合肥市产超广谱β-内酰胺酶菌株CTX-M型耐药基因的初步分布

目的了解1999～2000年合肥市多所医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中CTX—M一型耐药基因的初步分布情况。方法根据GenBank的基本序列(CTX—M-1、CTX—M-9和CTX—M-8)而设计3对引物，分别用这些引物对表型确认试验证实产ESBLs的细菌进行PCR扩增。结果98株产ESBLs细菌中，56株产CTX—M-型β-内酰胺酶，其中CTX—M—1、CTX—M-9和CTX—M-8来源的分别为30、29和0株。结论合肥市有产CTX—M-型β-内酰胺酶流行。     

产超广谱β-内酰胺酶表型及基因型分布

目的了解淮北地区3所医院,临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs表型和基因分布. 方法用1999年NCCLS推荐的初筛试验,从 147株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认,然后用PCR的方法扩增其基因型. 结果116株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中,共检出69株产ESBLs(46.9%),其中大肠埃希菌51株(42.2%),肺炎克雷伯菌18株(58.1%);将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散确证法,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出69株产ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株;PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 119株、SHV型10株、CTX-M型68株、OXA型18株. 结论淮北地区ESBLs的检出率为46.9%,头孢噻肟检测ESBLs的敏感性明显高于头孢他啶;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带≥2种耐药基因.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌临床菌株耐药表型与基因型

目的调查临床分离鉴定的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药表型与基因型的关系。方法以琼脂稀释法测定67株产ESBLs肺炎克雷伯菌对11种抗菌药物的MIC;应用PCR扩增其SHV、TEM和CTX-M型β-内酰胺酶编码基因,并对部分菌株的PCR产物进行克隆测序以确定其基因亚型。结果67株除未检出对亚胺培南耐药株外,对其他10种抗菌药物的耐药率在10.45%～89.55%,多重耐药率为74.63%;其中60株对氨基糖苷类耐药株和44株对β-内酰胺类耐药株的交叉耐药率各为88.33%和40.91%;67株SHV、TEM和CTX-M基因型检出率分别为91.04%、56.72%、28.36%,对其中7株克隆测序发现存在SHV-12、TEM-1及CTX-M-3基因亚型。结论67株产ESBLs肺炎克雷伯菌对除亚胺培南以外的大多数抗菌药物,呈现明显的多重耐药和交叉耐药,其中7株同时产SHV-12和CTX-M-3型超广谱和TEM-1型广谱β-内酰胺酶。     

郑州地区大肠埃希菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的基因型分布

TX-M型别者2株;CTX-M型ESBLS中,CTX-M-1(43株)、CTX-M-14(56株)、CTX-M-25(7株)及CTX-M-38(5株).结论 郑州地区大肠埃希菌CTX-M型ESBLs以CTX-M14型为主,且同一菌株町有多种CTX-M酶型.     

神经外科产超广谱β-内酰胺酶菌株感染

目的：研究神经外科产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)菌株感染的特点，为临床抗生素的合理选用提供依据。方法：对我院神经外科临床分离的106株细菌，采用纸片扩散法ELBLs确诊试验（NCCLS 1999年标准）行ELBLs检测，并对病例资料进行分析及讨论。结果：分离产ESBLs菌12株占11．3％；其中呼吸道感染9例，尿路感染3例；感染前头孢他啶的平均使用时间为13．3d，平均住院时间40．3d。结论：三代头孢菌素在神经外科的长期大量使用是细菌产生ESBLs的重要选择因素；合理选用抗生素、促进脑功能恢复、加强全身支持治疗及提高免疫力是控制神经外科感染的根本途径。     

阴沟肠杆菌流行菌株产超广谱β-内酰胺酶分析

目的研究江苏苏中地区阴沟肠杆菌流行株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的状况。方法采用改良的双纸片法(MDDT)进行ESBLs的初筛;以ESBLs引物(CTX-M、CTXM-1、CTX-M-2、CTX-M-9、SHV、TEM、VEB、PER型)进行PCR扩增,对扩增产物进行序列分析。结果MDDT初筛结果证明该菌株产超广谱β-内酰胺酶,CTX-M型ESBLs引物有扩增产物,序列分析表明该株阴沟肠杆菌携带CTX-M-3型ESBLs。结论江苏苏中地区阴沟肠杆菌流行株产CTX-M-3型ESBLs,是造成该流行株对三代头孢菌素耐药的重要原因。     

