丹参素对CCl4中毒肝细胞及NIH3T3细胞增殖及胶原合成的影响

丹参可改善肝功能及肝纤维化,但其成份多达３０余种［１］,具体何种成份起主要作用尚不十分清楚,基于此,我们以大鼠肝细胞及小鼠胚胎纤维母细胞为模型研究了丹参水溶性成份———丹参素的上述作用。１材料与方法１１试验药物丹参素为上海医科大学天然药物化学研究所...     

大蒜素对NIH3T3细胞增殖及胶原合成的影响

目的 研究大蒜素对NIH3T3细胞生长增殖和Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗纤维化作用机理。方法 大蒜素加入NIH3T3细胞培养液,以丹参为对照药物,测定H^3-thymidineDNA掺入量;碱消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸含量,荧光免疫染色方法检测NIH3T3细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达一结果大蒜素在0．2～5μg／mL剂量范围内剂量依赖的抑制NIH3T3细胞生长和增殖;药物作用后,细胞培养液中的羟脯氨酸含量减少,Ⅰ型胶原蛋白的表达减少。结论 大蒜素对NIH3T3细胞生长增殖有抑制作用,减少细胞胶原的合成,减少Ⅰ型胶原的表达,可能具有抗纤维化作用。     

紫杉醇对前列腺癌PC-3细胞作用的实验研究

目的：观察紫杉醇对前列腺癌细胞系PC-3的体外作用。方法：应用光镜形态学，MTT法，流式细胞仪和免疫细胞化学法观察了紫杉醇在体外对前列腺癌细胞系PC--3的作用和对细胞DNA含量及Cyclin D1表达的影响。结果：紫杉醇对前列腺癌细胞系PC-3同时可以下调Cyclin Dl的表达(P＜O．05)，并将细胞周期阻滞于G2／M期(P＜O．05)同时可以下调Cyclin D1的表达(P＜O．05)。结论：紫杉醇对前列腺癌细胞系PC-3有明显的生长抑制和诱导凋亡作用，显示了紫杉醇用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性。     

香菊片对NIH小鼠抗炎、镇痛作用的实验研究

目的:研究香菊片的抗炎、镇痛作用。方法:通过观察香菊片对棉球肉芽肿、耳廓肿胀和毛细血管通透性的影响,研究其抗炎作用;通过热板法和扭体法实验,观察其镇痛作用。结果:香菊片对慢性炎症大鼠棉球肉芽肿有抗炎作用;对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高等急性炎症反应也具有抗炎作用;对热板法和扭体法镇痛实验均显示了镇痛作用。结论:香菊片有抗炎、镇痛作用。     

华蟾素诱导白血病细胞凋亡和线粒体跨膜电位下降的实验研究

目的:观察华蟾素对白血病细胞的凋亡诱导作用并探讨其机制。方法:用 MTT 法观察华蟾素对 HL-60细胞的生长抑制作用,通过形态学方法、DNA 电泳、流式细胞仪技术、Annexin V 标记法检测华蟾素作用后 HL-60细胞的凋亡发生情况,通过罗丹明染色检测华蟾素作用后 HL-60细胞线粒体跨膜电位的变化。结果:华蟾素作用后 HL-60细胞线粒体跨膜电位下降并发生调亡,在0.0625～0.5 μg/ml 的浓度范围内具有一定的量效关系。结论:华蟾素对白血病细胞具有凋亡诱导作用,其机制与破坏线粒体的功能有关。     

桂皮醛对NIH3T3细胞周期及相关蛋白表达的影响

目的：观察肉桂主要成分桂皮醛对小鼠成纤维瘤细胞株NIH3T3细胞周期及相关蛋白的影响。方法：采用流式细胞仪检测桂皮醛(5.5 ng ·mL^-1)对NIH3T3细胞周期分布的影响；用免疫细胞化学法检测桂皮醛对NIH3T3细胞的细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和增殖细胞核抗 原(PCNA)蛋白表达的影响。结果：流式细胞仪检测显示,桂皮醛作用24 h后NIH3T3细胞S期比例上升了3%(P<0.05),G₂/M期比 例无明显升高,细胞增殖指数(PrI)增加了3.5%(P<0.01)。经桂皮醛刺激后,NIH3T3细胞Cyclin D1和PCNA蛋白表达量明显增加,与对照组 比较,有极显著差异(P<0.01)。结论：桂皮醛可推动NIH3T3细胞周期向前进展,这种正向调控作用与桂皮醛能促进Cyclin D1和PCNA蛋白 表达有关。     

