原位分子杂交检测肺癌组织MRP基因表达及意义

目的　研究多药耐药性相关蛋白基因 MRP基因 (multi drugresistanceassociatedproteingene ,MRPgene)对肺癌患者预后的影响。方法　应用地高辛抗体标记探针原位分子杂交结合免疫组化技术 ,检测 47例非小细胞肺癌 (NSCLC)根治术后石蜡组织标本中肺癌细胞MRP基因mRNA表达 ,并回顾性随访。结果　 47例组织标本中 ,肺癌细胞均有不同程度MRP基因mRNA过度表达 ,其表达水平与患者术后生存期、化疗疗效、复发及转移密切相关 ,与病理类型、肿瘤大小、淋巴结转移、病理分期、癌细胞分化程度、年龄、性别无明显相关性。结论　MRP基因与肺癌患者预后有密切相关性 ,检测MRP基因mRNA表达水平可作为预测肺癌患者预后、确定化疗方案的手段之一。     

共刺激分子在人胃癌组织中的原位表达及意义

肿瘤免疫主要由细胞免疫介导,肿瘤细胞具有免疫原性并能引起机体的抗肿瘤免疫应答,已是事实。越来越多的证据表明,淋巴细胞的特异性激活需要双信号刺激,一个是T细胞受体与同MHC结合的抗原肽复合物相互作用产生的特异性信号,另一个是共刺激分子同其配体结合产生的第二信号,即共刺激信号,协同淋巴细胞的激活。如果缺乏第二信号,可导致T淋巴细胞耐受     

肺癌患者外周血中MDR-1及MRP基因在化疗前后的表达及意义

目的 探讨肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞中多药耐药基因(MDR-1)和多药耐药相关蛋白(MRP)的表达及意义。方法 分别于化疗开始前及化疗周期结束后第3周收集肺癌患者外周血标本。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测39例肺癌患者外周血中MDR-1mRNA和MRP mRNA的表达情况,并与20例健康体检者进行对比。结果 病例组化疗前MDR-1mRNA和MRP mRNA的阳性表达率与健康对照组相比差异没有统计学意义(P＞0.05);各种病理类型的肺癌患者外周血MDR-1mRNA和MRP mRNA的阳性表达水平随着化疗次数的增多而增强,其中小细胞肺癌患者化疗后MDR-1 mRNA和MRP mRNA的表达水平均高于化疗前,差异具有统计学意义。结论 化疗可诱导肺癌患者外周血淋巴细胞MDR-1mRNA和MRP mRNA的表达水平增强;应用外周血评估MDR-1mRNA和MRP mRNA的方法简单可靠,创伤性小,可能成为预估肺癌患者化疗疗效的有效指标。     

耐药相关基因MDR1、MRP、LRP及其表达产物P-gp、MRP、LRP在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的：研究探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织和癌旁组织中多药耐药基因1（muhidrug resistance genel,MDR1）、多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-related proteins,MRP）、肺耐药蛋白（lung resistance protein,LRP）mRNA及其相应蛋白P—gP、MRP、LRP的表达情况及临床意义。方法：运用聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学法（IHC）检测43例NSCLC组织及癌旁组织标本中耐药基因MDR1、MRP、LRPmRNA及其蛋白P-gP、MRP、LRP的表达水平。结果：MDR1、MRP和LRP mRNA3种基因在43例肿瘤组织中的表达率分别为79．06％（34／43）、65．17％（28／43）和86．05％（37／43）,癌旁组织中的表达率分别为20．00％（3／15）、13．33％（2／15）和13．33％（2／15）;P—gP、MRP和LRP3种耐药蛋白在肺癌组织中的表达率分别为74．42％（32／43）、67．44％（29／43）和88．37％（38／43）,癌旁组织中的表达率分别为13．33％（2／15）、20．00％（3／15）和6．67％（1／15）,上述3种基因及其蛋白在肺癌组织与癌旁组织的表达差异有显著性（P〈0．05）。肺癌组织中既存在耐药基因MDR1、MRP和LRP的共表达,也存在耐药蛋白P-gP、MRP和LRP的共表达,3种基因与其相应蛋白表达密切相关。肺腺癌组织中MDR1及其蛋白P-gP、LRP mRNA表达率较高,与其它病理类型相比差异有显著性（P〈0．05）,MRP mRNA及其蛋白MRP表达与肺癌病理类型、临床分期和组织学分级无关（P〉0．05）。结论：NSCLC存在着广泛的原发性多药耐药现象,耐药基因MDR1、MRP和LRPmRNA及其相应蛋白参与了肺癌多药耐药的形成,检测多药耐药基因可为指导临床用药提供一定的理论依据及策略。     