产超广谱β-内酰胺酶临床分离株的耐药性及基因分型研究

目的了解深圳地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法采用纸片扩散法及E-test法检测产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性;多重聚合酶链反应(Multiple-PCR)检测ESBLs基因并进行初步分型。结果大肠埃希菌产ESBLs阳性率为24.14%,肺炎克雷伯菌为34.55%;对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类抗菌药的多重耐药率高达70%以上,未发现亚胺培南耐药株,对头孢西丁及β-内酰胺酶抑制剂复合物多数敏感。ESBLs基因型以CTX-M型最为常见,占84.62%;30.77%检出了TEM或SHV型基因;未定型菌占3.85%。结论深圳地区产ESBLs菌对亚胺培南、头孢西丁及β-内酰胺酶抑制剂复合物较敏感;ESBLs基因以CTX-M型为主。     

阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶基因及其流行病学研究

目的分析医院2008-2010年临床分离阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶及其对抗菌药物的耐药性,并了解其耐药基因的传播机制。方法采用改良三维试验筛选AmpC酶,双纸片扩散法检测ESBLs,聚合酶链反应(PCR)检测ESBLs和AmpC酶的基因,采用微量肉汤稀释法分析细菌耐药性,质粒接合试验分析耐药基因的传播特点。结果同时产ESBLs和AmpC酶菌株对三、四代头孢菌素及含酶抑制剂药物的耐药率均>50.0%;45株改良三维试验阳性,14株ESBLs确证试验阳性,ESBLs和AmpC酶的基因阳性者分别为25、38株,分别以TEM-1型、MIR-3型为主,其次为CTX-M-3、DHA-1型,SHV-11型广谱β-内酰胺酶2株,未检测到CIT、MOX、FOX、ACC型AmpC酶的基因,5株接合试验成功。结论阴沟肠杆菌主要携带TEM-1型广谱β-内酰胺酶、CTX-M-3型ESBLs和MIR-3型AmpC酶,耐药现状严重,应采取积极有效的措施预防多药耐药菌株的播散与暴发流行。     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶基因分型及耐药相关性研究

目的了解温州地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的基因分布及其与耐药的相关性。方法对临床分离的常见革兰阴性杆菌(大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、鲍氏不动杆菌)的产ESBLs菌株进行基因分型,并对其耐药相关性进行分析。结果温州地区产ESBLs大肠埃希菌以携带CTX-M-9中的CTX-M-14型基因为主,且大多合并携带TEM-1型广谱酶基因;肺炎克雷伯菌以CTX-M-14和多亚型的SHV型基因型为主,亦大多合并携带TEM-1型广谱酶基因;在阴沟肠杆菌和鲍氏不动杆菌中ESBLs基因携带变化较大,阴沟肠杆菌中主要携带CTX-M-14、SHV-56型ESBLs基因及TEM-1型广谱酶基因,另外发现主要有VEB-1型基因携带;鲍氏不动杆菌中主要以特异的TEM-128和PER-1型基因携带为主,不同ESBLs基因携带菌株显示了较大的临床耐药差异。结论温州地区的革兰阴性杆菌存在ESBLs基因的多样性分布特征,不同的基因型ESBLs可能与介导不同的β-内酰胺类抗菌药物耐药相关。     

产β-内酰胺酶葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药

目的调查本地区产β-内酰胺酶(Blac)葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性杆菌的耐药状况. 方法采用酸试剂纸片法检测产Blac的葡萄球菌;采用ESBLs确证试验检测产ESBLs的革兰阴性杆菌. 结果 326株葡萄球菌检出Blac阳性菌237株,检出率为72%;787株革兰阴性杆菌检出ESBLs阳性菌111株,检出率为14.1%;它们对β-内酰胺类抗生素均呈现极高的耐药性. 结论产Blac的葡萄菌及产ESBLs的革兰阴性杆菌均具有极高的耐药性及多重耐药性,检测葡萄球菌产Blac酶、革兰阴性杆菌产的状况,并探讨它们的耐药谱,有利于指导临床合理使用抗生素.     