细胞电穿孔联合艾迪注射液对小鼠宫颈癌U14作用的实验研究

目的观察细胞电穿孔联合艾迪注射液对小鼠宫颈癌U14生长的抑制作用。方法取雌性昆明小鼠58只,建立U14宫颈癌皮下移植瘤模型,然后随机分为对照组(C组)、艾迪注射液治疗组(Ai组)、电穿孔处理组(E组)、电穿孔+艾迪注射液低剂量治疗组(EAL组)、电穿孔+艾迪注射液高剂量治疗组(EAH组)。比较治疗后各组荷瘤鼠体质量和肿瘤的质量,计算各组抑瘤率。光学显微镜下观察肿瘤组织的病理变化,用TUENL细胞凋亡试剂盒检测各组肿瘤细胞的凋亡情况。结果 Ai组、E组、EAL组和EAH组平均瘤质量明显低于对照组,能显著抑制肿瘤生长。EAH组的平均瘤质量显著低于E组和Ai组。Ai组、E组、EAL组和EAH组的抑瘤率分别为26.8%,25.6%,51.9%和59.4%。结论电穿孔联合艾迪注射液对U14移植肿瘤起到很大的杀伤和抑制生长的作用。     

细胞电穿孔联合艾迪注射液对小鼠宫颈癌U14作用的实验研究

目的观察细胞电穿孔联合艾迪注射液对小鼠宫颈癌U14生长的抑制作用。方法取雌性昆明小鼠58只,建立U14宫颈癌皮下移植瘤模型,然后随机分为对照组（C组）、艾迪注射液治疗组（Ai组）、电穿孔处理组（E组）、电穿孔＋艾迪注射液低剂量治疗组（EAL组）、电穿孔＋艾迪注射液高剂量治疗组（EAH组）。比较治疗后各组荷瘤鼠体质量和肿瘤的质量,计算各组抑瘤率。光学显微镜下观察肿瘤组织的病理变化,用TUENL细胞凋亡试剂盒检测各组肿瘤细胞的凋亡情况。结果 Ai组、E组、EAL组和EAH组平均瘤质量明显低于对照组,能显著抑制肿瘤生长。EAH组的平均瘤质量显著低于E组和Ai组。Ai组、E组、EAL组和EAH组的抑瘤率分别为26.8%,25.6%,51.9%和59.4%。结论电穿孔联合艾迪注射液对U14移植肿瘤起到很大的杀伤和抑制生长的作用。     

华蟾素诱导多发性骨髓瘤细胞RPMI8226凋亡的实验研究

目的：观察华蟾素对多发性骨髓瘤细胞（MM）RPI88226抑制增殖和凋亡作用。方法：应用MTT法,检测华蟾素对多发性骨髓瘤细胞株RPI88226增殖的影响。通过Hochest33258染色、流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：华蟾素明显抑制RPI88226细胞的增殖,与空白对照组相比,差别有统计学意义（P〈0．05）。华蟾素作用RPI88226细胞增殖24h的半数抑制浓度（IC50）分别为0．152μg／ml。华蟾素以0．15μg／ml及0．3μg／ml作用于RPI8822624h后细胞形态改变,可见明显的凋亡小体出现。AnnexinV-PI双标记法流式细胞仪分析结果显示,RPI88226细胞0．3μg／ml华蟾素作用6、12、24h后,早期凋亡细胞百分数分别为7．23％、12．16％、28．04％,明显高于空白对照组4．78％。结论：华蟾素对MM细胞株RPI88226有生长抑制作用,可能是通过诱导其发生凋亡而起作用。     

