五氧化二钒对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

本研究采用胚胎肢芽细胞微团培养法，通过体外直接染毒及经体内染毒后在体外观察两种方式，观察了Ｖ２Ｏ５对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果显示，Ｖ２Ｏ５对体外肢芽细胞的增殖和分化均有明显抑制作用，并有较明显的剂量—反应关系，其ＩＣ５０分别为１３．６４和４．７７μｍｏｌ／Ｌ。体内／体外结合试验结果，Ｖ２Ｏ５对细胞增殖无明显影响，但对细胞分化有明显抑制作用。结果表明，Ｖ２Ｏ５对大鼠胚胎肢芽细胞有特异分化抑制作用。     

铅对胎鼠中脑细胞增殖和分化的影响

研究铅对胎脑神经细胞增和分化的影响,为不其脑发育毒性作用机理提供依据,方法：应用大鼠胚胎中脑细胞微团培养法,观察不同浓度的醋酸对胚胎脑细胞增殖和分化的影响。     

五氧化二钒对体外大鼠胚胎生长发育的影响

采用体外着床后全胚胎培养方法,观察了五氧化二钒对大鼠胚胎生长发育的影响。结果显示,钒可影响体外大鼠卵黄囊的生长;影响胚胎的生长发育,随着钒浓度的增加,生长发育迟缓加重,钒还可导致大鼠胚胎形状分化异常,引起多种畸形,主要畸形部位为神经系统和体屈等。     

羟基脲对大鼠胚胎中脑细胞增殖和分化的影响

背景与目的:为探讨羟基脲(HU)对胚胎发育的作用,采用胚胎中脑细胞微团培养研究HU对细胞增殖和分化的影响.材料与方法:从13 d龄的鼠胚胎中分离中脑细胞,加入不同浓度的HU体外连续培养5 d,观察细胞分化和细胞增殖情况.结果:对照组原单个分散的细胞形成明显的细胞集落,集落间有丰富的神经纤维,并连结成网状,而不同HU剂量组细胞集落数目减少,集落间的神经纤维束减少,并呈现出剂量-效应关系,显示HU可明显抑制中脑细胞的增殖和分化,阻止神经形成和集落形成过程,HU半数细胞增殖抑制浓度(IcV50)为0.078 mmol/L(5.9 μg/ml),半数细胞分化抑制浓度(IcD50)为0.018 mmol/L(1.37μg/ml),其IcV50与IcD50比值为4.33.结论:HU是一种非特异性细胞增殖和分化抑制剂,具有体外细胞致畸作用.     

五氧化二钒对体外小鼠胚胎生长发育的影响

本研究采用体外着床后全胚胎培养方法，观察了Ｖ２Ｏ５对小鼠胚胎生长发育的影响，结果显示，Ｖ２Ｏ５浓度达１５ｍｇ／ｌ时可影响胚胎的生长发育和形态分化，导致胚胎畸形率增加。在１５ｍｇ／ｌ以下浓度仅显示个别动物生长发育受影响，无明显的剂量－反应关系。     

利用全胚胎和微团培养模型评价硝酸铈的发育毒性

目的：利用大鼠植入后全胚胎培养模型和微团培养模型模拟胚胎发育早期和中、晚期过程,评价硝酸铈的发育毒性,以期为进一步开展体内实验研究及合理制定人群稀土接触的健康指导值提供科学依据。方法：取孕9.5 d的SD大鼠胚胎,分别在含0.00、0.50、0.75、1.00 mmol/L硝酸铈的大鼠即刻离心血清中37℃旋转培养,48 h后根据Brown's评分法对胚胎的生长发育及形态功能进行评分,结合BALB/c 3T3细胞毒性结果,利用欧洲替代方法验证中心（ECVAM）全胚胎预测模型评价硝酸铈胚胎早期发育毒性。分离孕13 d的SD大鼠胚胎肢芽原代细胞进行微团培养,分别用0.03、0.06、0.13、0.25、0.50、1.00、2.00和3.00 mmol/L硝酸铈进行染毒,培养5 d后利用中性红活细胞摄取染色法测定50%细胞增殖受抑制时的浓度（IC50）,利用阿利新蓝染色法测定50%细胞分化受抑制时的浓度（ID50）,根据ECVAM微团培养预测模型评价硝酸铈胚胎中、晚期发育毒性。结果：全胚胎培养模型中硝酸铈对胚胎生长的无可见有害作用水平（NOAEL）为0.50 mmol/L,0.75 mmol/L以上浓度硝酸铈可显著降低胚胎卵黄囊直径和顶臀长（P < 0.05）,抑制胚胎生长,并可致胚胎体节数目减少（P < 0.05）,胚胎发育畸形。微团培养模型中硝酸铈对肢芽细胞增殖活性的NOAEL为0.25 mmol/L,对肢芽细胞分化为软骨细胞的NOAEL为0.12 mmol/L,其IC₅₀和ID₅₀分别为1.23和0.76 mmol/L。结论：经全胚胎培养预测模型和微团培养模型评价硝酸铈为弱发育毒性化学物。     

