5种中草药对不同分离株禽源大肠杆菌体外抑菌试验

为了探讨5种具有清热解毒功效中草药水提液的体外抑菌活性,采用水煎法提取中草药有效成分,以琼脂扩散法分别测定金银花、蒲公英、连翘、板蓝根和甘草的水提物对本地分离的5株禽源大肠杆菌的抑菌活性及最小抑菌浓度(MIC).结果表明,对本地5株禽源大肠杆菌抑菌圈最大的是连翘、金银花,其抑菌圈直径约在15~20mm,其次为蒲公英,其抑菌圈直径在10~15mm.连翘、蒲公英、金银花最小抑菌浓度在0.031~0.5g/mL,甘草对两种大肠杆菌的最小抑菌浓度都在0.5g/mL.说明除板蓝根外,其余4种中草药对上述细菌具有不同程度的抑菌效果,连翘、金银花的抑菌效果更佳.     

6味中草药及配伍方剂提取物对3株大肠杆菌的体外抑菌试验

选用6味中草药及配伍方剂提取物为试验对象,采用以酚红为指示剂的改良马丁液体培养基(加微量酚红),利用试管二倍稀释法测定各味中药及配伍方剂对3株大肠杆菌的最小抑菌浓度。试验结果表明,在单味中药比较时黄连对大肠杆菌抑菌效果良好,方剂中大青叶、板蓝根、鱼腥草、金银花以及黄连的组方对大肠杆菌抑菌效果良好。     

复合益生菌与金霉素配合抑制大肠杆菌生长的研究

[目的]为益生菌和抗生素的配伍使用提供理论依据.[方法]选用乳酪杆菌、粪肠球菌、枯草芽孢杆菌和布拉迪酵母4种益生菌与金霉素配比,通过正交试验研究其对致病菌性大肠杆菌的抑制作用,探讨金霉素与微生态制剂的最佳配伍比例.[结果]复合益生菌抑制大肠杆菌的最佳组合为:枯草芽孢杆菌∶酵母菌∶乳酪杆菌∶粪肠球菌=2∶1∶3∶4.单独复合益生菌对大肠杆菌的抑制作用与75～150 mg/kg的金霉素相当.随着金霉素浓度的提高,无论是单一的金霉素还是与益生菌复合,其抑菌作用均逐渐增强(P＜0.05).当150 mg/kg的金霉素与益生菌配合时,其抑菌效果与单独使用300～400 mg/kg金霉素相当.[结论]低浓度金霉素与复合益生菌配合后,可以达到高浓度金霉素的抑菌效果.     

一株猪源发酵乳杆菌的体外特性研究

采用全自动曲线分析仪测定了猪源发酵乳杆菌X6的不同接种量、不同初始pH的生长曲线;采用琼脂平板扩散法检测该菌的抑菌能力,探讨该菌在不同高温下的存活时间;在体外模拟了该菌对人工胃液和人工肠液的耐受性.结果表明:在接种量1%、初始pH 5.3的条件下,该菌的生长情况最佳;该菌能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的生长;该菌在50、55、60℃处理2min时,存活率分别为99.19%、91.94%、80.65%;该菌在人工肠液和pH 3.0的人工胃液中存在4h后活性几乎不受影响,活菌数在109 CFU/mL以上,说明该菌具备作为益生性饲料添加剂的基本条件.     

益生菌对鸡大肠杆菌的抑制试验

鸡大肠杆菌病是肠道的常住菌,主要侵害4周龄以内的仔鸡,是由埃希氏大肠杆菌的致病性菌株所引起的疫病,在养鸡生产中危害甚大。近年来,应用有益微生物的制剂,该制剂是一种新型的饲料添加剂,具有调节畜禽肠道微生物群落,维持肠道正常菌群,抑制病原菌,对病原性大肠杆菌的生成繁殖具有一定的抑制作用。特别用其发酵饲料,可以有效的调整微生物菌群,对提高和增强动物体内器官的功能,提高动物对饲料的消化率和抗病能力具有明显的作用。     

蜡样芽孢杆菌对大肠杆菌的体外抑制研究

本试验通过蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌同时接种及分别先后接种等3种不同的接种方式分别于4h,8h、12h、24h,36h、48h等6个时间点观察抑制效果，以确定最佳接种方式。研究表明，先接种蜡样芽孢杆菌后接种大肠杆菌，抑制作用最强；蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌同时接种次之；先接种大肠杆菌后接种蜡样芽孢杆菌，抑制作用最弱。并且每种接种方式都在12小时左右出现抑制高峰。     

