乙醇体系中酶抑制法检测氨基甲酸乙酯的研究

研究了在乙醇-水溶液和乙醇-缓冲液体系中,以乙酰胆碱酯酶对底物碘化硫代乙酰胆碱进行水解。根据氨基甲酸乙酯对乙酰胆碱酯酶的抑制率与吸光度的线性关系,测定体系中氨基甲酸乙酯的含量。实验发现,在乙醇-水溶液中,此方法不可行;而在低浓度乙醇-缓冲液体系中,氨基甲酸乙酯对乙酰胆碱酯酶的抑制率与其浓度在一定范围内呈线性关系。在5%、10%和15%乙醇-缓冲液体系中测定氨基甲酸乙酯的线性范围分别为2¹0、1⁵、1⁵mg/L,相关系数在0.992⁰.997之间,最低检出限为0.00895、0.04259、0.02916mg/L,RSD分别在1.41%².17%、0.34%⁰.55%和3.61%⁶.44%范围内。该法快速简便,所用仪器设备简单,检测成本低。本研究为酒精饮料及发酵食品中氨基甲酸乙酯的快速、简便、低成本检测方法的研究及相关产品的开发提供一定的理论和数据支持。      

酶抑制法检测蔬菜中有机磷农药残留

对酶抑制法快速检测有机磷农药残留进行研究.以鲫鱼脑、肝脏和肌肉乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)为检测用酶,对5种蔬菜中有机磷农药残留进行检测.根据AChE酶活抑制率和农药抑制方程,判断农药残留情况.当AChE酶活抑制率大于35%时,可判断该样品中农药残留超标.结果表明,试验中5种蔬菜样品农药残留均未超标.除豆角外,该方法的回收率均在80%～120%之间,表明该方法的检测结果准确可靠.     

乙酰胆碱酯酶抑制率法测定氨基甲酸乙酯的研究

本研究以乙酰胆碱酯酶对底物碘化硫代乙酰胆碱进行水解,根据氨基甲酸乙酯对乙酰胆碱酯酶的抑制作用,测定氨基甲酸乙酯。实验发现,经溴水溶液增敏后,显著提高了氨基甲酸乙酯对乙酰胆碱酯酶的抑制率,且其抑制程度与浓度在一定范围内呈线性关系,由此建立了一种快速测定氨基甲酸乙酯的酶抑制法。该法测定氨基甲酸乙酯的线性范围为1~7.5mg/L,相关系数r=0.9972,最低检出限为0.04177mg/L,RSD在1.82%~9.69%之间。该法所用试剂成本低,方法快速简单、条件温和易于控制、所需设备少,易于操作。本文为进一步开发基于酶抑制原理的酒精饮料及发酵食品中氨基甲酸乙酯快速检测方法技术及产品提供了相应的理论和技术支持。     

荧光方法在酶抑制农药残留快速检测中的研究进展

农药残留污染是农产品质量安全的首要关注因子,基于大型仪器的实验室检测模式难以匹配检测时效性需求。基于乙酰胆碱酯酶活性抑制的农药残留快速检测方法(酶抑制法)具有操作便携、检测速度快等优势,已成为农产品质量安全的常用筛查手段。囿于常规可见光比色法性能,传统的酶抑制法在检测灵敏度方面受到制约,这限制了其进一步的发展。荧光方法利用特征的激发/发射光谱,可以有效降低非特异性干扰,因此将荧光信号作为数据采集技术是改善酶抑制法灵敏度缺陷的有效手段。本文重点介绍了荧光方法在酶抑制农药残留快速检测中的信号响应模式,包括单酶-荧光材料响应、多酶级联响应和酶活性靶向小分子荧光探针响应,还分别总结了不同方法的目标物响应机制、检测效果及应用现状,最后对酶抑制农药残留快速检测的发展方向进行了展望。     

蔬菜中有机磷农药残留的两种酶抑制快速检测方法的比较研究

本实验比较了快速测定蔬菜中有机磷农残的两种酶抑制法即胆碱酯酶抑制法和植物酯酶抑制法，通过正交实验优化了两种酶抑制法的测定条件。对实际蔬菜样品的磷农残测定结果表明：这两种酶抑制快速测定方法均可用于蔬菜中有机磷农残的测定，其加标回收率都达到85％以上。但植物酯酶法测量精密度较好(3％以下)，酶源易得，提取、保存方便，在有机磷的快速测定中有更广泛的应用价值。     

酶抑制法在农残检测中的应用及乙酰胆碱酯酶的研究进展

论述了乙酰胆碱酯酶用于有机磷及氨基甲酸酯类农药残留检测的原理和方法，总结了目前国内外进行的乙酰胆碱酯酶的分离纯化工作，并对各种纯化方法的纯化效果进行了比较。     

酶抑制法快速检测食品中重金属研究进展

综述酶抑制法快速检测重金属的原理和方法,介绍脲酶、葡萄糖氧化酶、蛋白酶和磷酸酯酶等检测用酶,以及与之相结合的酶传感器、试纸条、量热计、比色法等重金属快速检测新技术,提出今后的研究方向.     

