紫苏分离蛋白酶解制备抗菌肽的工艺优化

以紫苏分离蛋白为原料,通过碱性蛋白酶(Alcalase)水解制备紫苏抗菌肽。以大肠杆菌为指示菌,在单因素试验基础上,运用响应面(RSM)法对水解条件进行优化,并研究了紫苏抗肽的广谱抗菌性、热稳定性和水解度与抑菌性的关系。结果显示:在加酶量6.89%、酶解温度52.68℃、底物浓度4.17%、p H 8.98,水解3 h的条件下,酶解产物RSM的理论预测值为19.33 mm,实际测量值为19.40 mm。广谱抗菌试验表明:紫苏抗菌肽对沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用。水解度和抑菌性试验表明:抑菌性随水解度增加而增强,后趋于稳定。     

Plackett-Burman和Box-Behnken试验优化苦荞蛋白酶解制备抗菌肽的工艺

用中性蛋白酶酶解苦荞蛋白制备抗菌肽,以抑菌率和肽质量浓度为响应值,在底物质量分数、加酶量、pH值、酶解温度和酶解时间5个单因素试验基础上,采用Plackett-Burman试验选出其中影响显著的因素,再以肽质量浓度为评价指标,用Box-Behnken试验优化抗菌肽制备工艺。最佳工艺为:底物质量分数3.22%、加酶量4 000 U/g、pH 6.86。在此条件下,苦荞蛋白酶解产生的肽质量浓度为32.41 mg/mL(预测值为32.12 mg/mL),对大肠杆菌抑菌率为(27.88±2.78)%,对金黄色葡萄球菌的抑菌率为(94.56±0.74)%。结果表明,优化中性蛋白酶酶解苦荞蛋白制备抗菌肽工艺合理。     

食物源蛋白高F值寡肽的制备及应用研究进展

寡肽一般由3～9 个氨基酸残基组成,高F值寡肽是指寡肽混合物中支链氨基酸（亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸）与芳香族氨基酸（苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸）的物质的量比值（F值）大于20的肽,研究表明高F值寡肽具有多种生理活性。本文综述了食物源蛋白高F值寡肽制备原料选择、主要制备工艺及其生理活性研究进展,并对其未来研究趋势进行展望。     

酶法制备乳源抗菌肽的抗菌性研究

研究了乳源抗菌肽的抗菌效果,研究表明乳源抗菌肽提取物对金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌皆有明显的抗菌活性,但对金黄色葡萄球菌的抗菌活性强于乙型溶血性链球菌,酶法制备的乳源抗菌肽,有较好的抑菌效果。     

牛骨胶原蛋白抗菌肽的制备及其抑菌活性

以牛骨胶原蛋白为原料,采用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、动物复合蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对其进行水解,确定最佳的酶解时间和酶用量,并比较酶解效果.酶解液经离心过滤和真空冷冻干燥后,测定其对金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌的抑制活性.结果表明:动物复合蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白得到的酶解液的水解度最高,其最佳的酶解时间为4h,最适宜的酶添加量(占骨质量的百分比)为1.25%;风味蛋白酶和中性蛋白酶的酶解液对金黄色葡萄球菌具有抑菌效果,其抑菌圈直径分别为6.03mm和7.97mm;动物复合蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶对肠炎沙门氏菌具有抑菌效果,其抑菌圈直径分别为8.67、9.10、9.03mm.     

蚕蛹蛋白酶解制备抗氧化肽的初步研究

将蚕蛹通过粉碎和丙酮脱脂后,得到蚕蛹蛋白粉.用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶酶解蚕蛹蛋白粉,以DPPH清除能力为指标对酶解过程进行分析,结果表明胃蛋白酶对蚕蛹蛋白有较好的酶解效果.然后通过正交优化胃蛋白酶的酶解条件,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性.     