利用全胚胎和微团培养模型评价硝酸镧的发育毒性

目的： 利用大鼠植入后全胚胎培养模型和微团培养模型评价硝酸镧潜在的胚胎早期和中、晚期发育毒性。方法： 将大鼠胚胎随机分为5组后培养于含不同剂量硝酸镧（0、0.12、0.23、0.46及1 mmol/L）的即刻离心血清中，48 h后测量胚胎卵黄囊直径（YSD）、顶臀长（CRL）和头长（HL），计数体节，并根据Brown's评分法对胚胎进行总形态学评分（TMS）。同时，对BALB/c 3T3细胞进行细胞毒性测试。根据欧洲替代方法验证中心（ECVAM）的预测模型对硝酸镧的胚胎早期发育毒性进行评价。分离大鼠胚胎肢芽细胞，制成单细胞悬液，进行微团培养。分别用0.03、0.06、0.13、0.25、0.5、1、2及3 mmol/L硝酸镧进行染毒，利用中性红活细胞摄取染色法测定50%细胞增殖受抑制时的浓度（IC₅₀）以反映细胞增殖情况，利用阿利新蓝染色法测定50%细胞分化受抑制时的浓度（ID₅₀）以反映细胞分化情况。根据ECVAM预测模型对硝酸镧胚胎中晚期发育毒性进行评价。结果： 硝酸镧对胚胎生长的无可见有害作用水平（NOAEL）为0.12 mmol/L，0.46 mmol/L硝酸镧可明显降低胚胎YSD、CRL和HL（P < 0.05），对胚胎生长有明显的抑制效应。0.46 mmol/L硝酸镧可诱导胚胎产生发育畸形，减少胚胎体节形成数目（P < 0.05）。硝酸镧对肢芽细胞增殖活性的NOAEL为1 mmol/L，对肢芽细胞分化为软骨细胞的NOAEL为0.25 mmol/L，其IC₅₀和ID₅₀分别为1.57 mmol/L（510.25 μg/mL）和0.99 mmol/L（321.75 μg/mL）。结论： 经全胚胎培养预测模型评价硝酸镧为弱胚胎发育毒性化学物；经微团培养模型评价硝酸镧为无胚胎发育毒性化学物。     

