甾体糖苷抗肿瘤活性构效关系研究

为研究甾体糖苷的苷元和糖链结构对其抗肿瘤活性的影响,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定了五种结构相关的甾体糖苷薯蓣皂苷、纤细皂苷、边缘茄碱、澳洲茄碱和查茄碱对人宫颈癌细胞(Hela细胞)、人肝癌细胞(H7402细胞)和小鼠成纤维细胞(L929细胞)增殖的影响,随后测定了化学修饰的6-O-双硫酸茄碱、6-O-硫酸查茄碱和全乙酰化查茄碱对人结肠癌细胞(HCT-8细胞)增殖的影响。结果发现,以查茄三糖为糖链的薯蓣皂苷、边缘茄碱和查茄碱抗增殖活性明显高于以其它三糖为糖链的纤细皂苷和澳洲茄碱;甾体糖苷对人源癌细胞的抑制作用更强;6-O-双硫酸茄碱、6-O-硫酸查茄碱和全乙酰化查茄碱无抗增殖活性。构效关系分析表明,苷元"F"环结构对活性有一定影响,糖链的单糖组成和结构对抗肿瘤活性有显著影响;糖链上的羟基在甾体糖苷的抗肿瘤活性中发挥关键作用。     

桑黄子实体多糖的分离纯化及单糖组成研究

目的：对桑黄子实体活性多糖的单糖组成进行研究。方法：桑黄子实体经水提、醇沉、冷冻干燥得水溶性多糖,经DEAE—Sepharose Fast Flow离子柱和Sephacryl S-100 HighResolution凝胶柱进行分离纯化得纯多糖PIFI,气相色谱和气质联用分析多糖的单糖组成。结果：桑黄予实体多糖PIFI的单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为0．64：1：1．94。另外还发现一种特殊的单糖3（4）-O-甲基-己糖。结论：建立了用毛细管气相色谱及气质联用测定桑黄了实体多糖单糖组成的方法,确定了桑黄多糖PIFI的单糖组成及摩尔比,还发现一种特殊的单糖3（4）-O-甲基-己糖。     

金耳发酵液多糖的制备、分析及生物活性研究

探讨了金耳发酵液多糖的化学成分和生物活性。通过液体发酵法获得了金耳发酵液多糖,分别采用苯酚硫酸法、气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)、凝胶渗透色谱(GPC)、红外光谱对其总糖含量、单糖组成、相对分子质量、糖苷键类型进行测定。此外,对金耳发酵液多糖的体外抗氧化和体内降血糖活性进行了研究。结果表明,金耳发酵液多糖总糖质量分数为85.85%,主要的单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,相对分子质量为14 000,主链以β糖苷键相连。具有一定的还原能力以及较强的清除DPPH和羟基自由基活性,可显著降低四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖含量。     

海参硫酸多糖化学组成与结构的研究进展

海参硫酸多糖包括岩藻糖基硫酸软骨素（fucosylated chondroitin sulfate,FCS）和硫酸岩藻聚糖（fucoidan,FUC）,是来源于海参体壁结构复杂的一类硫酸多糖。研究表明,FCS主链由β-D-葡萄糖醛酸和β-D-乙酰氨基半乳糖构成二糖重复单元,支链由不同聚合度的L-岩藻糖构成,FUC主要由硫酸化α-L-岩藻糖构成主链,两者主链中均含有少量其他类型单糖。FCS的硫酸基位于主链β-D-乙酰氨基半乳糖的C-4、C-6或C-4,6位和支链L-岩藻糖的C-4、C-3,4或C-2,4位,FUC的硫酸基位于L-岩藻糖的C-2或C-4位,也存在C-2,4双硫取代。目前,海参硫酸多糖化学组成、结构的分析技术主要为甲基化法分析、二维核磁共振技术、液相色谱-串联质谱分析技术等。本文对海参硫酸多糖的化学组成和结构以及常用分析技术进行了总结,旨在为海参硫酸多糖的结构分析以及构效关系研究提供依据。     

钝顶螺旋藻多糖的分离纯化及组成分析

目的：对钝顶螺旋藻多糖进行提取、分离纯化和热降解,并对不同多糖组分的基本化学性质和糖链的精细组成进行分析。方法：采用蛋白酶酶解、醇沉、阴离子交换色谱法和热降解,从钝顶螺旋藻中提取和分离纯化出P0、P0.2、P0.4、P0.6、P0.8五种多糖组分及其热降解产物。采用高效凝胶排阻色谱法、离子色谱法、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生-高效液相色谱法和亲水液相色谱-高分辨傅里叶转换质谱（hydrophilic interaction liquid chromatography-Fourier transform mass spectrometry,HILIC-FTMS）联用技术,分析比较不同多糖组分的化学性质和糖链精确组成。结果：钝顶螺旋藻多糖中P0、P0.2、P0.4和P0.6组分硫酸根质量分数在6%～7%,而P0.8组分硫酸根质量分数最高（14.46%）。单糖组成分析结果说明,P0组分是1 种葡聚糖,P0.2组分是主要由葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、岩藻糖等中性糖组成的杂多糖;而P0.4、P0.6和P0.8组分主要是由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、木糖和半乳糖组成的结构非常复杂的硫酸鼠李聚糖。采用HILIC-FTMS分析多糖组分热降解产物中的寡糖组成,发现P0.2糖链主要是由己糖单糖、戊糖二糖、脱氧己糖-戊糖寡糖、脱氧己糖-糖醛酸的寡糖片段组成,硫酸根在脱氧己糖、戊糖和己糖上,糖链组成复杂。而P0.4和P0.6组成相似,主要鼠李糖-戊糖寡糖、鼠李糖-葡萄糖醛酸寡糖、戊糖二糖和三糖寡糖片段组成,硫酸根连接在鼠李糖和戊糖上。结论：钝顶螺旋藻中有多种不同结构的复杂硫酸多糖,其中葡萄糖醛酸-鼠李聚糖是钝顶螺旋藻中特有的一种硫酸多糖。     