卵白蛋白源抗菌肽的分离纯化与结构鉴定

以卵白蛋白为原料,采用胃蛋白酶水解制备具有抑菌活性的蛋白肽。通过超滤和Superdex peptide 10/300凝胶色谱分离技术获得高抑菌性组分,以抗菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌性为试验指标,筛选最佳抑菌性组分,再进行反相高效液相色谱分离,测定分离得到的9个组分抑菌活性,发现C3组分的抑菌活性和得率最高,其中大肠杆菌及沙门氏菌抑菌圈直径分别为(19.32±1.45),(18.74±1.27)mm。最后采用高效液相色谱—电喷雾—质谱鉴定抗菌肽的结构,显示氨基酸序列为GlyLeu-Glu-Pro-Ile-Asn-Phe-Gln(GLESINFQ)。该肽经固相合成纯度为95.84%,其抑菌活性与C3组分无显著性差异(P0.05),从而证明卵白蛋白源抗菌肽发挥抑菌活性的成分主要是肽段GLESINFQ。     

小麦蛋白酶解制备活性多肽的研究

分别采用胃蛋白酶、酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解小麦蛋白,实验结果表明,胃蛋白酶作用效果最好。以水解度（DH）和得率为指标,对底物浓度、胃蛋白酶浓度、反应温度、反应时间和反应体系pH值等影响因素进行了单因素试验,在此基础上通过正交试验最终确定了酶解小麦蛋白的最佳条件为：底物浓度10％、E／S7％、温度35℃、时间3h、pH2．0,在此条件下蛋白质水解度为4．62％、产物得率为50．64％。利用SDS．聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小麦蛋白的水解产物,实验结果表明,所有水解产物的分子量均小于7．0kD,其中大多数处于4．1～1．4kD,说明小麦蛋白已被水解成多肽。     

酪蛋白酶解产物中抗菌肽的初步研究

以干酪素酪蛋白为试验原料，采用胰蛋白酶在合适的条件下水解，经过不同分子质量的中空纤维超滤膜超滤，获得具有较强抑菌活性的分子量小于3ku的活性组分．结果表明该肽可抑制多种细菌的生长，尤其是对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有很强的抗菌作用。     

酪蛋白酶解产物中抗菌肽的初步研究

以干酪素酪蛋白为试验原料,采用胰蛋白酶在合适的条件下水解,经过不同分子质量的中空纤维超滤膜超滤,获得具有较强抑菌活性,分子质量<3000u的活性组分。结果表明,该肽可抑制多种细菌的生长,尤其是对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有很强的抗菌作用。     

酶解蛋白制备生物活性肽进展

该文主要对国内外制取活性肽的蛋白质资源、其酶解物功能特性、蛋白酶解工艺和活性肽制取 方法进行分析;由于活性肽独特生理功能,在保健食品和饲料工业有着广泛应用。     

酶法制备汉麻籽蛋白抗氧化肽

采用不同蛋白酶酶解汉麻籽蛋白,确定Alcalase 2.4L碱性蛋白酶是酶解汉麻籽蛋白制备抗氧化肽的优良酶源。通过单因素和响应面回归分析,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解汉麻籽蛋白的优化条件为:底物浓度50 mg/mL、水解时间2 h、温度50℃、加酶量2.2%、pH 9.4。优化酶解条件下,水解度约为20%,10 mg/ mL酶解产物的DPPH自由基清除率为82.65%,显示出较好的抗氧化活性。     

酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离与稳定性研究

目的：研究酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离和稳定性,为其开发应用提供基础数据。方法：超滤分离酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽,比色法测定其抗氧化能力。结果：超滤分级后得到分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽对O2－•、•OH、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的IC50分别为18.85 mg/mL、3.13 mg/mL、35.23 μg/mL。该抗氧化肽经过4 h胃蛋白酶+胰蛋白酶处理前后对DPPH自由基清除率分别为81.05%、82.26%;在pH 4、8条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率分别为98.02%、11.80%（100 μg/mL）;在温度95 ℃条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率为87.11%（100 μg/mL）;用浓度为1.0 mol/L的NaCl处理6 h,相比对照组,对DPPH自由基清除率由51.58%下降到22.68%（60 μg/mL）。结论：超滤后得到的分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的抗氧化能力比酶解原液有一定提高;且在酸性、高温、脱盐处理后对DPPH自由基的清除能力保持较好;胃肠道消化酶对其DPPH自由基清除能力的影响不显著（P＞0.05）。     

