高产胞外多糖的嗜酸乳杆菌诱变筛选

嗜酸乳杆菌所产生的胞外多糖不仅对于酸乳的质地结构有影响,同时其还具有多种生物活性.研究主要是在市售酸奶中分离得到嗜酸乳杆菌、通过化学诱变的方法选取具有高产胞外多糖性能的嗜酸乳杆菌,其产量能够达到6.458g/L,遗传稳定性发现胞外多糖产量降幅在10%以内.     

嗜酸乳杆菌胞外多糖提取工艺优化

微生物的胞外多糖是微生物在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的黏液多糖或荚膜多糖,是具有增稠和胶体性质并能溶解或分散在水中的长链、高分子聚合物。试验以嗜酸乳杆菌胞外多糖为研究对象,对提取时间、提取的乙醇体积分数和提取的料液比进行单因素实验,并利用sas软件对其提取工艺进行优化,得到在80%体积分数的乙醇下,以1∶1.8(体积比)的料液比抽提12 h,得到的多糖的产量为1.91 g/L。     

嗜酸乳杆菌NCFM对IL-6ST调控作用研究

研究了嗜酸乳杆菌NCFM作用于Caco-2和灌服小鼠后对免疫相关细胞因子白细胞介素6受体(IL-6ST)表达的影响,确定其免疫调节作用。在Caco-2细胞与嗜酸乳杆菌NCFM作用后,采用Real Time PCR方法检测il-6st基因的表达,il-6st基因的表达量呈现下降的趋势;嗜酸乳杆菌NCFM灌服小鼠后,肠道上皮细胞中il-6st基因短暂性上调后下降的趋势。通过特异性抑制剂PDTC证明il-6st基因的表达受到p38 MAPK途径的调控。因此,嗜酸乳杆菌NCFM能够诱导细胞因子il-6st短暂性的表达,进一步增加了其具有免疫调节作用的证据。     

蓝莓汁及其提取物对嗜酸乳杆菌NCFM体外生长的影响

蓝莓汁、蓝莓花青素和蓝莓多糖对嗜酸乳杆菌NCFM(Lactobacillus acidophilus NCFM)体外生长影响表明,24 h培养期间,添加蓝莓汁会促进嗜酸乳杆菌NCFM的生长,蓝莓汁添加量低于70％时,随蓝莓汁添加量的增加益生茵NCFM的细胞活茵数上升;当蓝莓汁添加体积分数高于70％时,促进菌株NCFM生长的作用趋于稳定;当添加量达到100％时,促进益生菌NCFM生长的作用开始减弱.添加单一蓝莓花青素对嗜酸乳杆茵NCFM的生长无明显作用;蓝莓多糖添加量为100 mg/L时能较好的促进菌株NCFM的生长,37 ℃培养24 h,细胞活菌数可达到8.323× 108 mL-1.目前的工作表明,在发酵乳中添加适当浓度的蓝莓能促进益生茵数量的增殖.     

乳酸菌胞外多糖增强小鼠免疫功能的研究

研究乳酸菌胞外多糖在增强小鼠免疫功能方面的作用。将200 只昆明种小鼠(雌雄各半)随机分为5 组,分别灌喂生理盐水及高、低剂量的乳酸菌胞外多糖纯多糖和粗多糖15d,测定小鼠的细胞免疫、体液免疫及单核- 巨噬细胞的吞噬能力。结果表明,与NS 组相比,多糖组可以显著提高小鼠脾脏、胸腺的重量,提高小鼠单核- 吞噬细胞碳廓清的能力,降低小鼠的血清溶血值;粗多糖高剂量组可以使小鼠足跖肿胀度明显增加;纯多糖高剂量组和粗多糖高剂量组可以显著地提高T 淋巴细胞的增殖(p ＜ 0.05 或 p ＜ 0.01)。因此,乳酸菌胞外多糖具有增强小鼠免疫力的功能。     