浅析酶抑制法在农药残留检测中的应用及酶源的研究进展

农药被认为是现代农业的重要组成部分,其在维持高效的农业生产力方面发挥着重要作用,但农药的滥用,也增加了农产品中农药残留超标的风险,从而对人体健康造成危害。本文分析了农药残留检测常用的检测方法,重点阐述了酶抑制法检测原理、检测方法和不同酶源研究进展,旨在为今后农药残留检测技术相关研究提供参考。     

麦麸酯酶抑制法检测辛辣蔬菜假阳性消除的研究

利用酶抑制法可以快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留,这两者能够抑制酯酶的活性,而辛辣蔬菜中含有影响酶活性的含硫化合物,容易导致检测结果出现假阳性.为了消除辛辣蔬菜造成的假阳性,以酶活性抑制率为指标,采用不同的加热方式、时间对4种辛辣蔬菜进行前处理.结果 表明,对样品提取液使用水浴加热可起到消除假阳性的作用,其...     

酶抑制法快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的研究现状及展望

概述了酶抑制法快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留技术的研究现状、检测原理、应用情况和存在的问题。酶抑制法具有检测时间短、成本低、操作简便等特点,是目前我国控制农药残留的一种有效的初筛方法。     

酱油中的氨基甲酸乙酯检测方法研究

研究采用SLE(固相支持液/液萃取)结合GC-MS法测定酱油中的氨基甲酸乙酯,方法检出限0.005 mg/L,加标回收率71.0%~90.5%,相对标准偏差RSD%4.45%~5.53%,满足分析方法的实验要求。     

气质联用内标法测定饮料酒中氨基甲酸甲酯和氨基甲酸乙酯

为同时检测酒精性饮料中的氨基甲酸甲酯（MC）和氨基甲酸乙酯（EC）含量,采用固相萃取方式对酒样进行前处理,D5-氨基 甲酸乙酯为内标,使用气相色谱串联质谱（GC-MS）定量测定含量。 结果表明,在10～400 μg/L范围内,EC的线性相关系数为0.999 6, MC的相关系数为0.996 1,二者检出限均为10 μg/L,MC加标回收率为103%～108%,RSD为0.50%;EC加标回收率为96%～104%,RSD 为3.79%;方法准确性良好。 MC含量测定结果RSD为3.0%,EC含量测定结果RSD为2.0%,方法精密度良好。 抽样检验结果表明,白酒 中未检出MC,其他酒精性饮料均含有一定量的MC和EC。     

气相色谱-正化学源-串联三重四极杆质谱法测定面包中氨基甲酸乙酯

建立了以气相色谱-正化学源-串联三重四极杆质谱(gas chromatography-positive chemical ionization-tandem triple quadruple mass spectrometry, GC-PCI-MS/MS)测定面包中氨基甲酸乙酯含量的方法。面包样品添加氨基甲酸乙酯同位素内标后,经10 g/100 mL(质量浓度)乙酸铅水溶液提取及沉淀蛋白,Cleanert EC碱性硅藻土固相萃取柱净化后,利用气相色谱-正化学源-串联质谱法检测提取溶液,利用多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM)分析,内标法定量。结果表明,氨基甲酸乙酯在0.5～50.0μg/L范围内,线性良好,相关系数为0.999 5,检出限(limit of detection, LOD)为0.12μg/kg,定量限(limit of quantification,LOQ)为0.40μg/kg。在阴性样品添加的质量浓度分别为2.0、10.0、50.0μg/kg三个加标水平试验中,回收率为89.3%～95.6%,日内精密度为1.3%～4.6%,...     

A method for the determination of methyl carbamate and ethyl carbamate in wines.

A method is described for the simultaneous determination of methyl carbamate (MC) and ethyl carbamate (EC) in wines that is based on: (a) extraction of the sample with dichloromethane using an extraction tube or an alumina-Celite column, (b) concentration of the extract to a small volume, and (c) determination by gas-liquid chromatography-thermal energy analyser (N-mode). The method is highly sensitive (1-2 ng/ml), accurate (recoveries greater than 80%), and precise (CV, 5-10%). Nineteen of 27 samples of wines analysed contained traces (up to 2.7 ng/ml) of MC, and most contained EC (up to 70 ng/ml). Wines treated in the laboratory with 200 ppm dimethyl pyrocarbonate (DMPC)-a cold sterilant recently approved for use in wines-indicated that such a treatment may increase the MC contents of the wines to 10 ng/ml. Additional studies suggested that formation of MC in DMPC-treated wines is dependent on both pH and ammonia content of the wines. The identity of MC in a few selected samples was confirmed by gas-liquid chromatography-high resolution (10 K) mass spectrometry. The natural low levels of MC found in these wines are not considered to pose a risk to human health.     

