兔慢性颈脊髓压迫减压术后凋亡基因bcl-2和bax的表达

目的:通过观察兔慢性颈脊髓压迫症动物模型脊髓减压术后bcl-2和bax的表达,以期了解脊髓减压术治疗慢性颈脊髓压迫症的作用机制。方法:21只患有慢性颈脊髓压迫症的中国大白兔,改良Tarlov运动功能评分均为3分,随机分为两组:①减压组15只:退出螺钉进行减压。其中1只兔发生急性脊髓损伤,改良Tarlov运动功能评分降至1分,排除实验。②压迫组6只:不施行减压术。另取6只无神经功能障碍的健康大白兔作为正常对照组。分别在减压后第1,7,15,30,60天,观察减压术后脊髓的细胞凋亡和凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果:脊髓减压术后凋亡细胞逐渐减少。脊髓减压术后第1天,bcl-2和bax阳性细胞均较减压前增多。减压后第7天,bcl-2阳性细胞明显增多,bax阳性细胞减少。减压后第15,30天和第60天,bcl-2和bax阳性细胞均逐渐减少。至减压后第60天,bcl-2和bax阳性细胞表达与正常对照组相似。结论:脊髓减压术能有效抑制神经细胞凋亡。     

慢性脊髓压迫及减压后骨骼肌细胞凋亡的实验研究

目的：研究大鼠慢性压迫性脊髓损伤及减压后骨骼肌萎缩与细胞凋亡的关系以及凋亡相关基因P53的表达意义。方法：45只SD大鼠分成3组，压迫组15只，作成轻、中和重度慢性脊髓压迫损伤；减压组25只，将重度压迫组的压迫装置取出；正常对照组5只，不做任何处理。应用苏木精-伊红染色、终末脱氧核苷酰转移酶介导的原位末端标记法和原位杂交技术研究慢性脊髓压迫及减压后肌细胞萎缩、凋亡的特点。结果：随着压迫程度的增加肌细胞凋亡数量增加，P53mRNA表达增高；减压后肌细胞凋亡数量明显减少，P53mRNA表达减少。结论：慢性脊髓压迫后肌细胞出现凋亡，骨骼肌细胞的凋亡是肌肉失神经萎缩的机制之一，减压可通过抑制细胞凋亡阻止肌肉萎缩。     

慢性颈脊髓压迫兔的体感诱发电位变化

目的：探索慢性颈脊髓压迫后电生理变化规律，及其与脊髓损伤内在关系。方法：实验于2004—09／2005—08在广西中医学院骨伤科研究所完成。①分组：将42只新西兰兔随机分为2大组，即对照组和实验组，每组分为6，8，12周组，共6小组，每小组7只。②实验组经颈4，5椎体前螺钉多次缓慢加压造成兔慢性颈脊髓受压模型。对照组行颈5手术入路，不置入螺钉，普通饲养，分别于6，8，12周处死取材。③甩改良Tarlov法，对其肢体肌力进行评估。肌电诱发电位仪测定体感皮质诱发电位的潜伏期和波幅变化。苏木精-伊红染色进行脊髓组织形态学观察。结果：参加实验动物42只，实验组有6只退出观察，随机补充6只，最终进入结果分析42只兔。①实验组各时间段改良Tarlov法分值差别不明显，在12周改良Tarlov法分值变异性变大，部分动物神经功能趋于好转，而部分动物功能进行性恶化，对照组神经功能正常。②诱发电位潜伏期比术前明显延长，并趋于增加，12周后有所回落，12周实验组4，6，8，12周潜伏期分别是（13．56&;#177;1．11），（14．31&;#177;0．56），（16．25&;#177;0．36），（14．74&;#177;1．78）ms；波幅变化较大，趋于逐渐降低，至12周又逐渐增高，12周实验组4，6，8，12周分别是，（3.45&;#177;0．71），（4．23&;#177;1．97），（2．51&;#177;0．83），（2．98&;#177;0．73）V。③形态学观察示灰质神经元减少，自质脱髓鞘变性。结论：对于慢性脊髓压迫，皮质体感诱发电位潜伏期能反映脊髓损伤程度和预后，可作为临床观察指标，波幅变异性大，无确切临床意义。     

