用于壳聚糖降解的复合酶制剂产生菌的筛选

以壳聚糖为唯一碳源,结合固态培养基发酵培养,从自然界中筛选得到一株产复合酶的菌株,初步鉴定为曲霉属。该菌产复合酶中以壳聚糖酶、纤维素酶和α-淀粉酶为主,它们的酶活分别为2.206、0.790、3.229U/mL。该复合酶降解壳聚糖的最适温度为50℃,最适pH为5.6,最适时间为4h。通过有机溶剂分级沉淀,发现该复合酶降解壳聚糖的最终产物以聚合度为8～16的壳寡糖为主,表明该复合酶在壳寡糖制备方面具有一定的应用价值。      

壳聚糖氧化降解制备壳寡糖的研究

本文将脱乙酰度为96.7%的壳聚糖(COS)通过过氧化氢氧化降解制取壳寡糖,通过单因素变量的研究以及正交实验得出最优反应条件为:反应温度60℃,反应时间6 h,过氧化氢质量分数4.0%,乙酸质量分数4.0%,且四个因素对降解程度的影响为反应温度>过氧化氢质量分数>乙酸质量分数>反应时间。通过凝胶渗透色谱(GPC)对原料壳聚糖及最优条件下得到的降解产物的分子量分布进行检测,结果表明壳聚糖已完全降解且相对分子量达2000以下,降解产物经电喷雾质谱(ESI-MS)检测分析得聚合度为10以下,在控制降解的范围内,达到制备目的。     

壳聚糖氧化降解制备聚合度6以下的壳寡糖

壳寡糖是壳聚糖经降解后的低聚物,其相对分子质量较小,水溶性好,易于吸收,生物活性高。本实验采用过氧化氢氧化降解脱乙酰度高于95%的壳聚糖,利用离子色谱-脉冲安培法对低聚合度的壳寡糖进行定性和定量分析,以制备聚合度在6以下的壳寡糖。以降解产物的离子色谱中聚合度6以下的峰面积和与产物得率之积作为响应指标,并结合凝胶渗透色谱来考察过氧化氢浓度、反应时间、反应温度对壳聚糖降解的影响及降解特性,并利用响应面分析法对氧化条件进行优化。研究结果表明,采用离子色谱测定聚合度6以下的壳寡糖在方法学上是可行的,具有良好的精密度、稳定性和重现性。得到的最佳降解工艺条件为:过氧化氢浓度4.50%、反应时间6 h、反应温度56℃。由最优条件下的降解产物离子色谱图可知,聚合度越低的壳寡糖越容易得到;可利用离子色谱法对壳聚糖的降解过程进行调控。     

壳聚糖降解制备低聚壳聚糖和壳寡糖的研究进展

壳聚糖降解制备的低聚壳聚糖和壳寡糖具有许多独特的生理活性。介绍和评述了酸降解法、氧化降解法、酶降解法以及复合降解法等各种制备方法的研究进展。     

微波强化壳聚糖固相酸降解研究

本文研究了微波强化下的壳聚糖固相酸降解反应,分析了降解过程中微波辐射功率和盐酸用量等参数对降解产物分子量变化的影响,并利用红外光谱和核磁共振氢谱对降解产物的结构进行了表征。研究表明,微波辐射功率和盐酸用量的增加均有利于壳聚糖分子量的降低。采用微波辐射壳聚糖固相酸化物料15 min,即可获得重均分子量低于50000的低分子量壳聚糖,且糖单元的结构在反应过程中保持稳定。采用微波强化固相酸降解和酶降解复合工艺制备壳寡糖,壳寡糖单位时间内的产能可提高4倍以上。综上所述,本研究建立了一种基于微波强化的壳聚糖固相酸降解的高效制备低分子量壳聚糖和壳寡糖的方法,有助于低分子量壳聚糖和壳寡糖的广泛应用。     

复合酶对壳聚糖的降解作用研究

研究由胃蛋白酶、果胶酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶组合而成的复合酶对壳聚糖的降解作用.着重探讨反应温度、pH、酶底比和不同脱乙酰化度的原料对多种复合酶水解作用的影响.结果表明：复合酶E2对壳聚糖具有最高的水解活力,水解产物的DE值最高.结合酸预处理,以酶底比1∶10,可使壳聚糖的水解产物分子量低于4000.     

