麻醉深度对中性粒细胞粘附和呼吸爆发的影响

目的观察不同麻醉深度下中性粒细胞（PMN）粘附与呼吸爆发的变化,探讨麻醉深度对PMN炎症反应活性的影响。方法选择腹腔镜全子宫切除术或子宫肌瘤剥除术患者40例,在全凭静脉麻醉下以BIS值为判断麻醉深度的客观指标,随机分为深麻醉组（I组）和浅麻醉组（Ⅱ组）,（n=20）,深麻醉纽术中维持BIS值在31～40,而浅麻醉纽术中BIS值维持在41～50。分别在麻醉诱导前（T1）、术毕（T2）、术后24h（T3）、术后72h（T4）抽取静脉血5ml,应用流式细胞仪检测PMN表面粘附分子D2整合素：CD11b的表达及呼吸爆发（RB）的变化情况。结果两组在术毕（T2）PMNCD11b表达以及呼吸爆发强度均高于麻醉前（T1）水平（组内比较,P〈0．05）,其余各时点差异无统计学意义。组间比较：Ⅰ组和Ⅱ组各时点CD11b表达差异无统计学意义;Ⅰ组在术毕（T2）时的RB弱于Ⅱ组（P〈0．05）,其余各时点差异无统计学意义。结论手术创伤引发机体炎症反应：激活PMN表面粘附分子CD11b表达、增强呼吸爆发。深麻醉状态在一定程度上抑制了PMN功能,减轻了机体炎症反应强度。     

单克隆抗体HIM82对中性粒细胞呼吸爆发的降调节作用

本研究用单抗HIM82对中性粒细胞（PMN）呼吸爆发的早期调控，发现HIM82（30μg／ml）对佛波酯（PMA）激活的PMN产生的O2-、H2O2分别可下调至（44．00±8．9）％（n=8，P＜0．01）和（65．16±15.41）％（n=8，P＜0．01），对因呼吸爆发产生的活性氧物质（reactiveoxygenspecies，ROS）引起质膜中性内肽酶（NEP）的纯化作用（inactivation）[活性下降（43．29±9．41）％，n＝8，P＜0．01]有防护作用[活性恢复至（6648±15.53）％，n=8，P＜0．05]。结果表明该单抗对PMA激发PMN呼吸爆发产生O2-、H2O2有明显的降调节作用，也表明质膜上相应分化抗原分子对PMN功能特别是对激活呼吸爆发的机构有重要影响。     

热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响

目的观察体外诱导热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响。方法18例健康者中性粒细胞每例随机分为三份。其中1份作为对照组,其余2份分别应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液共同孵育,并分别作为热休克组和氯化镉组。于热应激反应诱导后0、2、3、4、6 h,运用PCR技术和流式细胞仪分别测定各组中性粒细胞热休克蛋白(HSP70)的表达及呼吸爆发功能;于热应激反应后24 h,应用荧光染色法和流式细胞仪DNA倍体分析法观察、检测细胞凋亡情况。结果热休克组和氯化镉组热应激诱导后各时段中性粒细胞HSP70表达及24 h的细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01);热休克组和氯化镉组热应激诱导后4 h和6 h时,中性粒细胞活性氧生成明显低于对照组(P<0.01)。结论热应激反应促进中性粒细胞凋亡并减少活性氧释放。提示热应激反应可能参与机体的抗炎作用机制。     

热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响

目的 观察体外诱导热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响.方法 18例健康者中性粒细胞每例随机分为三份.其中1份作为对照组,其余2份分别应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液共同孵育,并分别作为热休克组和氯化镉组.于热应激反应诱导后0、2、3、 4、6 h, 运用PCR技术和流式细胞仪分别测定各组中性粒细胞热休克蛋白(HSP70)的表达及呼吸爆发功能;于热应激反应后24 h,应用荧光染色法和流式细胞仪DNA倍体分析法观察、检测细胞凋亡情况.结果 热休克组和氯化镉组热应激诱导后各时段中性粒细胞HSP70表达及24 h的细胞凋亡率均明显高于对照组(P＜0.01);热休克组和氯化镉组热应激诱导后4 h和6 h时,中性粒细胞活性氧生成明显低于对照组(P＜0.01).结论 热应激反应促进中性粒细胞凋亡并减少活性氧释放.提示热应激反应可能参与机体的抗炎作用机制.     

