4 433.196,P < 0.01),且时间和浓度间存在着交互效应(F交互=825.472,P < 0.01).不同浓度的As2O3作用后细胞中Caspase-3 mRNA表达显著增强, Bcl-2 mRNA表达显著减弱,且分别与As2O3浓度呈正相关和负相关.结论:As2O3可能通过升高CytC及Caspase-3,抑制Bcl-2诱导HFLS凋亡.     

白藜芦醇体外诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的实验研究

目的探讨白藜芦醇(Res)体外对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测Res对RA滑膜细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞光度分析术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期时相分布,同时进行细胞的形态学观察。结果MTT的检测结果显示药物浓度和细胞增殖抑制率间具有正相直线相关关系(P<0.01),Res体外作用类风湿关节炎滑膜细胞24 h对滑膜细胞的IC50为365μmol.L-1。FCM检测和细胞形态学观察结果显示Res可阻滞滑膜细胞于S期并诱导细胞凋亡,但细胞凋亡率并不完全与药物浓度成正相关。作用24 h时Res诱导类风湿关节炎滑膜细胞发生凋亡的最佳浓度是在200~400μmol.L-1。结论Res对类风湿关节炎滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用,在一定药物浓度范围内,随药物浓度的增加Res可使细胞凋亡率升高,但超过一定作用浓度,药物的细胞毒作用增强,细胞凋亡率则成下降趋势。     

类风湿关节炎细胞凋亡的研究现状

类风湿关节炎是一种自身免疫病，有关类风湿关节炎细胞凋亡的研究成为近年来的研究热点，本探讨了类风湿关节炎滑膜细胞的凋亡异常和影响其凋亡的因素如凋亡基因和细胞因子等，并简要阐述了与类风湿关节炎滑膜细胞凋亡有关的信号转导途径，了解此方面内容的研究进展必将有助于类风湿关节炎的治疗和新药开发。     

类风湿关节炎滑膜液对体外诱导树突细胞的影响

目的了解树突细胞(DCs)在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用,对RA滑膜液是否能影响DCs的活化状态进行了研究。方法体外诱导外周血单个核细胞转化成为非活化的DCs,用此诱导的DCs再经RA滑膜液培养48h,然后用流式细胞仪对细胞表面表达的人类白细胞抗原(HLA)-DR和共刺激分子CD80进行分析。结果经滑膜液培养的DCs表达CD80为(45±13)%高于对照组的(26±6)%,差异有统计学意义;经滑膜液培养的DCs表达HLA-DR为(67±16)%高于对照组的(60±4)%,差异无统计学意义。结论 RA滑膜液在体外能诱导DCs活化。     

白藜芦醇通过下调MnSOD诱导类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡

目的探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白表达改变在白藜芦醇(Res)介导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)的增殖和凋亡中的作用。方法 Res处理RA-FLSs后,CCK-8法检测细胞增殖,Western blot检测MnSOD蛋白表达水平;慢病毒感染RA-FLSs后,8 mg·L~(-1)的嘌呤霉素筛选感染后细胞,以此建立3种稳定细胞系:MnSOD过表达、MnSOD干扰、MnSOD对照;激光共聚焦显微镜检测每种细胞系在5μmol·L~(-1)过氧化氢(H_2O_2)和200μmol·L~(-1) Res处理后线粒体活性氧(mtROS)水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果 Res抑制RA-FLSs增殖,降低细胞内MnSOD表达;荧光倒置显微镜与Western blot检测证实慢病毒可高效感染RA-FLSs,使MnSOD表达上调和抑制。与对照组相比,在同种因素处理下,MnSOD过表达组mtROS水平降低,凋亡细胞减少。而MnSOD干扰组则呈现相反的结果。结论 Res可通过抑制MnSOD表达来上调mtROS水平,从而促进RA-FLSs凋亡。     

