IFN-γ酶联免疫斑点法与结核菌素皮试在附睾结核检测中的应用比较

目的:将新兴的结核特异性IFN-γ酶联免疫斑点法(ELISPOT)应用于附睾结核检测,并比较其与传统的结核菌素皮试(PPD)在附睾结核及健康对照组中检测的差异,探讨ELISPOT在附睾结核诊断中的应用前景。方法:采用自主研制的ELISPOT试剂盒对13例附睾结核患者进行检测;采用PPD对11例附睾结核患者检测。同时采用2种方法对57例健康男性志愿者进行平行检测。结果:附睾结核患者,ELISPOT阳性率92.3%(12/13),PPD阳性率90.9%(10/11),2种方法差异无显著性(P>0.05)。健康志愿者中ELISPOT阳性率14.0%(8/57),PPD阳性率49.1%(28/57),两者差异有极显著性(P<0.01)。结论:附睾结核检测中ELISPOT在敏感性上与PPD一致,在区分附睾结核与健康人方面特异性优于PPD,在附睾结核诊断上有较好的应用前景。     

分泌干扰素-γ的效应T细胞在预警肾移植术后急性排斥反应中的意义

探讨肾移植术后早期外周血中分泌干扰素(IFN)-γ的效应T细胞数量变化在预警急性排斥反应(AR)中的意义.方法 本前瞻性对照非连续性研究对象选取2011年1月1日至2012年12月31日在西安交通大学医学院第一附属医院肾移植科收治的200例同种异体肾移植患者.根据移植后临床表现、实验室检查及肾穿刺病理学检查结果分为两组:AR组(24例)和移植肾功能正常(stable allograft function,STA)组(176例).其中AR组根据病理严重程度再分为Ⅰ级(9例)、ⅡA级(7例)、ⅡB级(4例)、Ⅲ级(4例)4种等级.另外随机选择行活体亲属肾移植供者为健康对照(healthy control,HC)组(10例).3组分别于术前1 d,术后1、3、5、7、14、21、28、60、90 d留取外周血;另外AR组于临床拟诊AR当日开始留取外周血,即0、1、3、5、7、14、21、28 d.通过体外刺激因子佛波酯(phorbol myfismte acetate,PMA)和离子霉素(ionomycin,Ion)刺激外周血淋巴细胞释放IFN-γ,采用酶联免疫斑点试验(enzyme linked-immunospot assay,ELISPOT)方法,动态监测外周血分泌IFN-γ的效应T细胞数量(IFN-γ ELISPOT值).比较3组研究对象外周血中IFN-γ ELISPOT值的动态变化;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析IFN-γ ELISPOT值对AR的诊断效果;比较AR组患者冲击治疗前后IFN-γ ELISPOT值的动态变化;比较AR组中不同病理分级患者的IFN-γ ELISPOT值的动态变化,以分析IFN-γ ELISPOT值与AR病理分级的关系.结果 术后1、2、4 d,AR组和STA组的IFN-γ ELISPOT值明显高于HC组(均为P<0.05),肾移植术后1、2、4、7、14、21 d,AR组的IFN-γ ELISPOT值均明显高于STA组(均为P<0.05).IFN-γ ELISPOT值诊断AR的ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.92,最佳临界值为23 spots/ 5×105 PBLs,其评价AR的灵敏度为0.920,特异度为0.875.在诊断前3 d、前1 d及穿刺当日,4组患者之间IFN-γ ELISPOT值的差异有统计学意义(均为P<0.05).在AR发生前7 d内,IFN-γ ELISPOT值上升速度越快,上升峰值越高,提示AR病理损害越严重(P<0.05).结论 肾移植术后早期动态监测IFN-γ ELISPOT值对早期诊断AR有重要意义.     