严重急性呼吸综合征患者中性粒细胞CD11b的变化及意义

目的通过观察严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)患者病程中中性多型核粒细胞(PMN)表面CD11b的表达强度,初步探讨PMN的黏附功能在SARS病程中的变化及意义。方法应用流式细胞仪检测86例SARS患者外周血PMN的CD11b表达强度,根据采血时病程及病情将患者分为3组,44例符合出院标准的患者为出院组,肺部阴影明显吸收的33例为恢复组(其中18例为普通型,15例为重症型),肺部阴影加重且符合重症型的患者9例为重症型进展组。另有25例健康体检者为正常对照组,比较各组CD11b表达强度的差异。恢复组有13例、重症进展组有4例间隔1周复查CD11b,比较2种情况下CD11b的变化趋势。结果恢复组CD11b的表达显著高于正常对照组与出院组(P=0.000,0.003),正常对照组与出院组CD11b表达差异无统计学意义(P=0.066)。重症进展9例患者与恢复组内的15例重症患者及正常组比较,重症进展组CD11b显著高于正常对照组(P=0.000),但与重症恢复组间差异无统计学意义(P=0.997)。恢复组13例间隔1周检测CD11b的结果较复查前明显下降(P=0.000);重症进展组4例间隔1周检测CD11b,其均值较复查前增加。结论处于恢复阶段SARS患者的PMN仍有较高的黏附功能;其动态变化可反映SARS患者病情的发展趋势。     

山里红叶多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用

目的:比较山里红(Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.)叶中多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发的抑制活性。方法:以佛波豆蔻酸乙酯(PMA)为刺激剂,鲁米诺为发光剂,通过化学发光法比较山里红叶中11种主要多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用。结果:11种多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发表现出不同的抑制活性。黄酮类成分活性最强,其次是绿原酸,表儿茶素活性最弱。黄酮类成分既可抑制大鼠中性粒细胞呼吸爆发,又可清除呼吸爆发后产生的自由基;而绿原酸则对呼吸爆发的抑制作用较弱,主要是直接清除呼吸爆发产生的氧自由基;表儿茶素则只能清除呼吸爆发产生的自由基,对呼吸爆发本身没有抑制作用。结论:山里红叶中多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发具有明显的抑制活性,其中主要活性成分为黄酮类化合物。     

热应激反应对中性粒细胞NADPH氧化酶活性及呼吸爆发功能的影响

目的：观察体外诱导热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响。方法：将健康人中性粒细胞分成3份,1份作为对照组,其余2份应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液共同孵育,并分别作为热休克组、氯化镉组。各组（n=18）于热应激反应诱导后0、2、3、4、6h分别测定中性粒细胞热休克蛋白（HSP）70的表达、NADPH氧化酶活性及呼吸爆发功能。结果：热休克与氯化镉均可诱导热应激反应,细胞内HSP70表达增加;热应激反应抑制中性粒细胞NADPH氧化酶活性并降低其呼吸爆发功能。结论：热应激反应通过抑制中性粒细胞NADPH氧化酶活性减少O2^-释放,提示热应激反应可能参与机体的抗炎作用机制。     