基层医院产超广谱β-内酰胺酶菌株感染的调查

目的监测基层医院超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的感染和耐药现状,以指导临床医师的合理用药.方法采用双纸片协同法初筛,确证法检测ESBLs菌株,并对筛选确证为产ESBLs菌株进行药敏试验. 结果产ESBLs菌株共44株,均为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,它们对多种抗生素显示耐药,仅亚胺培南敏感率为100%. 结论基层医院也存在ESBLs菌株感染,细菌室应注重ESBLs的监测和报告,指导临床合理应用抗生素,以及时有效地控制ESBLs菌株在医院感染与流行.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌感染相关因素分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌感染患者对抗菌药物耐药性、治疗及预后情况。方法 对2002年1～12月经标本送检证实为产ESBLs细菌感染的病历进行回顾性调查。结果 45例产ESBLs细菌感染患者中大肠埃希菌30例、肺炎克雷伯菌15例，与非产ESBLs菌比较耐药性明显增高，有39例合并有1～4项基础疾病，死亡率22．22％，抗菌药物应用中不按药敏结果使用的高达53．33％。结论 ESBLs细菌感染者耐药性明显增高，往往合并有多项基础疾病，强化医师对ESBLs的认识，合理使用抗菌药物非常必要。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌β-内酰胺酶基因研究

目的检测20株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的β-内酰胺酶基因,以便了解该20株产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因亚型携带存在状况。方法收集医院2013年分离到的20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)方法分析16种A类β-内酰胺酶基因、6种C类β-内酰胺酶基因、3种D类β-内酰胺酶基因。结果 20株产ESBLs大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟的耐药率均为100.0%;共检出4种A类β-内酰胺酶基因,其中检出blaTEM16株、blaSHV1株、blaCTX-M-1 cluster 3株、blaCTX-M-9 cluster 14株,检出率分别为80.0%、5.0%、15.0%、70.0%,C类β-内酰胺酶基因检出blaDHA2株,检出率为10.0%,D类β-内酰胺酶基因检出blaOXA-1 cluster 3株,检出率为15.0%;20株产ESBLs大肠埃希菌每一株均有β-内酰胺酶基因检出,少者检出1种,多者同时检出2⁴种,且该组菌株blaCTX-M总检出率85.0%。结论产β-内酰胺酶基因是该组大肠埃希菌对β-酰胺类抗菌药物产生耐药的重要原因。     

ICU病房产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌聚类分析

目的了解ICU病房超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠杆菌的主要基因型,并对其同源性进行分析。方法运用双纸片确证试验对20株大肠杆菌进行超广谱β-内酰胺酶检测,随机引物扩增PCR技术对20株大肠杆菌进行指纹图谱分析。结果 20株ESBLs阳性的大肠杆菌经RAPD扩增后,可见3～6条电泳带,经聚类分析分为8个基因型,以Ⅰ、Ⅱ型、Ⅲ型为主,占75.0%。结论 RAPD基因分型是医院内感染分析的一个较好方法 ,预防ESBLs阳性的大肠杆菌在ICU病房传播对于控制病原菌耐药性尤为重要。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌致呼吸道感染患者的耐药特征与基因分型

目的研究呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的耐药性及基因分型,以期为临床诊治提供一定的参考。方法选取2011年1月-2013年6月临床分离的呼吸道感染产ESBLs细菌,应用纸片扩散法检测其对常用抗菌药物的耐药性,并应用聚合酶链式反应(PCR)法分析细菌基因分型。结果经痰液、肺部分泌物培养及咽拭子分离得到不重复大肠埃希菌54株、肺炎克雷伯菌50株,其中产ESBLs大肠埃希菌28株检出率51.9%,产ESBLs肺炎克雷伯菌26株检出率52.0%;产ESBLs菌对头孢类抗菌药物的耐药率较高,其中对头孢他啶、头孢曲松、头孢呋辛的耐药率均为100.0%;对β-内酰胺类抗菌药物/酶抑制剂符合耐药率的抗菌药物为氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦,且对亚胺培南、美罗培南的耐药率均为0,上述比较差异均有统计学意义(P<0.05);产ESBLs菌中检出TEM型基因16株、SHV型基因6株、CTX-M-1型基因11株、CTX-M-9型基因20株,分别占29.6%、11.11%、20.4%、37.0%。结论产ESBLs细菌具有多药耐药性,经PCR扩增后可见以质粒介导的多药耐药基因表达符合其多药耐药表型。     

