泉州市1068例结核杆菌利福平耐药状况分析

目的了解泉州市结核分枝杆菌(结核杆菌)对利福平的耐药情况以及利福平耐药结核病的流行特征,为制定防控策略提供依据。方法对2012—2015年收集的1068例结核杆菌分离株进行4种一线抗结核药敏试验,并对利福平耐药结核病疫情资料进行分析。结果在1068株结核杆菌分离株中,利福平耐药212株,总耐药率19.9%;初治耐药率7.7%,复治耐药率高达33.1%。利福平耐多药菌株占75.0%(159/212);不同性别、年龄和户籍患者的耐药率差异无统计学意义.结论泉州市利福平耐药结核病的耐药形势不容乐观,应加强对初治病人规范化治疗管理。耐利福平可作为泉州地区耐多药结核病的初筛指标,可根据初筛指标制定合理治疗方案,防止耐多药结核病发生。     

结核分枝杆菌利福平耐药株rpoB基因突变特征研究

目的了解郑州市结核分枝杆菌耐利福平临床分离株的相关耐药rpoB基因突变特征。方法应用PCR方法对40株结核分枝杆菌利福平耐药、40株结核分枝杆菌利福平敏感临床分离株及1株H37Rv结核分枝杆菌标准株中包含"利福平耐药决定区(RRDR)"在内的rpoB基因片段(385bp)进行扩增,并将扩增产物进行测序,以H37Rv结核分枝杆菌标准株的DNA序列作为参比序列,分析结核分枝杆菌临床分离株的突变特征。结果 40株结核分枝杆菌利福平敏感临床分离株及1株H37Rv结核分枝杆菌标准株均未检测到突变,结核分枝杆菌耐利福平临床分离株中有36株检测到突变,突变率92.3%,且突变均位于RRDR区域内;突变位点为8个,共有8个突变类型;最常见的突变热点依次为531位点,该位点突变率为64.1%;526位点,其突变率为12.8%和516位点,其突变率为10.3%。结论 rpoB基因是郑州市结核分枝杆菌对利福平耐药的最相关基因,其中在RRDR内的531位点基因突变率最高,并可通过对rpoB基因的突变检测,对耐多药结核病进行预测。     

47株结核分枝杆菌利福平耐药决定区基因突变特征的研究

目的了解吉林省结核分枝杆菌的利福平耐药决定区(RRDR)基因突变特征。方法结核分枝杆菌(MTB)分离自2008-2009年吉林省临床肺结核病人的痰液标本,培养方法为改良酸性罗氏(L-J)培养基。分离出的抗酸杆菌经对硝基苯甲酸(PNB)培养基初步鉴定后选出结核分枝杆菌复合群并应用比例法进行药敏试验(DST)。根据DST结果,选择22株利福平耐药株、22株利福平敏感株以及3株临界值标本进行聚合酶链式反应(PCR)扩增rpoB中包含RRDR在内的部分基因,阳性DNA片段通过基因测序以及Bioedit软件分析方法比对基因突变情况。结果 22株利福平耐药株中,16株同时对异烟肼耐药;22株利福平敏感株中,1株异烟肼耐药。利福平耐药菌株中,95%(21/22)的菌株在利福平耐药决定区RRDR发生了基因突变,其中第531位密码子突变频率占50%,第526位占27%,第533位占9%,第516位及513位均为4.5%;22株利福平敏感株中,RRDR区全部无基因突变发生;3株临界值标本中,1株在第531位密码子发生了基因突变,1株在533位发生基因突变,最后1株无突变。结论 RRDR区点突变的发生与利福平耐药高度一致;异烟肼耐药与利福平耐药高度相关。     

