自体骨泥混入骨膜碎片植骨与单纯自体骨泥植骨修复骨缺损的效果对比实验

目的:观察应用自体骨泥混入骨膜碎片修复骨缺损的效果,并与单纯自体骨泥植骨修复,骨缺损的效果作比较。方法:实验于2004-10/2005-02在广西医科大学第四附属医院骨科实验室完成。选择新西兰白兔12只,建立双侧桡骨中段1.5cm×0.3cm的骨缺损。实验侧(左侧)将髂骨制成的骨泥与髂骨内板骨膜剪成的碎片相混匀后取0.5g植入骨缺损处,对照侧用松质骨骨泥0.5g植入,于术后2,4,6,8,10,12周分别摄X射线片并在麻醉状态下每次处死2只,于骨缺损处两端剪断桡骨,完整取出骨缺损段,分析天平称重,双侧对比,光镜和电镜下观察组织学情况。结果:纳入12只白兔均进入结果分析。①术后12周平均骨质量比较:实验侧明显高于对照侧[(1.31±0.05,1.12±0.03)g,(P<0.05)]。②术后平均骨愈合时间比较:实验侧明显低于对照侧[(3.66±0.30,4.25±0.55)周,(P<0.05)]。③光镜下检查结果:4周实验侧除了有大量的新生骨细胞外,开始出现较多的骨小梁等正常结构,对照侧的骨小梁结构较实验侧少;实验侧和对照侧在6周以后的骨痂已经有了正常的骨结构,骨细胞均匀,骨小梁排列整齐。④电镜检查结果:术后2周实验侧与对照侧骨痂组织中均有大量的胶原纤维,在实验侧发现正常的骨祖细胞,而对照侧未发现;4周时实验侧可见较成熟的骨细胞,而对照侧所见到的骨细胞发育较差;两侧6周以后的骨痂组织中均有正常的骨细胞。结论:自体骨泥混入骨膜碎片后成骨愈合能力较单纯自体骨泥植骨明显增强,可提高骨质量,缩短骨愈合时间,促进骨细胞的发育,具有方法简单、不增加手术难度和创伤,效果可靠等优点,为临床工作提供了一种新的植骨方法。     

自体髂骨与骨痂骨植骨对骨折修复的对比观察

目的：应用自体髂骨与骨痂骨植骨对长骨骨折修复的动物实验与临床应用。方法：动物实验中将家兔左侧肱骨干人工造成骨折，按骨折后时间分成第2、3、4周组，于相应时间内在侧切开取肱骨干骨痂，于同侧手术切开剪断桡骨，将骨痂植入；右侧取出与骨痂等量髂骨，同法植入该侧桡骨断端，分别于后1、2、3、5周处死，行X线及组织学观察，临床选择陈旧骨折63例，在骨折固定同时取出骨痴植入骨3折端，通过X线及查体观察骨折愈合情况。结果：自体髂骨植骨与第4周骨痂骨植骨的骨愈合过程基本相同，早期均发生骨坏死，且都是经过软骨化骨“替代爬行”而愈合，而第2、3周骨痂骨植入后无骨坏死的发生，继续经软骨化骨而愈合，且术后第1－3周时的成骨过程较同时期自体髂骨植入侧提前1－2周。临床平均随访15．3月，平均骨折愈合时间较应用自体髂骨植骨相比基本相同（P＞0．05）。结论：动物试验表明，利用兔骨折后第2、3周骨痂骨植骨优于自体髂骨植骨。临床应用骨痂骨可以替代自体髂骨植骨。     

带骨膜自体骨联合Cem-OsteticTM人工骨浆修复骨缺损临床研究

目的应用带骨膜自体骨联合Cem-OsteticTM人工骨浆修复骨缺损,探讨其治疗效果及可行性。方法将26例骨缺损骨不连患者分为3组:第1组8例,采用带骨膜自体骨联合Cem-OsteticTM人工骨浆修复骨缺损;第2组8例,采用Cem-OsteticTM人工骨浆植入;第3组10例,采用单纯自体骨植骨。结果均无毒副作用及异物反应等不良反应。第1组术后均达到骨折愈合优良,第2组有2例、第3组有1例愈合可,第2组有1例愈合差。结论带骨膜自体骨联合Cem-OsteticTM人工骨浆修复骨缺损有促进骨折愈合的作用,有临床应用价值。     

