超临界流体萃取牛蒡子中牛蒡子苷的实验研究

目的：探讨超临界流体萃取牛蒡子中牛蒡子苷的可行性。方法：用HPLC测定牛蒡子苷的含量，采用正交试验优化超临界流体萃取牛蒡子中牛蒡子苷的工艺条件。结果：超临界流体萃取牛蒡子苷的最佳工艺条件为萃取压力40 MPa，萃取温度70 ℃，采用甲醇作为夹带剂，流量0.55 mL·min^-1，静态萃取5 min，动态萃取30 min ，CO₂流量2 L·min^-1。结论：超临界流体具有极性可调的优势，可有效萃取牛蒡子中牛蒡子苷。     

牛蒡子中牛蒡子苷的工业纯化工艺研究

目的:研究从牛蒡子中提取纯化高纯度牛蒡子苷的工业纯化工艺条件.方法:通过工艺研究,考察提取条件对牛蒡子苷提取量的影响,建立大孔树脂梯度洗脱法精制牛蒡子苷提取物的优化工艺,结合DDW-16脱色树脂和重结晶技术,制备牛蒡子苷单体.结果:建立了牛蒡子苷单体的制备工艺,三批次中试的牛蒡子苷平均得率1.4%,平均纯度93.6%....     

牛蒡子苷及牛蒡子苷元的药理作用研究进展

牛蒡子苷及牛蒡子苷元是从牛蒡子中提取的主要活性成分,具有广泛的药理作用.牛蒡子苷及其苷元具有抗肿瘤和神经保护等活性;牛蒡子苷元还具有较强的抗炎及免疫调节活性、抗病毒活性以及对热休克反应的抑制活性.综述近10年来国内外学者对牛蒡子苷及其苷元药理活性的研究概况.     

牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的超声提取工艺研究

目的:研究牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的超声提取工艺。方法:考察超声功率、药材粒径、液固比、提取时间、提取温度以及占空比等因素对牛蒡苷及牛蒡苷元提取率的影响,并采用正交试验设计优化提取工艺。结果:在本试验条件内,超声提取的最优条件如下:药材粒径为80～100目,提取温度为50℃,液固比为14mL/g,超声功率为400W,提取时间为10min。结论:按照优化正交试验确定的最佳工艺条件合理、可靠。     

牛蒡子苷元对子宫内膜癌HEC-1B细胞的增殖抑制作用及机制

目的:探讨牛蒡子苷元(ARG)对子宫内膜癌HEC-1B细胞的增殖抑制作用及机制。方法:HEC-1B细胞分为观察组和对照组,观察组用终浓度为10、20、30、40、60、100μmol/L的ARG干预,对照组用0.5%二甲基亚砜(DMSO)干预。48 h后,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期;蛋白免疫印迹法(WB)检测细胞NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果:10、20、30、40、60、100μmol/L ARG干预48 h,HEC-1B细胞的相对生存率分别为(92.36±0.52)%、(89.59±0.74)%、(78.49±0.68)%、(56.47±0.59)%、(40.12±0.69)%、(37.52±0.58)%,且随着ARG作用浓度的升高,HEC-1B细胞的相对生存率呈逐渐降低趋势,差异有统计学意义(P0.05),干预48 h HEC-1B细胞50%抑制浓度(IC50)为50μmol/L。对照组和观察组(50μmol/L ARG)细胞凋亡率分别为(2.89±0.56)%、(26.58±3.26)%,观察组细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。但观察组细胞周期分布与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。观察组(50μmol/L ARG)细胞p65、p-IκB-α蛋白表达量明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05),2组间IκB-α蛋白表达量差异无统计学意义(P0.05)。结论:ARG可抑制HEC-1B细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制与可能与降低NF-κB通路相关蛋白表达水平,抑制NF-κB通路活化有关。     