华蟾素诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的实验研究

目的:探讨华蟾素诱导人肝癌细胞凋亡及作用机理。方法:采用 MTT 法、AO/EB 荧光染色法、流式细胞仪及免疫组化等方法,观察华蟾素对人肝癌 SMMC-7721细胞株的作用。结果:华蟾素可显著抑制SMMC-7721细胞的生长;经药物处理后,AO/EB 染色时,肝癌细胞在显微镜下呈现出典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪上可见华蟾素能将细胞周期阻断在 S 期;对抗凋亡基因 bcl-2表达有一定的抑制作用。结论:华蟾素能抑制人肝癌 SMMC-7721细胞生长;能诱导人肝癌细胞凋亡;其诱导细胞凋亡的机理与其能阻断细胞周期、抑制 bcl-2基因表达有关。     

青蒿琥酯对T细胞淋巴瘤细胞株凋亡诱导作用的实验研究

目的：探讨青蒿琥酯对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat细胞的凋亡诱导作用及其可能的作用机制。方法：采用Mrrll比色法检测青蒿琥酯对Jurkat细胞体外生长的抑制作用;细胞形态学、DNA琼脂糖凝胶电泳、DNA的PI染色等观察和检测Jurkat细胞的凋亡;Western-blot法检测Jurkat细胞凋亡过程中Bcl-2、Bax、Caspase-8和ICAD蛋白表达水平的变化。结果：青蒿琥酯对Jurkat细胞的生长有明显的抑制作用,且生长抑制率与药物作用浓度呈正相关（P〈0．01）,呈浓度依赖性;其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关;随药物浓度的增高Bcl-2和ICAD蛋白表达量逐渐下降,而Bax蛋白表达上调,Caspase-8蛋白出现明显的剪切激活带。结论：青蒿琥酯具有诱导Jurkat细胞凋亡作用,既能通过线粒体途径又能通过外源性途径诱导Jurkat细胞凋亡。     

中药天花粉对免疫调节T细胞作用的研究

本研究用流式细胞仪测定了天花粉蛋白对健康人组及系统性红斑狼疮患者免疫调节Ｔ细胞（Ｔ８＋，２Ｈ４＋，４Ｂ４＋）数量的影响，同时观察了不同浓度的天花粉蛋白对人淋巴细胞ＤＮＡ合成的作用。研究发现天粉蛋白可使Ｔ８＋细胞减少，同时增加４Ｂ４＋细胞数，促进淋巴细胞ＤＮＡ合成。提示天花粉蛋白可通过改变不同功能的免疫调节Ｔ细胞的比例，起到增强体液免疫功能的作用。     

华蟾素对卵巢癌3AO细胞CD44s表达的影响

目的 探讨华蟾素对体外培养的卵巢癌3AO细胞CD44s表达的影响.方法 体外培养卵巢癌3AO细胞,不同浓度的华蟾素干预后,应用RT-PCR检测CD44s mRNA的表达,流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果 卵巢癌3AO细胞对照组CD44smRNA表达为1.3±0.1,细胞凋亡率为(2.31±0.98)%;0.25mg/ml华蟾素对卵巢癌3AO细胞CD44s mRNA和凋亡率的影响较对照组,无显著性差异(P＜0.05);2.5 mg/mL华蟾素干预后,3AO细胞CD44s mRNA 表达为1.0±0.1,癌细胞凋亡率为(28.69±4.16)%,较对照组有显著性差异(P＜0.05):25 mg·ml-1华蟾素与2.5mg·ml-1华蟾素对卵巢癌3AO细胞CD44s mRNA表达和凋亡率的影响无显著性差异(P＜0.05),较对照组有显著性差异(P＜0.05).结论 2.5 mg·ml-1华蟾素可有效抑制卵巢癌3AO细胞CD44s的表达,抑制癌细胞的侵蚀性生长.     