分娩方式对新生儿中性粒细胞CD11b表达的影响

目的 探讨分娩方式影响新生儿非特异性免疫功能的分子机理。方法 采用全血流式细胞术和直接免疫荧光染色法，检测３３例正常新生儿中性粒细胞ＣＤ１１ｂ平均荧光强度（ＭＦＩ）和阳性细胞丰分率。结果 自然分娩儿脐静脉血中性粒细胞（ＣＤ１１ｂＭＦＩ均低于择期剖宫产儿脐静脉血４～２２日龄自然分娩儿静脉血和４～１８日龄择期剖宫产儿静脉血，差异有显著性（Ｐ〈０．０１）；四组间ＣＤ１１ｂ阳性细胞百分率差异无显著性（Ｐ〉     

白藜芦醇甙抗血栓作用及对中性粒细胞与血小板之间粘附的影响

目的：研究白藜芦醇甙(Polydatin，PD)的抗血栓形成作用及其作用机制。方法：采用电刺激大鼠颈动脉血栓形成方法评价PD的抗血栓形成作用；运用玫瑰花结粘附试验观察PD对血小板一中性粒细胞之间粘附的影响。结果：PD对电刺激大鼠颈动脉引起的血栓形成具有明显的对抗作用；PD抑制血小板与中性粒细胞间的粘附作用，其半数抑制浓度(medium inhibitory concentration，IC50)为51．9μmol／L。结论：PD有明显的抗血栓形成作用，其机制与阻抑血小板与中性粒细胞间的粘附作用密切相关．     

丙泊酚对肝脏缺血再灌注损伤患者外周血中性粒细胞黏附因子CD11b表达的影响

目的观察丙泊酚对肝脏缺血再灌注损伤患者外周血中性粒细胞黏附因子CD11b表达的影响,探讨丙泊酚对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法选取2013年1月至2015年6月黄冈市中心医院收治的择期行阻断肝门肝脏手术患者110例,根据麻醉方法分为观察组和对照组,每组55例。对照组患者给予咪达唑仑、芬太尼和阿曲库铵麻醉,观察组患者在对照组基础上给予丙泊酚麻醉;分别于肝门开放前及开放10、30 min和开放1、2 h时检测患者外周血CD11b的表达;并于肝门开放前、开放30 min、开放1 h时取正常肝组织,测定细胞间黏附因子-1(ICAM-1)mRNA表达。结果观察组和对照组患者肝门阻断时间分别为(18.13±0.23)、(20.21±1.09)min,术中出血量分别为(824.52±21.52)、(832.61±19.59)m L,2组患者肝门阻断时间及术中出血量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肝门开放前2组患者外周血CD11b表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。肝门开放10、30 min和1、2 h时2组患者外周血CD11b表达显著高于肝门开放前(P<0.05)。肝门开放10、30 min时2组患者外周血CD11b表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。肝门开放1、2 h时观察组患者外周血CD11b表达显著低于对照组(P<0.05)。肝门开放前2组患者肝组织中ICAM-1 mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。肝门开放30 min和1 h时,2组患者肝组织中ICAM-1 mRNA表达均显著高于肝门开放前(P<0.05),且观察组患者肝组织中ICAM-1 mRNA表达显著低于对照组(P<0.05)。结论丙泊酚能有效降低肝脏缺血再灌注损伤患者外周血CD11b的表达,对肝脏缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