HPLC法测定牛蒡中牛蒡子苷、牛蒡子苷元、绿原酸的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定牛蒡中牛蒡子苷、牛蒡子苷元、绿原酸含量的方法,比较3种成分在不同部位以及牛蒡子不同炒制时间的含量。方法:采用Welchrom C_(18)柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱;流速为1.0m L/min;检测波长为280nm;柱温为30℃。结果:3种成分的进样量分别在4.2844~51.4128μg,0.3254~3.9048μg,0.3072~3.6864μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.64%,100.81%,97.92%,RSD值均小于1.5%;牛蒡叶和牛蒡根中几乎没有牛蒡子苷和牛蒡子苷元;牛蒡子所有炒制品与生品比较,三者的总含量均下降,炒制时间从10~40min时,牛蒡子苷、绿原酸的含量下降,牛蒡子苷元的含量增加。结论:该方法简便、准确,精密度、重复性良好,可为牛蒡子质量控制提供依据,不同部位、炒制时间结果可以为牛蒡综合开发提供依据。     

高效液相色谱法测定不同采购地牛蒡子中牛蒡子苷和苷元的含量

目的 :同时测定牛蒡子药材中牛蒡子苷和牛蒡子苷元的含量。方法 :采用高效液相色谱法。HP110 0液相色谱系统四元泵 ,色谱柱 Kromasil ODS(4 .6 mm× 2 5 0 mm,5 μm) ;流动相 :甲醇 -乙腈 -水 -四氢呋喃 10∶ 2 4∶ 6 5∶ 1至 10∶ 39∶ 5 0∶ 1线性梯度 ,检测波长 2 2 0 nm。结果 :牛蒡子苷及牛蒡子苷元的平均回收率分别为 10 2 .4 % ,10 2 .9% ,RSD分别为0 .6 % ,1.3% (n=5 ) ,线性方程分别为 Y=0 .0 0 0 7X- 0 .176 3(r=0 .9999) ,Y=0 .0 0 0 5 X+0 .0 14 1(r=0 .9998)。结论 :该方法快速准确 ,可同时测定牛蒡子药材中牛蒡子苷和牛蒡子苷元的含量 ,可用作牛蒡子药材的质量控制方法。     

星点设计-效应面法优化牛蒡子中牛蒡子苷和牛蒡子苷元提取工艺

目的：优化牛蒡子中双指标成分最佳提取工艺。方法：采用星点设计-效应面法,在3个主要因素作用下,以牛蒡子苷及牛蒡子苷元提取率为评估指标,经过多元线性回归和二项式拟合,利用岭嵴分析法优化牛蒡子苷及其苷元提取工艺。结果：确定牛蒡子苷及牛蒡子苷元最佳提取工艺为：70%乙醇,24倍量,超声提取15 min。结论：上述工艺能够大量提取牛蒡子苷及牛蒡子苷元,为制备牛蒡子苷及其苷元提供试验依据,也为充分开发利用牛蒡资源提供参考。     

牛蒡子苷元对体外C6胶质瘤细胞的抑制效果和凋亡机制

目的:探讨牛蒡子苷元对体外C6胶质瘤细胞的抑制效果和凋亡机制。方法:将牛蒡子苷元作用于C6胶质瘤细胞,采用CCK-8法测定各组细胞的生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验检测TNF-α、IL-2的水平;Western blot检测Bax、Bcl-2、NF-кB蛋白表达水平。结果:与空白组比较,牛蒡子苷元组(2.5～40μmol/L)显著抑制C6胶质瘤细胞生长,诱导肿瘤细胞凋亡,其诱导效应具有浓度依赖性;牛蒡子苷元处理后,细胞中TNF-α、IL-2水平增加;牛蒡子苷元可以显著上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2、NF-кb蛋白表达。结论:牛蒡子苷元可以促进C6胶质瘤细胞凋亡,可能是通过增强TNF-α、IL-2水平及上调Bax蛋白、下调Bcl-2、NF-кB蛋白水平而诱导肿瘤细胞凋亡。     

高效液相色谱法测定牛蒡药材不同部位牛蒡子苷和苷元的含量

目的:对牛蒡药材不同部位牛蒡子苷和牛蒡子苷元含量测定.方法:采用高效液相色谱法的测定.Agilent 1100液相色谱系统四元泵,Agilent色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);甲醇一水二元梯度洗脱,检测波长280nm.结果:牛蒡的根、茎、叶中几乎不含牛蒡子苷和牛蒡子苷元.绒毛和花序中含少量牛蒡子苷和牛蒡子苷元,而牛蒡子在牛蒡中二者含量均高.结论:该方法简便、准确,为更好的开发利用牛蒡提供依据.     