γ-干扰素释放试验联合胸膜组织活检用于诊断结核性胸膜炎的评估

目的：评价全血γ-干扰素释放试验联合胸膜活检对结核性胸腔积液诊断的应用价值。方法应用全血γ-干扰素释放试验QuantiFERON-TB Gold In Tube（QFT-GIT）对79例胸腔积液患者进行检测,其中结核性胸腔积液患者45例,非结核性胸腔积液患者34例,结核合并肿瘤患者1例。同时,对其中27例患者进行胸腔镜下胸膜组织活检。结果结核性胸腔积液组,QFT-GIT的阳性率为91.1%（41/45）,非结核性胸腔积液组的阳性率为26.5%（9/34）。QFT-GIT试验诊断结核性胸腔积液的敏感性为91.1%（41/45）,特异性为73.5%（25/34）,阳性预测值为82.0%,阴性预测值为89.3%;胸膜组织活检诊断结核性胸膜炎的敏感性为96.3%（26/27）,特异性为100.0%（12/12）。联合胸膜活检诊断结核性胸膜炎的敏感性为95.5%（42/44）,特异性为94.1%（32/34）。结论全血γ-干扰素释放试验QFT-GIT联合胸膜组织活检用于诊断结核性胸腔积液具有较高的敏感性和特异性,在我国具有较高的临床应用价值。     

酶联免疫斑点法在快速诊断活动性肺结核中的应用

目的探讨酶联免疫斑点法（ELISPOT）在临床快速诊断活动性肺结核病中的应用价值。方法：采用T—SPOT．TB试剂盒对36例明确诊断为活动性肺结核的初治患者、30例健康体检者的外周血中结核分枝杆菌特异性T淋巴细胞进行检测,同时对26例活动性肺结核患者做结核菌素（PPD）试验。结果在36例活动性肺结核初治患者和30例健康对照者中,T-SPOT检测的阳性率分别为80．6％与6．7％,此技术用于诊断初治活动性肺结核患者的敏感性为80．6％,特异性为93．3％,阳性预测值为93．5％,阴性预测值为80．0％。在26例同时做PPD试验的活动性肺结核患者中,T-SPOT检测的阳性率略高于PPD试验（80．6％vs61．5％）,但差异无明显统计学意义（P〉0．05）。结论酶联免疫斑点法是一种具有较高敏感性和特异性的检测结核感染的技术,在活动性肺结核病的快速诊断中有较大应用价值。     

运用ROC曲线对γ-干扰素释放试验、抗-结核分枝杆菌及其组合在涂阴肺结核诊断中的效能分析

目的探讨γ-干扰素释放试验（IGRA）、抗-结核分枝杆菌及其组合在肺结核诊断中的应用价值。 方法回顾性调查苏州大学附属传染病医院结核病科于2013年6月至2014年12月收治的符合要求、资料完整的疑似肺结核病例共512例,采用IGRA试剂盒检测其血浆γ-干扰素含量,同时应用蛋白芯片识别仪检测其结核分枝杆菌蛋白16 kDa和38 kDa以及抗-脂阿拉伯甘露糖（Lam）含量,应用ELISA检测抗-结核分枝杆菌（TBAb）,并将5种检测结果进行平行分析。 结果在涂阴肺结核的单一检测指标中,IGRA的AUC最大,诊断效能最好。在各项指标联合检测中,二联组合16 kD + IGRA和三联组合IGG + 16 kD + IGRA较好,且两种组合的检验效能差异无统计学意义（Z = 1.622、P = 1.107）,AUC分别为0.694和0.667,灵敏度分别为82%和96%,特异度分别为57%和36%。 结论多项检测指标联合较单一指标检测能够提高涂阴肺结核诊断的灵敏度。16 kD + IGRA和IGG +16 kD + IGRA为IGRA、抗-分枝杆菌在涂阴肺结核诊断中的最优组合。     

肾移植受者术前供者反应性干扰素γ和转化生长因子β生成细胞的频数及其意义

LISPOT与肾移植术后6个月肾功能相关,可能为肾移植受者远期预后提供信息.     