补肾活血中药对兔慢性颈脊髓压迫的电生理影响

由于脊髓型颈椎病所致的慢性颈脊髓压迫．可造成神经电生理的改变。研究证实补益肝肾和活血化瘀中药治疗有利于神经功能恢复，但其有效性仍未得到公认。本实验拟通过慢性脊髓压迫动物模型，探讨中药治疗对慢性颈脊髓压迫动物电生理变化的影响，及其在脊髓型颈椎病应用条件的价值。[第一段]     

慢性颈脊髓压迫兔的体感诱发电位变化

目的:探索慢性颈脊髓压迫后电生理变化规律,及其与脊髓损伤内在关系。方法:实验于2004-09/2005-08在广西中医学院骨伤科研究所完成。①分组:将42只新西兰兔随机分为2大组,即对照组和实验组,每组分为6,8,12周组,共6小组,每小组7只。②实验组经颈4,5椎体前螺钉多次缓慢加压造成兔慢性颈脊髓受压模型。对照组行颈5手术入路,不置入螺钉,普通饲养,分别于6,8,12周处死取材。③用改良Tarlov法,对其肢体肌力进行评估。肌电诱发电位仪测定体感皮质诱发电位的潜伏期和波幅变化。苏木精-伊红染色进行脊髓组织形态学观察。结果:参加实验动物42只,实验组有6只退出观察,随机补充6只,最终进入结果分析42只兔。①实验组各时间段改良Tarlov法分值差别不明显,在12周改良Tarlov法分值变异性变大,部分动物神经功能趋于好转,而部分动物功能进行性恶化,对照组神经功能正常。②诱发电位潜伏期比术前明显延长,并趋于增加,12周后有所回落,12周实验组4,6,8,12周潜伏期分别是(13.56±1.11),(14.31±0.56),(16.25±0.36),(14.74±1.78)ms;波幅变化较大,趋于逐渐降低,至12周又逐渐增高,12周实验组4,6,8,12周分别是(3.45±0.71),(4.23±1.97),(2.51±0.83),(2.98±0.73)V。③形态学观察示灰质神经元减少,白质脱髓鞘变性。结论:对于慢性脊髓压迫,皮质体感诱发电位潜伏期能反映脊髓损伤程度和预后,可作为临床观察指标,波幅变异性大,无确切临床意义。     

大鼠慢性压迫性脊髓损伤后凋亡调控相关基因p53的表达变化及意义

目的：探讨慢性压迫性脊髓损伤(chronic compressive spinal cord iniury，CCSCI)后脊髓组织中凋亡相关基因p53的表达变化规律及意义。方法：通过制作Wistar大鼠慢性压迫脊髓损伤模型，应用免疫组织化学方法和原位杂交方法，研究压迫组、假手术对照组脊髓组织中p53mRNA和p53蛋白表达的灰度值差异。结果：p53mRNA在脊髓受压后4h脊髓组织即有表达，1d后增高，7d后仍有表达，14d后无表达，而p53蛋白受压1d后呈弱阳性，之后无明显表达。结论：p53的表达规律提示它参与了CCSCI内源性机制的调控过程。     

bcl—2和bax基因在乳腺癌中的表达及其病理特征

目的探讨bcl-2和bax基因在乳腺癌中的表达及其病理特征.方法应用免疫组织化学方法检测54例乳腺癌及31例癌旁组织和8例良性乳腺病变组织标本的bcl-2和bax基因表达情况.结果bcl-2蛋白在乳腺癌中的阳性表达率为57.4%.bax蛋白的阳性表达率为79.6%.Ⅰ级乳腺癌的bcl-2蛋白阳性表达率为72.2%,Ⅱ级为61.5%,Ⅲ级为30%.bcl-2蛋白各级别表达程度间无显著性差别(χ2=5.839,ν=4,P=0.2496).Ⅰ级乳腺癌的bax蛋白阳性表达率为100%,Ⅱ级为88.5%,Ⅲ级为20%.bax蛋白的表达程度间有显著性差异(χ2=27.889,v=4,P＜0.0001).bcl-2蛋白在良性乳腺病变,癌旁组织和原位及浸润型乳腺癌4组病例中的表达阳性率之间有显著性差异(χ2=23.694,v=3,P＜0.0001);bax蛋白在4组间的阳性表达率亦有差异性(χ2=10.772,v=3,P=0.013).结论bcl-2和bax基因在乳腺癌的发生,发展过程中起着重要的作用,并与乳腺癌细胞凋亡的调节过程有关.     

