四种固定液对肾上腺组织冰冻切片固定效果的比较

目的　以肾上腺组织为例观察比较丙酮、4%多聚甲醛、AAF和95%乙醇四种固定液的固定效果,为临床做出更好的快速冰冻切片,及时、准确的做出病理诊断提供实验基础。 方法　取人正常肾上腺组织,冰冻切片后分别用四种固定液进行固定,然后行HE染色,观察各组的组织结构、细胞核染色、细胞质染色和核质对比度情况。 结果　经冷丙酮固定的肾上腺组织切片,镜下组织结构清晰,高倍镜下观察：细胞核形态清晰完整,核染色和胞质染色清晰对比度好;经4%多聚甲醛固定的切片,镜下组织结构不清,细胞核形态较清晰,核染色和胞质染色对比度差;经AAF液固定的组织切片,镜下组织结构尚清晰,细胞核部分溶解,核染色均一,胞质染色较清晰;经95%乙醇固定的组织,组织结构尚清晰,核溶解普遍,胞质染色不清晰。 结论　四种固定液都可用于固定肾上腺组织及其它细胞成分较多的病理肿瘤组织,但冷丙酮效果最好。     

渡边Azan特殊染色方法及其应用

渡边Azan特殊染色方法是一种用苯胺蓝显示胶原纤维的特异性组织化学染色方法,该法通过使用媒染剂,提高了甲醛固定标本的染色效果,本文对渡边Azan染色方法及其应用作简要介绍。     

不同染色方法对人脑垂体细胞显示效果的比较

目的改进人脑垂体的染色方法,更清晰地显示腺垂体内各种细胞的形态特点,提高实验课教学质量。方法应用苏木精-伊红染色法和改良染色液染色法显示脑垂体的组织结构。结果用传统的苏木精-伊红染色法不易区分各种细胞,而采用改良染色液显示脑垂体组织结构效果好,既能观察脑垂体的结构,又能区分嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。结论改良染色液染色法能够很好地显示脑垂体组织结构,使3种细胞的形态特点清晰可辨,可为实验教学提供优质的切片标本。     

一种显示肾组织结构的新染色法——酸性复红银染法

对肾小球和其他肾脏疾病的诊断,主要依赖于对活检标本的光镜、电镜观察,或利用免疫细胞化学技术进行诊断,但电镜及免疫组化方法并非在所有病理实验室都可施行,大部分诊断仍需依赖常规福尔马林固定、石蜡包埋组织进行普通染色和一系列特殊染色.如过碘酸雪夫氏反应,Masson染色法、地衣红弹性蛋白染色和银染法等.许多肾小球的异常取决于光镜的鉴别,因此,肾组织各种结构的清晰显示与分辨至关重要,我们将常规染色与一些特殊染色相结合,建立一种显示肾组织各种结构的染色方法.     

提高病理冰冻切片质量的体会

目的通过自身的工作体会,探讨提高冰冻切片质量的技巧及方法.方法对乳腺、子宫、甲状腺、胃肠等几种不同组织进行冰冻切片比较、观察.结果切片完整,厚薄均匀,染色核浆对比鲜明,细胞形态及组织结构清晰,符合术中快速冰冻诊断要求.结论一张优质的冰冻切片需要技术员对不同的组织区别对待,从取材、冷冻、切片、固定、染色等环节认真做起.     

脊髓块染改良法

脊髓是医学院校学生实验课必须观察的内容之一,脊髓前角神经细胞内尼氏体的形态结构可作为判断其机能状态的一种标志.在光镜下显示尼氏体的染色方法较多,但大多数为石蜡切片染色法.虽然有的方法能很清晰地显示尼氏体.但标本很快褪色,不易保存.为探索一种快速显示和能较久地保存尼氏体的方法.作者经反复试验,改用组织块固定和染色同时进行的方法.该方法非常简单,容易掌握.经染色后的组织块不但容易切片.而且能保存数年不褪色:同时,封固剂也由常规的加拿大树胶改用环氧树脂、DDSA混合剂,避免易褪色现象.     

