环氧合酶-2反义RNA在不同时间点对食管癌细胞系EC9706生长的影响

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)反义RNA在不同时间点对人食管癌细胞系EC9706生长的影响。方法:培养293细胞,扩增、纯化COX-2反义RNk的重组腺病毒-Ad-AShcox-2,转染食管癌细胞EC9706,在不同时间点进行活细胞计数及3H-TdR掺入量测定。结果:扩增、纯化获得编码COX-2反义RNA的重组腺(?)毒Ad-AShcox-2,滴度达1.2×1012 PFU/ml;Ad-AShcox-2传染EC9706后在24 h、48 h、72 h、96 h对细胞生长的抑制率分别为8.60％、24.33％、50.21％、75.26％,对3H-TdR掺入量在24 h开始减少,以72～96 h最低,与对照组比较P<0.001。结论:表达COX-2反义RNA重组腺病毒感染人食管癌细胞后,对癌细胞的抑制从24 h开始,48～72 h最明显。     

腺病毒介导的环氧合酶-2反义RNA对肝癌细胞株生长的影响

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)的表达与肝癌的关系,并构建表达人COX-2反义RNA的腺病毒载体,研究其对人肝癌细胞生长的抑制作用。方法采用免疫组织化学法探讨34例肝癌组织COX-2 的表达与肝癌病理特征的关系。采用基因重组法把人COX-2的cDNA片段反向克隆于穿梭质粒pHCMVSP1A,获得pAd-AShcox-2,通过脂质体与pJM17共转染293细胞,经同源重组产生编码COX-2反义RNA的重组腺病毒--Ad-AShcox-2。经聚合酶链反应法鉴定为阳性克隆者大量扩增、纯化,转染人肝癌细胞株SMMC-7402和SMMC-7721,采用免疫细胞化学、细胞集落形成率及流式细胞术检测其对肝癌细胞生长、凋亡及细胞周期分布的影响。结果34例肝癌组织中有28例COX-2高度表达,阳性率达82.4%; COX-2的表达水平与肝癌的病理分级有关,与甲胎蛋白、细胞类型、有无肝内转移无关。成功构建、扩增、纯化得到编码COX-2反义RNA的重组腺病毒Ad-AShcox-2,滴度达1.06×1012PFU/ml;Ad-AShcox- 2转染两种肝癌细胞株后,发现高度表达COX-2的SMMC-7402 COX-2表达水平明显降低,细胞凋亡率明显增加,出现G1期阻滞,与Ad-LacZ组及空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);而不表达COX- 2的SMMC-7721变化不明显。细胞集落形成实验显示SMMC-7402细胞集落形成率较低(2.7%±0.94%); 而SMMC-7721     

腺病毒介导的COX—2反义RNA对食管癌细胞株生长的影响

目的：验证环氧合酶（COX）－2在食管癌组织是否高度表达；构建表达人COX－2反义RNA的腺病毒载体，研究其对人食管癌细胞生长的抑制作用。方法：用免疫组织化学方法（SP法），检测COX－1、COX－2在38例食管癌癌旁组织和癌组织中表达情况；并将人COX－2的cDNA片段反向构建于腺病毒载体并转染食管癌细胞EC9706，采用生长曲线、用^3H-TdR、^3H-Leucine掺入法及免疫细胞化学的方法，研究其对COX－2表达、及对食管癌细胞生长、DNA复制及蛋白合成的影响。结果：COX－2在食管癌中的阳性表达率为91．7％，主要为癌组织的表达，而在癌旁正常组织无表达或弱表达，而COX－1在食管癌正常组织和癌旁组织均有不同水平的表达。同时，我们构建的重组腺病毒感染肿瘤细胞后，COX－2表达水平与对照组比较明显降低，^3H-TdR和^3H-Leucine掺入量均明显减少，与对照组比较P＜0．001；同时发现食管癌细胞的生长细胞计数随时间递减，对照组生长细胞计数随时间而递增，Ad-LacZ组与空白对照组生长曲线几乎重叠。结论：COX－2可能与食管癌的发生发展有关；抑制COX－2的表达可能是治疗食管癌的一种新途径。     

