葡萄籽提取物的化学成分及药理活性研究概况

葡萄是常见的水果和酿酒原料 ,中医认为其果、根和藤均可入药。葡萄籽提取物 (grapeseedextract,EGS)中含有大量多酚类、脂质类和矿物类等有益于人体的化学成分 ,对多种疾病有预防和治疗作用。现对葡萄籽提取物的化学成分及药理作用作一介绍。1　葡萄籽提取物中的化学成分1 .1　多酚类物质葡萄籽中含有多酚类物质 (GSP) ,主要有儿茶素类和原花青素类。儿茶素类化合物包括儿茶素、表儿茶素及其没食子酸酯 ,是葡萄籽中主要的单聚体 ,也是原花青素寡聚体和多聚体的构成单位。葡萄籽提取物原花青素 (GSPE)是由不同数目的黄烷醇聚合而成 ,目…     

葡萄籽超微粉中多酚成分的检测

对葡萄籽超微粉中的多酚成分进行了分析和测定。儿茶素是葡萄籽多酚中单体的主要成分,又是构成原花青素的主要单体,福林肖卡法测定多酚时采用儿茶素作为对照物来表征葡萄籽多酚含量更准确。经过改进的HPLC方法对没食子酸、儿茶素、表儿茶素三种单体的分离效果较好,具有很好的准确度和精密度,适合于葡萄籽超微粉中的单体检测。经测定,葡萄籽超微粉中,多酚含量10.9%(以儿茶素计),三种单体的总量为1.2%,以总多酚含量减去三种单体总量代表原花青素含量来计算,原花青素含量为9.7%。     

葡萄籽提取物(GSE)有效成分的分析

葡萄籽提取物（GSE）的多酚化合物包括原花青素和单体多酚，因此，采用Folin-Ciocalteu法测定葡萄籽提取物总多酚的质量分数，高效液相色谱法测定单体多酚质量分数，以总多酚质量分数减去单体多酚质量分数，即可代表样品中原花青素的质量分数。测定结果表明，自制GSE总多酚质量分数稍高于对照样品（天津尖峰天然产物研究开发公司产品），分别为90．5％和88．3％；没食子酸、儿茶素质量分数明显高于对照样品；而表儿茶素和表儿茶素没食子酸酯的质量分数稍低于对照样品。自制样品与对照样品的原花青素质量分数无显著差异，分别为74．6％和75．8％。     

莲房原花色素的纯化分级和结构鉴定

莲房中原花色素经甲醇水提取,大孔树脂纯化,制得莲房原花色素提取物(LSPE),酸降解法测定其平均聚合度,并经TSK HW-40s凝胶树脂分级,高效液相色谱-二极管阵列检测器和电喷雾质谱分析。结果表明:采用60%甲醇水溶液,调整pH值至2.0,料液比1:20(m/V),在60℃提取1h,提取率可达7.65%,最适合纯化的树脂为AB-8。LSPE乙酸乙酯相和水相平均聚合度为3.2和15.4。LSPE乙酸乙酯相主要由儿茶素、没食子酸儿茶素、儿茶素和没食子酸儿茶素构成的二聚体、三聚体和少量四聚体构成。凝胶树脂将LSPE乙酸乙酯相分为11个级分(F1～F11),F1～F4可能为黄酮类及黄酮苷类,F5主要为儿茶素以及少量表儿茶素,F6为没食子酸儿茶素、原花青素二聚体B3、儿茶素,以及含有没食子酸儿茶素单元的原花色素,F7为儿茶素和原花青素B1、B2、B3,F8为原花色素类物质,F9～F11可能为儿茶素和没食子酸儿茶素组成的更高聚合度的聚合物。     

原花青素分级分离

原花青素由(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素、(-)-表儿茶素没食子酸酯聚合而成,聚合度、单体及连接键的不同使得原花青素具有多种异构体,造成分离分析困难.原花青素的抗氧化活性受聚合度影响,按聚合度大小对原花青素分级分离,对产品性能进行评价.用10％～ 40％和60％乙醇溶液对吸附在AB-8大孔树脂上的原花青素梯度洗脱,原花青素洗脱收率达到98.63％.分析各乙醇洗脱液中原花青素平均聚合度和抗氧化活性,0％ ～ 12％乙醇洗脱液中为单体,12％ ～32％洗脱液中主要为低聚体,32％～60％洗脱液中为高聚体,12％ ～ 32％洗脱液原花青素抗氧化活性最高,自由基清除率为44.85％,维生素C当量浓度为19.38 μg/mL.     