褐藻胶降解酶产生菌的筛选与鉴定

为了丰富褐藻胶降解酶产生菌的来源,该研究以褐藻胶为唯一碳源,从长兴岛采集的腐烂海带中筛选能够高效降解褐藻胶 的菌株,并通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定。结果表明,经筛选和鉴定获得一株能够高效降解褐藻胶的 水莱茵海默氏菌（Rheinheimera aquimaris）,编号为E-10,其产褐藻胶降解酶活力为14U/L。     

壳聚糖酶的研究进展

壳聚糖酶(Chitosanase,EC3.2.1.99)是一种对壳聚糖具有分解作用的专一性酶,可以特异性的水解壳聚糖,得到特异分子量范围的壳寡糖。壳寡糖是目前仅知的唯一的碱性寡糖,具有独特的生物活性。本文概述了近年来壳聚糖酶的研究进展,包括酶来源及性质、纯化方法的研究、分子水平的研究、作用方式及功能、应用及展望等方面,并探讨了壳聚糖酶研究中尚存在的主要问题及今后的研究方向。      

壳聚糖酶的研究进展

壳聚糖酶(Chitosanase,EC3.2.1.99)是一种对壳聚糖具有分解作用的专一性酶,可以特异性的水解壳聚糖,得到特异分子量范围的壳寡糖。壳寡糖是目前仅知的唯一的碱性寡糖,具有独特的生物活性。本文概述了近年来壳聚糖酶的研究进展,包括酶来源及性质、纯化方法的研究、分子水平的研究、作用方式及功能、应用及展望等方面,并探讨了壳聚糖酶研究中尚存在的主要问题及今后的研究方向。     

有于降解秸秆的纤维素酶产生菌的筛选研究

研究了降解农人物秸秆纤维素菌株的筛选方法,即用刚果红纤维素粉琼脂培养基,并结合滤纸条培养基进行初筛,以稻草或玉米秸秆为发酵培养基进行复筛,筛选到纤维素酶活力较高的野生菌株Ma,通过对其进行紫外诱变得到诱变菌株TMa-9118,该菌株的产量最适条件为：稻草粉和麸皮的比例为8：2,培养基含水量65％,发酵时间为72h,发酵温度为30℃,该酶最适反应pH为4．4,最适反应温度为50℃,最佳浸提条件为40℃蒸馏水。     

降解乳蛋白菌株的分离筛选与鉴定

从腐败食物中分离筛选到一株可降解牛乳蛋白的菌株,并通过菌落形态观察与测定、生理生化指标测定、核酸特征分析以及16S rRNA基因序列测定等方面对该菌株进行鉴定,经BLAST比对构建了该菌株的系统发育树。经上述几方面的鉴定后,判定该菌株属于枯草芽孢杆菌。     

L-苯丙氨酸抗噬菌体生产菌的选育和应用

为了解决噬菌体污染问题,提高L-苯丙氨酸(L-Phe)的生产稳定性,首先从L-Phe生产菌大肠杆菌WSH-Z06(pAP-B03)的异常发酵液中分离到1种噬菌体,将其命名为BP-1;再经WSH-Z06的亚硝基胍(NTG)诱变、抗性初筛、质粒pAP-B03的转化和摇瓶发酵复筛等过程,获得了1株对噬菌体BP-1不敏感的L-Phe高产菌株BR-42(pAP-B03)。在添加噬菌体的条件下的发酵中,该菌株的生长和L-Phe合成均不受影响,说明BR-42(pAP-B03)是1株可以抗噬菌体BP-1并能高产L-Phe的优良菌株,具有较大的工业生产应用价值。     

一株伏马毒素降解菌的筛选与鉴定

以伏马毒素FB_1为唯一碳源,采用富集培养法从污泥样品中分离到1株高效降解FB_1的菌株。经高效液相色谱(HPLC)法检测,该菌在液体无机盐培养基(MSM)中对FB_1有良好的削减能力,5 d内可将25μg的FB_1完全降解。通过对该菌的16S rDNA序列进行同源性分析,并结合生理生化试验,最终鉴定为鞘氨醇盒菌(Sphingopyxis sp.),命名为ASAG22。ASAG22细胞内产生的活性物质将FB_1降解为4种质荷比分别为406.352 7、288.209 9、264.182 7和220.156 9的新物质,且该活性物质经蛋白酶K处理而失去活性。     