8种中草药对猪大肠杆菌的体外抑菌试验

为了探讨乌梅等8种中草药对猪大肠杆菌的体外抑菌作用,采用打孔法和试管二倍稀释法,选用乌梅、五倍子、五味子、秦皮、连翘、夏枯草、大黄、苍术等8种中草药水提物对猪大肠杆菌进行体外抑菌试验,测定抑菌圈的大小和最小抑菌浓度。结果表明:乌梅、五倍子、五味子对猪大肠杆菌呈高度敏感,秦皮、连翘、夏枯草呈中度敏感,大黄、苍术抑菌作用不明显。其中乌梅、五倍子、五味子水提物对猪大肠杆菌的抑菌效果较好,最小抑菌浓度为62.5 mg/mL,秦皮、夏枯草、连翘水提物对猪大肠杆菌的抑菌效果次之,为500 mg/mL。     

抗禽大肠杆菌中药的体外抑菌方法和效果的研究

为研究金银花、大青叶等10味中药对禽类大肠杆菌的体外抗菌效果,使用纸片法、打孔法同时对10种中药水提物进行体外抑菌试验,通过抑菌结果筛选较优抑菌试验方法,并测定抑菌效果较好中药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,两种方法检测的药物抑菌圈大小除甘草、重楼外,均呈现显著性差异(P≤005),且其中的金银花、黄柏、贯众、黄连四味药抑菌结果差异极显著(P＜001),说明纸片法效果更佳;10味中药中金银花、黄连的抑菌圈直径最大,分别为(1510±001),(1602±001) mm,呈高度敏感反应;二者的MIC分别是625,3125 mg·mL-1,MBC为125,625 mg·mL-1。试验得出较好的体外抑菌试验方法为纸片法,10种抗禽大肠杆菌中药中以金银花、黄连效果最佳。     

中草药制剂对猪链球菌和大肠杆菌的体外抑菌效果

为了观察中草药对猪场常见病原菌的体外抑菌效果,选取20种单味中草药及其组配的5组复方药物,按常规法制备水提取物,采用试管2倍稀释法分别检测单味中草药及复方药物对猪大肠杆菌和猪链球菌的体外抑菌活性.结果表明:单味中草药及复方中草药对二者均具有一定的抑制作用.     

nisin和EDTA对牛源致病性大肠杆菌体外抑菌效果的研究

为研究乳酸链球菌素(nisin)和四乙酸乙二胺(EDTA)的联合作用对5种血清型牛源致病性大肠杆菌(O_1、O_2、O_8、O_(78)和O_(86))的体外抑菌效果,利用牛津杯法测定抑菌圈直径;结合微量稀释法和平板法测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:1)nisin或EDTA单独使用无抑菌圈;2)将nisin分成12个质量浓度分别与0.1mg/mL的EDTA相混合进行协同作用,均产生明显的抑菌圈,并且随着nisin质量浓度的增加,抑菌圈越大;3)O_8、O_(78)和O_(86)型大肠杆菌的MIC均为0.063mg/mL,而O_1型的MIC为0.016mg/mL,O_2型的MIC为0.031mg/mL,O_2、O_8和0_(86)型大肠杆菌的MBC均为0.125mg/mL,O_1型的MBC为0.063mg/mL,O_(78)型的MBC为0.25mg/mL。EDTA或nisin溶液单独使用时,对5种血清型致病性大肠杆菌无抑菌效果;EDTA和nisin联合使用时,对5种致病性大肠杆菌有明显的抑菌效果;5种大肠杆菌的MIC为0.016~0.063 mg/mL,MBC为0.063~0.250mg/mL。     

硒蛋氨酸对猪细小病毒体外增殖的抑制作用

以PK15细胞为模型,研究不同浓度的硒蛋氨酸对猪细小病毒(PPV)体外复制的抑制作用。结果表明,在2～8μmol·L-1范围内,硒蛋氨酸对细胞生长没有影响,但对猪PPV的体外复制呈现显著的抑制作用(P<0.05),且随着浓度的增加其抑制作用增强。还原型谷胱甘肽和甘露醇均有增强硒蛋氨酸的抑制病毒复制作用,两者同时添加时,其作用更明显。     

载锌蒙脱石对大肠杆菌K88抗菌效果的影响

通过阳离子交换反应合成了载锌蒙脱石(Zn*Ca-MMT&Zn*Na-MMT),X射线衍射分析显示,载锌反应前后,蒙脱石的(001)面网间距增大,表明锌是以水合阳离子形式进入蒙脱石晶格层间位置。体外抗菌试验表明,蒙脱石(Ca-MMT&Na-MMT)未显抗菌活性,而Zn*Ca-MMT和Zn*Na-MMT对大肠杆菌K88均有很强的抑制和杀灭作用,且后者的杀菌效果优于前者。     

大肠杆菌K88菌毛蛋白faeG亚基基因克隆及表达

利用PCR技术,从致仔猪黄痢的大肠杆菌中扩增不含信号肽序列的K88菌毛蛋白faeG亚基基因片段,将其克隆到表达载体pGEX-6P-1中,构建该基因的原核表达载体pGEX-FaeG,通过测序证明序列正确后,导入大肠杆菌BL21,得到工程菌株PGEX-FaeG。IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,融合蛋白（约53ku）在大肠杆菌BL21中得到高效表达,表达产物约占菌体蛋白的35％,免疫印记结果表明此融合蛋白与K88单抗反应。     