己酮可可碱对人食管癌EC9706细胞增殖及NF—κB p65、COX-2、Ki-67蛋白表达的影响

目的探讨己酮可可碱（PTX）对肿瘤细胞的增殖抑制作用及机制。方法体外培养人食管癌EC9706细胞,用不同质量浓度的PTX进行干预,采用MTT法检测细胞增殖抑制率（IR）,免疫组化染色SP法检测核转录因子-κB（NF—κB p65）、环氧化酶-2（COX-2）、Ki-67蛋白表达。结果PTX处理后EC9706细胞IR明显升高,NF-κB P65、COX-2蛋白及Ki-67蛋白表达明显下降（P〈0．05）,且呈时间-浓度依赖性。结论PTX可抑制EC9706细胞增殖,可能机制为下调NF-κB、COX-2及Ki-67蛋白表达;此为PTX治疗食管癌提供了理论依据。     

重组腺病毒Ad/siRNA/环氧合酶-2的构建及其抑制食管癌细胞的效果

目的观察腺病毒介导的RNA干扰（RNAi）技术对人食管鳞癌细胞（Eca-109）环氧合酶（COX）-2基因表达的抑制效果及其对Eca-109细胞生长的影响。方法采用含RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的质粒pSUPER构建针对人COX-2 mRNA的重组质粒psiRNA COX-2。Not Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切psiRNA/COX-2 得到siRNA/COX-2表达片段．定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack的相同位点得到pAdTrack/siRNA／COX-2．后者与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组得到腺病毒Ad/siRNA／COX-2．经293细胞包装、扩增后转染Eca-109细胞。ELISA法测定培养液上清的前列腺素（PG）E2浓度，PCR法检洲细胞COX-2 mRNA水平．流式细胞仪检测细胞凋亡与周期分布．绘制细胞生长曲线。结果重组腺病毒Ad／siRNA/COX-2构建成功．转染Eca-109细胞后．细胞COX-2 mRNA水平下降71．7％（P〈0．01）．培养液上清PGE2浓度下降62．0％（P〈0．01）；细胞生长明显减缓．G0-G1期细胞比例增加、S期与G2-M期细胞比例减少（P〈0.01）．细胞凋产增多（P〈0.01）。结论腺病毒介导的RNAi技术可显著抑制人食管鳞癌细胞COX-2基因表达．从而导致肿瘤细胞增殖减缓、凋亡增加。     

siRNA沉默TPX2基因对食管癌细胞EC9706的增殖和TPX2基因表达的影响

目的:研究TPX2基因特异性小干扰RNA(small RNA interference,siRNA)对食管鳞癌EC9706细胞基因表达的抑制作用及对食管癌细胞生长的影响.方法:以食管鳞癌EC9706细胞为研究对象,利用Lipofectamine2000介导TPX2 siRNA分组转染EC9706细胞24,48,72,96 h(实验组),并设立阴性对照组和空白对照组.RT-PCR检测siRNA转染前后TPX2 mRNA的表达水平的变化:Western blot检测转染前后EC9706细胞中TPX2蛋白表达水平的变化;MTT法检测瞬时转染TPX2 siRNA对EC9706细胞增殖的影响.结果:导入有效siRNA后,PT-PCR及Western blot结果显示.TPX2 siRNA可使EC9706细胞中TPX2 mRNA水平及蛋白表达水平下降,至72 h时表达量最低,与空白对照组相比分别为0.31±0.08和0.39±0.12,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验显示细胞的生长增殖受到明显抑制,与对照组相比抑制率可达35.4%(P<0.05).结论:siRNA可以有效抑制EC9706细胞中TPX2的表达,并降低EC9706细胞的增殖能力.     

核因子-κB反义RNA对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

目的：探讨核因子（NF）-κB反义RNA重组腺病毒预处理对凝血酶诱导培养的自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响。方法：分别用表达NF—κB反义RNA的50多重感染（MOI）重组腺病毒和100μmol／L吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC,NF—κB特异性阻断剂）预处理VSMCs 48h和1h．采用WST-1试剂和氚胸腺嘧啶核苷（^3H—TdR）掺人率测定0．5U／ml凝血酶诱导的VSMCs细胞增殖率。结果：与PDTC一样。表达NF—κB反义RNA的重组腺病毒预处理明显抑制凝血酶诱导VSMCs的增殖（P〈0．01）．抑制率〉30％。结论：NF—κB反义RNA与NF—κB特异性阻断剂对VSMC的增殖具有相同的抑制作用,其抑制率超过30％。     