利用全胚胎和微团培养模型评价硝酸镧的发育毒性

目的： 利用大鼠植入后全胚胎培养模型和微团培养模型评价硝酸镧潜在的胚胎早期和中、晚期发育毒性。方法： 将大鼠胚胎随机分为5组后培养于含不同剂量硝酸镧（0、0.12、0.23、0.46及1 mmol/L）的即刻离心血清中,48 h后测量胚胎卵黄囊直径（YSD）、顶臀长（CRL）和头长（HL）,计数体节,并根据Brown's评分法对胚胎进行总形态学评分（TMS）。同时,对BALB/c 3T3细胞进行细胞毒性测试。根据欧洲替代方法验证中心（ECVAM）的预测模型对硝酸镧的胚胎早期发育毒性进行评价。分离大鼠胚胎肢芽细胞,制成单细胞悬液,进行微团培养。分别用0.03、0.06、0.13、0.25、0.5、1、2及3 mmol/L硝酸镧进行染毒,利用中性红活细胞摄取染色法测定50%细胞增殖受抑制时的浓度（IC₅₀）以反映细胞增殖情况,利用阿利新蓝染色法测定50%细胞分化受抑制时的浓度（ID₅₀）以反映细胞分化情况。根据ECVAM预测模型对硝酸镧胚胎中晚期发育毒性进行评价。结果： 硝酸镧对胚胎生长的无可见有害作用水平（NOAEL）为0.12 mmol/L,0.46 mmol/L硝酸镧可明显降低胚胎YSD、CRL和HL（P < 0.05）,对胚胎生长有明显的抑制效应。0.46 mmol/L硝酸镧可诱导胚胎产生发育畸形,减少胚胎体节形成数目（P < 0.05）。硝酸镧对肢芽细胞增殖活性的NOAEL为1 mmol/L,对肢芽细胞分化为软骨细胞的NOAEL为0.25 mmol/L,其IC₅₀和ID₅₀分别为1.57 mmol/L（510.25 μg/mL）和0.99 mmol/L（321.75 μg/mL）。结论： 经全胚胎培养预测模型评价硝酸镧为弱胚胎发育毒性化学物;经微团培养模型评价硝酸镧为无胚胎发育毒性化学物。     

大鼠胚胎中脑神经细胞微团试验检测化学物的致畸作用

大鼠胚胎中脑神经细胞微团试验检测化学物的致畸作用席小平，李建国，郭琳，贾继峰（山西省卫生防疫站毒理科太原０３００１２）大鼠胚胎中脑神经细胞微团试验（简称微团法），国内开展单位尚不多。我们在本实验室建立了该法，并用已知的致畸物维生素Ａ、乙酰水杨酸进行了...     

兔着床后全胚胎培养方法的建立

目的:建立用于发育毒物研究和评价的兔着床后全胚胎培养方法。方法:取怀孕第9天(gestation day 9,GD9)的孕兔胚胎,参照Carney和Naya的方法,剥离胚胎后单瓶培养,体外培养48 h后将发育情况与文献报道的结果进行对比;并用5.0mmol/L的甲氧基乙酸(methoxyacetic acid,MAA)作为致畸阳性物对所建立的培养方法作进一步验证,采用Carney建立的兔胚胎形态评分系统进行评分。结果:本研究中23个GD9兔胚胎体外培养48 h后,存活率为100%,头长平均增长2.15倍,卵黄囊闭合和胚胎弯曲情况、体节数、自发畸形率、形态评分均数等指标均与文献报道的体外培养发育情况相近,5.0 mmol/L的MAA显示对兔胚胎有发育毒性,包括卵黄囊闭合减少、头部肿胀、面部器官缺失、体节紊乱、尾神经管闭合不全等,形态评分低于溶剂对照(P0.05)。结论:本研究所建立的兔着床后全胚胎培养方法是可行的。     

快杀灵与敌杀死对小鼠骨髓细胞增殖抑制和染色体诱变效应

目的 :检测快杀灵和敌杀死对小鼠骨髓细胞的增殖抑制和染色体诱变效应。方法 :分别按受试药的1/4、1/2和1×LD50(快杀灵和敌杀死的LD50 分别为72.8mg/kg和26mg/kg)3个剂量分5次(每次间隔24h)经口灌胃给小鼠染毒 ,每次灌胃量为20ml/kg;用细胞遗传学方法检测骨髓的细胞增殖指数、染色体结构畸变率和畸变细胞率的变化。 结果 :与阴性对照组比较 ,2种农药的3个剂量都使骨髓的细胞增殖指数显著降低 ,快杀灵作用后骨髓细胞增殖指数为3.38±0.42～3.40±1.16(P<0.00001) ,敌杀死作用后骨髓细胞增殖指数为5.12±0.47～5.97±0.62(P<0.001～P<0.0001) ;快杀灵大剂量组以及敌杀死的3个剂量组各自的染色体畸变率、畸变细胞率均有显著性增高 ,快杀灵大剂量诱导的染色体畸变率和畸变细胞率分别为8.87±1.65(P<0.001)和7.21±2.10(P<0.01) ,敌杀死诱导的染色体畸变率和畸变细胞率分别是11.74±2.81～23.42±2.17(P<0.001～P<0.0001)和9.36±1.52～17.33±3.68(P<0.001～P<0.0001) ;敌杀死引起的染色体畸变类型比快杀灵的多而复杂。 结论 :快杀灵和敌杀死既能抑制骨髓细胞增殖 ,又能诱发染色体损伤。以LD50 为评价标准 ,快杀灵抑制骨髓细胞增殖的效应较强 ,敌杀死诱发染色体损伤的效应较强     