嗜酸乳杆菌NCFM黏附定植能力的研究

采用实时定量(Real-time)PCR的方法对嗜酸乳杆菌NCFM在小鼠肠道中的定植情况进行了评价。通过研究发现,实时定量(Real-time)PCR用来菌数的评估具有非常好的线性关系和稳定性。小鼠灌胃一周的过程中,在小鼠的十二指肠、回肠、空肠、盲肠、结肠和粪便中菌体的数量并没有出现数量级上的增长或减少,说明我们灌胃的菌体浓度适当,并没有引起小鼠体内的菌群失调。而在灌胃第1 d,基本上各部分的肠组织和粪便中菌体的数量都有增加,说明灌胃初期菌体在肠道中有较好的定植。而第3、5和7 d小鼠肠道和粪便中的菌体数量上下波动,但并没有显著地增加或减少,说明小鼠体内的菌群数量达到了一个平衡,并不会因为持续灌胃就打破这个平衡。因此,嗜酸乳杆菌NCFM具有良好的定植能力。     

嗜酸乳杆菌胞壁肽聚糖对小鼠肠黏膜的免疫调控

通过建立以致病性大肠杆菌感染小鼠为模型,研究氧化修饰前后嗜酸乳杆菌肽聚糖（peptidoglycan,PG）对小鼠肠道上皮细胞病理形态影响,及对感染大肠杆菌肠黏膜分泌sIgA、血清干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的影响,发现灌胃PG后能够促进小肠黏膜分泌sIgA,降低IFN-γ及TNF-α的表达,且选择性氧化修饰PG比未修饰PG具有优势。可见,嗜酸乳杆菌在肠道免疫方面,可以通过其功能性PG提高对小肠黏膜的免疫调控作用。     

乳杆菌胞外多糖及其在酸乳中的应用

乳酸菌胞外多糖是近十年来乳品科学的研究热点。在乳酸菌中,有关乳杆菌胞外多糖的研究报道越来越多。乳杆菌胞外多糖不仅在发酵乳的流变学特性、产品的结构和质地以及口感等方面起到重要作用,有的胞外多糖还具有抗癌、抗溃疡、免疫调节或降胆固醇等活性。本文主要讨论乳杆菌胞外多糖的结构特性、分离纯化和定量方法、影响胞外多糖产量的因素以及在酸乳中的应用。     

乳酸菌胞外多糖及其对酸乳品质的影响

综述了乳酸菌胞外多糖的研究,包括胞外多糖分类、生物合成、影响合成因素,并讨论了乳酸菌胞外多糖对酸乳品质的影响。     

乳酸菌胞外多糖及其对酸乳品质的影响

综述了乳酸菌胞外多糖的研究,包括胞外多糖分类、生物合成、影响合成因素,并讨论了乳酸菌胞外多糖对酸乳品质的影响。      

Lactobacillus casei HS4胞外多糖对发酵乳组织结构和流变特性的影响

研究干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）HS4所产乳酸菌胞外多糖（exopolysaccharide,EPS）及其对发酵乳微观结构和流变性的影响。通过Sephadex G-50柱纯化得到两种类型的EPS,分别命名为HS4-1-EPS和HS4-2-EPS。HS4-1-EPS主要由葡萄糖组成,峰面积为0.940。HS4-2-EPS主要由葡萄糖和甘露糖组成,峰面积比为0.3830.364。红外光谱结果显示,HS4-1-EPS和HS4-2-EPS均为杂多糖。分别采用干酪乳杆菌HS4、嗜热链球菌-保加利亚乳杆菌（11）复合菌株以及复合菌株添加纯化EPS制成的不同发酵乳作为样品,通过测定流变特性及微观结构观察,研究补充纯化EPS和原位EPS对发酵乳流变特性及微观结构的影响。结果显示,其在4 ℃贮存期间显示出不同的流变特性及微观结构。基于扫描电镜下样品的微观结构,可以推知,EPS的类型和空间阻挡效应与发酵乳的流变性质相关。     