自体及异体骨软骨移植与骨缺损修复

目前临床上可用于修复骨缺损的材料较多，但理想的骨移植材料应具有成骨性、骨诱导性、骨传导性及完全生物相容性。目前常用的移植物包括自体或异体骨软骨、软骨膜或骨膜及软骨细胞。自体骨软骨镶嵌移植具有移植软骨固定可靠、软骨细胞存活率高等优点，由于供区的限制，自体骨软骨移植难以满足修复特长段骨缺损的要求，众学者开始研究应用多种材料来修复关节软骨缺损，其中软骨膜的应用较多，但由于其来源于自身，延长了手术时间，增加了患者的痛苦，使其应用受限。异体骨软骨移植材料获得相对较易，大小形状不受限制，且具有生物活性与受体部分能发生生物愈合，其主要问题是移植后的排斥反应，深低温冷冻处理技术虽然保留了成骨活性又最大限度的降低了免疫源性，但其生物力学强度仍明显低于自体骨。配合各种生长因子的刺激作用增强骨移植物转化成软骨的能力，构成具有生物活性的骨移植物将是骨移植材料研究的主要方向。     

自体骨髓复合人工骨联合髂骨骨膜移植修复四肢难治性骨不连:与单纯骨膜移植及骨髓联合人工骨移植的比较

背景:自体骨髓富含诱导性和确定性骨祖细胞的惟一组织,是治疗骨不连的首选移植材料:保留一定成骨诱导活性的人工骨可为成骨细胞的长入提供支撑和支架作用;髂骨膜最厚、血循环丰富、取材容易,移植可改善局部动脉血供,对骨愈合具有促进作用.目的:利用自体骨髓复合人工骨联合髂骨骨膜移植治疗四肢难治性骨不连,并同单纯髂骨植骨等方法进行比较.方法:选择四肢难治性骨不连患者36例39肢,根据治疗方案分为3组,自体骨髓复合人工骨联合髂骨骨膜移植(联合组)19肢,自体骨髓移植联合人工骨(骨髓组)9肢,自体髂骨移植治疗(髂骨组)11肢.观察骨愈合时间、固定物取出1个月患肢功能评分和移植后X射线评分.结果与结论:39肢最终均达骨性愈合,均获随访,平均随访时间18.5个月.在骨愈合时间、固定物取出1个月患肢功能评分和移植后X射线评分方面,联合组疗效优于其他两组(P<0.05).提示自体骨髓复合人工骨联合髂骨骨膜移植治疗四肢难治性骨不连临床疗效优越.     

家兔不同部位自体游离骨膜移植修复关节软骨缺损的实验比较

目的：探讨不同部位自体游离骨膜修复关节软骨缺损的能力。方法：用大耳兔32只，在股骨关节面造成5mm&;#215;8mm全层软骨缺损，分别行自体髂骨骨膜和胫骨骨膜游离移植术，术后4及8周取材傲组织学观察比较。结果：术后8周自体髂骨骨膜移植侧、胫骨骨膜移植侧的优势组织性质分别为类透明软骨、幼稚软骨，前者形成软骨的质量优于后者。结论：自体髂骨骨膜游离移植的成软骨能力优于自体胫骨骨膜，是较理想的自体骨膜游离移植取材部位     

