乳腺癌循环肿瘤细胞检测的临床应用

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,其复发转移会增加患者死亡率,研究显示转移的发生发展由早期存在于外周血的循环肿瘤细胞所介导。循环肿瘤细胞是从恶性肿瘤原发部位脱落,通过血管或淋巴系统进入血液循环的癌细胞,其通常被认为是癌症发生转移的前提,而且会以单一细胞、细胞簇等形式出现于患者机体的血液中,其检测无创、方便、可重复性好,在乳腺癌的早期诊断和预后中起着重要的作用,并可监测患者辅助化疗的疗效,有助于新辅助化疗及辅助化疗方案的选择,为实现乳腺癌患者个性化治疗提供新的靶点。本文就循环肿瘤细胞检测在乳腺癌临床应用中的进展做一综述。     

乳腺癌循环肿瘤细胞与原发肿瘤临床病理特征关系的初步研究

目的 探讨乳腺癌循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)与原发肿瘤临床病理特征的关系.方法 128例乳腺癌及30例乳腺纤维腺瘤患者首次住院时抽取静脉血5 ml,用密度梯度离心法富集分离单个核细胞,以免疫荧光法检测所获单个核细胞中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)8/18阳性的CTC,分析CTC与患者临床病理特征的关系.结果 在128例乳腺癌患者中CTC阳性率为40.6%(52/128),30例乳腺纤维腺瘤患者均未检出CTC.不同淋巴结病理分期(pN0、pN1、pN2和pN3期)患者CTC阳性率分别为15.4%(6/39)、27.O%(10/37)、64.7%(11/17)和66.7%(12/18),各组CTC阳性率差异有统计学意义(P=0.000 6);转移性(M1期)乳腺癌患者CTC阳性率为80%(16/20),较非转移性(M0期)乳腺癌患者CTC总阳性率33.3%(36/108)显著升高(P=0.000 9);小同TNM分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期)患者CTC阳性率分别为12.5%(3/24)、32.0%(16/50)、50.0%(17/34)和80.0%(16/20),各组CTC阳性率差异有统计学意义(P=0.000 3).结论 部分乳腺癌患者血液中存在CTC.CTC与淋巴结转移、远处转移及TNM分期密切相关.检测CTC有利于进行更精确的病情评估.     

乳腺癌循环肿瘤细胞临床研究进展

目前,乳腺癌治疗已逐步进入分子分型治疗时代,为患者提供了有效的个体化治疗。而乳腺癌循环肿瘤细胞的发现更能为乳腺癌个体化治疗提供了新的治疗靶点、监控指标以及疗效和预后的评价指标。作者就近年来乳腺癌循环肿瘤细胞与乳腺癌化疗、内分泌治疗及分子靶向治疗的相关临床研究作一综述。     

青、老年乳腺癌临床病理分析

目的：分析青年组乳腺癌和老年组乳腺癌的临床病理特征。方法：回顾性分析新疆维吾尔自治IXA．民医院1998年1月-2004年12月收治的142例乳腺癌资料，将其分为青年组（≤35岁）和老年组（〉60岁）。青年组53例。老年组89例，比较两组的临床病理学特点。结果：雌激素受体阳性青年组少于老年组（P=0．012）；组织学分级Ⅰ级中，青年组明显较老年组少，Ⅲ级明显多于老年组（P=0．033）；淋巴结转移阳性者，青年组明显高于老年组（P=0．003）；老年组乳腺癌中，ER、PR的表达与组织学分级之间有显著的相关性（P=0．003、P=0．007），淋巴结状况也与组织学分级显著相关（P=0．002）。肿瘤大小、部位、病理类型、孕激素受体的表达、p50及C-erbB-2的表达两组相比均无统计学差异（P〉0．05）。结论：本研究提示青年乳腺癌的恶性程度高，生物学行为差，应采取积极治疗，以提高其生存率。老年乳腺癌恶性程度较青年乳腺癌低，预后较好，治疗需要适合患者的健康状况，尽量减少并发症。     

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌预后评估中的作用及与乳腺癌分子分型的关系

循环肿瘤细胞（CTC）的发现,给乳腺癌一开始就是全身性疾病提供了有力证据。动态监测血液中CTC可以早期发现乳腺癌的远处转移和疾病进展情况,为评估治疗效果和患者预后提供依据。随着在基因和分子生物学水平对CTC研究的深入开展,CTC检测有望成为评价肿瘤生物学变化的指标,更有利于个体化治疗。本文就CTC在乳腺癌预后评估中的作用及与乳腺癌分子分型的关系作一综述。     

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌中的可行性分析

目的:探讨乳腺癌患者开展循环肿瘤细胞(TCT)检测的可行性.方法:2016年5月-2018年1月收治乳腺癌患者120例,按TNM分期不同分为四组,各30例;患者均进行TCT检测,分析四组CTC表达水平.结果:B、C、D组患者CTC阳性率高于A组,差异有统计学意义(P<0.05).D组CTC阳性率与C组比较,差异无统计学...     