甘蔗醋高产菌株的筛选及鉴定

为了获得适宜甘蔗醋酿造的高产菌株,以自然发酵的甘蔗渣为筛选材料进行筛选。通过对筛选样品进行富集培养和平板分离,获得116株菌株,再采用产醋酸发酵、耐酒精性发酵以及传代稳定性发酵等方法进一步筛选,采用高效液相色谱检测法分析发酵液的乙酸含量,最后获得1株具有产酸高、耐酒精性强、遗传稳定的菌株C22。菌株C22在12%(v/v)的酒精度下仍能够表现出较强的发酵作用,在起始酒精度为6%(v/v)和12%(v/v)的培养基中,菌株C22的醋酸产量分别为41.8g/L和62.2g/L。经过形态特征、生理生化特征以及16S rDNA等方面的分析,鉴定菌株C22为巴氏醋酸杆菌。      

低聚果糖生产菌株的筛选及鉴定

从玉米芯、玉米芯腐殖质、糖液、淀粉乳罐内壁残渣、草莓园土壤、桃园土壤(1号、2号2个样品)、苹果园土壤、杨树林土壤,共9个样品中筛选到12株转化生产低聚果糖的菌株,最终分离获得1株具有工业化生产潜力的米曲霉菌株FTST-2-6,转化率达到60.4%。在对其进行常规形态学特性鉴定的基础上,对其ITS基因的部分核苷酸序列进行分析,发现FTST-2-6菌株与曲霉菌属的相似度100%,经比对确定是一株米曲霉,命名为A.Oryzae FTST-2-6。通过10L发酵罐试产研究,HPLC检测其发酵液中低聚果糖组分含量高达59.9%,发酵液滤除菌体后呈微黄色,透光度达86.6%。本研究表明,菌株FTST-2-6是生产低聚果糖的潜力菌株,具有很好的应用前景。     

一株酸性脂肪酶高产菌株的筛选与鉴定

目的分离筛选出一株酸性脂肪酶高产菌株并对其进行鉴定。方法通过溴甲酚紫酸碱指示剂进行平板初筛,甘油三丁酸酯透明圈法以及摇瓶培养复筛,筛选获得了一株酸性脂肪酶产生菌株;利用平板透明圈法、橄榄油乳化液滴定法和对硝基苯酚比色法3种方法对所筛菌株进行酶活力测定。结果分离获得一株具有高产酸性脂肪酶活力的菌株,将其命名为菌株WY19。经过检测,其粗酶活力达到11000 U/L。通过对菌株WY19进行形态学鉴定、生理生化实验以及分子生物学鉴定,结合系统发育树分析,确定本研究获得的酸性脂肪酶产生菌为克雷伯氏菌。结论菌株WY19所产脂肪酶为酸性脂肪酶,在食品、医药、油脂加工等领域方面具有较好的应用前景。     

Screening of different agroindustrial by-products for industrial enzymes production by fermentation processes

Agroindustrial by-products are an abundant source of biocompounds that contain valuable nutrients, which are not exploited. In this work, lignocellulosic wastes (LW) were used in submerged fermentation (SmF) and solid-state fermentation (SSF) by Aspergillus niger NRRL3 to obtain valuable enzymes required in industries. SmF using soya bean hulls (SH), wheat bran (WB) and a by-product of wheat flour (F) produced the highest activities of endo-1,4-β-xylanase (Xyl) and endo-1,4-β-D-glucanase (EG) being at least 3 times lower than those obtained by SSF. The highest ratio of Xyl to EG was obtained in SmF with F. Xyl obtained by SmF with WB was the most thermally resistant. The enzymatic extract obtained in SmF using SH presented a high power of saccharification. The production of enzymes for further application such as bioethanol generation process revalue these LW and can help offset growing environmental problems.     

苹果发酵所需乳酸菌生产种培养基及发酵剂的筛选

筛选出理想的乳酸菌生产种培养基E.利用选定的3种乳酸菌组成不同配比的发酵剂发酵苹果,依据pH值、感官指标等综合评定,筛选出理想发酵剂(sp1:sp2:sp3=1:1:1)接种发酵苹果效果较好.     

细菌型腐乳生产菌株的筛选及其培养条件优化

从自然培菌的豆腐坯上挑选出不同的菌株,经过纯种培养发酵后,挑选出一株产腐乳风味好的菌株,对其生理生化特征进行鉴定,确定为藤黄微球菌Micrococcus luteus,命名为XY0623。采用正交设计,确定该菌株的最佳培养基组成为豆粉40.0g/L,(NH4)2SO410.0 g/L,NaCl50.0 g/L,KH2PO4 4.0g/L。进一步单因子试验表明其最佳培养条件为pH7.0,温度30℃,摇床转速200r/min。