同种异体冻干骨混合自体骨治疗创伤性骨缺损

目的：研究同种异体冻干骨混合自体骨治疗创伤性骨缺损的临床应用价值。方法：自1999年5月至2003年9月采用同种异体冻干骨加自体骨按1～3：1的比例混合一起移植治疗12例创伤性骨缺损。结果：12例病人获随访，随访时间6～36个月。术后所有患者功能均恢复优良，在术后3个月X线片显示在骨结合部可见少许骨痂，6个月后有较多骨痂生长，冻干骨周围及髓腔内侧面可见骨被大部分替代；植入创伤后胫骨内的冻干骨愈合速度慢，移植骨和受体骨达骨性愈合的时间7～15个月(平均10个月)，股骨与肱骨移植骨和受体骨达骨性愈合的时间为4～8个月(平均6个月)。结论：应用同种异体冻干骨和自体骨按一定比例混合一起进行植骨治疗是一种有效的方法，值得推广应用。     

家兔不同部位自体游离骨膜移植修复关节软骨缺损的实验比较

目的 探讨不同部位自体游离骨膜修复关节软骨缺损的能力. 方法 用大耳兔 32只,在股骨关节面造成 5 mm× 8 mm全层软骨缺损,分别行自体髂骨骨膜和胫骨骨膜游离移植术,术后 4及 8周取材做组织学观察比较. 结果 术后 8周自体髂骨骨膜移植侧、胫骨骨膜移植侧的优势组织性质分别为类透明软骨、幼稚软骨,前者形成软骨的质量优于后者. 结论 自体髂骨骨膜游离移植的成软骨能力优于自体胫骨骨膜,是较理想的自体骨膜游离移植取材部位     

兔自体骨髓间充质干细胞移植覆盖骨膜修复关节软骨缺损:与单纯骨膜覆盖及空白对照的比较

背景：目前软骨缺损主要通过自体软骨移植来治疗，患者不易接受。随着组织工程的兴起，间充质干细胞成为研究的焦点。多数学者认为动态应力、低氧环境和一些生长因子是骨髓间充质干细胞向软骨方向分化的有利因素，这使人自然地想到关节腔微环境。目的：建立一种骨髓间充质干细胞的分离培养方法，将自体骨髓间充质干细胞移植于兔关节软骨损伤区并用骨膜覆盖，建立关节腔微环境，观察损伤修复的效果。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005—07／200707在山西医科大学第二医院骨科实验室完成。材料：选用24只新西兰大白兔，制备全层关节软骨损伤模型。方法：采集兔骨髓间充质干细胞，密度梯度离心法对其进行分离纯化，体外贴壁培养扩增。将24只大白兔按随机数字表法分为3组（n=8），未诱导的骨髓间充质干细胞＋骨膜覆盖组在关节软骨缺损区植入未诱导的骨髓间充质干细胞并用骨膜覆盖；单纯骨膜覆盖组用骨膜覆盖缺损区；空白对照组不作处理。主要观察指标：分别于术后6，12周取材，观察兔软骨损伤的修复情况。结果：①白体骨髓间充质干细胞移植后6周，未诱导的骨髓间充质干细胞＋骨膜覆盖组软骨损伤区已由透明软骨样修复组织填充，术后12周软骨和软骨下骨得到良好修复，修复组织进一步改建，免疫组织化学结果证实修复组织内产生了Ⅱ型胶原。②单纯骨膜覆盖组损伤区有部分修复，基底和表面细胞成分较多。③空白对照组由纤维组织修复，但基底也可见少量软骨样细胞。结论：3组结果比较后，认为以体外培养扩增的兔骨髓间充质干细胞复合骨膜移植可促进关节软骨损伤的修复，在尚无更为完善的治疗方法出现之前，利用此法修复损伤关节软骨不失为一种有效的技术。     

自身骨泥能否成为骨缺损或骨间隙修复的植骨材料:兔桡骨空白对照实验研究

目的探讨自身骨泥有无骨诱导活性及对长管状骨缺损修复的影响.方法22只兔骨泥股部肌肉内植入,24只兔做桡骨缺损模型,一侧骨泥回植、对侧空白对照;2周做ECT检查,术后不同时间取材摄X线片并做组织学检查及碱性磷酸酶(ALP)测定.结果肌袋植入侧1周软骨生长,3周网织骨形成;ALP水平2周最高;骨缺损骨泥植骨侧术后12周出现皮质骨及成熟的骨髓组织.对照侧骨不连形成.术后2周ECT检查,植骨侧的放射性计数明显高于对侧(P<0.05).结论长管状骨内固定产生的自身骨泥具有诱导成骨活性,可做为植骨材料.     