颈前路减压并发脊髓损伤的处理

目的：探讨颈前路减压并发脊髓损伤后的处理。方法：对4例术中发生颈脊髓损伤的患者术中采取立即将骨块取出，冰生理盐水反复冲洗，术中、术后大剂量肾上腺皮质激素的治疗，随访10个月～4年。结果：经过术中、术后的积极治疗，术后神经功能恢复良好，改良Frankle分级评价均在Ⅳ级。结论：对于颈前路减压并发脊髓损伤采用上述保守治疗方法是有效的。     

大鼠慢性渐进性脊髓损伤减压后脊髓诱发电位的变化

目的：研究对大鼠慢性渐进性脊髓损伤减压后诱发电位的变化，探讨减压后神经功能恢复的规律。方法：将动物随机分为正常组，慢性渐进性脊髓损伤组，慢性渐进性脊髓损伤组＋减压后1、2、3、5、7、10、14、20、28d组，分别观察其皮层本感诱发电位（CSEP）和运动诱发电位（MEP）的变化，用Tarlov评分及斜板试验来评价神经功能，结果：慢性渐进性脊髓损伤减压后CSEP和MEP潜伏期明显缩短，波幅明显升高，其中前7d变化较快，7d后CSEP和MEP潜伏期分别缩短了39％、34％，波幅分别增加62％、48％，以后变化不明显，脊髓的神经功能于前10d恢复较快，以后有高但变化不明显。结论：慢性渐进性脊髓损伤减压后脊髓神经功能了减压早期即10d左右有一迅速的恢复，以后变化明显。     

bcl-2和bax在口腔癌组织中表达与凋亡关系的研究

目的　通过对口腔癌组织及癌旁正常组织中bcl 2和bax基因表达与本底凋亡细胞的研究 ,探讨口腔癌组织及癌旁正常组织中凋亡与基因表达的关系。方法　利用免疫组化法检测 67例口腔癌组织标本及 42例癌旁正常口腔组织中bcl 2和bax基因表达 ,利用TUNEL方法检测口腔癌组织标本中凋亡的情况。结果　bcl 2、bax基因在口腔癌组织及癌旁口腔组织中的阳性及阴性表达均具有显著性差异 ;两者在口腔癌组织中的阳性及阴性表达 ,其细胞凋亡的指数均有显著性差异。bcl 2、bax基因表达呈显著负相关。结论　口腔癌组织中bcl 2基因阳性表达时 ,其本底凋亡指数较阴性表达时低 ;而bax基因性表达时 ,其本底凋亡指数较阴性表达时高 ,两者在细胞凋亡过程中存在着拮抗作用的关系     

