SARS患者血清抗体动态变化规律及其临床意义研究

[目的]研究不同时期SARS患者血清特异性IgM、IgG抗体的动态变化规律，并分析其临床意义。[方法]选择86例确诊SARS病人的不同病程的血清共197份，采用酶联免疫吸附方法（ELISA）测定其IgM、IgG抗体水平；同时设正常对照血清10份。[结果]SARS患者发病1周内特异性抗体检测结果均为阴性；SARS-CoV IgM抗体在发病后8-14d逐渐出现，于30d达到高峰（阳性率为75％），然后逐渐下降，3个月后阳性率明显下降（19．2％）；IgG抗体亦在发病1周后出现，随病程增加呈升高趋势，30-90d基本达到高峰，但和IgM抗体相比IgG抗体在体内持续时间较长，在9个月（270d）时仍维持在较高水平（阳性率为66．7％）。[结论]SARS患者血清特异性抗体检测是临床确诊SARS的重要依据之一；血清IgG抗体在体内持续时间长，可能对机体有利，是人群保护性抗体。     

严重急性呼吸综合征冠状病毒多肽抗原筛选的研究

严重急性呼吸综合征(SARS)可从SARS病人分泌物中分离出SARS冠状病毒(SARS-CoV)。目前检测SARS-CoV方法有三类：分子生物学检测、免疫学检测(抗体检测)和细胞分离培养。本研究用克隆表达的SARS-CoV的各种蛋白，以重组抗原片段检测病人血清中对应抗体，并通过试验筛选出SARS-CoV表面有效性多肽抗原，进行临床研究。     

SARS病毒不同基因区抗原与SARS患者血清反应性的研究

目的研制非典型肺炎病毒(SARS病毒)不同基因区抗原,探讨SARS病毒感染机体不同基因区抗体免疫应答。方法根据目前已知SARS病毒的基因组序列及其编码的蛋白质,运用计算机抗原表位预测技术,筛选4种SARS病毒主要抗原表位。合成抗原表位基因,克隆到表达载体pBVILl,在E．coli中表达S蛋白和N-蛋白,E-蛋白和M-蛋白为合成肽。结果用SARS病毒编码的S(Spike)蛋白、M-蛋白、N-蛋白和E-蛋白分别与46份SARS患者恢复血清反应,检测血清中IgG抗体,结果S蛋白、N-蛋白、E-蛋白和M-蛋白检出率分别为71．7％(33／46),89．13％(41／46),30．43％(14／46),52．17％(24／46)。结论感染SARS病毒病人血清中S蛋白、M-蛋白、N-蛋白和E-蛋白的免疫应答有显著差异。     

IFA和ELISA在肿瘤患者血清SARS-CoV抗体测定中的对比分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)检测严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoY)&体在SARS病原中诊断中的特异性及其在肿瘤患者血清中的假阳性问题。方法 应用ELISA和IFA检测了111例正常对照和40例肿瘤患者血清中SARS-CoV抗体的阳性率。结果在111例正常对照和40例肿瘤患者中,IgM抗体均阴性,IgG抗体在正常对照中的阳性率为3.6%(4/111),在肿瘤患者中的阳性率17.5％(7/40),IgC抗体诊断SARS的特异性为96.4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。经IFA检测,上述SARS-CoV抗体阳性者均为阴性。结论 IFA诊断SARS的特异性为100％,ELISA诊断SARS存在一定的假阳性。应用ELISA测定SARS-CoV抗体时,应同时测定两种抗体以降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。     