重组人内抑素诱导佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究

目的以弗氏完全佐剂诱导的佐剂性关节炎(AA)大鼠为动物模型,观察重组人内抑素诱导AA大鼠滑膜细胞凋亡的作用。方法分离、培养滑膜细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测重组人内抑素体内用药对滑膜细胞增殖的影响;用缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞仪检测重组人内抑素对AA滑膜细胞凋亡的影响。结果AA大鼠表现为滑膜细胞异常增殖,rh-End(1.25、2.5、5.0mg·kg-1)体内治疗给药及rh-End6.25～50mg·L-1浓度范围体外给药可抑制AA大鼠成纤维样滑膜细胞的增殖反应。rh-End体内用药可诱导AA大鼠滑膜组织及细胞的凋亡,rh-End体外用药作用48h,AnnexinV/PI双染色法观察到大鼠AAFLS凋亡率为1.77%,rh-End(25mg·L-1)可诱导AA大鼠FLS的凋亡,其凋亡率为6.67%。结论rh-End可不同程度抑制FLS的增殖反应,并诱导其凋亡的发生,减轻AA大鼠增生性滑膜炎。上述结果提示炎症增生的滑膜细胞可能是rh-End的另一个作用靶点。     

类风湿性关节炎滑膜细胞功能的研究进展

<正> 类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎为特征的慢性自身免疫功能障碍性疾病。目前认为本病发生可能与患者的遗传基因变异、感染和性激素等有关。上述的一或多种因素共同构成RA发病的始动因子,引起RA关节滑膜组织结构的改变,使其具有抗原性。机体免疫系统对这些自身抗原作出应答,从而导致异常免疫反应的发生。表现为:(l)RA病人外周血中可检测出高滴度类风湿因子(RF),OKT~+(T_h)与OKT_8~+(T_s)细胞亚群比值改变;(2)滑膜组织增厚,并有大量淋巴细胞和单核     

植物药对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的研究

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种常见的致残性风湿性疾病，目前尚无根治的方法。植物药在RA的治疗中发挥了一定作用，多年来许多学者在植物药治疗RA机制方面进行了研究，为临床应用提供了理论依据。     

三氧化二砷诱导喉癌细胞凋亡的体外研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导喉癌Hep-2细胞株凋亡的作用。方法体外培养的Hep-2细胞与不同浓度的As2O3作用不同时间,用流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳研究细胞凋亡的发生及对细胞周期的影响。结果流式细胞仪检测发现不同药物浓度和作用时间下均有细胞凋亡发生。2滋mol/LAs2O3引起细胞周期明显变化,作用24h后S期细胞比例增高,72h后S期细胞明显下降,细胞大量凋亡。结论As2O3可有效抑制人喉癌Hep-2细胞的体外生长,具有时间、浓度依赖性。As2O3诱导Hep-2细胞凋亡主要是S期的细胞。     

rhTNFR:Fc诱导降植烷诱导型关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究

肿瘤坏死因子α(TNF-α)作为一种效应和调节的细胞因子,在炎症反应、免疫调节等方面重要作用[1]。类风湿性关节炎(RA)的发病机制迄今仍不十分清楚,但TNF-α在RA中起很关键的作用,RA患者关节中的巨噬细胞和淋巴细胞产生大量的TNF-α[2]。重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白(rhTNFR:Fc)是1个二聚体的融合蛋白,包含人75ku肿瘤坏死因子受体(TNFR)(p75)的细胞膜外配基结合部分与人IgG1的Fc片段。rhTNFR:Fc可特异性地与肿瘤坏死因子TNF-α结合,阻断其与细胞表面的TNF受体的结合[3]。对RA等自身免疫性疾病有较好的治疗效果,但其治疗机…     

瘦素在类风湿关节炎中的作用机制初步探讨

目的：检测类风湿关节炎（RA）患者血清瘦素水平、滑膜中瘦素及瘦素受体的表达，探讨瘦素在RA发病中的作用机制。方法：RA患者血清标本30例（RA组），以酶联免疫吸附试验（ELISA）测定其血清瘦素浓度；关节滑膜标本25例，用免疫组化的方法测定瘦素及瘦素受体在滑膜中的表达；并与25例骨性关节炎（OA）组和3例正常者（对照组）比较。结果：RA组患者血清瘦素水平明显高于骨性关节炎（OA）组（P〈0．01），也明显高于滑液水平（P〈0．05）；且与体质量指数、a1酸性糖蛋白呈正相关（标准化回归系数分别为0．369及0．234；P〈0．01）；与握力、胰岛素指数及空腹血糖呈负相关（标准化回归系数分别为-0．295、-0．453及-0．192；P〈0．01）；与胰岛素水平、C反应蛋白、类风湿因子（RF）、肿胀指数、压痛指数、晨僵时间、病程、年龄、性别等无关：瘦素及瘦素受体在RA患者滑膜中的表达明显高于正常对照组。结论：瘦素可能通过在靶器官的高表达而起到调节炎症的作用；可能在炎性反应中参与急性时相蛋白的合成与调节而影响疾病的发展过程。     