产胞外多糖植物乳杆菌的筛选及粗多糖的活性研究

通过观察乳酸菌菌落拉丝状况并测定其胞外多糖（exopolysaccharide,EPS）的产量,筛选出1 株所产EPS黏性好、产量高的乳酸菌AR307,经鉴定为植物乳杆菌。为得到更多的胞外多糖,对植物乳杆菌AR307的发酵条件进行优化,确定其在发酵温度32 ℃、发酵时间20 h条件下的产糖量为389 mg/L。在体外实验中,所得胞外多糖具有抑制HT-29肿瘤细胞活性、降低血糖水平的作用。     

Functional properties of Lactobacillus acidophilus metabolites

BACKGROUND: This study addressed the characteristics of metabolites synthesized by Lactobacillus acidophilus 5e2, with particular attention paid to exopolysaccharides, biosurfactants, proline peptidases and antibacterial compounds. RESULTS: The strain Lb. acidophilus 5e2 synthesizes low‐molecular‐mass polysaccharides (340 kDa) constituted by glucose, galactose and glucosamine at a ratio of 3.3:2.8:1.0, as well as biosurfactants with a molecular mass of 32 kDa built from a protein fraction, a polysaccharide fraction and phosphate groups. It additionally synthesizes extra‐ and intracellular proline peptidases, including prolyl endopeptidase and thermostable low‐molecular‐mass (<3.5 kDa) compounds with antimicrobiological activity against Escherichia coli strains. CONCLUSION: The strain Lb. acidophilus 5e2 may be applied to the production of functional food. Copyright © 2009 Society of Chemical Industry     

一株马乳酒样乳杆菌胞外多糖的理化性质

ZW3胞外多糖是由分离自西藏开菲尔粒中的马乳酒样乳杆菌马乳酒亚种ZW3分泌产生,文中针对此多糖进行了理化特性的分析与表征。实验中,傅立叶变换红外光谱表明此多糖存在羧基、羟基和酰胺基,与典型的异型多糖结构相一致。气相色谱分析表明此多糖仅由半乳糖和葡萄糖构成。ZW3胞外多糖絮凝能力与黄原胶相似,比瓜尔胶的絮凝能力要强。相对于商业用途亲水胶体黄原胶、瓜尔胶和刺槐胶来说,ZW3胞外多糖具有更强的乳化能力,因此它具有作为商业用乳化剂的潜力。以上特性表明ZW3胞外多糖在工业应用方面特别是食品工业上拥有广阔的前景。     

嗜酸乳杆菌的微胶囊化研究

应用质量分数为1%海藻酸钠和3%明胶作为包埋材料对嗜酸乳杆菌NCFM菌株进行微胶囊化处理,包埋后的微胶囊在36min内完全崩解,释放出的活菌数最多,可达1.15×109g-1。经人工胃液及人工肠液处理3h后,微胶囊化的活菌数分别为3.85(109mL-1和2.53×109mL-1,显著高于两种条件的对照处理(P<0.05)的活菌数(分别为2.80×109mL-1和2.01×109mL-1)。与对照处理的发酵酸度(39°T)和氨基酸质量浓度(2.03g/L)相比,经胃液处理3h后的菌株在灭菌脱脂乳中发酵48h后,其酸度、氨基酸含量明显提高(P<0.01),分别为123°T和2.59g/L。经肠液处理24h后的菌株,在同样条件下发酵灭菌脱脂乳48h后的酸度(114°T)和氨基酸质量浓度(2.24g/L)显著高于对照(P<0.01)处理(酸度为69°T,氨基酸质量浓度为1.79g/L)。经人工胃液处理3h和肠液处理24h后的菌株,在MRS培养基中培养16h后,其细胞!-半乳糖苷酶活力较对照处理明显提高(P<0.01),分别为1.14mmol/(g·min)和0.58mmol/(g·min),而同样条件下对照处理的!-半乳糖苷酶活力分别为0.66mmol/(g·min)和0.32mmol/(g·min)。显然,微胶囊化处理能明显提高嗜酸乳杆菌在极端环境下的存活能力。     