慢性颈脊髓压迫症模型的电生理及病理变化

背景：慢性颈脊髓压迫症的发病机制和病理生理变化没有完全阐明。目的：建立兔慢性颈脊髓腹侧压迫模型，探讨脊髓慢性压迫后的病理和电生理的改变。设计：以实验动物为研究对象．随机对照的观察性研究。单位：一所大学医院动物实验中心和一所军医大学医院骨科实验室。材料：实验于2002-06／2003-04在南通医学院动物实验中心和上海长征医院骨科实验室完成。12周龄健康中国大白兔60只，雌雄不限，体质量2．5～3.0kg。随机分为正常对照组6只，实验组54只。方法：经颈前入路Cs椎体置入钛合金螺钉．进行渐进性加压，建立慢性颈脊髓压迫模型。主要观察指标；主要结局：①组织学检查。②电生理检查。次要结局：神经功能评分。结果：48只白兔进入结果分析，其中正常对照组6只，实验组42只：实验组有31只出现脊髓病症状，改良Tarlov运动功能评分均为3分；其他11只无脊髓病症状评分为4分。正常对照组动物、实验组未出现脊髓压迫症状动物和实验组中出现慢性脊髓压迫症状动物的CSEP N1波潜伏期分别为(9．11&;#177;1．61)，(11．36&;#177;2．17)，(17.55&;#177;3．73)ms。实验组中出现慢性脊髓压迫症状的动物的皮质体感诱发电位(CSEP)N1波，与正常对照组和实验组未出现脊髓压迫症状的动物相比，潜伏期明显延长，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：本模型可模拟临床慢性颈脊髓压迫症的发病过程。脊髓压迫程度越重，越容易出现慢性脊髓压迫症状，CSEPN，波潜伏期也越延长。脊髓的病理损害也越重。     

慢性颈脊髓压迫症模型的电生理及病理变化

背景慢性颈脊髓压迫症的发病机制和病理生理变化没有完全阐明.目的建立兔慢性颈脊髓腹侧压迫模型,探讨脊髓慢性压迫后的病理和电生理的改变.设计以实验动物为研究对象,随机对照的观察性研究.单位一所大学医院动物实验中心和一所军医大学医院骨科实验室.材料实验于2002-06/2003-04在南通医学院动物实验中心和上海长征医院骨科实验室完成.12周龄健康中国大白兔60只,雌雄不限,体质量2.5～3.0kg.随机分为正常对照组6只,实验组54只.方法经颈前入路C5椎体置入钛合金螺钉,进行渐进性加压,建立慢性颈脊髓压迫模型. 主要观察指标主要结局①组织学检查.②电生理检查.次要结局神经功能评分.结果48只白兔进入结果分析,其中正常对照组6只,实验组42只.实验组有31只出现脊髓病症状,改良Tarlov运动功能评分均为3分;其他11只无脊髓病症状评分为4分.正常对照组动物、实验组未出现脊髓压迫症状动物和实验组中出现慢性脊髓压迫症状动物的CSEP N1波潜伏期分别为(9.11±1.61),(11.36±2.17),(17.55±3.73)ms.实验组中出现慢性脊髓压迫症状的动物的皮质体感诱发电位(CSEP)N1波,与正常对照组和实验组未出现脊髓压迫症状的动物相比,潜伏期明显延长,差异有显著性意义(P＜0.05).结论本模型可模拟临床慢性颈脊髓压迫症的发病过程.脊髓压迫程度越重,越容易出现慢性脊髓压迫症状,CSEP N1波潜伏期也越延长.脊髓的病理损害也越重.     

碱性成纤维细胞生长因子对脊髓损伤后bcl-2及bax基因表达的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脊髓损伤后bcl-2和bax基因表达的影响。方法：利用Allen WD法以25gcf致伤SD大鼠脊髓制作损伤模型，经蛛网膜下腔导管于术后即刻，0.5，1．2，3，4，6,12，24，48h导管注入bFGF20μL(含bFGF200U)；对照组相同时间点注入等量生理盐水作对照。术后2，6，12，24，48h取损伤脊髓组织，采用免疫组化和原位杂交方法分别检测Bcl-2、Bax蛋白和bcl-2 mRNA基因的表达。结果：脊髓损伤后应用bFGF显著促进bcl-2基因的表达，2，6，12，24，48h Bcl-2平均光密度值分别为0.165&;#177;0.020,0.254&;#177;0.081，0．312&;#177;0．017,0.415&;#177;0．021，0．304&;#177;0．031，(P&;lt;0．01，t=2.729—9．279),Bax平均光密度值分别为0．034&;#177;0．021，0．184&;#177;0.014，0．204&;#177;0．014．0.216&;#177;0027，0．180&;#177;0.013(P&;lt;0.01，t=4．601～6，376),提高Bcl-2蛋白的含量，降低了Bax蛋白的水平，每组数据差异具有统计学意义。结论：bFGF通过促进bcl-2基因的表达、抑制Bax蛋白的表达抑制脊髓损伤后神经细胞的凋亡，从而保护脊髓组织，这可能是bFGF对脊髓损伤具有保护作用的机制之一。     