 Simulation Study on the Entrance of

d fund industries.The research indicates that the entrance of commercial banks into the property insurance and fund industries can increase their revenue and return per unit of risk,and significantly reduce their probability of bankruptcy.The results also indicate that appropriate proportion of nonbanking assets is indispensable for achieving the optimal effect of diversification.In addition,a comparative study shows that the simultaneous diversification into the property insurance and fund industries generates higher divers2;P<0.01)C与胰岛素水平、C反应蛋白、类风湿因子(RF)、肿胀指数、压痛指数、晨僵时间、病程、年龄、性别等无关;瘦素及瘦素受体在RA患者滑膜中的表达明显高于正常对照组。结论:瘦素可能通过在靶器官的高表达而起到调节炎症的作用;可能在炎性反应中参与急性时相蛋白的合成与调节而影响疾病的发展过程。     

青蒿琥酯联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度的青蒿琥酯（ART）和甲氨蝶呤（MTX）对类风湿关节炎（RA）滑膜细胞增殖和凋亡的影响。方法收集RA关节液标本25例,体外分离培养滑膜细胞,以生长良好的3～5代滑膜细胞进行试验,调整细胞浓度,分为对照组和不同质量浓度ART组、MTX组。用四甲基偶氮唑盐比色法测定不同质量浓度的MTX和ART单独或联合作用于滑膜细胞对滑膜细胞增殖的影响;用流式细胞术检测不同质量浓度的MTX和ART单独或联合作用于滑膜细胞对滑膜细胞凋亡的影响。结果ART对滑膜细胞的增殖具有显著的抑制作用。ART质量浓度在3.125～50μg/mL范围内均可抑制RA滑膜细胞生长,且抑制作用随质量浓度增大而增强,具有剂量依赖性;ART12.5μg/mL＋MTX20μg/mL组的抑制作用最强,与其他药物组比较,P〈0.05。各药物作用于滑膜细胞24h后,早期凋亡细胞率与对照组比较,有显著差异（P〈0.05）;ART质量浓度在3.125～25μg/mL范围内作用于滑膜细胞24h后,早期凋亡细胞率与未用ART处理的对照组比较,有显著差异（P〈0.05）,并呈剂量依赖性;当ART的质量浓度达到50μg/mL时,早期凋亡细胞率降低,坏死细胞率却升高（P〈0.05）;ART12.5μg/mL＋MTX5μg/mL组的早期凋亡细胞率较其他药物组显著升高（P〈0.05）,而坏死细胞率却较低（P〈0.05）。结论ART和MTX单独或联合作用均可显著抑制RA滑膜细胞的增殖,诱导其凋亡。     

祛风活络丸治疗类风湿性关节炎临床疗效评价

目的:观察祛风活络丸治疗类风湿性关节炎的临床疗效。方法:将208例患者分为2组,治疗组(148例)采用祛风活络丸,对照组(60例)采用雷公藤多苷片,2组均以2个月为1疗程,用药1-2疗程。结果:临床总有效率治疗组(89．2％)明显高于对照组(71．7％),治疗组在改善临床症状、体症和实验室指标(ESR,RF,CRP,IgG,IgA,IgM,C3)方面均优于对照组(P<0．01或P<0．05),治疗组不良反应发生率显著低于对照组(P<0．01)。结论:祛风活络丸可综合改善类风湿性关节炎的关节及全身症状,无明显不良反应,并有较好的远期疗效。     