大鼠脑垂体前叶内IL-6样免疫反应物质的表达及肾上腺切除后的变化

目的　了解肾上腺切除后垂体前叶内神经纤维增多的成因及与神经营养因素的关系。方法　观察了切除大鼠双侧肾上腺后脑垂体前叶内白细胞介素－６（ＩＬ－６）样免疫反应物质的表达变化。雄性成年大鼠随机分为正常对照组和双侧肾上腺切除组,垂体组织作ＩＬ－６ 免疫组织化学方法染色。结果　在正常大鼠垂体前叶内有ＩＬ－６ 阳性反应物质表达,多位于血管内皮细胞内,少数位于滤泡星形（ＦＳ）细胞内,而且阳性ＦＳ细胞数量较少,分布弥散,染色浅淡,其形态为圆形或椭圆形,突起较短或无。肾上腺切除后,垂体前叶内ＩＬ－６ 免疫样阳性产物染色增深,阳性ＦＳ细胞数量明显增多,形态多样,呈多边形、梭形、三角形和卵圆形等,细胞突起增多变长。结论　研究结果提示,ＩＬ－６可能是肾上腺切除后造成垂体前叶内神经纤维增多的神经营养因素之一。     

CellDetect~染色技术在宫颈脱落细胞诊断中的价值

目的探讨CellDetect染色技术对阴道脱落细胞诊断及鉴别诊断作用。方法采用CellDetect染色对正常细胞和肿瘤细胞中颜色变化和细胞形态的相关性进行分析;并在子宫颈鳞状细胞癌(squmous cells carcinoma,SCC)和高级别上皮内瘤变(cervical intraepithelium neoplasia,CIN)的活检组织切片中比较CellDetect染色和HE染色的效果。结果 (1)手工涂片和TCT涂片的CellDetect染色均能较好的显示细胞的形态学特征,同时显示绝大多数正常鳞状上皮呈蓝色/绿色,子宫颈管上皮细胞呈鲜红色,不典型细胞与癌细胞呈红色。炎症细胞核呈红色,胞质大多数呈绿色/蓝色,红细胞胞质均呈绿色。(2)CIN和SCC的CellDetect染色诊断结果和HE染色诊断结果一致。(3)对子宫颈活检组织的切片和涂片分别行CellDetect染色,结果显示上皮原位细胞颜色反应相同,但CellDetect染色在判断癌与间质的关系或癌间质反应不如HE染色清晰。结论 Cell-Detect染色技术具有颜色和形态双重分析功能,适用于不同形式固定组织的细胞涂片染色,是子宫颈癌筛查和早期诊断的有效工具之一。     

肾上腺多层螺旋CT图像三维重建

目的：对正常肾上腺进行多层螺旋CT（MSCT）三维重建,为肾上腺病变的影像学诊断和外科治疗提供实用的影像断层解剖学依据。方法：使用20例无肾上腺病变的临床病人64层螺旋CT断层图像探讨了。肾上腺的三维重建方法,重点研究了肾上腺的整体形态特点及其在正常人体中的位置和毗邻等。结果：在1.25mm层厚64层螺旋CT横断层图像上,双侧肾上腺的边界清晰,易于进行肾上腺边界的提取。用VR依次分步重建出的肾上腺及其毗邻结构,边界清楚,立体感强,能动态多角度显示正常肾上腺的形态和位置、以及和周围器官的毗邻关系。结论：正常肾上腺MSCT三维重建图像能动态立体显示肾上腺及其周围结构的毗邻关系,充分体现肾上腺的在体方位,与手术视野中的肾上腺有很好的对应关系,以期为现代泌尿外科施行各种肾上腺手术提供可行而又实用的解剖学依据。     

神经纤维髓鞘和轴索双重染色方法的建立与比较

神经纤维髓鞘和轴索的染色方法很多,但一般均为单一染色,在实验动物神经组织的某些毒性病理诊断及人体大脑组织变性性疾病的诊断和研究中常常需要同时显示神经纤维髓鞘和轴索,但常规的HE染色不能很好地显示神经纤维髓鞘和轴索的组织形态,这就迫切要求建立一种新的能够同时显示神经纤维髓鞘和轴索的染色方法.     