血清Six1与乳腺癌临床病理特征的关系研究

目的 研究乳腺癌患者血清中的Six1（sine oculis homeobox homolog 1）水平,探讨其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法 应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测原发性乳腺癌患者（60例）、乳腺良性疾病患者（45例）和正常对照者（20例）的血清Six1水平。结果 乳腺癌患者血清中Six1水平明显高于乳腺良性疾病患者及正常对照者,且乳腺良性疾病患者血清Six1水平也高于正常对照者（P<0.05）。乳腺癌患者血清中Six1高水平与肿瘤TNM分期、组织学分级以及淋巴结转移有关（P<0.05）,与年龄、肿瘤直径无关（P>0.05）。结论 Six1与乳腺癌的发生及其侵袭转移具有相关性,其变化在乳腺癌的转移和预后评测中起重要作用。     

循环肿瘤细胞在乳腺癌诊治中的应用

乳腺癌是女性患病率最高的恶性肿瘤,复发转移是导致乳腺癌死亡的主要原因.循环肿瘤细胞(CTCs)的产生与肿瘤转移密切相关.CTCs作为一种代表性的"液体活检",能更直观、实时、无创地进行组织学鉴定.随着对CTCs研究的不断深入,对其进行高特异性和高敏感性的检测可为早期和转移性乳腺癌患者明确治疗方案、判断疗效及预后,对减少...     

循环肿瘤细胞在可手术乳腺癌患者中的检出率及特征分析

目的：探讨循环肿瘤细胞（ CTCs ）在可手术乳腺癌患者外周血中的水平及与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法收集T2～4 N0～3 M0可手术乳腺癌患者126例。抽取入组患者7.5 mL外周血,使用CellSearch系统检测CTCs。分析CTCs与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果在126例患者中,有9例患者检测到CTCs,检出率为7.1％。 CTCs阳性组的Ki67为（51±20）％,CTCs阴性组的Ki67为（33±23）％（ P＝0.04）。可手术乳腺癌患者外周血检出CTCs与患者年龄、月经状态、肿块大小、淋巴结状态、AJCC分期、病理类型、病理学分级、ER、PR、HER2状态以及分子分型无关。结论7.1％的可手术乳腺癌患者检测到CTCs,CTCs与Ki67相关。     

乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞相关性探讨

目的探讨乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的相关性。方法抽取116例乳腺癌及20例乳腺纤维腺瘤患者外周静脉血5 ml,利用密度梯度离心法富集单个核细胞,通过荧光定量PCR技术检测所获单个核细胞中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)19 mRNA表达阳性的CTC,分析乳腺癌分子分型与CTC的关系。结果 116例乳腺癌患者中CTC阳性率为31%(36/116),20例乳腺纤维腺瘤患者均未检测出CTC。36例CTC阳性患者的中位CTC水平为1.65(1.18,2.87)个MCF-7细胞/2μg总RNA;116例乳腺癌患者中各分子亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)所占比例分别为62.1%(72/116)、17.2%(20/116)、20.7%(24/116);各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性率分别为27.8%(20/72)、35%(7/20)、37.5%(9/24),差异无统计学意义(P=0.615),各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性患者的中位CTC水平分别为2.1(1.18,3.9)、1.37(1.12,2.12)、1.53(1.32,2.64)个MCF-7细胞/2μg总RNA,差异有统计学意义(P=0.046)。结论乳腺癌各分子亚型间CK-19 mR-NA阳性CTC水平存在差异,提示各亚型间临床异质性可能与患者CTC水平相关。     

乳腺癌病人循环肿瘤细胞检测的临床意义

目的:探讨乳腺癌外周静脉血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)检测的临床意义.方法:收集女性乳腺癌病人60例,在新阶段治疗前采集病人外周静脉血,采用密度梯度离心法联合流式细胞术法检测CTCs,免疫组织化学法检测ER、PR、HER-2、p53、Ki-67表达.同期选取20名健康女性志愿者作为阴性对照组.结果:观察组CTCs阳性表达率为38.3% (23/60),对照组均未检出CTCs阳性表达,2组CTCs阳性表达差异有统计学意义(P<0.01).不同年龄、不同病理类型病人间CTCs阳性表达差异均无统计学意义(P>0.05);不同TNM分期病人CTCs阳性表达差异有统计学意义(P<0.01);转移性乳腺癌病人CTCs阳性表达明显高于非转移性病人(P<0.01).不同ER、PR、HER-2、Ki-67表达病人的CTCs阳性表达差异均无统计学意义(P>0.05),不同分子分型病人间的CTCs阳性表达差异亦无统计学意义(P>0.05).结论:CTCs与乳腺癌TNM分期及肿瘤细胞转移有关,对指导乳腺癌的诊断、治疗及预后判断有重要意义.     