156例SARS患者血清抗SARS冠状病毒抗体的观测

本研究的目的是观察严重急性呼吸综合征 (severeacuterespiratorysyndrome ,SARS)患者抗SARS 冠状病毒 (SARS CoV)抗体IgG和IgM的产生及抗体效价变化特征 ,探索采集SARS痊愈患者抗血清的时机。应用ELISA方法对随机抽取的 156名SARS患者血清标本进行抗SARS CoV抗体IgG和IgM抗体效价测定。结果表明 ,156名SARS患者于病后 3至 9周期间 ,IgG抗体阳性率为 75.6% ,IgM抗体阳性率为 41.7% ,IgG和IgM抗体均阳性为 41% ,IgG和IgM抗体均阴性为 2 3 .7% ;IgG抗体阳性患者中抗体效价为 18.2 3± 2 4.72 ,IgM抗体阴性患者抗体效价为 2 .18± 1.13 ;IgG和IgM抗体效价与SARS患者的性别、年龄、病程、体温正常天数无显著相关性。结论 :并非所有SARS患者都能产生抗SARS CoV抗体 ,即使产生抗体 ,其效价的个体差异也较大 ,并不能通过性别、年龄、病程及体温正常天数等因素较准确地评估抗体的效价。因此 ,在SARS抗血清采集前 ,应重新进行抗体效价测定 ,遴选具有高效价抗SARS CoV抗体的SARS痊愈患者进行抗血清的采集 ,才能提高所采集的抗血清在临床的治疗效果 ,同时又可为患者抗体输注提供量化指标     

严重急性呼吸综合征患者血清病毒抗体消长规律的研究

2003年传染性非典型肺炎在全世界几十个国家和地区暴发流行，世界卫生组织根据其发病特征于2003年4月16日正式命名为严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome，简称SARS)。由SARS冠状病毒(SARS-associated coronavirus，简称SARS-CoV)引起的此次传染性非典型肺炎发病后，病情发展较急，部分病人病情较重，临床上大致符合病毒感染的病情变化。我们检测了95例SARS患者体内不同时期SARS病毒抗体，探讨病毒抗体在患者体内出现的规律，现报道如下。     

自身免疫病患者血清中传染性非典型肺炎冠状病毒抗体阳性原因分析

目的 探讨传染性非典型肺炎又称严重急性呼吸综合征(SARS),冠状病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的特异性及其在系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、干燥综合征(SS)和混合结缔组织病(MCTD)患者中的假阳性问题。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量RT-PCR技术检测了111名正常对照和58例SLE、20例RA、10例SS、16例MCTD患者做血清中SARS-CoV抗体的检测。结果 在111名正常对照中,IgM抗体均阴性,IgG抗体的阳性率为3.6％;IgG抗体诊断SARS的特异性为96.4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。58例SLE患者中,IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为8.6％和32.8％,IgG抗体和IgM抗体同时阳性为19％;在10例SS患者中只有1例两种抗体同时阳性(10％);在16例MCTD患者中,IgG抗体阳性6例(37.5％),两种抗体同时阳性1例(6.3％);在20例RA患者中只有1例IgG抗体阳性(5％)。经RT-PCR检测,上述自身免疫病患者中的阳性病例血清SARS-CoV抗体均为阴性。结论用非纯化抗原制备的ELISA试剂盒测定自身免疫病患者的SARS-CoV抗体,可能出现假阳性,两种抗体同时测定可降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。在自身免疫病患者中出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。     

非SARS患者中儿童与成人抗SARS抗体检测与比较

为了调查非SARS患者中儿童与成人体内抗SARS血清抗体的阳性率 ,随意选取我院门诊及住院的 14岁以下儿童患者 197例 ,健康儿童 15 6例 ,同时选取我院 18岁以上门诊及住院的病人 4 5 3例 ,无偿献血者 5 0 2例 ,采用两种抗SARS冠状病毒特异性抗体检测试剂盒及ELISA方法测定血清中抗SARS抗体。检测结果发现 ,健康儿童与患病儿童人群中抗SARSIgG抗体的阳性率均为 2 %左右 ( 4 /197和 3/15 6 ) ,而健康成人和成人患者中抗SARSIgG抗体的阳性率均为 0 .2 %左右 ( 1/45 3和 1/5 0 2 ) ,两者相比差异具有显著性意义 ( χ2 =11.6 1,P <0 .0 0 1)。而IgM抗体均为阴性。结论 :儿童体内抗SARSIgG抗体的阳性率显著高于成人     