组织工程化仿生人工骨修复兔桡骨节段性骨缺损

目的:观察自体骨髓基质细胞复合多孔仿生人工骨后修复节段性骨缺损的效果。方法:实验于2002-01/2003-05在解放军第四军医大学西京医院全军骨科研究所完成。①抽取成年家兔骨髓并分离、培养和诱导骨髓基质细胞。②采用纳米晶羟基磷灰石-胶原中羟基磷灰石和胶原的比例为4∶1,仿生材料中纳米晶羟基磷灰石和聚左旋乳酸的比例为1∶1;孔隙率>90%,孔径50～300μm;规格15mm×3mm×3mm材料。使用前分别经乙醇、无菌双蒸水和离心等处理。将第3代骨髓基质细胞按3×1010L-1接种于上述材料中常规培养。体外构建骨髓基质细胞和仿生基质材料复合体。③手术造成兔右桡骨干15mm骨缺损动物模型,随机分为实验组14只、对照组14只和空白组6只,实验组植入自体骨髓基质细胞/仿生材料复合体,对照组仅植入仿生材料,空白组不作任何处理。通过X射线、骨密度、组织学以及计算机图象分析等手段观察各组在不同时相的骨缺损修复情况。结果:34只兔全部进入结果分析。①骨髓基质细胞和多孔纳米晶羟基磷灰石-胶原/聚左旋乳酸材料体外复合培养结果:7d后细胞基本汇合成片,细胞表面和周围出现较多网状胶原纤维。②各组兔骨缺损区X射线检查:实验组术后24周骨缺损区密度较高,与截骨端骨性融合,接近形成正常骨干结构;对照组术后24周可见少量骨痂自截骨端向材料内长入,但未见材料表面连续性骨痂形成。空白组术后24周两截骨端硬化封闭,形成骨不连。③骨密度测定:术后16周、24周实验组骨缺损区骨密度明显高于对照组(16周:(0.152±0.041),(0.092±0.029)g/cm2,24周:(0.177±0.044),(0.113±0.026)g/cm2,t=2.67,2.80,P<0.05),而与对侧正常桡骨无明显差异。④组织学观察:实验组术后24周植入材料大部分降解并为新生骨替代,新生骨和两端皮质骨融为一体;对照组术后24周材料部分降解成颗粒状,缺损区中央为纤维组织充填,仅两端有部分新生骨组织;空白组术后24周断端封闭形成骨不连。⑤计算机图象分析:8,16,24周,实验组修复性新骨占原骨缺损面积百分数随着观察时间的延长而增加,并显著高于同一时间点对照组(t=8.971,11.240,12.836,P<0.01)。结论:①通过微创方式获取大量成骨性骨髓基质细胞,并将其与多孔纳米晶羟基磷灰石-胶原/聚左旋乳酸材料复合培养后植入骨缺损区,可以发挥多重成骨效应,从而较快地启动骨修复反应。②采用组织工程学技术修复节段性骨缺损是一条切实有效的治疗手段,有较广泛的临床应用前景。     