宁波地区不同基因型利福平耐药结核分枝杆菌耐药特征

目的 应用全基因组测序技术分析宁波市利福平耐药结核分枝杆菌(RR-TB)耐药特征,为RR-TB感染患者的临床诊疗及疫情防控提供科学依据。方法 选取宁波市耐药肺结核唯一定点诊疗机构(宁波市第二医院)耐药监测期间保存的2018-2019年59株RR-TB临床分离株,提取总DNA后进行全基因组测序。应用Perl脚本处理原始数据,并通过结核分枝杆菌(MTB)耐药基因数据库确定耐药基因相关突变,同时结合表型药敏试验结果综合分析本地区RR-TB临床分离株对异烟肼(INH)、利福平(RIF)、乙胺丁醇(EMB)、链霉素(SM)、阿米卡星(AM)、卷曲霉素(CAP)、左氧氟沙星(LFX)、丙硫异烟胺(PTO)及对氨基水杨酸(PAS)9种抗结核药物的耐药特征。结果 59株RR-TB菌株INH、RIF的耐药率分别为83.05%、100.00%;基于全基因组测序的59株RR-TB菌株共检测到40种耐药相关基因突变类型,其中以katG基因Ser315Thr(62.71%),rpoB基因Ser450Leu(62.71%),rpsL基因Lys43Arg(50.85%)和embB基因Met306Val(30.51%...     

苏州市耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因突变特点的研究

目的 了解苏州市利福平( rifampin,RFP)耐药结核分枝杆菌rpoB基因突变特点,以期为苏州市RFP耐药结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)临床快速诊断提供有价值的分子标记靶点.方法 通过裂解MTB抽提基因组DNA,采用PCR扩增和DNA测序方法,分析苏州市结核病患者痰培养阳性并经药敏试验诊断为RFP耐药MTB的rpoB基因RFP耐药决定区(rifampin resistance-determining region,RRDR)和CⅡ区变异谱与变异率.将主要突变形式RRDR-531 (TCG→TTG)与传统药敏实验进行诊断学试验,评价此类型突变作为RFP耐药菌株分子标记靶点的临床应用价值.结果 42株RFP耐药MTB的rpoB基因总突变率为90.5％ (38/42),在所检测到的突变中,以RRDR-531 (TCG→TTG)为主要形式(61.9％).以此类型的位点突变作为RFP耐药菌株诊断的分子标记,与传统药敏试验比较进行配对x2检验,结果表明,与敏感菌株相比,RRDR-531(TCG→TTG)突变在RFP耐药菌株中差异有统计学意义(x2=12.51,P＜0.01).结论 rpoB基因RRDR-531(TCG→TTG)突变是苏州市MTB产生RFP耐药性的主要分子机制,其作为RFP耐药MTB诊断的分子标记靶点具有较好的临床应用价值.     

rpoB基因突变与结核分枝杆菌利福平耐药相关性研究

目的 探讨临床患者痰标本中分离的结核分枝杆菌rpoB基因突变与利福平耐药之间的关系. 方法 对115株结核分枝杆菌应用L-J药敏培养法,检测对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星的耐药情况;根据rpoB基因序列设计包含利福平耐药决定区（RRDR）的扩增引物,PCR法进行扩增,运用生物信息学方法对耐药决定区扩增产物序列进行比对分析,对耐药株与非耐药株基因突变率进行统计学分析. 结果 115株结核分枝杆菌经比例法药敏试验,RIF耐药株53株,占所有菌株的46.09％;53株RIF耐药株中39株rpoB基因存在不同位点的变异,突变率为73.58％,突变位点包括531、526、522、516、513、511,最主要的突变位点集中在531位,引起氨基酸呈Ser531Gln、Ser531Leu、Ser531Trp 3种形式改变;RIF敏感株62株,其中有2株检测到rpoB基因的突变,敏感株与耐药株突变率经McNemar统计检验,差异有统计学意义（P＜0.05）. 结论 岳阳地区rpoB基因变异与利福平耐药呈高度相关,rpoB基因最主要的突变位点位于531位和526位.     

