八种小杂鱼肝胰脏中马尾藻多糖降解酶的分离纯化研究

以南海海域的部分小杂鱼肝胰脏为原料,经磷酸盐缓冲液抽提,硫酸铵分级沉淀,SephadexG-100凝胶柱层析纯化来制备马尾藻多糖降解酶。系统的分析了硫酸铵饱和度、pH、盐析温度以及盐析时间对盐析效果的影响。结果表明:当硫酸铵饱和度为80%、盐析pH为5.5、盐析温度为45℃、盐析时间为3h时盐析效果最好。经SephadexG-100柱层析纯化后比活力达到126.72U/mg,提纯倍数达8.45倍,回收率为32.26%。     

羔羊皱胃酶提取技术的研究

以2周龄羔羊皱胃酶为原料,研究了食盐浓度、酒精浓度、pH以及提取液与皱胃粉比例(v/w)对羔羊皱胃酶提取效果的影响。结果表明,酒精浓度对提取效果无明显影响;当提取液中食盐浓度为5%、pH为4、提取液与皱胃粉比例为20∶1时,提取羔羊皱胃酶凝乳活性最高。     

猪血免疫球蛋白提取条件的优化研究

以猪血为原料,以猪血清Ig活性保留率为指标,研究猪血免疫球蛋白的提取工艺。通过单因素试验和正交试验考察硫酸铵盐饱和度、盐析pH值、盐析温度和盐析时间对猪血清Ig活性保留率的影响。试验结果表明:硫酸铵盐饱和度45%,pH值7.2,盐析温度40℃,盐析时间1.0h时,猪血清Ig活性保留率最高,为87.13%。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳研究猪血清蛋白硫酸铵分级盐析

本文通过聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了盐析时各种猪血清蛋白溶解度与硫酸铵饱和度的关系,结果显示猪血清蛋白析出区间为25%～70%硫酸铵饱和度,各种猪血清蛋白具有各自的沉淀区间。10倍稀释猪血清白蛋白最佳硫酸铵沉淀方案为:pH值7.4,调节硫酸铵饱和度到50%,离心除去沉淀,调清液pH值至4.5,硫酸铵饱和度至55%,沉淀白蛋白。pH值7.4,35%饱和度硫酸铵沉淀猪血清时,IgG得率为69.5%,纯度为76%;40%饱和度时,IgG得率为91.8%,纯度为61.6%。     

南美白对虾虾头蛋白酶提取工艺的研究

以南美白对虾虾头为原料,对提取条件进行优化设计.通过单因素实验研究pH、温度和料液比对内源蛋白酶活力的影响,然后设计正交实验确定内源蛋白酶的最佳提取条件,初步研究内源蛋白酶硫酸铵分级沉淀的最佳饱和度.结果表明:内源蛋白酶在pH为2和8时酶活力较高.通过正交实验得出酸性蛋白酶最佳提取条件为缓冲溶液pH3,料液比1:2,温度30℃;碱性蛋白酶最佳提取条件为缓冲溶液pH8,料液比1:3,温度50℃.酸性蛋白酶进行初步分离的结果是硫酸铵一级沉淀饱和度10%,硫酸铵二级沉淀饱和度50%;碱性蛋白酶进行初步分离的结果是硫酸铵一级沉淀饱和度20%,硫酸铵二级沉淀饱和度80%.     

头蛋白质分离及抗肿瘤作用的研究

利用Tris-HCl(pH7.5,100mmol/L)提取藠头总蛋白质,用不同饱和度硫酸铵盐析沉淀,检测饱和硫酸铵盐析后藠头蛋白质对小鼠B16黑色素瘤细胞和Meth-A细胞的抑制作用。结果表明:20%～80%饱和硫酸铵盐析制备的藠头蛋白质对白色念球菌、小鼠黑色素瘤细胞的生长均有明显的细胞毒效应,其中80%饱和硫酸铵盐析制备藠头总蛋白质抗菌抗肿瘤活性最为明显。藠头蛋白质经液相色谱-质谱(LC-MS)检测,其主要成分为凝集素、热休克蛋白、蒜氨酸酶、半胱氨酸合酶和肿瘤坏死因子受体蛋白等物质。     

海洋细菌L1-9菌株蛋白酶的初步纯化及其酶学性质研究

采用硫酸铵沉淀的方法对海洋细菌L1-9菌株产生的蛋白酶进行了初步纯化并对酶学性质进行了测定.结果表明,硫酸铵饱和度由30%升高到80%,随着浓度的增加,沉淀的蚩白酶活性逐渐增强,硫酸铵饱和度为80%时,酶活性达到最高为128.3 U/mL.而上清液的酶活性随着硫酸铵饱和度的增加而下降.对该菌株蛋白酶的酶学性质的研究结果表明:该酶最适反应温度为40℃,在50℃以下保温20min酶活仍较高,在60℃以上酶活减弱:酶反应最适pH值为7.0,酶活性在pH值5.0～7.0时比较稳定,而在4.0＞pH＞9.0时酶活性下降较快:金属离子(5mmol/L)Na+、K+能提高蛋白酶活性,Ag+、Zn2+、Cu2+、Fe3+对蛋白酶活性有抑制作用.     