固相萃取净化HPLC法同时检测荔枝皮中的几种原花青素

本研究建立了荔枝皮中儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、没食子酸(GA)、原花青素B_2(PCB_2)、原花青素B_4(PCB_4)和原花青素A_2(PCA_2)含量的测定方法。样品经85%乙醇水溶液提取,Oasis PRi ME HLB固相萃取柱净化,高效液相色谱(HPLC)同时进行检测。色谱柱为Thermo Syncronis C_(18)(250×4.6 mm,5μm),以甲醇和1%冰乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长280 nm。儿茶素、表儿茶素、没食子酸、原花青素B_2、原花青素B_4和原花青素A_2在0.5～100 mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.9998。平均添加回收率为83.00%～102.00%,相对标准偏差(RSD)在0.48%～0.83%之间。儿茶素、表儿茶素、没食子酸、原花青素B_2、原花青素B_4和原花青素A_2在荔枝皮中检出限分别为0.52、0.55、0.35、0.45、0.95和0.65 mg/kg,定量限分别为1.26、1.64、0.95、1.35、2.80和1.45 mg/kg。该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于荔枝皮中C、EC、GA、PCB_2、PCB_4、PCA_2的含量同时定量测定。     

高粱原花青素的ESI-MS分析及其低聚体的RP-HPLC-MS/MS法分离鉴定

以高粱加工后的副产物--高粱外种皮为原料,采用电子喷雾离子化质谱(electrospray ionization-mass spectroscopy,ESI-MS)对ADS-17大孔树脂纯化的高纯度高粱原花青素(sorghum procyanidins,SPC)的组成进行分析,并通过反相高效液相色谱(reverse phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)-质谱(RP-HPLC-MS/MS)联用对Toyopearl HW-40凝胶色谱分离的SPC-5级分进行分离鉴定。结果显示：SPC为低聚体原花青素,包含有儿茶素/表儿茶素单体、原花青素二～六聚体;SPC-5由8种三聚体和1种二聚体组成。     

葡萄籽提取物主要质量指标研究

目的 为了确定保健食品原料葡萄籽提取物主要质量指标的参数,本实验搜集30批次葡萄籽提取物并测定了其主要质量指标。方法 采用紫外分光光度法测定了葡萄籽提取物的原花青素值、多酚含量,采用液相色谱法测定了儿茶素、表儿茶素含量,参照食品安全国家标准,测定了灰分、水分、微生物指标(菌落总数、大肠杆菌、沙门氏菌、酵母菌、霉菌)、重金属和溶剂残留等主要质量指标。结果 所有葡萄籽提取物样品中原花青素值范围在81.1%至108.2%之间;儿茶素及表儿茶素含量范围为1.12%至8.58%;多酚含量在70.1%至106.1%之间;灰分含量范围在0.2%至1.8%;水分含量范围在3.76%至5.23%。变异系数由大到小的顺序为：儿茶素、表儿茶素＞灰分＞多酚＞水分＞原花青素值。所有样品菌落总数均小于10 CFU/g,大肠杆菌、沙门氏菌均未检出,酵母菌、霉菌总数均小于10 CFU/g,甲醇、乙醇残留均小于2 mg/kg,重金属(以pb计)小于0.05 mg/kg。结论 与我国目前唯一相关标准对比,所有质量指标中,仅原花青素值的限量需要进一步调整。     

荔枝皮原花青素低聚体的定性分析

制备并定性分析荔枝皮原花青素低聚体(LPOPC)。荔枝皮原花青素(LPPC)通过乙醇浸提,AB-8大孔树脂纯化,Toyopearl HW-40S 树脂层析分级处理得到LPOPC,并按聚合度分成了3个组分。通过红外光谱、高效液相色谱(HPLC)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)等分析表明,LPOPC中主要成分为(－)-表儿茶素,并且含有A型原花青素二聚体和A型原花青素三聚体。通过选择性的级分收集,可以得到纯度较高的原花青素单体、二聚体和三聚体。     