SARS患者康复后血清抗SARS病毒特异性抗体IgM和IgG动态变化

目的:探讨SARS患者康复后4年内血清抗SARS病毒特异性抗体IgM(SARS-CoV-IgM)和IgG(SARS-CoV-IgG)的动态变化.方法:前瞻性跟踪50例SARS患者血清抗SARS-CoV-IgM和IgG的变化.用ELISA法检测该组患者患SARS后第0～10 d、11～20 d、21～30 d、31～40 d、41～50 d、51～60 d、61～70 d、71～80 d、81～90 d、91～120 d、121～150 d和第4年血清抗SARS-CoV-IgM和lgG的变化.结果:抗-SARS-CoY-IgM和IgG阳性率均在SARS发病10d后逐渐升高.并在发病后31～40d达100%,但抗-SARS-CoY-IgM阳性率在发病51～60d后逐渐下降,发病后第4年为0;抗SARS-CoV-Igc阳性率在发病81～90d后逐渐下降,发病后第4年为47%.在体内维持时间较短,而IgG下降缓慢,在体内维持时间较长.结论:根据SARS患者血清中抗-SARS-CoV-IgM在体内维持时间短和IgG在体内维持时间长的特点,抗-SARS-CoV抗体可用于SARS流行病学追踪调查.     

193份SARS患者血清IgG抗体检测和结果分析

[目的]探讨SARS患者体内抗SARS冠状病毒抗体产生和变化的规律。[方法]用间接ELISA方法进行抗SARS CoV IgG抗体检测。[结果]采用北京华大吉比爱生物技术有限公司研制的抗SARS冠状病毒抗体检测试剂盒对61例临床和实验室确诊住院患者193份血清进行了IgG抗体检测，结果散点图表明大部分病人在病程的第15d左右可检出IgG抗体，最早第7d可检出抗体；其高峰出现在第2d左右。系列血清检测结果表明抗体产生模式呈现多样化趁势。[结论]SARS病人可产生抗SARS冠状病毒IgG抗体，并以多种模式有规律变化。     

Experience of using convalescent plasma for severe acute respiratory syndrome among healthcare workers in a Taiwan hospital

OBJECTIVES: To describe the immunological responses and clinical outcome of coronavirus (SARS) infected healthcare workers (HCW) who had been administered with convalescent plasma as a treatment. METHODS: Convalescent plasma (500 mL) was obtained from each of three SARS patients and transfused into the three infected HCW. Donors were blood type O and seronegative for hepatitis B and C, HIV, syphilis and human T-cell lymphotropic virus types I and II (HTLV-I and -II). Serum antibody (IgG) titre was >640. Apharesis was performed with a CS 3000 plus cell separator followed by the forming of the convalescent phase plasma. As part of the routine check with donated plasma, the convalescent plasma was confirmed free of residual SARS-CoV by RT-PCR. Serial serum samples obtained from the recipients of the convalescent plasma were collected to undertake real-time quantitative RT-PCR for SARS-CoV for direct measurement of viral concentration. Specific immunoglobulin IgM and IgG concentrations were titrated using an antigen microarray developed in-house. RESULTS: Viral load dropped from 495 x 10(3), 76 x 10(3) or 650 x 10(3) copies/mL to zero or 1 copy/mL one day after transfusion. Anti-SARS-CoV IgM and IgG also increased in a time-dependent manner following transfusion. All three patients survived. One HCW became pregnant subsequently, delivering 13 months after discharge. Positive anti-SARS-CoV IgG was detected in the newborn. Passive transfer of anti-SARS-CoV antibody from the mother was considered as a possibility. CONCLUSIONS: All infected HCW whose condition had progressed severely and who had failed to respond to the available treatment, survived after transfusion with convalescent plasma.     