红葡萄酒中氨基甲酸乙酯检测方法的优化

该研究使用高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLD）检测红葡萄酒中氨基甲酸乙酯（EC）,并进一步优化检测方法。结果表明,最佳检测条件为吸附时间10 min、正己烷作为淋洗溶剂、乙酸乙酯与乙醚（5∶95,V/V）作为洗脱溶剂,荧光反应时间5 min。在最佳的实验条件下对氨基甲酸乙酯进行检测,在50～200 μg/L范围内时,线性关系良好,该方法的平均加标回收率为88.5%～92.8%,精密度实验结果相对标准偏差（RSD）为2.9%～6.9%,检出限为5 μg/L,说明该检测方法具有较好的精密度和准确度,易于掌握,可用于葡萄酒中氨基甲酸乙酯的测定,具有良好的应用前景。     

高通量酶抑制法快速测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留

目的 建立一种室温下高通量酶抑制法快速测定蔬菜中农药残留的方法。方法 从酶抑制法检测原理出发,以阳性蔬菜样品为研究对象,通过对提取剂、提取时间及反应体系的选择和优化,确立酶反应体系。采用该方法检测市售蔬菜样品,对筛选出阳性样品进行定量检测复核,验证方法有效性。结果 蔬菜样品用乙腈作为提取液,采用超声提取,上清液氮吹后加入磷酸盐缓冲溶液(pH 8.0)作为最终样液,农药提取效率最高,且不会对酶抑制法反应体系造成影响。采用优化后的高通量农药速测方法,以室温(25±5)℃下酶抑制率≥40%作为阳性判定标准,对筛选出的734个阳性样品进行仪器定量分析复核,检出符合率达到92.1%。结论 该方法有效提升了农药提取效率和检测效率,可有效用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。     

Determination of ethyl carbamate in some fermented Korean foods and beverages

Ethyl carbamate has been associated with cancer for several decades. It is mainly found in fermented foods and beverages. In view of the importance of fermented foods in the Korean diet and the significant level of ethyl carbamate expected, we determined ethyl carbamate concentrations in some of the staple food items and estimated the daily intake for the Korean population. Ethyl carbamate in commercial samples of kimchi, soy sauce, vinegar, soybean paste, and alcoholic beverages were determined by gas chromatography-mass spectrometry/selective ion monitoring (GC-MS/SIM). Homemade soy sauce and kimchi were also analysed. The maximum ethyl carbamate concentrations observed were 73 mu g/kg in soy sauce, 7.9 mu g/kg in soybean paste, 2.5 mu g/l in vinegar, 16.2 mu g/kg in kimchi and 15.4 mu/l in Korean traditional alcoholic beverages. Combining these values with the average daily food intake data, we estimated that the maximum daily exposure of Korean population to ethyl carbamate is 2.8 mu g/day, which is not a negligible amount considering the 'virtually safe dose' derived by animal experiment ranges between 1.2 and 4.8 mu g/day. It would be desirable to closely monitor ethyl carbamate levels in Korean foods and to find ways to reduce the daily intake.     

GC-MS/MS测定镇江香醋中的氨基甲酸乙酯

镇江香醋中的氨基甲酸乙酯(EC)通过乙酸乙酯提取,用N-丙基乙二胺(PSA)分散固相萃取的方法净化,采用气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法测定。结果表明,氨基甲酸乙酯(EC)的回收率达到96.7%,标准曲线的相关系数R2为0.999 7,最低检出限为1 μg/kg。该方法简单、快速、灵敏,能有效减少杂质干扰。测定二十份不同厂家生产的镇江香醋,均检出氨基甲酸乙酯（EC）。表明镇江香醋在生产发酵过程中,不可避免的会发生EC污染,应采取措施进行控制。     

HPLC测定白兰地中的氨基甲酸乙酯

高效液相结合荧光是检测氨基甲酸乙酯的新方法。经过实验得到最优的检测条件是：荧光检测入射光波长为234nm,发射光波长为600nm;流速为0．8mL/min;流动相梯度（0min-10min,A相为55％,B相为45％;10min-35min,A相为50％,B相为50％;35min-40min,A相为0％,B相为100％）;荧光反应时间为5min。并通过与标准GC／MS方法进行对比研究,对HPLC-FLD方法进行了评价。     

江西省产黄酒中氨基甲酸乙酯残留量的GC-MS分析

采用气相色谱-质谱法调查60份江西省内生产的黄酒产品中氨基甲酸乙酯(EC)残留量。酒样添加d5-EC同位素内标,经硅藻土层析住吸附,乙醚洗脱,用GC-MS测定,内标法定量。色谱柱为DB-INNOWAX石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)。加标回收试验的平均回收率为107.5%,相对标准偏差为1.33%(n=2),黄酒中EC的污染水平中,EC的中位数为24.4μg/kg,均值为35.0μg/kg,检出率为70%,含量值范围为6.0~123.7μg/L。通过此次调查江西产黄酒中氨基甲酸乙酯残留量,将为我国制定国家标准和对黄酒中氨基甲酸乙酯的污染水平评估提供数据支持。