食源性免疫活性肽的研究进展

食源性免疫活性肽具有无毒、低过敏性、高安全性等优点,食物源蛋白质来源广,易于取材,而免疫活性肽在人类营养健康和疾病调节中发挥着不可替代的作用,随着科学技术的发展,食源性免疫活性肽的价值日益引起世界各国学者广泛关注,食源性免疫活性肽已被逐步应用到新型功能性食品研发及临床治疗中。本文在分析食源性免疫活性肽与临床及生活应用关系的基础上,从选择食物源蛋白质和制备方法及条件两方面,按照植物源免疫活性肽、动物源免疫活性肽、微生物源免疫活性肽、酶解法制备以及微生物发酵法制备等五个方面,综述了食源性免疫活性肽的研究现状,并对食源性免疫活性肽的研究趋势进行了展望。     

超声辅助酶解大米多肽的制备及其对酵母细胞增殖性影响

采用超声辅助酶解制备大米多肽,并研究其对酵母细胞增殖性的影响。在单因素试验基础上,对超声辅助酶解制备大米多肽进行工艺优化,确定最优超声辅助酶解工艺:超声功率密度51.8 W/L、超声温度50℃、超声时间15 min。在最优工艺条件下,大米多肽得率为70.57%。对酵母细胞培养增殖显示随着多肽浓度的增加而增强,当多肽浓度达到25 g/L后,酵母细胞增殖效果不再增强;另外超声辅助酶解的大米蛋白多肽作为氮源对酵母细胞培养增殖效果要好于常规酶解。     

酶解菜籽粕制备多肽的研究

本试验以菜籽粕为原料,从四种蛋白酶中挑选出中性蛋白酶和碱性蛋白酶对菜籽粕进行同步复合酶解。分别考察了不同的加酶量、酶比、料液比和时间对多肽得率的影响,并利用响应面分析法对混合蛋白酶水解菜籽粕的条件进行了优化。结果表明,在加酶量固定为4500 U/g,温度50℃,pH为8.0,料液比1:8及碱性蛋白酶:中性蛋白酶为3:1条件下酶解6.5 h,可使多肽得率达到54.89%。     

双酶法制备葵花籽肽的工艺研究

利用双酶法水解葵花籽分离蛋白（SPI）制备葵花蛋白肽,探讨各因素对水解度（Degree of hydrolysis,DH）和肽含量的影响,目的在于确定葵花蛋白肽制备的最佳酶解条件。结果表明：最佳酶解条件为底物浓度5.0?10-2 g/mL,温度为53.5 ℃,pH 8.5,按照[E/S]为1.0?10-2 g/g加Alcalase 2.4 L,酶解104 min,调整pH为7.5,按照[E/S]为0.44?10-2 g/g添加Flavourzyme酶解120 min。此工艺得到水解液中肽含量为4.25 mg/mL,DH为30.97%,与单酶法相比,肽含量显著提高。     

鲈鱼(Lateolabrax japonicus)蛋白抗氧化肽的酶解制备及结构鉴定

为了制备具有较强抗氧化活性的鲈鱼蛋白肽段,采用风味蛋白酶、复合蛋白酶、Alcalase 2.4 L、中性蛋白酶及木瓜蛋白酶等5种商业蛋白酶在其最适宜作用条件下水解鲈鱼鱼肉蛋白,比较分析了鲈鱼酶解产物的水解度(DH)、蛋白回收率和抗氧化活性(氧自由基吸收能力和ABTS自由基清除能力),用超高压液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)分离鉴定具有较好抗氧化活性酶解产物的肽段结构,并进一步合成肽段验证其活性。结果发现:鲈鱼蛋白的木瓜蛋白酶酶解产物不仅具有最高的DH和蛋白回收率,分别为25.61%和78.71%,同时具有最强的抗氧化活性,其ORAC值为783.56μmol TE/g,TEAC值为734.55μmol TE/g。采用UPLC-MS/MS分析鉴定木瓜蛋白酶酶解产物,共得到9条肽段,其中3条肽段具有显著抗氧化活性,分别是EYGTVVVFQ,HRDRLCVVQ和GGGAGMLLK,且EYGTVVVFQ抗氧化活性最强,其ORAC值和TEAC值分别为为1.43μmol TE/μmol和2.34μmol TE/μmol。本研究结果为深入研究开发鲈鱼抗氧化肽和海洋蛋白资源提供了更多理论基础。     

酶法水解苦荞麸皮蛋白生产降血压肽

苦荞具有很高的营养价值和保健功能,这已被许多的动物学实验、临床实验、流行病学调查结果所证实,本文试图通过酶法水解苦荞麸皮蛋白研究其降血压作用,从而为降血压功能提供科学的证据。