98株结核分枝杆菌药敏试验结果分析

目的：了解武义县结核分枝杆菌耐药的发生率及特点,获得该地结核分枝杆菌耐药性水平资料,对涂阳结核病人治疗中影响治愈率的因素进行分析。方法：采用绝对浓度间接法对98株结核分枝杆菌进行4种药物的敏感性试验。先以培养获得分枝杆菌,再上送金华市疾控中心进行菌株鉴定和药敏试验,后由金华市疾控中心将菌株鉴定和药敏试验结果返回。结果：227例涂阳肺结核患者经培养后共获得98株结核分枝杆菌,均为人型结核菌,无牛型结核菌;共检出耐药菌株31株,占31.7%（31/98）,初治涂阳患者菌株耐药的有24株,占27.6%（24/87）,复治涂阳肺结核患者菌株耐药的有7株,占63.6%（7/11）。31株耐药菌株中,耐异烟肼7株（22.6%）,耐利福平11株（35.5%）,耐链霉素9株（29.0%）,耐乙胺丁醇4株（12.9%）;同时耐2种药物的13株（41.9%）,耐3种药物的5株（16.1%）,还有2株耐4种药物（耐HRES,6.1%）。结论：该县初治耐药率高于浙江省耐药监测结果,复治耐药率与全省耐药监测结果基本相符。结核菌耐药是影响治愈率的主要因素,对临床用药具有重要的指导意义,早期、联用、适量、规律、全程用药是治疗肺结核的关键。     

合肥地区结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB突变特征研究

目的:了解合肥地区结核分枝杆菌利福平(RFP)耐药株rpoB基因突变特点。方法:应用PCR-直接测序法对合肥地区肺结核病人痰液中分离的90株结核分枝杆菌的rpoB基因629 bp(包括rpoB基因利福平耐药决定区(RRDR)的81 bp)序列进行测定分析。结果:90株结核分枝杆菌中69株对RFP耐药,21株对RFP敏感;69株耐利福平临床分离株中53株发生rpoB基因突变,突变率为76.8%;突变发生在531位丝氨酸的31株,发生率为44.9%,发生在526位组氨酸的8株,发生率为11.6%;还有6株发生了联合突变,发生率为8.7%。21株敏感株中1株rpoB基因发生突变,突变位点是533位亮氨酸。结论:合肥地区结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB基因的RRDR发生了突变,其中531位丝氨酸和526位组氨酸是最常见的突变位点。     

175株分枝杆菌菌种鉴定和药敏检测报告

分枝杆菌的菌种鉴定和药敏检测 ,对指导医生正确诊断结核病 ,合理有效地选择药物 ,防止耐药菌株的产生 ,减轻病人的经济开支 ,具有十分重要的作用。我室在 2 0 0 0年中共做了5 80件培养标本 ,分离出 175株分枝杆菌 ,现将 175株分枝杆菌的菌种鉴定和药敏检测的结果报告如下。材料和方法　杭州市 13个县 (市 )区门诊、住院病人及外院送来的痰、尿、胸腹水、脑脊液共 5 80件。实验方法　分枝杆菌的分离培养和药敏检测 ,菌种鉴定按照 1995年中国防痨协会《结核病诊断细菌学检验规程》和1999年《全国结核病防治手册》进行。结果　 5 80件标本中共…     

PCR-SSCP检测结核分枝杆菌利福平耐药性

目的:建立PCR-SSCP快速检测结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB突变。方法:用比例法筛选出70株耐利福平结核分枝杆菌临床分离株,用PCR-SSCP方法检测菌株ropB基因突变,并与比例法检测结果进行对比。结果:70株耐利福平菌株中,单耐利福平菌株为12株,同时耐福平和异烟肼菌株为58株。扩增菌株rpoB基因,70株结核分枝杆菌临床分离株ropB基因突变率为91.43%(64/70),其中,耐多药菌株ropB基因突变率为91.38%(53/58),单耐利福平菌株ropB基因突变率为91.67%(11/12)。结论:用PCR-SSCP技术检测结核分枝杆菌RFP耐药性所用时间大幅缩短,检测出的结果与传统方法一致率高,但结核分枝杆菌表型耐药菌株,存在rpoB基因位点无突变的现象,是否存在其他耐药位点或耐药机制,值得深入研究。     

荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变研究

目的 对荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变方法进行临床研究,评价其检测效能及在国境口岸应用价值.方法 应用荧光PCR熔解曲线法检测结核病人临床分离标本,与传统药物敏感性试验对比,衡量该方法的灵敏度、特异性.结果 对347例结核病人临床分离培养样本,药敏试验检出271例利福平敏感标本,76例利福平耐药标本;...     

某院结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药基因特征

目的了解某院结核分枝杆菌(MTB)利福平耐药相关基因rpo B及异烟肼耐药相关基因kat G、inh A的突变特征,为耐药结核病的预防和治疗提供科学依据。方法收集83例结核病患者痰标本,分离培养MTB,采用BD960液体法检测利福平、异烟肼耐药性,提取菌株DNA,采用聚合酶链反应扩增rpo B、kat G、inh A全基因,对扩增产物进行测序分析。结果 83株样本中,39株对利福平耐药,51株对异烟肼耐药。耐利福平菌株rpo B基因突变率为97.44%(38/39),531位点突变率60.53%(23/38),526位点突变率23.68%(9/38),32株出现多位点联合突变。耐异烟肼菌株kat G基因突变率为98.04%(50/51),共发现16种突变类型,其中以kat G 315位点突变为主,占70.00%(35/50),1株为kat G与inh A联合突变。结论该院耐多药MTB产生耐药性与rpo B和kat G基因突变相关,检测MTB耐多药相关基因突变可为早期快速诊断耐药结核病提供参考依据。     

阜阳市316株结核分枝杆菌耐药情况分析

正我国是全球22个结核病流行严重的高负担国家之一,也是全球27个耐药结核病高负担国家之一,耐多药结核病患病人数高居全球第1位~([1])。耐药、耐多药结核患者的增多已经成为现代结防工作中非常严峻的问题,对公共卫生造成了巨大威胁。所以,对结核分枝杆菌耐药情况的分析,对控制耐药和耐多药结核病有重要意义~([2])。阜阳市疾控中心结核病实验室于2012年7月开展耐多药结核病可疑者的菌株分离培养与药敏工作。本文对近两     

680株结核分枝杆菌耐药结果分析

自1934年首次应用药物治疗结核病以来,耐药结核病的发生率就不断增加,根据WHO估计,全球约有44万例耐多药结核(MDR-TB),超过50个国家存在广泛耐多药结核病患者,中国在全球27个耐多药结核高负担国家中排行第2,仅次于印度〔1〕。为研究江苏镇江市的结核分枝杆菌的耐药情况,为结核病临床治疗和防制提供依据,2009-2013年对镇江市的结核病人进行了痰培养,并对培养出的分枝杆菌进行了菌型鉴定和一线抗结核药物的药敏试验。     

盐城地区非结核分枝杆菌耐药情况分析

目的观察非结核分枝杆菌(NMT)耐药情况,为NMT肺病的临床治疗提供依据。方法从2012年盐城地区痰涂片阳性病人标本中筛选出NMT菌株,检测其对8种抗结核药耐药情况。结果 NMT总体耐药率为98.2%(56/57),全耐药率为42.1%。耐药率顺位为异烟肼(96.5%)、链霉素(91.2%)、利福平(86.0%)、氧氟沙星(77.2%)、丁胺卡那霉素(75.4%)、乙胺丁醇(73.7%)、卷曲霉素(73.7%)、卡那霉素(66.7%)。NMT对一、二线抗结核药物耐药率分别为96.5%、86.0%,全耐药分别占70.2%、57.9%。结论 NMT对大部分抗结核药物具有耐药性,NMT药敏试验后再合理选择治疗方案至关重要。     