胃癌患者围手术期循环肿瘤细胞变化及其与临床病理分期的相关性

目的 了解胃癌患者围手术期外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)数量的变化及其与肿瘤病理分期的相关性。方法 应用肿瘤细胞微流控芯片技术检测手术前1天、手术后1周胃癌患者CTCs,并与其临床病理资料进行对比,阐明两者之间的相关性。结果 在92例胃癌患者中,术前外周血CTCs阳性者58例,阳性率为63%;CTCs阳性的胃癌患者与肿瘤浸润深度、脉管侵犯、神经侵犯都具有相关性（P=0.02）;术后1周60.5%患者CTCs消失或减少,CTCs数量没有变化甚至增多者主要见于TNM分期晚（Ⅳ期）患者。结论 胃癌患者外周血中CTCs与其临床病理分期具有密切相关性。     

细胞角蛋白的表达水平与结直肠癌临床病理学特征的相关性研究

目的 研究细胞角蛋白(cytokeratin,CK)在结直肠癌组织中的表达水平及其与临床病理特征的关系.方法 收集行手术切除并经病理确诊的结直肠癌组织蜡块标本200例,同时选取其对应的癌旁正常组织作为对照.采用免疫组织化学染色法检测结直肠癌组织与癌旁组织中CK7、8、18～20的表达情况,并统计分析其表达水平与结直肠癌...     

乳腺癌外周血循环肿瘤细胞变化与新辅助化疗效果的关系

目的 探讨乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)变化情况与新辅助化疗(neoadjuvant or primary chemotherapy,NCT)疗效的关系.方法 抽取70例乳腺癌患者NCT前后健侧上肢静脉血5mL,利用密度梯度离心法富集血标本中单个核细胞,通过荧光定量RT-PCR技术检测所获得单个核细胞中细胞角蛋白-19(cytokeratin-19,CK-19)阳性的CTC数目.结果 NCT前外周血CTC检出率为24.29％ (17/70),与患者年龄(P =0.008)及HER-2(P =0.022)表达情况有关.根据NCT前后CTC检测情况,将患者分为阳性-阳性、阳性-阴性、阴性-阳性及阴性-阴性4组,以RECIST标准评估NCT疗效时,4组有效率依次为66.67％ (2/3)、78.57％ (11/14)、0(0/4)和71.43％ (35/49),差异具有统计学意义(P=0.023);以Miller-Payne标准评估NCT疗效时,4组有效率依次为66.67％(2/3)、71.43％ (10/14)、0(0/4)和69.39％ (34/49),差异具有统计学意义(P=0.043).结论 NCT前后CTC的变化情况与疗效有一定关系,CTC可作为评估NCT疗效的潜在预测指标.     

Methylated APC and GSTP1 genes in serum DNA correlate with the presence of circulating blood tumor cells and are associated with a more aggressive and advanced breast cancer disease

Background

Tumor-related methylated DNA and circulating tumor cells (CTC) in the peripheral blood might be of prognostic importance in breast cancer. Thus, the aim of our study was to examine free methylated DNA and CTC in the blood from breast cancer patients and to correlate it with clinicopathological features known to influence prognosis.

Materials and methods

We prospectively obtained serum samples from 85 patients with breast cancer and 22 healthy volunteers. Sera were analysed by methylation specific PCR (MethyLight PCR) for five genes: adenomatous polyposis coli (APC), ras association domain family protein 1A (RASSF1A), estrogen receptor 1 (ESR1), CDKN2A (p16) and glutathione s-transferase pi 1 (GSTP1). Beta actin (ACTB) served as control. In parallel matched peripheral blood of 63 patients was used to assay for circulating tumor cells in the peripheral blood by a modified immunomagnetic AdnaTest BreastCancerSelect with PCR detection for EPCAM, MUC1, MGB1 and SPDEF.