环氧合酶-2选择性抑制剂NS-398诱导食管癌细胞EC 9706凋亡及其机制的探讨

目的 观察环氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂NS一398对食管癌细胞株EC 9706增殖及凋亡的影响,砌究其对凋亡抑制蛋白Survivin和Caspase-3表达的影响,探讨NS-398诱导Ec 9706细胞凋亡的作用机制.方法 NS-398作用EC 9706细胞后,MTT法测定NS-398对人食管癌EC 9706细胞增殖的抑制率;DNA片段分析法和流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫细胞化学检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化.结果 NS-398(10～100μmol/L)对EC 9706细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长抑制作用增强,并诱导EC 9706细胞凋亡,呈剂量-时间效应关系;NS-398可降佴Survivin蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达.结论 NS-398可诱导人食管癌细胞株EC 9706凋亡,其机制可能与下调Survivin表达及激活Capase-3表达有关.     

己酮可可碱对人食管癌细胞EC9706的5-Fu化疗增敏作用

目的探讨己酮可可碱对人食管癌细胞EC9706的5-Fu化疗增敏作用。方法采用MTT法测定5-Fu及己酮可可碱联合5-Fu对EC9706细胞的抑制作用。结果不同浓度的己酮可可碱联合5-Fu作用于EC9706 12、24、48、72 h,同一时间各组抑制率差异有统计学意义(P均<0.01),同一5-Fu浓度,随着己酮可可碱药物浓度的增加,5-Fu对己酮可可碱细胞的抑制作用也增强(P均<0.01)。25μg/mL 5-Fu联合己酮可可碱(0.5 mg/mL、1.0mg/mL)与50μg/mL 5-Fu对EC9706细胞抑制作用,在24、48、72 h无统计学差异(P均>0.05)。结论己酮可可碱可以增加EC9706细胞对5-Fu的敏感性,减少5-Fu的剂量。     

VEGF-C siRNA载体构建及其对转染食管癌细胞中VEGF-C表达的影响

目的 观察小分子干扰RNA(siRNA)对人食管癌细胞EC9706中血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达的抑制作用.方法 根据siRNA设计原则,针对人VEGF-C cDNA序列设计并合成编码siRNA的寡核苷酸序列,并将其克隆入siRNA表达载体,构建重组质粒.将重组质粒转染入EC9706细胞株,通过免疫组织化学、RT-PCR和原位杂交法检测转染细胞中VEGF-C蛋白和mRNA的表达.结果 正常未转染(对照组)和无关序列转染(无关序列组)EC9706中,均有大量VEGF-c蛋白阳性棕色颗粒、mRNA阳性条带和紫蓝色阳性颗粒,而在siRNA转染EC9706(siRNA1-3组)中,仅有少量弱表达颗粒和较弱的阳性条带,与对照组和无关序列组相比,P均<0.01.结论 成功构建了VEGF-C siRNA载体.此载体能有效抑制人食管癌细胞EC9706中VEGF-C的表达,其可能成为抗食管癌淋巴管生成的一种新方法 .     

Pathogenesis of carcinoma of the papilla of Vater

Most adenomas and carcinomas of the small intestine and extrahepatic bile ducts arise in the region of the papilla of Vater. In familial adenomatous polyposis (FAP) it is the main location for carcinomas after proctocolectomy. In many cases symptoms due to stenosis lead to diagnosis at an early tumor stage. In about 80%, curative intended resection is possible. Operability is the most relevant prognostic factor. Most ampullary carcinomas resp. carcinomas of the papilla of Vater develop from adenomatous or flat dysplastic precursor lesions. They can be sited in the ampulloduodenal part of the papilla of Vater, which is lined by intestinal mucosa. They also can develop in deeper parts of the ampulla, which are lined by pancreaticobiliary duct mucosa. Intestinal-type adenocarcinoma and pancreaticobiliary-type adenocarcinoma represent the main histological types of ampullary carcinoma. Furthermore, there exist unusual types and undifferentiated carcinomas. Many carcinomas of intestinal type express the immunohistochemical marker profile of intestinal mucosa (keratin 7?, keratin 20+, MUC2+). Carcinomas of pancreaticobiliary type usually show the immunohistochemical profile of pancreaticobiliary duct mucosa (keratin 7+, keratin 20?, MUC2?). Even poorly differentiated carcinomas, as well as unusual histological types, may conserve the marker profile of the mucosa they developed from. These findings underline the concept of histogenetically different carcinomas of the papilla of Vater which develop either from intestinal- or from pancreaticobiliary-type mucosa of the papilla of Vater. Molecular alterations in ampullary carcinomas are similar to those of colorectal as well as pancreatic carcinomas, although they appear at different frequencies. In future studies, molecular alterations in ampullary carcinomas should be correlated closely with the different histologic tumor types. Consequently, the histologic classification should reflect the histogenesis of ampullary tumors from the two different types of papillary mucosa.     