IL-6受体对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞致病信号及功能的抑制作用

目的 观察白介素-6受体（IL-6R）模拟表位肽活化免疫后产生的抗体结合类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）所表达的相应受体对相关致病信号及功能的抑制作用。方法 化学法制备模拟表位肽,后皮下免疫Wistar大鼠,取血清纯化抗体。酶联免疫吸附法评估血清抗体效价,免疫印迹法和免疫荧光法观察模拟表位肽诱导的抗体是否能结合IL-6R并促进其降解,免疫印迹法观察抗体对IL-6下游信号是否有抑制作用,应用CCK8试剂盒和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法观察诱导的抗体对细胞增殖和凋亡能力的影响。结果 IL-6R模拟表位肽免疫动物后获得的抗血清能够有效结合重组IL-6R,该血清经纯化后获得的抗体能够有效结合RA-FLS所表达的自然IL-6R并促进其降解,能进一步抑制下游信号通路、抑制RA-FLS的增殖,下调RA-FLS所具有的抗凋亡能力。结论 IL-6R受体模拟表位肽为潜在的控制RA-FLS恶性行为的多肽药物。     

复方夏天无片治疗类风湿关节炎的实验研究

目的 探讨复方夏天无片对胶原诱导性关节炎（collagen induced arthritis,CIA）小鼠的疗效及安全剂量。方法 将CIA小鼠随机分为6组：模型组、正常组、阳性（雷公藤15 mg·kg^-1）组、复方夏天无片低、中、高剂量（288,864,1 728 mg·kg^-1）组,每组10只。治疗21 d后,比较各组小鼠的一般情况、关节病理情况。探索复方夏天无片的安全浓度及对TNF-a诱导下的滑膜成纤维细胞（fibroblast-like synoviocyte,FLS）增殖程度的影响。结果 与模型组比较,各给药组小鼠足爪肿胀情况明显减轻,复方夏天无片中、高剂量组关节炎指数显著降低（P<0.05或P<0.01）。病理上,复方夏天无片可减少炎性细胞浸润,降低TNF-a表达,抑制破骨细胞形成,且复方夏天无片中、高剂量组优于阳性组。复方夏天无片安全浓度≤200 mg·mL^-1,与模型组比较,复方夏天无片高剂量组可明显抑制FLS细胞增殖（P<0.05）。结论 复方夏天无片可改善CIA小鼠的一般情况,降低关节炎指数及TNF-a阳性表达,抑制破骨细胞形成及FLS增殖。     

生物制剂在类风湿关节炎中的应用与进展

目的:介绍生物制剂在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)中的应用及其最新研究进展。方法:根据近年来的相关文献和指南进行综述,对生物制剂在治疗RA中的作用机制、临床疗效和安全性等方面进行综述。结果和结论:生物制剂是一类安全、有效的药物,在控制风湿病情和改善生活质量方面发挥了重要作用,具有良好的临床应用前景。     

肌骨超声在类风湿关节炎评估中的应用研究

目的:对肌骨超声在类风湿关节炎评估中的应用情况进行探讨。方法:选取50例2016年9月~2018年4月某院接收的类风湿关节炎患者,将其作为观察组,同时随机选取50例体检健康者作为对照组,对两组患者同时进行肌骨超声检查,对比两组患者的检查结果。结果:对照组患者没有检查出滑膜增生、膝关节积液和血流信号,观察组患者的滑膜增生率为66.0%,膝关节积液发生率为62.0%,血流信号出现率为60.0%,两组患者的检查结果差异显著,具有统计学意义(P<0.05);对照组的关节滑膜厚度和积液厚度明显低于观察组,组间差异显著,有统计学意义(P<0.05);对照组患者软骨厚度高于观察组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肌骨超声在类风湿关节炎诊断中应用,能够尽快对患者关节病变的情况进行诊断,使临床治疗有科学的参考,让患者及时接受治疗,因此值得在临床中应用推广。     

治疗类风湿性关节炎处方分析

目的分析治疗类风湿性关节炎（RA）处方的药物使用情况,对其合理性进行评价。方法选取本院2013—01～06治疗类风湿性关节炎的门诊处方2510张进行处方分析,通过查阅国内外指南、MICROMEDEX HeahhCare Series数据库、国内外文献等方式对处方进行合理性评价。结果所分析处方治疗RA的药物主要是非甾体抗炎药、改善病情抗风湿药（DMARDs）、生物制剂、糖皮质激素、植物药制剂;辅助用药主要有质子泵抑制剂、影响骨代谢药物及钙调节剂、叶酸;超说明书用药有甲氨蝶呤、羟氯喹、环孢素、环磷酰胺,超说明用药有指南推荐,有较好的询证医学证据级别。结论所评价处方的药物选择和联用药物均有指南支持,说明书外用法有合理的医学实践证据,辅助用药用药有用药依据．处方合理。