非小细胞肺癌组织中HIF-1α和MRP1、GST-π基因的表达及意义

目的:探讨低氧诱导因子-1(HIF-1α)和多药耐药相关蛋白(MRP1)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)在肺癌组织中的表达水平以及与肺癌生物学特性的关系。方法:采用PT-PCR、凝胶电泳半定量方法检测36例非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)组织中HIF-1αmRNA、MRP1 mRNA和GST-πmRNA的表达,并采用SAS 6.12统计软件分析它们在不同TNM分期中的表达情况。结果:随着TNM分期的增高,HIF-1αmRNA的表达显著性增高(P<0.01),MRP1 mRNA和GST-πmRNA表达均有增高趋势,但无统计学意义(P>0.05);三者在有淋巴结转移组和有远处转移组中的表达均明显高于无淋巴结转移组和无远处转移组(P<0.01,P<0.05)。HIF-1αmRNA的表达与MRP1 mRNA和GST-πmRNA的表达呈正相关。结论:HIF-1α,MRP-1和GST-π基因表达的增高可能与肿瘤组织的恶化有关。     

spp1基因在肺癌组织中表达的定量检测及其意义

目的:探讨定量检测骨桥蛋白编码基因在原发性肺癌中的表达及其意义。方法: 制备24例肺癌患者癌及癌周正常肺组织中总RNA，采用RTPCR及实时荧光定量PCR技术分析spp1基因的mRNA表达水平。结果:在所有24例肺癌中肺癌组织的骨桥蛋白表达高于相邻的癌周正常肺组织，并且全部在6倍以上，其中7例在100倍以上。结论: 肺癌组织中骨桥蛋白的表达明显升高，是肺癌诊断的重要标志物。     

脆性组氨酸三联体基因及p53 基因在肺癌组织中的表达及意义

 目的 探讨脆性组氨酸三联体基因（FHIT）在肺癌组织中的表达及其与肺癌分化程度、组织学分类、p53表达的关系。方法 利用组织芯片，运用免疫组织化学技术，对110例肺癌及25例良性病变的肺组织标本分别进行FHIT、p53蛋白检测。结果 ①良性病变肺组织FHIT异常表达率为16％，而肺癌组织中FHIT异常表达率为85．5％。肺癌组织与良性病变肺组织相比，差异有极显著性（P〈0．01）；分化程度不同肺癌组织，FHIT表达差异有极显著性（P〈0．01），且FHIT基因表达与肺癌组织分化程度正相关（P〈0．01）；组织学分类不同的肺癌组织，FHIT基因表达差异无统计学意义（P〉0．05）；②p53阴性表达组和阳性表达组，FHIT的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；p53异常表达率为53．6％，FHIT异常表达率为85．4％，两者比较差异有极显著性（P〈0．01）。p53异常表达与FHIT异常表达共同检出率为93．6％。结论 ①FHIT蛋白可能成为肺癌早期诊断的更有效分子标记物，p53蛋白与FHIT蛋白的联合检测有助于提高肺癌的检出率；②FHIT蛋白影响肺肿瘤细胞的分化方向，为临床药物开发提供新思路。     