Results

We found a hypermethylation in the APC gene in 29% (25/85), in RASSF1A in 26% (22/85), in GSTP1 in 18% (14/76) and in ESR1 in 38% (32/85) of all breast cancer patients. No hypermethylation of CDKN2A was found (0/25). Blood samples of patients were defined CTC positive by detecting the EPCAM 13% (8/63), MUC1 16% (10/63), MGB 9% (5/55), SPDEF 12% (7/58) and in 27% detecting one or more genes (15/55). A significant difference was seen in methylated APC DNA between cancer patients and healthy volunteers. Moreover, methylated APC, RASSF1 and CTC were significantly different in metastatic versus non-metastatic disease. In addition, the presence of methylated APC, RASSF1A and CTC correlated significantly with AJCC-staging (p = 0.001, p = 0.031 and 0.002, respectively). High incidences of methylations were found for the genes RASSF1 and ESR1 in healthy individuals (both 23% 5/22). Methylated GSTP1 was predominantly found in the serum of patients with large primaries (p = 0.023) and was highly significantly correlated with positive Her2/neu status (p = 0.003). Elevated serum CA15.3 was strongly correlated with methylated APC and CTC detection (both p = 0.000). Methylated ESR1 failed to exhibit significant correlations with any of the above mentioned parameters. The presence of CTC in peripheral blood was significantly associated with methylated APC (p = 0.012) and methylated GSTP1 (p = 0.001).

Conclusion

The detection of methylated APC and GSTP1 DNA in serum correlated with the presence of CTC in the blood of breast cancer patients. Both methylated DNA and CTC correlated with a more aggressive tumor biology and advanced disease.     

巢式RT-PCR检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值

目的:联合采用细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及乳腺上皮黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)指标,探讨通过巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)的临床价值?方法:采用MCF-7 RNA与健康志愿者外周血单核细胞(peripheral mononuclear cell,PMNC)RNA进行梯度混合后的反转录产物,检测优化后巢式RT-PCR体系的敏感性,再选择10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血检测其特异性后,对56例乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA及SBEM mRNA表达情况进行检测? 结果:优化后的检测体系能够在3 ml外周血PMNCs中检测到1个MCF-7细胞,10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血中未检测到CK19 mRNA与SBEM mRNA的表达;两者的表达与原发肿瘤大小,腋窝淋巴结状况及TNM分期相关(P < 0.05),而与原发肿瘤病理类型,激素受体以及C-erbB-2的表达无明显相关性(P > 0.05)? 结论:经过优化的巢式RT-PCR体系联合检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA及SBEM mRNA的表达敏感性和特异性较高,能用于检测外周血CTC,对进一步精确评估预后及指导治疗可能有较高的临床价值?     

乳腺癌间质细胞的特征及其对肿瘤细胞的调控

肿瘤的发生与其周围组织细胞及细胞外基质等微环境的改变密切相关。肿瘤间质细胞不仅充当支持者的角色,而且直接或间接作用于肿瘤实质细胞,包括对肿瘤生长的抑制或促进作用及调控肿瘤上皮细胞的恶性表型等,从而参与肿瘤的发生、发展和转移。鉴于肿瘤间质细胞对于肿瘤细胞复杂的调控效应,近年来相关研究逐渐深入。     

循环肿瘤细胞和播散肿瘤细胞对食管癌患者预后的meta分析

目的 用循环肿瘤细胞(CTCs)和播散肿瘤细胞(DTCs)预测食管癌患者的预后仍存在争议,本文旨在探究食管癌患者CTCs/DTCs是否与患者临床病理特征、预后及生存状况存在相关性.方法 通过PubMed、Web of Science、Embase及Cochrane数据库检索所有CTCs/DTCs相关研究.制定文献纳入/排除标准并依此选择文献.以比值比(OR)、相对危险度(RR)、风险比(HR)和95％可信区间(95％ CI)作为效应指标,用Review Manager5.3、Statal2.0软件进行计算和分析.结果 共纳入19项研究,包含1766例食管癌患者.Meta分析显示,CTCs/DTCs与患者下列临床病理参数:肿瘤分期(OR=1.95)、浸润深度(OR=1.99)、淋巴结转移(OR=2.44SEN)、远处转移(OR=5.98sEN)、分化程度(OR=1.67)、淋巴脉管转移(OR=4.48);预后:复发(RR=6.86SEN)、转移(RR=3.22);生存状况:总体生存率(OS)整体分析(HR=3.46)、无病生存率/无进展生存率(DFS/PFS)整体分析(HR=3.00)显著相关.结论 食管癌患者CTCs/DTCs与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、分化程度、淋巴脉管转移、复发、转移显著相关,也与总体生存率、无病生存率/无进展生存率显著相关.因此,CTCs/DTCs可作为食管癌患者临床预测指标.