大鼠慢性压迫性脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白的表达及意义

目的：探讨大鼠慢性压迫性脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达变化，并研究GFAP与压迫程度的关系．以及对脊髓功能恢复的影响。方法：通过制作Wistar大鼠CCSCI模型，分成A组（假手术对照组）、B组（椎管侵占率25％压迫组）和C组（椎管侵占率50％压迫组），结合大鼠的生物行为评分，应用免疫组织化学SABC法，分别于术后1、2、3、5、8、12周检测各组脊髓组织中GFAP蛋白表达的灰度值差异。结果：GFAP表达在3周时达高峰，同时间点A组表达最低，C组最高。BBB评分显示术后3周内压迫组脊髓功能恢复较快。结论：GFAP在CCSCI中的表达水平与压迫程度有关，适度的GFAP表达增高和胶质化反应有助于大鼠脊髓功能的恢复。     

直流电对鼠坐骨神经横断致L4-6脊髓前角运动神经元凋亡及bax基因表达的影响

目的 :观察直流电对鼠坐骨神经横断后脊髓运动神经元凋亡及bax表达的影响。方法 :将鼠右侧坐骨神经自梨状肌下缘 0 .5cm处切断 ,实验组在相应的脊髓节段立即置入直流电刺激器 ,对照组置入无输出电流的电刺激器 ,手术后 1、4、7、14、2 8d处死动物 ,切取L4— 6段脊髓 ,对右侧脊髓阳性运动神经元计数 ,应用免疫组化技术 ,对右侧脊髓bax表达阳性运动神经元计数。结果 :坐骨神经切断后 4、7、14d ,实验组脊髓Tunel染色阳性运动神经元数明显少于对照组 ,术后 4、7、14、2 8d ,实验组脊髓bax阳性运动神经元数明显少于对照组。结论 :直流电刺激对坐骨神经切断引起的脊髓运动神经元凋亡的预防作用与直流电刺激抑制神经元的bax表达有关。     

大鼠坐骨神经慢性压迫损伤后脊髓感觉神经元发生非凋亡性细胞程序性死亡

目的:观察大鼠坐骨神经慢性压迫损伤后脊髓背角感觉神经元是否发生非凋亡性细胞程序性死亡(paraptosis).方法:成年雄性SD大鼠20只,随机分为正常组,手术组.手术组建立慢性压迫性损伤(CCI)模型,又分为术后3d、7d、14d组.实验动物以4%多聚甲醛PBS液灌注内固定,取与坐骨神经相应的腰4～腰6节段脊髓,于2.5%戊二醛中固定,透射电镜观察左侧脊髓背角浅层神经元超微结构并摄片.结果:电镜下,术后3d组腰4～腰6节段脊髓左侧背角浅层神经元形态学典型变化为:细胞肿胀,胞膜完整,胞浆内大量空泡,核结构基本正常,符合paraptosis形式程序性细胞死亡表现;7d和14d组神经元形态变化:细胞皱缩、密度增大,核带增多及染色质浓聚贴附于核膜,符合凋亡表现.结论:坐骨神经损伤3d腰4～腰6节段脊髓背角浅层神经元发生了paraptosis形式程序性细胞死亡.     

嗅鞘细胞移植对大鼠脊髓损伤后bcl-2、bax基因表达的影响

目的:探讨嗅鞘细胞移植对脊髓损伤后脊髓组织bcl-2、bax基因表达的影响。方法:64只SD大鼠随机分成生理盐水组(A组)和嗅鞘细胞移植组(B组);采用AllenWD法致伤力损伤T8脊髓,B组术后即刻给予嗅鞘细胞局部注射,A组局部注射等量生理盐水。采用RT-PCR和免疫组织化学染色(SABC方法)分别检测SCI后基因bcl-2、bax的mRNA水平和蛋白表达变化。结果:B组bcl-2mRNA和蛋白较A组在各时间点的表达均明显升高,P<0.01;B组baxmRNA较A组在各时间点的表达均明显降低,P<0.01。结论:嗅鞘细胞移植可以促进脊髓损伤后bcl-2基因表达和蛋白产物的增加,抑制bax基因的表达和蛋白产物的增加,这可能是嗅鞘细胞移植对脊髓损伤具有保护作用的机制之一。     