T细胞斑点试验在肺结核诊断和疗效评价中的意义

目的探讨基于γ-干扰素释放的T细胞斑点试验（T—SPOT．TB）对诊断肺结核及评价抗结核疗效的意义。方法采用T—SPOT．TB检测55例活动性肺结核患者、14例肺部病变非肺结核患者和12名健康体检者外周血特异性T细胞释放IFNγ的斑点形成细胞数（SFC）,并对20例痰菌及T—SPOT．TB均阳性的活动性肺结核患者在治疗前、治疗第2个月末和第6个月末分别行T—SPOT．TB检测。多组间的比较采用多个独立样本Kruskal—WallisH检验,组间两两比较采用Mann—WhitneyU检验,治疗前后SFC数值差异比较采用Wilcoxon符号秩检验。结果肺结核组T—SPOT．TB阳性率（85．5％,47／55）显著高于肺部疾病组（2／14）和健康对照组（1／12）（X^2=40．926,P〈0．05）。肺结核组T—SPOT．TB的早期分泌抗原（ESAT-6）孔（A孔）和培养滤过蛋白（CFP-10）孔（B孔）SFC分别为70．00（27．00～125．00）和80．00（17．00～180．00）,显著高于肺部疾病组和键康对照组,差异具有统计学意义（,=35．376和30．485,P值均〈0．05）。T—SPOT．TB诊断菌阳和菌阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为88．6％和80．0％,88．5％和88．5％,91．2％和84．2％,85．0％和85．2％,差异无统计学意义（P〉0．05）。痰菌及T—SPOT．TB均阳性的20例活动性肺结核患者治疗前测试孔A和孔B的SFC分别为75．50（41．25～116．25）和56．25（105．00～225．00）,治疗2个月的测试孔A和孔B的SFC分别为41．0（18．00～68．75）和72．50（42．25～158．75）,较治疗前下降（z=-3．213和-3．622,P值均〈0．05）;治疗6个月末,测试孔A和B的SFC分别为25．00（5．75—52．25）和55．00（6．25～122．50）,较治疗前明显下降（Z=-3．921和-3．923,P〈0．05）,较治疗2个月时下降差异也有统计学意义（Z=-3．926和-3．884,P〈0．05）。结论T—SPOT．TB对诊断结核分枝杆菌感染及监测抗结核治疗疗效上有重要意义,且对痰菌阴性肺结核具有重要的诊断价值。     

结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验在肺外结核病中的诊断价值

结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据WHO估计,全球约20亿人感染结核分枝杆菌,每年约有200万人死于结核病。我国因结核分枝杆菌感染导致死亡的人数是其他传染性疾病总死亡人数的2倍以上。结核病临床表现多样,可以累及全身各个系统,尤其是肺外结核病变往往十分隐匿,给临床诊断带来极大困难。目前用于诊断结核病的方法较有限,     

结核分枝杆菌感染的免疫学诊断:进展与争议

近年来,全球结核病疫情出现再度加重趋势,我国结核病负担在全球居于前列.控制结核病依赖于早期诊断和早期治疗,而诊断水平的落后将直接影响临床疗效和进一步的疫情控制.目前结核病确诊的主要依据仍然是细菌学检查(包括培养和涂片),因此发展快速易行的检测方法尤为重要.免疫学诊断是结核病诊断的重要部分,近期取得了诸多进展.目前发展的以T细胞为基础的γ-干扰素释放试验(IGRAs),相比于目前最常用的结核菌素试验(TST,又称PPD试验)有更高的敏感性与特异性.     

胸膜厚度联合外周血结核感染T细胞斑点试验鉴别诊断结核性与恶性胸腔积液

目的 评价胸膜厚度联合外周血结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）鉴别结核性与恶性胸腔积液的价值。方法 纳入284例结核性胸膜炎患者（结核组）及213例恶性胸腔积液患者（恶性组）。采用超声测量胸膜厚度,并进行外周血T-SPOT.TB,比较组间结果差异;利用多因素logistic回归分析观察二者是否为恶性胸腔积液的独立危险因素。绘制受试者工作特征（ROC）曲线,计算曲线下面积（AUC）,评价胸膜厚度、外周血T-SPOT.TB及二者联合鉴别结核性与恶性胸腔积液的效能,并以DeLong检验比较其效能差异。结果 2组间胸膜厚度及外周血T-SPOT.TB结果差异均存在统计学意义（P均<0.05）,且此二项均为判断胸腔积液性质的独立危险因素,其OR分别为0.67[95%CI（0.60,0.75）,P<0.05]及6.79[95%CI（4.44,10.39）,P<0.05]。以胸膜厚度鉴别结核性与恶性胸腔积液的AUC为0.71,截断值取0.55 mm时,其诊断的敏感度为90.84%,特异度为45.08%;以外周血T-SPOT.TB鉴别诊断的AUC为0.72,敏感度为72.89%,特异度为70.89%;二者联合鉴别诊断的AUC为0.81,高于单一指标（P均<0.01）,敏感度为65.49%,特异度为83.10%。结论 胸膜厚度和外周血T-SPOT.TB可用于鉴别结核性与恶性胸腔积液,且二者联合可提高鉴别特异度。     