黄芪提取物对3T3-L1细胞的影响及其部分作用机制

目的观察黄芪提取物对3T3-L1细胞增殖、分化和分泌Leptin、PAI-1的影响,探讨中药黄芪调脂作用的部分机制。方法培养3T3-L1细胞,并用不同浓度的黄芪多糖和黄芪甲苷进行干预,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,用油红O染色和染色比色法分析脂肪细胞的分化程度。用ELISA法检测细胞培养上清中Leptin、PAI-1的含量。结果黄芪多糖和黄芪甲苷均能促进前脂肪细胞的增殖和分化,且对Leptin分泌均有促进作用,而二者对PAI-1的分泌均有抑制作用。结论中药黄芪调脂机制复杂,其可能通过促进前脂肪细胞的增殖与分化和影响脂肪细胞分泌功能而达到调脂作用。     

不同程度的活血化瘀药对CC14慢肝模型的治疗作用

通过动物实验观察不同程度活血化瘀药（和血药：当归、丹参;活血药、牛膝;破瘀药：莪术、Ｚｈｅ虫）不同剂量（大剂量０．３２４ｇ／１００ｇ、小剂量０．０８１ｇ／１００ｇ）对大鼠ＣＣ１４轻度慢肝模型的治疗作用。结果显示：和血药当归、丹参大剂量组和活血药郁金、牛膝水刘量组能显著提高ＳＯＤ活力,升高血清白蛋白含量,降低ＭＤＡ、ＡＬＴ。提示：活血化瘀药治疗慢肝损时,和血药剂量宜大,活血药剂量宜小,不宜选用破瘀药     

玉屏风散直接抑制和免疫调节抗肝细胞癌作用的实验研究

目的:阐明玉屏风散直接抑制和免疫调节抗肝细胞癌的作用和初步机制。方法:MTT法评价玉屏风散抑制肝癌细胞增殖和促进免疫细胞杀伤能力;以小鼠肝癌移植模型观察玉屏风散在体抗肝癌作用和对免疫调节的影响;采用流式细胞术观察玉屏风散对肝癌细胞凋亡和周期的影响。结果:玉屏风散呈现量效和时效依赖性抑制肝癌细胞的增殖;抑制肝癌荷瘤裸鼠和C57小鼠的肿瘤生长;促进肝癌细胞凋亡和阻滞细胞在G2期。可增加肝癌荷瘤C57小鼠脾脏的重量(P<0.05),但对胸腺重量和脾脏中CD4+T、CD8+T细胞比例及二者比值无影响;可显著提高血液和肿瘤组织中CD4+T、CD8+T细胞比例(P<0.01)和降低二者比值;可增强脾淋巴细胞杀伤肝癌细胞的能力。结论:玉屏风散抗肝癌作用是增强机体免疫和微弱的直接诱导肿瘤细胞凋亡的综合效应。     

莪术醇对肝星状细胞NLRP3炎症小体作用的实验研究

目的 研究莪术醇对NLRP3炎症小体的作用,为莪术醇抗肝纤维化提供科学依据.方法 将肝星状细胞分为空白组,模型组以及莪术醇组.用WB和 RT-PCR检测各组细胞NLRP3信号通路上关键分子NLRP3和Caspase1以及IL-1β的表达和含量,用免疫荧光检测各组细胞NLRP3的表达情况.结果 RT-PCR检测发现莪术醇...     

扶正化瘀方对3T3细胞殖和胶原生成的影响

为了探讨扶正化瘀方抗肝纤维化的作用机制。以体外培养的ＮＩＨ／３Ｔ３细胞作为肝脏成纤维细胞的替代模型，用扶正化瘀方药物血清，以１０％的浓度被添加到培养液中，通过［＾３Ｈ］ＴｄＲ掺入法和免疫细胞化学，观察药物血清对３Ｔ３细胞［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入量和胶原生成的影响。结果表明药物血清组［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入量明显少于正常大鼠血清组。药物血清组Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原量均明显低于正常大鼠血清组，其中Ⅰ、Ⅲ型胶原更