胎盘组织液-同种异体冻干骨与同种异体冻干骨修复颌骨缺损的对照

背景:研究证实,冻干和辐照灭菌的同种异体骨是理想的骨移植材料,不仅具有良好的生物相容性、生物力学特性,而且还保留骨基质中的骨形态发生蛋白和构成形态发生蛋白所必须的一些酶类,具有一定的骨诱导能力.目的:观察胎盘组织液-同种异体冻干骨修复犬的人工颌骨缺损效果,以同种异体冻干骨为对照.设计、时间及地点:对比观察性实验,于2007-12/2008-09在哈尔滨医科大学动物实验中心完成.材料:健康杂种成年犬8只;同种异体冻干骨由湖北联结生物材料有限公司提供;胎盘组织液为广东珠海丽珠制药厂产品,2 mL/支.同种异体冻干骨:胎盘组织液=(4.0-5.0):1.方法:在犬上、下中切牙、尖牙、第一磨牙根尖相对应的颌骨处分别建立直径1.0 cm类半球型上下颌骨缺损模型共96个实验区,实验组选择大小合适的同种异体冻干骨及骨颗粒按比例浸泡在胎盘组织液呈饱和状,阳性对照组亦将大小合适的同种异体冻干骨及骨颗粒浸泡在生理盐水液呈饱和状,分别放入颌骨缺损处并添满,阴性对照组不植入任何材料.每只犬的实验区均由4个实验组材料、4个阳性对照组材料、4个阴性对照组材料组成.主要观察指标:术后2,4,8,12周取材进行放射线学和组织学观察.结果:实验组早期以软骨内化骨为主,晚期以膜内化骨为主,有明显的新骨形成,并与周围骨组织连接良好;阳性对照组可见新生骨,与周围骨组织连接欠佳;阴性对照组骨缺损区中央尚未被骨小梁充满.经组织学测定,术后2,4,8,12周实验组成骨量均高于其他两个对照组,差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01).结论:胎盘组织液-同种异体冻干骨复合材料能够积极地促进颌骨缺损的修复并有效缩短修复时间.     

合成材料神经导管与自体神经移植修复周围神经缺损的比较

背景：生物可降解材料制成的神经导管可在体内降解,避免出现的神经卡压等问题,因而受到越来越多的关注. 目的：比较自体神经移植与3种合成可生物降解材料神经导管在修复周围神经损伤的效果差异. 方法：通过电生理学检测,形态学观察等神经恢复效果评价方法,对比分析近年来常用的胶原神经导管、DL-乳酸-ε-己内酯神经导管、聚乙醇酸神经导管与自体神经移植修复周围神经缺损的效果. 结果与结论：虽然神经导管与自体神经移植相比在理论上有其优势的一面,但不同合成材料的神经导管之间在神经功能恢复中存在明显差异性,DL-乳酸-ε-己内酯神经导管修复效果与自体神经移植无明显差异,是较为理想的神经导管材料,聚乙醇酸神经导管因自身的因素影响其降解性能,在3种神经导管中的修复周围神经损伤效果最差,胶原神经导管需要交联剂改善其机械性能,其修复周围神经损伤效果居于前两者之间,因此,这3种神经导管在神经功能再生方面还有潜在的缺陷,不能完全替代自体神经移植,而且3者之间的性价比,还缺少足够的大样本长期随机对照实验结果来验证,还需要进一步的实验观察.     

组织工程化骨替代材料的评价及其在修复骨肿瘤性骨缺损中的应用

目的制备和综合评价组织工程化骨替代材料并用于修复骨肿瘤所导致的骨缺损。方法制备狗和人的异体脱钙骨基质颗粒(DBM),提取牛骨形成蛋白(bBMP)并经成骨诱导活性测定,将bBMP与DBM用直接掺和的方法复合后,再与骨水泥(BC)混合制成组织工程化复合材料,进行综合评价后备用。56例下肢骨肿瘤患者在微波诱导高温原位灭活后,应用组织工程化复合材料对遗留的骨缺损进行修复重建。结果bBMP、DBM和BC组织工程化复合骨修复替代材料具有良好的生物相容性、很强的生物力学强度和成骨诱导活性,并且具有良好的粘合性和可塑形性。临床应用56例,经平均9个月的随访,效果良好且无任何不良反应。患肢膝关节功能评价,优52例(93%),良4例(7%),优良率100%。结论bBMP、DBM和BC组织工程化复合骨修复替代材料是目前修复骨缺损理想的产品,有广阔的临床应用前景。     