非小细胞肺癌组织中MRP1 mRNA和GST-π mRNA的表达及意义

目的：探讨多药耐药相关蛋白MRP1和谷胱甘肽-S-转移酶（GST-π）在非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中的表达水平以及与肺癌生物学特性的关系。方法：RT-PCR、凝胶电泳-积分光密度IOD比值半定量法检测MRP1 mRNA和GST-π mRNA在36例NSCLC组织和12例癌旁组织中的表达,并分析它们在TNM分期中的表达情况。结果：MRP1和GST-π在NSCLC（83.3%、88.9%）和癌旁组织中（75.0%、83.3%）表达阳性率均差异无统计学意义,P值分别为0.135和0.413;MRP1 mRNA和GST-π mRNA在NSCLC组织中的表达（IOD比值分别为0.7403、1.2679）明显高于在癌旁组织（IOD比值分别为0.2013、0.4217）,均P=0.000;二者在各T分期中的表达均差异无统计学意义,P值均〉0.05;二者在有淋巴结转移组（IOD比值分别为0.8496、1.3874）和有远端转移组中的表达（IOD比值分别为0.9583、1.5790）均明显高于无淋巴结转移组（IOD比值=分别为0.6591、1.0571）和无远处转移组（IOD比值分别为0.6553、1.1109）,P值分别为0.047、0.021、0.042和0.015。结论：对MRP1和GST-π mRNA的联合检测有助于临床预测预后及指导化疗的个体化用药。     

抑癌基因p16蛋白在肺癌组织中的表达及意义

目的：检测抑癌基因ｐ１６蛋白在７５例肺癌组织中的表达,并与癌旁组织和正常肺组织对比。结合肺癌的病理特征及预后进行分析,探讨ｐ１６基因与肺癌发生、发展的关系。方法：应用免疫组化ＳＡＢＣ法。结果：正常肺组织、癌旁组织和肺癌组织中ｐ１６蛋白阳性表达率分别为９１．７％、７５．０％和４９．３％,不同类型肺癌组织中ｐ１６蛋白的表达不同（Ｐ〈０．０５）;随着肿瘤分化程度的降低,ｐ１６蛋白的表达下降（Ｐ〈０．０５     

多药耐药相关蛋白基因在肺癌组织中的表达及意义

目的探讨多药耐药相关蛋白基因（MRP1）、肺耐药蛋白（LRP）基因和增值细胞抗原Ki-67在肺癌中的表达及相关性。方法应用免疫组织化学方法,检测110例肺癌组织和22例其他恶性肿瘤（食管癌、胃癌、膀胱癌等）组织中LRP、MRP1及Ki-67的表达情况,并以其中的23例癌旁组织作比较。结果非小细胞肺癌（NSCLC）中MRP1、LRP表达水平显著高于癌旁组织（P〈0．05）,小细胞肺癌（SCLC）与癌旁组织无显著性差异（P〉0．05）。其他恶性肿瘤组织中其表达水平显著高于癌旁组织（P〈0．05）。Ki-67在各种肿瘤组织中均呈阳性表达,与LRP、MRP,表达无相关性。结论NSCLC存在广泛的原发性多药耐药现象,耐药基因LRP、MRP。参与了肺癌多药耐药的形成,LRP的表达率最高,可作为一项独立的预警指标,耐药与肿瘤细胞增殖无明显相关性。     

原位分子杂交的基本原理和方法——附肝组织HBV-DNA检测技术

应用biotin标记探针的原位分子杂交技术(insitu hybridization)检测石蜡切片(或细胞涂片)的病毒感染疾病,已受到广泛的重视。原位分子杂交具有灵敏度高、专一性强等特点,而用biotin标记的探针与同位素标记探针比较,更具有性质稳定、无需放射防护、测定时间短等优点,是现今检测病毒感染的新技术。     

抗凋亡基因bcl—2在肺癌组织中的表达及意义

ｂｃｌ－２基因是近年发现的第三类肿瘤基因，是一种调控细胞死亡的“存活基因”，可抑制编程性细胞死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｄｅａｔｈ，ＰＣＤ），又称细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），故称之为抗凋亡基因。细胞凋亡发生障碍，可导致细胞堆积，而形成肿瘤。本...     