兔颈脊髓慢性受压后神经元计数及截面积的变化

背景机械压迫可造成神经细胞死亡,直接的机械性损伤和复杂的病理生理学机制都可导致轴突和神经元胞体的病变.目的观察兔颈脊髓慢性压迫后神经细胞超微结构变化、压迫程度与神经细胞损害的关系.设计以实验动物为研究对象,随机对照观察性研究.材料实验于2002-12/2003-08在广西中医学院附属瑞康医院中心实验室完成.雄性新西兰大白兔共48只,体质量(2.45±0.28)kg.分为空白组,轻、重度压迫组,每组16只.方法建立兔颈脊髓慢性受压轻、重度动物模型,空白组为伪手术.分别进行颈脊髓光镜、电镜观察、神经细胞凋亡检测(TUNEL法),计算神经元个数,神经元截面积. 主要观察指标主要结局各组光镜观察结果.次要结局①各组电镜观察结果.②神经细胞凋亡检测.结果兔颈脊髓慢性受压后出现神经元萎缩、脱失,神经元截面积减少,压迫后有神经元、神经细胞凋亡现象,空白组神经元形态正常,数量多,为(40±2)个,神经元截面积(41.24±15 61)μm2;轻度压迫组神经元(27±2)个,神经元截面积(20.82±6.57)μm2;重度压迫组神经元(22±2)个,神经元截面积(17.96±9.03)μm2.轻、重度压迫组与空白组比较差异有显著性意义(P＜0.01),轻、重度压迫组间比较差异无显著性意义(P＞0.05).慢性压迫后神经细胞超微结构发生胞核体积减少,核仁不清,粗面内质网减少.髓鞘板层结构松散,出现泡解现象,轴浆内细胞器减少或缺失等变化.结论脊髓慢性受压后神经细胞超微结构发生变化,压迫程度越重,神经细胞损害越重,脊髓慢性压迫存在细胞凋亡现象.     

异丙酚对兔主动脉阻断脊髓细胞凋亡的影响

目的探讨异丙酚对家兔主动脉阻断所致脊髓细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法24只家兔随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注损伤组(B组)和异丙酚组(C组)。B、C组阻断腹主动脉40min,再灌注7d;C组于阻断腹主动脉前10min静脉注射异丙酚5mg/kg,继以微量泵静脉持续输注异丙酚20mg·kg-1·h-1直至松夹。分别测定阻断前10min(C10)、开放即刻(C40)、再灌注60min(R60)及7d(R7d)血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)值;检测脊髓凋亡神经元及Bax、Bcl2蛋白表达;观察术后后肢神经功能。结果1缺血、及再灌注后B组MDA值明显高于C10值及A组相应时间点值(P<0.05或P<0.01),SOD值变化同MDA变化相反;C组MDA值明显高于C10值(P<0.05),但显著低于B组相应时间点值(P<0.05),较A组差异无显著性。2B组Bax蛋白表达明显高于A组(P<0.05),Bcl2蛋白表达明显低于A组(P<0.01);C组Bax蛋白表达明显低于B组,但高于A组(P<0.01和P<0.05),Bcl2蛋白表达明显高于B组及A组(P均<0.01)。3B组凋亡细胞指数明显多于A组;C组明显少于B组,但高于A组(P<0.01和P<0.05)。4C组瘫痪发生率明显低于B组,其后肢神经功能明显好于B组(P均<0.01)。结论异丙酚能抑制家兔主动脉阻断所致的脊髓细胞凋亡的发生,其机制可能与其抗过氧化反应、抑制Bax蛋白、增强Bcl2蛋白的表达有关。