鼠李糖乳杆菌JAAS8胞外多糖生物合成基因的克隆和序列分析

根据已报道乳杆菌胞外多糖生物合成基因的同源性,利用其保守区设计引物,扩增出鼠李糖乳杆菌JAAS8RmlA基因部分序列,并通过染色体步移法扩增出Rml(ACB)的序列。获得了鼠李糖乳杆菌JAAS8胞外多糖生物合成基因4.1 kb序列片段,编码4个可读框。利用BLAST和ClustalX程序对获得序列进行生物信息学分析,预测其结构和功能。结果表明:该序列与已知鼠李糖乳杆菌胞外多糖生物合成基因具有高度同源性,RmlA、RmlC和RmlB基因与dTDP-L-鼠李糖前体的生物合成密切相关。     

鼠李糖乳杆菌JAAS8胞外多糖生物合成基因的克隆及生物信息学分析

根据已知乳杆菌胞外多糖生物合成基因的同源性,利用其保守区设计引物,扩增出鼠李糖乳杆菌JAAS8磷蛋白磷酸酶基因(wzb)序列,并通过染色体步移法克隆了鼠李糖乳杆菌 JAAS8 参与胞外多糖生物合成基因簇全部序列 (19.7kb),利用生物信息学方法预测了基因簇 16个阅读框的结构和功能。结果表明,该序列与已报道的乳杆菌胞外多糖生物合成基因具有高度同源性。welF、welG、welH、welI、welJ和welE为合成寡糖重复单元的糖基转移酶基因。rmlA、rmlB和rmlC基因与dTDP-L-鼠李糖前体的生物合成密切相关。wzd、wze、wzy、wzx、wzr和wzb基因预测蛋白主要参与胞外多糖合成过程中多糖链长检测、聚合和输出。     

微胶囊化的嗜酸乳杆菌在极端环境下的生理特性研究

研究了嗜酸乳杆菌NCFM菌株经胶囊化处理后对逆境的抵抗能力。结果表明,经pH值为2.5的酸处理后,微胶囊化菌株的活菌数(6.4×108 mL-1)、酸度(95oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.127 mmol/g.min),明显高于对照菌株(P<0.01)的活菌数(2.3×108 mL-1)、酸度(56 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.078 mmol/g.min);经质量浓度为14 g/L的胃蛋白酶处理后,与对照菌株的活菌数(7.8×108 mL-1)、酸度(70 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.01 mmol/g.min)相比,微胶囊化菌株的活菌数、酸度、!-半乳糖苷酶活力明显提高(P<0.01),分别为1.41×109 mL-1,119 oT和0.075 mmol/g.min;经质量分数为0.4%胆盐处理后,微胶囊化菌株的活菌数(4.8×108 mL-1)、酸度(98 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.97 mmol/g.min),明显高于对照菌株(P<0.01)的活菌数(2.9×108 mL-1)、酸度(52 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.43 mmol/g.min);经质量浓度为3 g/L胰蛋白酶处理后,与对照菌株的活菌数(0.2×107 mL-1)、酸度(48 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.017 mmol/g.min)相比,微胶囊化菌株的活菌数、酸度、!-半乳糖苷酶活力显著提高(P<0.01),分别为3.5×108 mL-1,90.8 oT和0.1 mmol/g.min;经质量分数为18%的NaCl溶液处理后,微胶囊化菌株的活菌数(11.7×108 mL-1)、酸度(102 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.52 mmol/g.min),明显高于对照菌株(P<0.01)的活菌数(0.37×108 mL-1)、酸度(38 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.18 mmol/g.min)。显然,微胶囊化处理能明显提高嗜酸乳杆菌在极端环境下的存活能力。