UPLC-MS-MS同时测定茶油中8种儿茶素类物质

利用超高效液相色谱-串联质谱建立了一种可以同时检测茶油8种儿茶素类物质的分析方法。使用Waters T3 C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.1%(V/V)甲酸水溶液和甲醇和为流动相进行梯度洗脱,正扫描方式下多反应监测(MRM)模式测定。在优化的条件下,8种儿茶素类物质线性关系良好(r~2=0.9966～0.9995),方法检出限为0.2～1.1μg/L。在不同浓度水平的添加平均加标回收率为76.4.%～93.4%之间,相对标准偏差3.0%～8.9%。应用本方法可以检测出茶油中儿茶素(C)、表儿茶素表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)等的含量。结果表明,茶油中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)的含量相对较高。本方法结果准确可靠,方法快速,简单易行,可为茶油中儿茶素类物质的检测提供参考。     

Concentration and compositional changes of procyanidins in grape seeds and skin of white Vitis vinífera varieties

Grapes from Sémillon and Ugni blanc varieties have been sampled over the periods just before coloration (stage I), véraison (stage II) and harvest (stage III), during the seasons 1991–92 and 1992–93. The content of total extractable proanthocyanidins, catechins ((+)-catechin, (−)-epicatechin and (−)-epicatechin gallate), procyanidin dimers B1 to B8 and trimer C1 in skin and grape seeds were further determined. The quantitative determination was performed through Fractogel TSK chromatography followed by HPLC analysis. The highest concentration of procyanidins is present in the grapes in the early stages of development. (+)-Catechin was the major constituent of flavan-3-ols in skin and grape seeds. Procyanidin dimers B1, B4 and B6 represent the majority of dimers in the early stage of grape seeds development, while in the last stage of maturation dimers B2 and B4 were predominant. Curiously, the decrease in the procyanidins concentration goes along with a corresponding increase of dimer B2 synthesis during grape ripening. Dimer B1 was always the major dimer in skin. The differences between the two seasons were more significant than those between the Ugniblanc and Sémillon varieties. However, Sémillon contains a higher concentration of total proanthocyanidins. © 1999 Society of Chemical Industry     

超声波辅助法提取葡萄籽中原花青素工艺的研究

提高酿酒后葡萄籽的综合利用率,探究在不同提取条件下超声波辅助法对葡萄籽中原花青素提取工艺的影响。在单因素试验的基础上,通过正交试验对提取工艺条件进行优化。结果表明,最佳提取工艺条件为乙醇体积分数70%,提取时间20 min,超声功率90 W,提取温度50 ℃,料液比1∶20（g∶mL）,在此最优条件下,葡萄籽中原花青素的提取率为3.98%。     

几种原花青素的降血糖作用及与常见食品原料的结合研究

以4种不同来源的原花青素为研究对象,利用高通量淀粉浊度法测定其对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活力的抑制效果,研究其与常见食物原料之间的相互作用,为进一步开发降血糖主食提供理论依据。结果表明:葡萄籽与高粱麸皮原花青素对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活力抑制效果相对较好,蔓越莓与苹果原花青素对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活力抑制效果相对较差;食物中的主要成分与原花青素结合后会影响其对酶活力的抑制效果,常见食物中糯米、散装大米、高粱米等与葡萄籽原花青素结合明显,降低其对碳水化合物消化酶活力抑制效果,但玉米淀粉、木薯粉、马铃薯粉、生粉、米粉、小西米、小黄米、玉米片、红薯粉、黑米及黑豆与葡萄籽原花青素之间几乎不结合,是适宜发挥原花青素对碳水化合物消化酶活力抑制作用的食品原料。     

葡萄枝蔓中原花色素的不同分析方法比较及含量分析

采用铁盐催化比色法、硫酸-香草醛法、盐酸-香草醛法和直接紫外分光光度法对13 个品种葡萄枝蔓中原花色素含量进行分析,直接紫外分光光度法选取不同原花色素对照品对测定结果进行比较。通过方法学考察和统计分析,比较不同品种葡萄枝蔓中原花色素分析方法的优缺点。结果发现铁盐催化比色法和香草醛法专一性强,但铁盐催化比色法反应时间长,香草醛法不稳定,而直接紫外分光光度法稳定性好、精密度高、操作简便,适合葡萄枝蔓中原花色素含量的快速测定。采用直接紫外分光光度法比较分析,分别以原花色素对照品、原花色素B1和原花色素B2为标准,发现所得各种葡萄枝蔓中原花色素的含量计算结果差别接近2 倍,说明原花色素对照品的纯度及组成对原花色素含量的分析结果影响明显。     