肾结核临床诊断方法探讨

目的：探讨肾结核的临床表现及诊断方法,提高早期诊断水平。方法：收集2000年10月～2009年10月收治136例肾结核患者的临床资料,对其病史特点及诊断方法进行回顾性分析。结果：136中男62例,女74例。常见临床症状依次为尿频尿急（59．6％）、尿痛（41．9％）、血尿（36．0％）和腰痛（36．0％）。尿常规异常率71．8％,尿沉渣找抗酸杆菌阳性率29．3％,PPD试验（纯结核菌素试验）阳性率86．7％,血结核蛋白芯片检测法阳性率88．3％。B超、KUB及IVu、CT、MRI、膀胱镜、活检以及输尿管逆行插管造影的阳性率分别为20．6％、10．3％、55．1％、51．7％、12．5％、22．6％、11.1％。结论：肾结核早期诊断困难,需要结合临床表现、实验室（结核蛋白芯片检测法阳性率最高）以及影像学检查（CT准确率最高）综合考虑。     

肾结核的诊断与治疗（附78例报告）

目的：提高肾结核的诊断和治疗水平.方法：回顾性分析78例肾结核患者的临床资料,探讨肾结核的临床演变特点和诊治趋势.78例肾结核患者中,不典型肾结核28例.其中24例药物治疗,54例手术治疗.结果：24例药物治疗者均治愈;54例手术治疗者术后随访1～2年均治愈.结论：肾结核的诊断主要依靠临床表现、实验室检验和影像学检查.其治疗应根据患者病情和肾脏破坏情况给予个体化治疗,包括适当的化学药物治疗、外科手术以及密切随访.     

非典型肾结核45例诊治分析

目的：提高对非典型肾结核临床特点的认知及诊治水平。方法：回顾性分析1979年1月～2009年12月收治的45例非典型肾结核患者的临床资料：男24例,女21例,年龄19～61岁,平均38岁,其中20～50岁者38例,占84．4％。临床表现为尿频31例（68．9％）,肉眼或镜下血尿9例（20．0％）,尿常规不正常36例（80．0%）。15例（62．5％）男性患者曾诊为慢性前列腺炎,治疗1～3年无效,后诊为肾结核;7例伴有附睾结核,其中3例已在外院行附睾切除术。治疗前行尿路造影、CT和B超检查。9例采用异烟肼加利福平加乙胺丁醇药物治疗,疗程9～12个月;36例于抗结核治疗2、3周后行患肾切除术,4例加行附睾切除。结果：尿路造影、CT和B超诊断准确性分别为21．2％、100％和88．9％。36例手术治疗者全部治愈,9例药物治疗者中,5例在6～24个月复查时,患肾损坏严重,遂行肾切除。结论：非典型肾结核的膀胱刺激症状不明显,尿常规、B超、静脉肾盂造影是主要的检查方法,CT具有较大的诊断价值;外科手术仍是肾结核无功能肾的主要治疗手段。     

中晚期肾结核的诊断和治疗（附245例报告）

目的：探讨中晚期肾结核的诊断和治疗.方法：回顾性分析手术治疗的245例中晚期肾结核患者的临床资料：尿频、尿急、尿痛、腰痛和血尿是最常见的症状,分别为55.5%、41.2%、29%、31.8%和53.8%;IVP、B超、CT、膀胱黏膜活检和MRU诊断符合率分别为30.2%,57.1%,89.8%,29.1%和85.6%.手术治疗245例,其中肾切除210例,一侧肾切除对侧输尿管再植21例,挛缩膀胱行乙状结肠膀胱扩大术9例,双肾结核肾积水肾功不全5例行肾造瘘.结果：245例患者中,治愈238例,未愈7例,治愈率97.1%.结论：尿液检查、IVP、膀胱镜检查及黏膜活检对肾结核早期诊断有十分重要的意义.B超、CT、MRU对中晚期肾结核诊断有决定意义.中晚期肾结核需手术治疗.     