金华地区结核分枝杆菌耐药谱变化分析

[目的]探讨金华地区1980—1986年(A年段)和1999--2003年(B年段)结核菌耐药谱的变化。[方法]对两个年段1300例住院病人按《全国结核病细菌学检验规程》的要求,用改良罗氏法进行痰结核菌培养、菌种鉴定和药物敏感性试验。[结果]两个年段结核菌耐药谱变化的特征：结核菌总耐药率下降,耐利福平跃居首位,耐多药率和中老年肺结核耐药率均呈上升趋势,其中以耐多药率升高为甚。[结论]我市B年段结核菌总耐药率比A年段呈下降态势,但与全国比较还处于较高水平,尤其值得警示的是耐多药现象相当严重。     

荧光PCR探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变研究

目的对荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变方法进行临床研究,评价检测能力及在国境口岸的应用价值。方法应用荧光PCR熔解曲线法检测结核病人临床分离结核分枝杆菌,以传统药物敏感性试验为标准,获得该方法的灵敏性、特异性。结果对347例结核病人临床分离培养样本,传统药物敏感性试验检出271例利福平敏感标本,76例利福平耐药标本。荧光PCR熔解曲线法检出269例利福平敏感标本,78例利福平耐药标本,灵敏性为93.42%,特异性为97.42%,符合率为96.54%。结论荧光PCR熔解曲线法检测速度快速、灵敏度高、特异性强,可用于结核分枝杆菌利福平耐药突变的快速检测,适于国境口岸对耐多药结核病的快速筛查。     

江苏省60株非结核分枝杆菌的耐药性分析

目的分析江苏省非结核分枝杆菌(NTM)的耐药水平和流行病学特点,为制定有效的防控措施提供科学依据。方法采用比例法,对2008年全省结核病耐药基线调查中确诊的60株NTM,进行针对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)和硫酸链霉素(SM)的药敏实验。结果 60株NTM的耐药率为98.33%,耐INH+RFP率为65.00%。对RFP、INH、SM等3种药物同时耐药的5株(占8.33%),对4种药物同时耐药的34株(占56.67%)。初治组耐药率、耐INH+RFP率(95.65%、43.48%)均低于复治组(100.00%、78.38%),差异均具有统计学意义(P值均0.05)。结论江苏省NTM耐药率、耐INH+RFP率水平较高,复治患者是耐药的主要群体,应作为NTM感染防控的重点人群。     

利用基因芯片技术检测结核分支杆菌耐利福平分离株rpoB基因突变的研究

目的利用基因芯片技术对我国结核分支杆菌耐利福平(RFP)分离株rpoB基因突变进行研究,建立大规模快速检测结核分支杆菌耐药基因型的基因芯片分子药敏试验方法. 方法利用寡核苷酸基因芯片技术分析19株结核分支杆菌临床分离株的rpoB基因突变,并经PCR-直接测序法(PCR-DS)验证,以结核分支杆菌H37Rv标准株为对照. 结果 7株结核分支杆菌药物敏感株芯片检测和PCR-DS分析均未见rpoB突变,12株RFP耐药株中,1株芯片检测和PCR-DS分析均未见rpoB突变;11株rpoB基因有突变,其中5株为531位TCG→TTG或TGG突变,5株为526位CAC→TAC或GAC或CGC突变,531位和526位突变占耐药菌株rpoB突变的83.3%,其余为502、505、506、507、516、518、522、538位突变;芯片检测和PCR-DS分析结果符合率达100%. 结论大多数结核分支杆菌耐RFP是由于rpoB基因突变所致,采用基因芯片技术可以快速、准确、大规模地确定结核分支杆菌RFP耐药突变的部位和性质,是一种有前途的结核分支杆菌分子药敏试验方法.