PF4对造血干/祖细胞系KGla总粘附性、粘附分子表达及细胞骨架蛋白聚合的作用

目的：研究PF4单用及与IL－3联合应用对造血干／祖细胞系KG1a总粘附性,粘附分子表达及细胞骨架蛋白聚合的影响。方法：采用结晶紫染色,免疫标记流式细胞仪测定,MTT,荧光分光光度等方法。结果：1．单用100ng/ml PF4作用于KG1a细胞时,KG1a细胞总粘附性增长80％,单用20ng/ml,IL-3作用于KG1a细胞时,KG1a细胞总粘附性增长96％,PF4与IL－3联合作用于KG1a细胞时,KG1a细胞总粘附性增长97％。2．PF4作用于KG1a后,CD31,CD44,CD11a,CD11b表达分别增加了21％,22％,17％,18％,较前均有显著性（P＜0．05）,而PF4对KG1a细胞的CD62P,CD62E表达无影响,PF4与IL－3联合作用于KG1a时,CD31,CD44,CD11a,CD11b表达并没出现互相促进作用。3．分别用抗CD31,CD44,CD11a,CD11b等单克隆抗体阻断KG1a粘附分子时,对PF4引起的KG1a粘附性分别下调了39％,43％,34％,38％,4．PF4,IL－3作用KG1a细胞时,能够引起KG1a细胞肌动蛋白的整合。结论：PF4可刺激早期的白血病性造血干／祖细胞系KG1a总粘附性的增加,增加细胞粘附分子表达,增加细胞骨架蛋白的聚合;PF4与IL－3联合作用时,总粘附性,粘附分子表达,细胞骨架蛋白的变化并没出现互相促进作用。     

重组人血小板因子4的表达、纯化及活性鉴定

目的: 用基因工程手段去获取有活性的重组人血小板因子4(rhPF4),为下一步的基础理论研究和临床应用奠定基础.方法: 用PCR手段获得人PF4的编码序列,克隆入质粒pRSET,构建融合表达载体pRSET-PF4,转化大肠杆菌,以IPTG诱导表达融合的人PF4蛋白,经镍柱亲和层析纯化,用SDS-PAGE分析所表达的目的蛋白及纯化后蛋白,用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验(CAM)验证rhPF4的活性.结果: 成功构建了表达载体pRSET-PF4,DNA序列测定结果与预期结果一致.IPTG诱导表达的rhPF4融合蛋白部分以可溶形式存在,占菌体总蛋白量的11%.亲和层析纯化后目的蛋白纯度为84%.CAM实验表明,经纯化获得的rhPF4对鸡胚血管形成具有抑制作用.结论: 成功地获得了具有高度生物学活性的rhPF4蛋白.     

紫癜性肾炎患儿血浆血小板活化因子的检测及其临床意义

目的:探讨紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)患儿中血浆血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)的变化及其临床意义.方法:采用生物学方法分别测定比较25例过敏性紫癜、38例紫癜性肾炎患儿(其中急性期20例,恢复期18例)及20例正常儿童(对照组)的血浆PAF水平.结果:紫癜性肾炎组急性期较恢复期、单纯过敏性紫癜组、正常对照组血浆PAF水平明显升高,差异均有显著性(P＜0.01);紫癜性肾炎组恢复期较正常对照组血浆PAF水平无很大变化,差异无显著性(P＞0.05).结论:PAF参与了过敏性紫癜、紫癜性肾炎的发病过程,可作为紫癜性肾炎急性期的指标之一,反映其病情.     

赤芍总苷对自发性高血压大鼠血小板sCD4OL和炎症因子的干预作用

目的 探讨赤芍总苷(TPG)对自发性高血压大鼠(SHR)血小板功能及血清sCD4OL水平和炎症因子的干预作用.方法 8周龄雄性SHR40只随机分为赤芍高、低剂量组、阿司匹林组、生理盐水对照组,另设Wistar大鼠作为正常对照组,连续灌胃给药8周.实验结束后,取全血检测白细胞计数、血小板计数、平均血小板容积(MPV)、血浆凝血酶原时间、血脂水平;取血清,散射比浊法检测hs-CRP,ELISA法测定可溶性CD40L(sCD40L)和一氧化氮(NO)水平.结果 血清胆固醇及三酰甘油水平、白细胞总数、血浆凝血酶原时间、血小板计数在5组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05);SHR大鼠MPV、sCD40L及hs-CRP水平升高,血清NO水平明显下降,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);TPG高剂量组MPV、sCD40L、hs-CRP水平降低,NO水平升高,与生理盐水对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).相关性分析显示,SHR组MPV与血清hs-CRP、sCD40L水平呈正相关(r=0.36,P＜0.05;r=0.48,P＜0.01);hs-CRP与sCD40L水平呈正相关(r=0.31,P＜0.05).结论 赤芍总苷能降低SHR大鼠sCD40L、hs-CRP水平,提高NO水平,可作为高血压治疗的辅助方法.     