产超广谱β-内酰胺酶腹泻病原菌的耐药分析

目的 了解腹泻病原菌产超广谱β-内酰胺酶的情况,分析产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性。方法 对分离的腹泻病原菌采用标准纸片扩散法检测超广谱β-内酰胺酶,K—B法检测其耐药性。结果461株分离的腹泻病原菌中有96株产超广谱β-内酰胺酶检出率为12．6％;阳性菌不仅对头孢类抗生素耐药性高,对其他抗生素也有较高的耐药性,但对美洛培南敏感。结论 腹泻病原菌中超广谱β-内酰胺酶检出率较高,阳性菌呈现多重耐药性。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性及基因分型

目的了解老年患者分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型。方法药敏试验采用微量肉汤稀释法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性,聚合酶链反应(PCR)法检测β-内酰胺酶耐药基因型并测序。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌仅对第三代头孢菌素与β-内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗菌药物较敏感;产ESBLs肺炎克雷伯菌中blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群等5种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为95.0%、30.0%、50.0%、5.0%、10.0%,同时携带2、3种以上耐药基因的菌株分别占40.0%和25.0%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性严重,基因型以blaTEM、blaCTX-M-1为主。     

新生儿产超广谱β-内酰胺酶细菌的基因型与耐药性分析

目的了解新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性和ESBLs的基因型,为临床合理治疗提供理论依据。方法对2010-2012年住院新生儿送检标本进行菌株鉴定;ESBLs鉴定采用VITEK-2Compact鉴定及药敏系统,采用PCR方法对ESBLs基因型进行检测。结果 2010-2012年新生儿住院患者中共分离不重复肺炎克雷伯菌1 260株、大肠埃希菌755株,ESBLs产酶率分别为70.8%和57.4%,对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物的敏感率高于65.0%;随机选取150株产ESBLs肺炎克雷伯菌、100株产EBSBLs大肠埃希菌进行PCR引物扩增;250株产ESBLs菌株中,TEM型引物扩增阳性176株,占70.4%;SHV型引物扩增阳性145株,占58.0%;CTX-M型引物扩增阳性227株,占90.8%;OXA型引物扩增阳性16株,占6.4%;PCR扩增阴性45株,占18.0%。结论在医院流行ESBLs的基因型主要是CTX-M型,加强ESBLs基因型监测、了解其基因型分布资料,对于产ESBLs菌株感染的治疗和控制具有重要指导意义。     

用多重PCR方法进行志贺菌超广谱β-内酰胺酶基因分型

目的 建立了一种志贺菌超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)基因型分类的多重PCR方法,鉴别杭州市1998-2007年产ESBLs志贺菌散发菌株基因型.方法 用纸片扩散药敏法对1998-2007年杭州分离出的195株志贺菌进行产ESBLs筛选,利用多重PCR鉴定CTX-M、TEM、SHV、OXA-1等4个基因型别,并用8次单个PCR验证多重PCR结果.结果 在195株志贺菌中共筛选到17株产ESBLs菌株,阳性率为8.72%,与2005年全国监测点结果(阳性率为6.10%)比较,差异无统计学意义(χ2=1.464,P=0.226);多重PCR结果显示ESBLs基因型分别为:CTX-M型17株(CTX-M-9组亚型11株,CTX-M-1组亚型6株),TEM型2株,OXA-1型10株,无SHV型;多重PCR结果与8次单个PCR结果一致率为94.12%,其中1株OXA-1型结果不一致.结论建立了一种志贺菌ESBLs基因型分类的多重PCR方法,杭州市志贺菌中产ESBLs的比例与全国监测点水平相似,但存在上升的可能.     

多药耐药肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的研究医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的主要耐药基因型并进行序列分析。方法收集临床住院患者产ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和变形菌属,通过改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验、分别测定KPC、金属酶;聚合酶链反应(PCR)检测其耐药基因、分析PCR产物序列并在GenBank中比对分析,总结产ESBLs细菌同源性的和变异情况。结果肺炎克雷伯菌中CTX型占85.0%,TEM型占77.0%,SHV型占15.0%;大肠埃希菌中3种基因型比较均衡,其中CTX占100.0%,SHV型和TEM型均为83.0%;变形菌属中TEM型占100.0%,CTX型占40.0%,未检出SHV型;同时还有携带金属酶和碳青酶烯酶的细菌检出。结论医院多药耐药肠杆菌科细菌产ESBLs耐药基因主要以CTX和TEM为主。