丽春红和维多利亚蓝（B）显示纤维,细胞和肌肉的新染法

在人体和动物组织制片中,用特殊染色显示胶原纤维和弹力纤维的方法较多,但是所显示的染色效果较差.为了研究工作和诊断学的需要,进行了反复实验性研究,发现酸性染料Ponceau's(丽春红S),碱性染料的Victoria blue及B(维多利亚蓝及B)等试剂,能较好的显示胶原、弹力纤维,细胞和肌肉的成分.而在目前还未见报道.实验证明所建立新的二种染色方法,使组织     

三种固定液对Feulgen反应显示DNA的比较

<正>本实验用10%福尔马林(10%FA),FAA液(甲醛、95%酒精、冰醋酸按10:85:4体积比)及Carnoy氏液作为固定液,对一个月SD大鼠睾丸组织(约3mm~2/块)进行固定.制得5μm的切片后,分别用Felugen反应显示DNA和H—E染色法染切片,并对Feulgen染色切片中的糖原细胞用图象分析仪进行DNA定量测定.结果发现:(1)选择60个左右大小、染色深浅均相近的精原细胞进行图象分析,用平均光密度值进行比较.发现Carnoy固定的切片,其均值最大而变异系数(CV)最小;10%FAA固定的居中,FAA固定的切片均值最小而CV最大.在镜下观察中,发现10%FA及FAA液固定后的切片染色均匀而Carnoy所染切片中曲细精管着色深浅不一.所以我们认为,(1)用10%FA作固定液对DNA的定量分析较适合.(2)对细胞核及细胞质的形态而言,经FAA液和Carnoy氏液固定的组织,其染色效果较由10%FA固定的组织好.经 FAA液和Carnoy氏液固定的切片,低倍镜下可见曲精小管管腔内初级精母细胞的丝状染色体及其他细胞的颗粒状染色质,高倍镜下核的结构更加清晰.而经10%FA固定的组织切片,低倍镜下管腔内的各级生精细胞的胞核呈现均匀成片的紫红色,观察不到丝状染色体,高倍镜下仔细分辨,才可隐约见到.但因Carnoy氏液固定的组织块脆性大,不易切片,所以FAA液固定最适于形态观察.     

垂体腺瘤细胞培养的实验研究

目的通过对垂体腺瘤细胞体外培养以垂体腺瘤细胞为移植物供体进行颅外移植,补充垂体功能不足及为腺垂体移植细胞库的建立奠定基础. 方法利用术中切除的垂体腺瘤组织进行了体外培养,并通过染色和放射免疫测定技术,评价体外培养的垂体腺瘤组织的功能状态,寻找其功能最佳间期的规律. 结果没有NGF和HRP介入的情况下,垂体腺瘤细胞的形态和功能状态在培养的第6天为最佳. 结论体外培养的垂体腺瘤细胞仍具有分泌激素的功能,为以垂体腺瘤细胞为移植物供体进行颅外移植的研究奠定了实验基础.     

超声波配合真空技术在石蜡组织块制备中的应用

超声波配合真空技术在石蜡组织块制备中的应用杨金镇我们应用超声波对取材组织进行固定、脱水和透明，然后再真空浸蜡。结果蜡块制备时间明显缩短，切片染色后组织结构和细胞形态清晰。该法是日常外检快速病理诊断的一种新方法。１材料和方法１．１标本和试剂选用宫颈息肉...     

去肾上腺大鼠垂体内IL-6水平的变化--PCR定量技术的辅助分析

目的　探测白细胞介素 - 6 (IL- 6 )是否与垂体前叶中的神经纤维的营养效应有关。　方法　应用免疫组织化学和原位杂交技术对去肾上腺大鼠垂体中的 IL- 6表达进行形态观察 ,并试用两种微量 PCR方法对同一组织中的 IL- 6进行蛋白水平和 m RNA水平的定量检测。　结果　免疫组织化学分析 ,阳性物质主要存在于垂体前叶滤泡星形 (FS)细胞中 ,但其含量变化却不甚清晰。PCR定量分析 ,IL- 6在上述两个水平上的表达均有增加 ,且基因激活时间早于术后 2 4h。　结论　 IL- 6变化与 ACTH无关 ,可能参与下丘脑 -垂体 -肾上腺 (HPA)轴以外的垂体前叶功能调节的其他路径 ,譬如通过神经支配而发挥影响     

两种染色方法对脑垂体三种嗜色细胞显示效果的比较

脑垂体由腺垂体和神经垂体两部分组成,其中腺垂体内有3种类型细胞：嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。在常规的苏木精-伊红染色切片中,脑垂体3种嗜色细胞显示的效果一直不甚理想,学生在显微镜下进行观察辨认比较困难,为了更清晰地显示脑垂体3种嗜色细胞,我们采用不同的染色方法对脑垂体进行染色,经过多次实验显示,采用Mallory氏法染色,获得了较满意的染色效果,现介绍如下：     