植物中原花青素含量的分析测定

通过对多种植物的花、叶、皮、壳、籽、核等部位的原花青素含量进行分析测定。结果表明:原花青素广泛分布于植物体的不同部位中,原花青素除葡萄籽含量较高以外,在某些植物的叶和花中含量也较丰富,葡萄籽中原花青素以新鲜葡萄籽含量最高,经过酿酒和放置时间的延长原花青素含量降低。     

Efficient isolation of major procyanidin A-type dimers from peanut skins and B-type dimers from grape seeds

In order to fully explore the biofunctional potential of proanthocyanidins (PA), isolated and well-characterised PA dimers are of great importance. Current methods to obtain pure A- and B-type dimers are laborious, because they comprise multiple chromatographic steps, often yielding only one or two specific dimers. In the current study, an efficient isolation procedure is described, to isolate a large variety of A-type dimers from peanut skins and B-type dimers from grape seeds. Yields increased 20–400 times for A-type dimers and about 10 times for B-type dimers compared to other methods with a lesser number of chromatographic steps. Dimers isolated from peanut skins were identified as; epicatechin-(2-O-7, 4-8)-catechin (A1), epicatechin-(2-O-7, 4-8)-epicatechin (A2), epicatechin-(2-O-7, 4-6)-catechin, epicatechin-(2-O-7, 4-8)-entcatechin, isolated from peanut skins for the first time, and epicatechin-(4-6)-catechin (B7). Dimers from grape seeds were identified as; epicatechin-(4-8)-catechin (B1), epicatechin-(4-8)-epicatechin (B2), catechin-(4-8)-catechin (B3) and catechin-(4-8)-epicatechin (B4).     

紫番薯原花青素的稳定性和抗氧化性研究

紫番薯原花青素粗提物经过AB-8大孔树脂分离得到4个样品,以吸光度做检测指标研究了在光照、温度、酸碱度和金属离子影响下的稳定性;用清除二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,分析了4个样品总的抗氧化作用。结果表明:和对照品葡萄籽原花青素相比,4个样品均具有较好的稳定性和抗氧化性,其中样品1的稳定性和抗氧化性最佳。并且和葡萄籽原花青素相比,稳定性和抗氧化性均存在统计学意义上的显著性差异(p<0.05)     

均匀设计优化超临界CO2提取含原花青素的葡萄籽油

以原花青素的提取率和葡萄籽的出油率为考察指标,利用均匀设计法对超临界CO2萃取时间、萃取压力、萃取温度进行了优化,得到最佳工艺条件为:萃取压力15 MPa,萃取时间3 h,萃取温度50 ℃;在最佳条件下葡萄籽出油率为(10.92±0.25)%,原花青素提取率为(23.4±7.2)mg/100 g.在加入无水乙醇夹带剂的前提下,利用超临界CO2萃取葡萄籽油,可以使油中含有原花青素,提高葡萄籽油的品质.     

Analysis of tannins in seeds and skins of Shiraz grapes throughout berry development

The flavan-3-ol and proanthocyanidin composition of both seeds and skin of Vitis vinifera L. cv. Shiraz grapes was determined by reversed-phase HPLC after acetone extraction and acid-catalysis in the presence of excess phloroglucinol. Samples were taken at weekly intervals from fruit-set until commercial harvest. The main period of proanthocyanidin accumulation in grape seeds occurred immediately after fruit-set with maximum levels observed around veraison. Over two seasons there was variation in both the timing and content of proanthocyanidins in seeds. In skin, proanthocyanidin accumulation occurred from fruit set until 1–2 weeks after veraison. Proanthocyanidin subunit composition was different in seeds and skin and changed during berry development but the mean degree of polymerisation of the tannin polymers in skins was higher than in the seeds at all stages of berry development. Proanthocyanidin levels in both seeds and skin decreased between veraison and harvest. Additional proanthocyanidin subunits were released when the residues remaining after acetone extraction were subjected to direct acid-catalysis in the presence of phloroglucinol. In the seeds, these accounted for much of the post-veraison decrease, but not in grape skin. At harvest, 75% of extractable berry proanthocyanidin was in the seeds. Accumulation of proanthocyanidins in the seeds appears to be independent of that in the skins, but in both tissues synthesis occurs early in berry development and maximum levels are reached around veraison.     

脱脂葡萄籽中低聚原花青素的提取

研究了葡萄籽中低聚原花青素的提取.采用石油醚脱脂的干葡萄籽为原料,以乙醇为溶剂热提取后,通过调节pH除去蛋白质,再用乙酸乙酯萃取分离粗提物,最后用石油醚沉淀纯化产品.