云锡矿工肺癌和其他地区肺癌c—fos原位分子杂交检测的比较研究

目的研究云锡矿工肺癌与ｃ┐ｆｏｓ癌基因关系。方法用原位杂交方法检测２０例云锡矿工肺癌（Ｍ组），２０例非云锡地区非矿工肺癌（ＮＭ组）以及１０例死于非肺部疾病患者的尸解肺组织（Ｃ组）中ｃ┐ｆｏｓ癌基因的过度表达情况。结果ｃ┐ｆｏｓ癌基因的过度表达Ｍ组５／２０（２５％），ＮＭ组１２／２０（６０％）和Ｃ组１／１０（１０％）。结论ｃ┐ｆｏｓ癌基因的过度表达和非云锡肺癌的发生有关，而与云锡肺癌发生的直接关系不明显，因此，云锡矿工肺癌与癌基因关系具有特殊性。癌旁增生上皮ｃ┐ｆｏｓ表达常呈阳性反应。     

肺癌患者MDR1和MRP基因共同表达的研究

目的检测60例肺癌组织,10例正常肺组织中MDR4和MRP基因表达水平与临床化疗疗效的关系.方法采用RT-PCR方法.结果MDR1检出率:正常肺组织10%(1/10),肺癌组织30%(18/60),其中,鳞癌6.7%(4/60),腺癌20%(12/60),大细胞癌3.3%(2/60);MRP检出率:正常肺组织0%(0/10),肺癌组织73.3%(44/60),SCLC3.3%(2/60),鳞癌36.7%(22/60),腺癌26.7%(16/60),大细胞癌6.7%(4/60).MDR1和MRP基因虽过度表达,二者并无显著相关性(P＞0.05),且与病理分型及TNM分期均无明显相关性(P＞0.05);肿瘤组织与正常组织的MRP基因表达具有极显著性差异(P＜0.05),但MRP的表达与既往化疗无关,术前化疗组MDR1基因表达75%(6/8),略高于未经化疗组23%(12/52),虽无统计学意义(P＞0.005),但MDR1似有增高趋势;联合检测MDR1和MRP基因表达,能提高体外耐药敏感性符合率(83%).结论(1)肺癌MDR1是多种耐药机制共同作用的结果;(2)MRP基因表达似有分布规律:鳞癌＞腺癌＞大细胞癌＞SCLC;MDR1则为腺癌＞鳞癌＞大细胞癌＞SCLC;(3)MDR1可能与获得性耐药有关,而MRP却与自然耐药性有关;(4)联合检测MDR1和MRP基因表达,能更准确地预测化疗效果,为临床化疗方案的个体化设计提供理论依据.     

p53基因蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

为了探索ｐ５３蛋白与肺癌的组织学类型、淋巴结转移等因素的关系。用免疫组织化学方法检测了５４例肺癌ｐ５３蛋白的表达。结果表明，阳性表达率为肺鳞癌２７．３％（６／２２），腺癌３６．８％（８／２０），腺鳞癌１００％（１／１），小细胞癌７５％（９／１２）。随着分化程度的不同表达率亦不同，高中低分化肺癌分别为３５．７％、４２．９％、４５．５％。淋巴结有无转移的患者ｐ５３蛋白表达率分别为４８．４％和３４．８％，各组之间的差异较显著。提示：ｐ５３蛋白表达可以反应肺癌细胞的活性，为研究肺癌的生物学行为提供了一个良好的标志物。     

耐药相关蛋白P-gp、MRP、LRP在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

Objective： To explore the expression and significance of the multidrug resistance-related proteins P-glycoprotein （P-gp）, multidrug resistance-related protein （MRP）, lung resistance protein （LRP）in human non-small cell lung cancer （NSCLC） tissues and paratumor tissues. Methods： Immunohistochemistry （IHC） was used to examine the expression level of proteins P-gp, MRP and LRP in 43 samples of NSCLC and 15 samples of paratumor tissues. Results： The expression rates of P-gp, MRP and LRP in 43 tumor tissues were 74.42% （32/43）, 67.44% （29/43） and 88.37% （38/43）, respectively, while in 15 paratumor tissues were 13.33% （2/15）, 20.00% （3/15） and 6.67% （1/15）, respectively. There was significant difference in the expression of proteins （P-gp, MRP and LRP） between lung cancer tissues and paratumor tissues （P 〈 0.05）. The expression of proteins P-gp, LRP in lung adenocarcinoma were higher than that in other pathological carcinomas （P 〈 0.05）. The expression of protein MRP was not related to pathological type, clinical stage and classification of histodifferentiation （P 〉 0.05）. Conclusion： Multidrug resistance is more common in NSCLC. The proteins of P-gp, MRP and LRP participated in the formation of multidrug resistance in lung cancer. Detection of multidrug resistance-related proteins in lung cancer tissues may be useful to choice drugs.     