Mycobacterium Tuberculosis Infection Incidence in Hospitalized Renal Transplant Patients in the United States, 1998–2000

The incidence, risk factors, and prognosis for Mycobacterium tuberculosis (MTB) infection have not been reported in a national population of renal transplant recipients. We performed a retrospective cohort study of 15,870 Medicare patients who received renal transplants from January 1, 1998 to July 31, 2000. Cox regression analysis derived adjusted hazard ratios (AHR) for factors associated with a diagnosis of MTB infection (by Medicare Institutional Claims) and the association of MTB infection with survival. There were 66 renal transplant recipients diagnosed with tuberculosis infection after transplant (2.5 cases per 1000 person years at risk, with some falling off of cases over time). The most common diagnosis was pulmonary TB (41 cases). In Cox regression analysis, only systemic lupus erythematosus (SLE) was independently associated with TB. Mortality after TB was diagnosed was 23% at 1 year, which was significantly higher than in renal transplant recipients without TB (AHR, 4.13, 95% CI, 2.21, 7.71, p < 0.001). Although uncommon, MTB infection is associated with a substantially increased risk of mortality after renal transplantation. High-risk groups, particularly those with SLE prior to transplant, might benefit from intensified screening.     

Diagnosis of Tuberculosis in Camelids: Old Problems,Current Solutions and Future Challenges

In spite of great efforts for its control and eradication, tuberculosis remains one of the most important zoonosis worldwide. Its causative agents, the members of the Mycobacterium tuberculosis complex, have a wide host range that complicates the epidemiology of this disease. Among susceptible species to these pathogens, camelids from the New World (llama, alpaca and vicuña) and Old World (Bactrian camel and dromedary) are acquiring an increasing importance in several European countries because of its growing number and could act as reservoirs of the disease for livestock and humans in their natural habitat. In addition, tuberculosis caused by a number of M. tuberculosis complex members is a life‐threatening disease in these animal species. Although tuberculosis has been known to affect camelids for a long time, ante‐mortem diagnosis is still challenging because of the lack of standardized diagnostic techniques and the limited sensitivity and specificity of the most widely applied tests. However, in recent years, several techniques that can at least partially overcome these limitations have been developed. This paper reviews the results and advances achieved in tuberculosis diagnosis in camelids in the last decade as well as the progresses on ongoing investigations, with special attention to the remaining challenges that still have to be faced to assure the availability of reliable tools for the detection of tuberculosis‐infected animals and herds.     

Genitourinary Tuberculosis After Renal Transplantation—A Report of Three Cases with a Good Clinical Outcome

Tuberculosis (TB) continues to be a major opportunistic infection after renal transplantation especially in the tropical countries. The risk of TB in renal transplant recipients is reported to be 20-74 times higher than that in the general population. Genitourinary TB that occurs after renal transplantation in uncommon and appears to present differently than genitourinary TB in the non-transplant population. An increased risk of graft rejection and graft loss has been reported. We report three cases of genitourinary TB in renal transplant recipients, all of whom had a good clinical outcome and a review of published literature.     

Diagnosis and Management of Tuberculosis in Transplant Donors: A Donor‐Derived Infections Consensus Conference Report†

Mycobacterium tuberculosis is a ubiquitous organism that infects one‐third of the world's population. In previous decades, access to organ transplantation was restricted to academic medical centers in more developed, low tuberculosis (TB) incidence countries. Globalization, changing immigration patterns, and the expansion of sophisticated medical procedures to medium and high TB incidence countries have made tuberculosis an increasingly important posttransplant infectious disease. Tuberculosis is now one of the most common bacterial causes of solid‐organ transplant donor‐derived infection reported in transplant recipients in the United States. Recognition of latent or undiagnosed active TB in the potential organ donor is critical to prevent emergence of disease in the recipient posttransplant. Donor‐derived tuberculosis after transplantation is associated with significant morbidity and mortality, which can best be prevented through careful screening and targeted treatment. To address this growing challenge and provide recommendations, an expert international working group was assembled including specialists in transplant infectious diseases, transplant surgery, organ procurement and TB epidemiology, diagnostics and management. This working group reviewed the currently available data to formulate consensus recommendations for screening and management of TB in organ donors.