牛蒡子苷在小鼠体内的分布状态及药代动力学研究

目的研究牛蒡子苷在小鼠体内的分布状态及药代动力学。方法采用高效液相色谱法测定牛蒡子苷在小鼠体内血药浓度及在脏器中的分布。结果牛蒡子木脂素口服后5 m in血液中即可检出牛蒡子苷,在小鼠体内呈二室模型分布,其主要动力学参数为A=37.312 5μg.m l-1;B=7.898 5μg.m l-1;α=0.005 5 m in-1;β=0.000 5 m in-1;Kα=0.478 9m in-1;t1/2α=125.008 3 m in;t1/2β=1 426.755 6 m in;K10=0.001 9 m in-1;K21=0.001 4 m in-1;K12=0.002 7 m in-1;Cmax=42.786 3μg.m l-1;Tmax=9.660 0 m in;AUC=22 892.878 9μg.m in.m-l1。同时牛蒡子木脂素在心、肝、肾、脑等脏器也有分布。结论牛蒡子木脂素在体内吸收很快,消除也快。     

掌叶半夏有效提取物对HeLa细胞的作用及机制

目的观察中药掌叶半夏有效提取物(Pinellia extract,PE)对HeLa细胞的作用,并对可能的机制进行初步研究,为其临床用于防治女性宫颈病变提供科学依据。方法用倒置相差显微镜观察细胞生长并摄影,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原(proliferatingcell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达,免疫荧光实验检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达。结果PE对HeLa细胞的生长表现出明显的抑制作用,流式细胞术检测结果显示PE作用后HeLa细胞出现凋亡,且随着作用时间延长,凋亡细胞的比例明显增加;免疫细胞化学实验和免疫荧光实验结果表明:PE作用24 h后HeLa细胞PCNA和Bcl-2蛋白表达均明显减少。结论PE对HeLa细胞有明显的抑制生长和促进凋亡的作用,其促凋亡机制是通过降低PCNA和Bcl-2蛋白表达来实现的,这为进一步研究PE的作用机制以及抗癌新药的研制开发奠定了初步的实验基础。     

美味猕猴桃根提取物的体内抗肿瘤作用研究

目的:研究美味猕猴桃根的乙酸乙酯提取物(Actinidia deliciosaethyl acetate extracts,ADEE)和正丁醇提取物(Actinidia deliciosan-butanol extracts,ADBE)体内抗肿瘤作用。方法:建立S180小鼠肉瘤和H22肝癌腹水瘤模型,观察乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对S180荷瘤小鼠肉瘤生长的抑制作用和对H22肝癌腹水瘤小鼠生命的延长作用,并观察其对胸腺和脾脏免疫器官重量的影响。结果:乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对S180实体瘤的生长有显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01),能够明显延长H22肝癌腹水瘤小鼠生命存活时间(P<0.05,P<0.01),并具有一定的免疫促进作用。结论:美味猕猴桃根的乙酸乙醇提取物和正丁醇提取物在小鼠体内具有明显的抗肿瘤作用。     

中药藤梨根抗肿瘤研究△

藤梨根是一种传统的清热解毒类中药,近几年关于藤梨根抗肿瘤的作用逐渐引起了人们的广泛关注,现将本课题组及国内有关专家对藤梨根的抗肿瘤作用研究近况进行综述,以期为进一步研究开发该药材提供思路。     

粉防己碱联合奈达铂抗人肝癌7402细胞作用的实验研究

目的:探讨粉防己碱与奈达铂联合应用对人肝癌细胞株7402的影响及其作用机制。方法:经不同浓度的粉防己碱和(或)奈达铂处理7402细胞后,采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应;AO/EB荧光染色、流式细胞术观察细胞凋亡及细胞周期变化;免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果:与粉防己碱或奈达铂单药作用相比,粉防己碱与奈达铂联合应用可显著增强人肝癌细胞增殖抑制作用和诱导肝癌细胞凋亡作用,联合用药后细胞周期分布发生改变,S期和G2/M期细胞比例下降,G0/G1期细胞比例上升,癌细胞Bc l-2基因表达明显下降,BAX表达显著增强。结论:粉防己碱与奈达铂联合应用具有显著协同抗肝癌作用,其机制可能与增强诱导肝癌细胞凋亡、细胞周期调控以及凋亡相关基因表达的调控有关。     