非小细胞肺癌细胞MRP基因表达及意义

研究多药耐药性相关蛋白基因－ＭＲＰ基因（ｍｕｌｔｉ－ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｇｅｎｅ ,ＭＲＰ ｇｅｎｅ）对非小细胞肺癌（ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）患者预后的影响。方法应用地高辛标记探针原位发子杂交结合免疫组化技术检测４７例ＮＳＣＬＣ患得根治术后石蜡组织标本中癌细胞ＭＲＰ基因ｍＲＮＡ＃牵? ＤＰ ＣＦ ＫＫＨＮＦ     

P—gp、MRP、p53蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

目的　探讨P gp、MRP、p5 3在肺癌中可能的临床意义及相互间的关系。方法　采用免疫组化法(IHC)检测 3 1例石蜡包埋的肺癌及相应远离肿瘤部位的正常肺组织中P gp、MRP、p5 3的表达情况 ,同时用流式细胞术 (FCM)检测其中 2 9例冻存的肺癌组织中P gp、p5 3水平 ,并与IHC结果比较。结果　IHC方法显示P gp、MRP、p5 3在正常肺组织中未见表达 ,在肺癌组织中阳性率分别为 61.3 %、5 4.8%、71.0 %。P gp与MRP表达有相关性 (P <0 .0 1) ,但P gp与p5 3、MRP与p5 3之间均无显著相关性。P gp和MRP阳性表达集中在NSCLC ,阳性率分别为 76%和 68% ,且肺癌细胞分化程度越低 ,P gp阳性率越低 (P <0 .0 5 )。p5 3阳性率在鳞癌 ( 10 0 % )明显高于腺癌 ( 3 3 .3 % ) (P <0 .0 1) ,在吸烟患者 ( 88.9% )明显高于不吸烟患者 ( 4 6.2 % ) (P <0 .0 5 ) ,而与各项病理特征无关。采用FCM测得P gp、p5 3阳性率分别为 65 .5 %和 79.3 % ,两种方法的符合率在P gp、p5 3分别为 62 .1%和 75 .9%。结论　P gp、MRP过表达在肺癌中可能具有一定的协同作用 ,而与p5 3异常无关。     

双糖残基在肺癌组织中的表达及意义

目的　探讨双糖残基[βD半乳糖(13)αN酰氨基半乳糖]于肺癌组织学上的表达及应用价值。方法　选取手术切除肺标本,其中癌变肺109例,非癌性病变肺87例,常规甲醛固定石蜡包埋。双糖残基用半乳糖氧化酶-Schiff试剂方法显示。结果　癌变肺支气管粘膜下腺体的双糖残基阳性率为71.76%(61/85),非癌性病变肺支气管粘膜下腺体的双糖残基阳性率为71.83%(51/71),两者间差异无显著性(χ2=0.0026,P>0.9)。癌组织检测94例,其中腺癌阳性率为36.11%(13/36),鳞癌、未分化癌、类癌等均阴性。结论　双糖残基在肺良性及恶性病变的支气管粘膜下腺体皆有表达,在肺癌组织中也仅见部分腺癌表达,其作为肺良恶性疾病的鉴定指标尚缺乏依据     

双糖残基在肺癌组织中的表达及意义

目的 探讨双残基「β－Ｄ－半乳糖（１→３）－α－Ｎ－酰氨基半乳糖」于癌组织学上的表达及价值。方法 选取手术切除肺标本,其中癌变肺１０９例,非癌性病变肺８７例,常规甲醛固定石蜡包埋。双糖残基用半乳糖氧化酶－Ｓｃｈｉｆｆ试剂方法显示。结果 癌变肺支气管粘膜下腺体的双糖残基阳性率为７１．７６％,非癌性病变肺支气管膜下腺体的双糖残基阳笥率为７１．８３％,两者间差异无显著性。癌组织检测９４例,其中腺癌阳性率