硫酸化发酵灵芝胞外多糖的组成与结构

从灵芝深层发酵液中获得的灵芝胞外多糖,经硫酸化后其抑癌活性大幅提升。硫酸化后,灵芝胞外多糖的结构和构象都发生一定的变化。经单糖组成分析和光谱初步解析,硫酸化灵芝胞外多糖的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩尔比为9∶3∶2∶4∶48;其主链可能是以α-D-Gal(1→6)为主或混杂有α-D-Gal,Rha,α-D-Glc,α-D-Man以及Ara为侧链,其硫酸基团可能接在C-3、C-4、C-6位上。硫酸化前灵芝多糖的构象主要为单螺旋结构,而修饰后呈三维螺旋结构,x-衍射亦证实其结构的有序变化。     

HPLC—ELSD法同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱含量

建立高效液相色谱—蒸发光散射检测(HPLC—ELSD)同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱的方法,并对不同样品含量进行测定。结果表明:当ELSD漂移管温度98℃,雾化管温度30℃,载气压力6.90kPa时,以0.1%三氟乙酸水—乙腈为流动相,经梯度洗脱程度,α-茄碱和α-卡茄碱可获得良好分离,色谱峰柱效高。样品用质量100倍的1%甲酸甲醇为提取溶剂在70℃下提取90min,提取液直接注入色谱仪进行检测。α-茄碱标准品在0.196~9.800μg线性关系良好(R2=0.999 5),平均回收率为99.4%,并以该标准曲线同时计算样品中的α-茄碱和α-卡茄碱的含量。马铃薯植物的不同部位均含有生物碱,α-茄碱的含量为0.13~1.59mg/g,α-卡茄碱的含量为0.39~8.28 mg/g;两种生物碱总量为0.52~9.37mg/g,同一部位中α-卡茄碱的含量为α-茄碱的1.2~7.6倍。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱的含量。方法 样品经80%甲醇水(V:V, 含0.1%甲酸)溶液提取、稀释后在正离子模式下以电喷雾电离串联质谱进行测定, 外标法定量。结果 α-茄碱和α-卡茄碱在50~1000 μg/L范围内线性良好, 相关系数＞0.99, 方法检出限为20 μg/kg, 定量限为50 μg/kg。在3、5、10 mg/kg的添加水平下, α-茄碱和α-卡茄碱平均回收率在83.5%~96.0%之间, 相对标准偏差(relative standard deviation, RSD), (n=6)在2.97%~5.41%之间。结论 本方法快速、准确、灵敏, 可应用于马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱的同时检测。     

南瓜多糖PCE-CGH的制备和结构表征

探讨具有降血糖作用的南瓜多糖的分子组成与分子结构信息。以南瓜粉为原料,经过水提取、有机溶剂分步萃取和柱色谱分离纯化,得到一种水溶性多糖(PCE-CGH)。经高碘酸氧化、Smith降解并采用IR,NMR等方法对该多糖的化学结构进行了表征。结果:该多糖由鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖(Glu)和半乳糖(Gal)组成,摩尔比为4∶2∶3∶5。主链主要是以β-1→2糖苷键及β-1→3糖苷键连接的Gal和Ara,同时还存在一定量的Glu和Rha;侧链主要是以β-1→4糖苷键及β-1→6糖苷键连接的Rha和Glu。南瓜多糖PCE-CGH是由4种单糖组成、带有侧链的杂多糖。     

USP34标准——硫酸软骨素钠

软骨素,硫酸氢,钠盐[9082-07-9]。硫酸软骨素钠是从牛、猪、禽等家畜软骨组织中提取制得的硫酸化线形糖胺聚糖钠盐。主要由N-乙酰半乳糖胺(2-乙酰胺-2-脱氧-β-D-吡喃半乳糖)和D-葡糖醛酸的共聚物的硫酸酯钠盐组成,共聚物内己糖通过β-1,4及β-1,3糖苷键交替连接。在普遍的糖胺聚糖中,半乳糖胺部分主要为4-位单硫酸盐,较少为6-位。按干燥品计算,含硫酸软骨素