松质骨的异体骨笼填充重建兔第四颈椎缺损

背景：椎体切除后的重建依然是脊柱外科医生面临的难题,理想的重建材料应该具有良好的成骨作用、可靠的支持性能、低廉的价格和简单的操作步骤。目的：观察兔颈椎缺损模型填充自体松质骨的异体骨笼重建的可行性和效果。方法：切除兔第四颈椎体建立颈椎缺损模型,利用免肱骨皮质环经冷冻干燥等处理制备同种异体皮质骨笼,并以填充松质骨的皮质骨笼、自体髂骨和单纯皮质骨笼3种材料分别重建兔第四颈椎椎体缺损。结果与结论：X射线、组织病理学和透射电镜观察均表明,填充有松质骨的皮质骨笼组的成骨作用最明显,骨笼与上下椎体实现了骨性融合。血清碱性磷酸酶检测表明,在重建后2,4周时,填充松质骨的皮质骨笼组和自体髂骨移植组的血清碱性磷酸酶含量差异均无显著性意义,但两组的血清碱性磷酸酶含量均高于单纯异体皮质骨笼组（P〈0.01）。生物力学实验表明,填充松质骨的皮质骨笼组在重建后1个月时的稳定性高于自体髂骨移植组（P〈0.01）。结果证实,兔颈椎缺损模型填充松质骨的异体骨笼重建后效果满意,强于单纯皮质骨笼和自体髂骨的移植效果,生物相容性良好。     

筋膜包裹的骨髓间充质干细胞/聚己内酯复合体血管化组织工程骨修复比格犬骨缺损

背景:骨组织工程技术的材料,细胞复合物已能在肌肉、皮下等异位组织内成骨,或是在小型哺乳动物的骨缺损处修复成骨,但这与临床的实际仍有较大差距,骨组织工程技术能否修复大型哺乳动物大范围的骨缺损,以及如何促进组织工程骨的体内再血管化进程还不明确.目的:观察应用比格犬带血管蒂深筋膜瓣及组织工程骨在体内的成骨情况. 方法:分离培养比格犬骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞以自然沉淀法进行组织构建,接种于聚己内酯材料上,与支架材料复合.在比格犬左足胫骨中段制作骨-骨膜缺损模型,植入以筋膜包裹的骨髓间充质干细胞,聚己内醑复合体作为实验组;右足制作胫骨中段骨一骨膜缺损模型后,植入骨髓间充质干细胞,聚己内酯复合体:另取2只犬制作骨-骨膜缺损模型不植入任何材料作为空白对照.术后进行大体、X射线片、组织学、磁共振灌注成像观察骨模具上成骨细胞生长与血管化情况.结果与结论:空白对照组无新骨生成,无血管长入,最后缺损由纤维瘢痕组织填充;对照组8～16周骨缺损逐渐被骨样组织填充,可见较多的骨痂,骨痂向移植物长入,断端连接不完全,髓腔硬化.实验组成骨过程及速度明显优于对照组,术后6周骨痂量较多,术后8周支架材料已完全降解,术后12周骨缺损完全修复,可见大量松质骨形成,新骨髓腔较通畅,骨皮质连续较牢靠,所形成的血管在数量、孔径和发布上均明显优于对照组.提示组织工程骨有较强、较快修复大动物大段负重骨缺损的能力,而带蒂的筋膜瓣则通过促进其再血管化而使其这种能力得到更好的发挥.     

Long bone defects treated with demineralized bone

This study was undertaken to determine the potential of demineralized bone alloimplant (DBA) for healing long bone defects. We removed 25 mm of bone from the junction of the proximal and middle thirds of both ulnas in seven adult male mongrel dogs. On one side of each animal the devascularized bone was replaced as a cortical autograft (CA) and on the other side, the defect was filled with DBA. Because of implant error, there were only five CAs to evaluate, of which two had achieved clinical union. Of the seven DBAs only one achieved union. The bone in and around the defect was quantified on each specimen roentgenogram and was compared to the size of the original defect. The CA defects were filled 139% +/- 11% with bone that was partly new and partly remnants of the replaced autograft. The demineralized alloimplant defects were filled 143% +/- 45% with bone which, of course, was all newly formed. The difference between the two groups was not significant. We concluded that the DBA was an excellent osteogenic stimulant, but that it did not prevent nonunion in this model.