猪肠毒素大肠杆菌（ETEC）F4受体的微卫星标记分析

从猪13号染色体选取与Escherichia.coli（ETEC）F4受体基因连锁的8个微卫星座位研究不同猪种间的遗传特性,并分析不同基因型与F4受体黏附表型的关系。结果表明,2个猪种在8个基因座均具有高度多态性,杂合度（H）在0.6117～0.7500之间,多态信息含量（PIC）达0.5749以上。在微卫星座位S0223和 SW207,两个猪种不同基因型在F4ab和F4ac血清型黏附表型上差异显著或者极显著,可能F4ab和ac受体就位于这2个位点附近（之间）。这为抗性猪的选择提供了可能,这两个微卫星座位可望作为E.coli F4抗性基因的遗传标记。     

生发泡移植过程对小鼠卵母细胞体外受精的影响

为研究生发泡(GV)移植后的重组卵母细胞能充分在体外成熟和发育,本试验比较了GV移植过程及体外成熟对小鼠卵母细胞体外受精的影响。通过透明带切口及GV移植获得的重组GV期卵母细胞的成熟率为87.0%(147/169),体外受精后发育到原核期胚和2-细胞期胚的比率分别为76.2%(112/147)和42.2%(62/147),与仅做透明带切口但不进行GV移植的对照组相似(P>0.05),表明GV移植过程未对卵母细胞体外受精后的早期胚胎发育能力产生不利影响。但与体内成熟的卵母细胞相比,体外成熟卵母细胞的受精率和卵裂率都明显降低,表明其进一步发育的能力受到影响。     

不同洗卵液对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后早期发育的影响

探讨不同洗卵液对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后早期发育的影响,以便开发出简易、经济的洗卵液。结果表明,使用TL-Hepes液、DPBS液、TCM-199()液和TCM-199()液作为洗卵液,对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后的早期发育没有显著影响,说明4种洗卵液均可用于猪卵母细胞的洗涤,但DPBS液配制较简易且价格便宜,是最佳的选择。     

猪大肠杆菌K88-K99 PCR诊断试剂盒研究

根据已成功扩增的大肠杆菌K88及K99菌毛蛋白结构基因PCR反应 ,进行PCR反应体系的优化。将 2种菌毛蛋白结构基因的扩增引物混合进行PCR ,同时检测K88及K99菌毛蛋白结构基因。经优化试验 ,筛选出 5 0 μLPCR反应体系中各成分的最适用量为 :Mg2 + 浓度 2mmol L ,Taq酶 5U ,dNTPs 2 0 0mmol L ,每条引物 5 0pmol,模板量 1 0 0CFU ,并研制成功用于临床检测的PCR诊断试剂盒。     

脱落酸对草莓种质离体保存的影响

草莓种质材料在田间种植时,由于易受病虫害的危害及自然灾害的侵袭,往往造成资源损失[1]。植物离体保存因不受外界环境条件的影响,而具有田间保存无法比拟的优点,为此得到国内外学者的广泛利用[2~9]。脱落酸(ABA)是一种良好的植物组织器官生长抑制剂。据报道,在培养基中添加ABA可以减缓猕猴桃、马铃薯、甘薯等的生长速度,从而延长相应种质在试管中的保存时间[7~9]。本研究旨在探讨ABA对草莓种质试管苗生长及其保存的影响,为进一步探明草莓种质中长期离体保存的可行性提供依据。1材料与方法1·1材料供试品种为宝交早生草莓栽培品种,由国…     

菠萝蛋白酶体外抑制小肠黏膜上皮细胞黏附K88~+ ETEC的作用

采用体外细胞黏附模型,研究菠萝蛋白酶对K88+产肠毒素大肠杆菌(ETEC)黏附大鼠小肠黏膜上皮细胞的抑制作用.结果表明:菠萝蛋白酶能显著降低K88+ETEC的黏附率,且与庆大霉素的抑菌效果相当(P>0.05).由此可以推测,菠萝蛋白酶能体外抑制K88+ETEC菌毛黏附上皮细胞,阻止K88+ETEC对肠道的侵袭,为临床提供一定的理论依据.     

奶牛卵丘细胞和共培养细胞对体外受精胚胎发育的影响

对奶牛卵母细胞进行体外受精,研究了卵丘细胞和共培养细胞对体外受精胚胎发育的影响.结果表明,奶牛卵丘细胞有助于卵母细胞的体外受精,能够显著提高体外受精的卵裂率(70.7%)和囊胚率(22.8%),而在B2胚胎培养液中添加Vero作为共培养细胞能显著提高体外受精后胚胎的囊胚率(22.7%).