狼毒Ⅰ号的抗肿瘤作用研究

目的:探讨狼毒Ⅰ号的抗肿瘤作用机理。方法:采用克隆计数法、MTT 比色法和活细胞计数法,观察狼毒Ⅰ号(简称狼毒)水提物对肿瘤细胞系的抑制作用;通过动物押瘤实验观察其体内抗肿瘤作用。结果:狼毒对肿瘤细胞系 L_(1210)、K_(562)和 Raji 的克隆形成有显著的抑制作用,半数抑制量分别为35.8、26.5和27.9μg/ml;对线粒体四唑氮盐(MTT)的代谢亦有明显抑制作用,其抑制率和剂量呈显著正相关(r=0.9025～0.9801,P<0.05)。对 S180肿瘤细胞的生长抑制率为33.6%～46.2%(P<0.05)。结论:狼毒Ⅰ号能抑制肿瘤细胞的增殖。     

雷公藤红素抗肿瘤作用研究进展

雷公藤红素是中药雷公藤的一个单体成分,在体内外均具有较强的抗肿瘤活性。研究表明雷公藤红素具有抑制肿瘤细胞转移,以及抑制血管内皮细胞生长等作用。作者查阅了近年来国内外的文献,对雷公藤红素的抗肿瘤作用进行综述,为雷公藤红素的抗肿瘤研究提供依据。     

壮药“复方铁草胶囊”抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察壮药"复方铁草胶囊"的抗肿瘤作用。方法:采用肝癌H22移植性实体瘤小鼠为动物模型,以瘤重为评价指标观察复方铁草胶囊体内抗肿瘤作用;采用MTT法测定复方铁草胶囊含药血清对肝癌H22细胞的生长抑制率,研究复方铁草胶囊的体外抗肿瘤作用。结果:复方铁草胶囊20,10,5g/kg剂量组均能明显抑制肝癌H22移植性实体瘤生长,与空白对照组比较有显著性差异(P0.05或P0.01);复方铁草胶囊20%含药血清组H22细胞的生长抑制率为29.51%,与空白对照组比较,差异有显著性意义(P0.01)。结论:复方铁草胶囊对肝癌H22细胞株体内外生长均具有明显抑制作用。     

荷包牡丹碱诱导人肺腺癌细胞A549凋亡及其机制初探

 目的 探讨荷包牡丹碱对人肺腺癌细胞A549的增殖抑制作用并对其作用机制进行研究。方法 MTT比色法检测荷包牡丹碱在不同浓度及不同时间对人肺癌细胞A549的增殖抑制作用。利用TUNEL法探讨荷包牡丹碱诱导人肺腺癌细胞A549的凋亡效果;流式细胞术（FMC）测定荷包牡丹碱对A549肿瘤细胞周期的分布;比色法测定荷包牡丹碱对半胱天冬酶（caspase）-3蛋白活性的影响。结果 荷包牡丹碱对人肺腺癌细胞A549增殖抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强;荷包牡丹碱对A549肿瘤细胞具有明显的凋亡效应;荷包牡丹碱与A549肿瘤细胞作用后,发生S期阻滞（P<0.05);荷包牡丹碱促使caspase-3蛋白活化(P<0.05)。结论 荷包牡丹碱能有效抑制人肺腺癌细胞A549的生长,使细胞周期阻滞在S期,进一步诱导其凋亡,并使caspase-3蛋白活化。caspase-3蛋白的激活可能在荷包牡丹碱诱导A549细胞凋亡过程中起重要作用。     

半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用

目的观察并比较半夏蛋白对体外培养的人肝癌细胞Bel-7402的生长抑制作用。方法应用流式细胞技术,检测半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用,并观察了其诱导凋亡作用的量-效关系。结果60%硫酸铵沉淀蛋白没有明显诱导Bel-7402细胞凋亡的作用,而30%硫酸铵沉淀蛋白有诱导Bel-7402细胞凋亡的作用。30%沉淀进一步分离结果显示,只有0.1 mol/L NaCl洗脱峰有一定诱导Bel-7402细胞凋亡的作用。结论半夏蛋白有一定的诱导Bel-7402细胞凋亡作用,其主要成分可能存在于总有机酸部位。