广州不同人群血清SARS冠状病毒抗体研究

目的　了解广州不同人群血清SARS冠状病毒 (SARS CoV)抗体水平。方法　用酶联免疫分析 (ELISA)和免疫荧光分析(IFA)对SARS临床确诊病人、病人接触者、野生动物销售人员及正常人群的血清SARS冠状病毒IgG抗体进行检测和分析。结果　SARS确诊病人、病人接触者、野生动物销售人员及正常人群的血清抗体阳性率分别为 6 8.7% (36 6 / 5 33)、4 .9% (13/ 2 6 7)、13.2 % (4 8/ 36 3)、2 .3% (7/ 310 ) ;抗体几何平均滴度 (GMT)分别为 15 6 .97、18.90、2 8.73、11.0 4 ;SARS病人、野生动物销售人员的抗体水平明显高于正常人群 (P <0 .0 1)。SARS病人的血清IgG抗体阳性率及抗体滴度随发病天数逐渐上升 ,15d后阳性率达6 5 .0 %以上 ,GMT超过 93.3,30～ 4 0d达峰值 (阳性率和GMT分别为 77.8%、189.3) ,15 0d左右仍维持较高水平。各年龄组和性别组的抗体水平无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　广州不同人群血清中都有不同程度的SARS冠状病毒IgG抗体 ,经过本次SARS流行 ,人群的免疫性有所提高。     

传染性非典型肺炎限制性内切酶检测方法的研究

目的建立一种对传染性非典型肺炎，又称严重急性呼吸综合征（SARS）准确诊断的新方法。方法利用GCG软件将已公布的SARS病毒变异品系与人类基因组、人类易感病原体进行比对分析。结果筛选出了用于检测的S-cDNA核苷酸片段，并在该片段中确定特异性的酶切位点，使检测方法的准确性得以保证。结论与传统检测方法比较，限制性内切酶分析法完全克服了检测中非特异性结果的产生，使检测结果准确可靠。     

非典型肺炎血清SARS冠状病毒抗体的检测及其意义

【目的】探讨非典型肺炎患者血清SARS冠状病毒抗体IgM、IgG检测意义。【方法】应用ELISA法对16例SARS患者、147例发热隔离患者、23例体格检查健康者进行血清SARS抗体IgM、IgG检测。【结果】12例SARS患者入院时8例检出SARS抗体IgM阳性,出院时9例检出SARS抗体IgG阳性;其中7例SARS患者康复出院半年后复查均检测出高滴度SARS抗体IgG,同时有2例仍检出SARS抗体IgM。2例重症患者血清动态结果观察到,从入院到出院的标本均同时检测到高滴度的SARS IgM、IgG;2例轻症SARS患者各只检测到一次SARS抗体IgM弱阳性;发热隔离区患者有6例从入院至出院均检测到SARS抗体IgG,其中两例滴度较高。健康体检者无一例SARS抗体阳性。【结论】ELISA检测SARS冠状病毒抗体IgM、IgG可作为一种辅助鉴定非典型肺炎患者的临床检测和确诊手段。     

严重急性呼吸综合征特异性体液免疫规律调查

目的:调查严重急性呼吸综合征患者特异性体液免疫规律。方法:采用间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法检测SARS患者血清中特异性抗体水平。结果:SARS患者血清特异性抗体IgG水平在住院5周内持续升高,第5周达最高值,5周后逐步下降,第6～7周阳性率为100%。特异性抗体IgM水平在住院3周内持续升高,第3周达到最高值,阳性率为70%,第4周逐步下降。抗SARS病毒核蛋白抗体水平在住院第5周达最高值,5周后略有下降,住院5～18周阳性率达100%。结论:SARS患者血清特异性抗体检测对于SARS临床诊断、康复血浆治疗和流行病学调查具有重要价值。