经典型滤泡树突细胞肉瘤的特殊变异形态及潜在诊断陷阱

目的探讨经典型滤泡树突细胞肉瘤(FDCS)的临床病理特征、特殊变异形态及潜在诊断陷阱,提高诊断准确性。方法对2006—2018年陆军军医大学第一附属医院诊断的25例经典型FDCS进行组织形态观察、免疫组织化学染色和EB病毒编码的小RNA(EBER)原位杂交检测,结合文献分析其特殊变异形态的类型和特点。结果25例FDCS患者年龄23~77岁(平均52岁),男女比例为1.5∶1.0,肿瘤最大径1.5~20.0 cm(平均7.4 cm),其中12例(48%)在初次诊断时被误诊。17例有随访信息,随访时间5~96个月,复发、转移、病死比例分别为3/17、5/17、2/17。除了典型组织形态外,10例FDCS可见特殊的变异形态和/或组织结构,包括淋巴上皮癌样、促结缔组织增生性浸润癌样、霍奇金淋巴瘤样、间变性大细胞淋巴瘤样及血管外皮细胞瘤样等,是需要重视的潜在诊断陷阱。免疫组织化学染色结果显示典型形态和各种特殊的变异形态均可表达2个以上滤泡树突细胞标志物(CD21、CD23、CD35等)。EBER原位杂交检测显示25例FDCS均为阴性。结论经典型FDCS罕见,除了典型的组织形态外还可出现多种特殊的变异形态,其中鼻咽部的淋巴上皮癌样、纵隔或淋巴结内的霍奇金淋巴瘤样、间变性大细胞淋巴瘤样变异型尤其值得我们重视。加强对此类罕见变异形态的认识,提高诊断警惕性,有助于避免误诊。     

网状纤维染色在显示胃肠道间质瘤中的应用

网状纤维染色是常用的特殊染色之一。网状纤维为细胞外问质成分,存在于人体各组织器官中,通过网状纤维染色观察网状纤维在肿瘤组织中的形态变化是鉴别诊断中重要参考依据。笔者在对来源于胃肠道以梭形细胞为主的问叶源性肿瘤且组织学形态相似的平滑肌瘤、神经鞘瘤和梭形细胞型问质瘤,辅以网状纤维染色,目的在于区分肿瘤的组织来源。     

五种染色方法对小鼠圆形精子染色效果的比较

比较五种染色方法对小鼠圆形精子(round spermatid,ROS)染色的效果,寻找一种鉴定圆形精子简单、有效的染色方法.以性成熟的昆明白鼠为实验材料,制备睾丸细胞悬液,分别用瑞氏、瑞氏-姬姆萨、姬姆萨、改良品红、苏木精五种方法对小鼠生精细胞进行染色,比较不同染色方法下圆形精子的形态.相比于其它四种染色方法,瑞氏-姬姆萨染色后能清晰地观察到圆形精子细胞膜和核膜的边缘,核质分明,与其它时期生精细胞区别明显.瑞-姬染色法是一种简单、有效的鉴定圆形精子形态的染色方法.     

基于硬组织切片染色的颈椎钩椎关节的解剖研究

目的利用硬组织切片技术、苏木精—伊红染色及甲苯胺蓝染色方法对成人钩椎关节的组织形态及各层结构进行观察,并对钩椎关节的解剖结构进行探讨。方法选取成年男性全颈椎标本,截取C₂~C₆钩椎关节进行福尔马林固定,脱水,于光固化机中包埋聚合。利用硬组织切片机对标本进行切片处理,磨片机对标本进行磨片处理,并使用苏木精—伊红及甲苯胺蓝进行染色。观察染色后钩椎关节组织形态及结构特点。结果苏木精—伊红染色的钩椎关节骨切片可清晰见到椎体及椎间盘被钙盐沉积分开,上下椎体切面可见粉染骨小梁,骨小梁间可见骨髓组织。甲苯胺蓝染色的钩椎关节骨切片可见成骨细胞和破骨细胞的各种骨组织形态,椎体切面可见体积、宽度、分布均正常的蓝色骨小梁。结论硬组织切片技术可以较完整保留钩椎关节的固有组织形态,经苏木精—伊红染色、甲苯胺蓝染色均可清晰观察到钩椎关节各层结构及形态特征。