丙谷胺抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的机制研究

目的 探讨丙谷胺在胃泌素促进人结肠癌细胞株SW480中的作用及其机制。方法 采用噻唑氮蓝（MTT）比色分析法,^3H－肌醇掺入法,Ca^2 荧光测定技术和γ－^32P－ATP掺入法,在体外观察丙谷胺（PGL）对5肽胃泌素（PG）促人结肠癌细胞株SW480增殖的影响。结果 PG＋PGL组的SW480活细胞数（viable cell count,VCC)降低,与对照线相比（P＜0．01）,与PG组相比（P＜0．01）;PG＋PGL细胞胞内三磷酸肌醇（inositol-1,4,5-triphosphate,IP3)、Ca^2 浓度降低,与PG组相比（P＜0．01）,与对照组相比（P＞0．05）;PG＋PGL组膜蛋白激酶C（protein kinase C,PKC)。结论 本研究提示丙谷胺可能通过肌醇质脂信号通路抑制胃泌素促进人结肠癌细胞株SW480的增殖,为结肠癌的抗信息传导治疗提供实验依据。     

大蒜素抑制人急性早幼粒白血病细胞生长的体外实验

本实验采用体外直接杀伤测定法，荧光偏振技术，ＭＴＴ比色分析法，ＤＮＡ合成的［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法，微量量热法五种测定技术从细胞膜流动性改变、线粒体功能，ＤＮＡ合成速率、细胞总代谢率变化等细胞和分子生物学方面的变化研究大蒜素对ＨＬ－６０细胞的作用，结果表明，大蒜对对ＨＬ－６０细胞的增殖有抑制作用，高浓度（＞３０ｍｇ／Ｌ）时还有较明显的直接杀伤作用。     

饮水微囊藻毒素在大鼠肝癌发生期间对细胞增殖与凋亡的影响

目的: 研究经饮水摄入微囊藻毒素(MC)在大鼠肝癌发生期间对细胞增殖与凋亡的影响,进而探讨微囊藻毒素促肝癌机制.方法:50只Wistar大鼠随机分为4组,A组(空白对照):B组(DEN启动对照);C组(DEN处理,饮含MC藻水):D组(DEN处理,腹腔注射MCLR纯毒素)、应用LSAB免疫组化技术检测大鼠肝癌前病变病灶中PCNA、Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果:各处理组PCNA平均积分光密度值(AIOD)均较A组0.0013明显升高,分别为B组0.0033,C组0.0036和D组0.0088,其中D组与B组比较有明显升高(P<0.05).饮水摄入或腹腔注射微囊藻毒素均可使Bcl-2表达上调,Bax表达下调.结论:促进调控细胞增殖与凋亡的基因平衡失调.使细胞失控性生长,可能是微囊藻毒素促肝癌作用的分子机制之一.     

二种不同砷剂体外对NB4细胞增殖及程序化死亡作用的研究

为了探讨砷剂治疗白血病的作用机制，我们采用形态学、细胞生长曲线、祖细胞培养、DNA电泳、荧光染色法流式细胞仪分析、P53蛋白和bcl－2蛋白表达等多参数研究，结果显示三氧化二砷和硫化砷作用相似，均能抑制NB4细胞增殖，对NB4细胞CFU－L和对正常人骨CFU-GM、BFU－E也有抑制作用。抑制作用强度三氧化二砷优于流化砷。二种砷剂均能诱导NB4细胞程序化死亡．其机制可能与P53蛋白和bci－2蛋白表达水平下降有关。     

环磷酰胺对全胚胎培养小鼠胚胎的细胞学影响

目的与方法;本实验采用全胚胎培养方法,建立了环磷酰胺致畸作用模型,并在皮基础上利用流式细胞分析术对培养所得胚胎地细胞学观察与分析。结果与结论：发现环磷酰胺所致胚胎畸形可能与其所引起的细胞周期改变及细胞凋亡有关。