Effects of platelet activating factor antagonist (BN50739) on gut mucosal injury in acute severe pancreatitis in pigs

Objective To study the role of platelet activating factor (PAF) in the pathogenesis of intestinal mucosal injury and endotoxin/bacterial translocation in acute severe pancreatitis (ASP) in pigs.
Methods ASP was induced by intraductal injection of a mixture of sodium taurocholate and trypsin. BN50739, a specific antagonist of PAF, was given 30 min prior to the induction of ASP. Mucosal blood flow, mucosal myeloperoxidase (MPO) and malondialdehyde (MDA) were determined. Intestinal injury was observed microscopically. Portal blood endotoxin levels and the bacterial counts in the portal blood, intestinal lymph nodes and the pancreas were determined.
Results Prior antagonism of PAF by BN50739 reduced intestinal injury, increased intestinal mucosal blood flow, and reduced blood levels of endotoxin and bacterial counts in the portal blood, mesenteric lymph nodes and pancreas.
Conclusions Intestinal mucosal injury developed in ASP. PAF is responsible for the injury. Antagonism of PAF by BN50739 can improve intestinal microcirculation and reduce the severity of intestinal mucosal injury, which may decrease endotoxin/bacterial translocation.     

血小板源性生长因子(PDGF)、血清反应因子(SRF)和波形蛋白在人脑胶质瘤中表达的临床意义

 目的 研究血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)、血清反应因子(serum response factor,SRF)和波形蛋白(vimentin)在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化染色法检测13例正常脑组织和70例人脑胶质瘤组织中PDGF-B、SRF和波形蛋白的表达并分析其临床意义。结果 PDGF B、SRF和波形蛋白在人脑胶质瘤组织中高表达,阳性表达率分别为67.14%、48.57%和81.43%,差异有统计学意义(P<0.05);三者在脑胶质瘤中的表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤大小无关(P>0.05)。随着胶质瘤恶性程度增加,三者表达逐渐上调,其中PDGF B、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达与肿瘤分级相关;相关性分析显示PDGF-B与SRF、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达有相关性(P<0.05)。结论 PDGF B、SRF和波形蛋白在脑胶质瘤的发生、发展中可能起到重要的调节作用,与肿瘤恶性程度具有一定的相关性。     

维吾尔族血小板抗原1～5、15系统基因多态性分析

目的：调查研究与血小板输注无效关系密切的人类血小板抗原（human platelet antigen，HPA）1～5及15系统基因在维吾尔族人群中的遗传多态性；分析民族差异，确定各系统临床意义，从而建立已知基因型血小板供者库。方法：采用聚合酶链一序列特异性引物技术（PCR—SSP）对153例无血缘关系的纯维吾尔族血样进行了HPA基因分型。结果：维吾尔族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0．9118、0．8889、0．5458、0．9935、0．9216、0．4412，维吾尔族HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0．0882、0．1111、0．4542、0．0065、0．0784、0．5588，维吾尔族HPA基因频率与汉族人群相比，HPA-1a，1b、3a、3b、5a、5b基因频率差异具有统计学意义（P〈0．05）；与西藏藏族人群相比，HPA-3a、3b、5b基因频率差异具有统计学意义（P〈O．05）。结论：维吾尔族人群中HPA1～5、15系统12个等位基因都可以检测到。在不同的个体中它们以纯合子或杂合子状态表达，但未检测到纯合子1b或纯合子4b型个体。HPA-1、2、3、4、5、15系统均具有多态性，其中HPA-3、15系统具有高度多态性，这使免疫暴露的机会增加。维吾尔族人群与汉族人群的HPA-1a、1b、3a、3b、5a、5b基因频率存在明显差异，与藏族人群的HPA-3a、3b、5b基因频率存在明显差异。