鲍鱼脏器β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

试验研究皱纹盘鲍内脏中β-葡萄糖苷酶的分离纯化技术,以及pH、温度及金属离子和某些抑制剂对β-葡萄糖苷酶活性的影响。结果表明,以硫酸铵分级盐析鲍鱼脏器β-葡萄糖苷酶,选取30%饱和度的硫酸铵初步盐析除杂,80%饱和度的硫酸铵沉淀,能使鲍鱼脏器β-葡萄糖苷酶的初步纯化效果最佳;经SDS-PAGE分析,透析后的鲍鱼脏器β-葡萄糖苷酶纯度较高,分子量约为54.0~76.0 k Da;β-葡萄糖苷酶的最适温度为50℃,最适pH为3.5,在小于50℃、pH 3.0~6.0下均能保持稳定;Zn~(2+)、Cu~(2+)和Ag+对鲍鱼脏器β-葡萄糖苷酶活性有明显的抑制作用;Na~+、K~+、Mg~(2+)、Ca~(2+)和Fe~(2+)对酶活性影响不明显;Ba~(2+)、EDTA和Mn~(2+)对酶活均有激活作用,其中,Mn~(2+)激活作用最强。以p-NPG为底物,β-葡萄糖苷酶动力学常数Km为4.66 mmol/L,Vmax为3.79 U/L。     

不同凝乳酶在干酪生产中应用效果的研究

对不同凝乳酶在干酪生产中的凝乳特性、干酪出品率及成熟2个月的干酪品质进行了研究。结果表明,小牛皱胃酶和羔羊皱胃酶是干酪生产的最佳凝乳酶;其次为毛霉凝乳酶和胃蛋白酶;木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶应用效果较差。在小牛皱胃酶和羔羊皱胃酶中添加20%木瓜蛋白酶或25%毛霉凝乳酶,可获得较为理想的效果。     

发酵菊粉酶酶解大蒜渣的工艺研究

以大蒜渣为原料,利用马克斯克鲁维酵母诱导产出菊粉酶。所得菊粉酶经硫酸铵盐析,得出最佳饱和度为40%～80%。在这一区间的饱和度下经过透析、冷冻干燥,沉淀得到较纯的外切菊粉酶。再利用发酵酶水解大蒜渣制备果葡糖浆,经选择温度,酶活,底物浓度,pH以及时间这5个单因素,并正交设计,得出最优方案:pH4.8,温度为45℃,底物浓度9mg/mL,酶活量53.95U/mL,时间为8h,此时水解率达到96%。经高效液相色谱法-示差折光分析法可以知道,酶解液以果糖为主。     

4-甲基-4-烷硫基-2-戊酮类化合物的合成研究

对4-甲基-4-烷硫基-2-戊酮类化合物的合成与香气特征进行了研究。具体方法是:在四氢呋喃溶剂中,4-甲基-3-戊烯-2-酮与各种硫醇在哌啶的催化作用下回流反应20h,得到5种4-甲基-4-烷硫基-2-戊酮类新型食用香料化合物,产率40.3%～65.1%,其中烷硫基分别为乙硫基、丙硫基、丁硫基、己硫基、糠硫基。4-甲基-3-戊烯-2-酮是通过丙酮醇在碘催化剂作用下加热脱水制取的。采用IR、GC-MS、1HNMR分析并确证了上述合成化合物的结构,并对其香气特征进行了描述,它们可能是潜在的食用香料。     

发酵行业4-乙烯基愈创木酚和4-乙基愈创木酚研究进展

介绍了4-乙烯基愈创木酚和4-乙基愈创木酚在发酵行业的研究进展,列举了一些有价值的研究实例,指出4-乙烯基愈创木酚和4.乙基愈创木酚是白酒、啤酒(特别是小麦啤酒)、葡萄酒、酱油等产品的重要呈香物质,并从原料、酵母菌种和工艺角度对它们形成的途径和影响因素进行了探讨,提出以分子生物学手段对酵母菌种进行基因克隆是全面提升传统发酵产品质量的关键.