Demonstration of the mechanism of action of biguanides

Summary Palmitic acid oxidation in rat diaphragm homogenate is depressed by biguanide concentrations that are still incapable of inhibiting oxidative phosphorylation. Glucose oxidation is not directly effected by the same biguanide concentrations: however, the inhibitory effect of palmitic acid on glucose oxidation is partly removed by biguanides. Inhibition of fatty acid oxidation, which accounts for most of the metabolic effects caused by these drugs, can be regarded as the fundamental mechanism of action of biguanides. There is some evidence suggesting that these drugs might interact with carnitine, thus preventing long-chain fatty acids from being transported across the mitochondrial membrane to the site of oxidation. Traduzione a cura degli AA.     

胰岛素瘤的解剖分布特点分析

目的胰岛素瘤是最常见的胰腺神经内分泌肿瘤，因其临床表现多样，导致诊断困难。影像学诊断尤其是超声内镜(EUS)在胰岛素瘤的诊断中起着重要作用，拥有较高的敏感性和特异性。本研究拟通过明确胰岛素瘤的解剖分布特点，以期有助于提高影像学的诊断准确率和降低漏诊率，尤其是在教育和培训实践中对于EUS的学习者更具有指导价值。 方法回顾性分析解放军总医院第一医学中心病案资料数据库1993年1月至2019年11月经外科手术、病理确诊为胰岛素瘤的患者的临床资料，检索方法采取搜索术后病理诊断为"胰岛素瘤"的病例，通过查阅病例的方法，提取出胰岛素瘤的大小和解剖分布等数据，进一步分析其特点。 结果共检索到确诊为胰岛素瘤的患者116例，其中，男45例、女71例，年龄13～76岁，平均年龄(44.4±14.85)岁。胰岛素瘤单发110例(94.8%)、多发6例(5.2%)。位置分布：头颈部46例(39.7%)，单发45例、多发1例；体尾部68例(58.6%)，单发65例、多发3例；全胰腺多发2例(1.7%)。病变大小特点：最大径0.4～3.4 cm，平均大小(1.53±0.58)cm。≤1 cm 29例、>1 cm而≤1.5 cm41例、>1.5 cm而≤2.0 cm28例，≤3 cm 15例，>3 cm 3例。年龄与肿瘤的大小相关，≤44岁患者肿瘤平均大小为(1.36±0.51)cm、>44岁患者肿瘤平均大小为(1.70±0.60)cm，P<0.05。头颈部的肿瘤大于体尾部的肿瘤，头颈部肿瘤平均大小(1.66±0.63)cm，体尾部(1.42±0.52)cm，P<0.05。 结论胰岛素瘤在胰腺体尾部较头颈部更好发；绝大多数单发，但可以全胰腺多发；多数小于1.5 cm，肿瘤的大小与患者年龄和肿瘤的解剖分布相关。     

氯硝柳胺悬浮剂的毒性评价

目的评价氯硝柳胺悬浮剂的毒性，为现场大规模应用灭螺提供依据。方法按照中华人民共和国国家标准GB 15670-1995《农药登记毒理学试验方法》和鱼类毒性试验方法进行。结果经口、经皮肤的LDso雌、雄性大鼠均>5 000 mg/kg，经呼吸道的LCso雌、雄性大鼠均>5 000mg/m3，该药经口、经皮肤、经呼吸道毒性均属微毒类药物；兔眼用药后，观察期内无不良反应，对眼无刺激性；皮肤用药后对皮肤无刺激性。与氯硝柳胺原药、氯硝柳胺乙醇胺盐原药和氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂相比，氯硝柳胺悬浮剂对鱼急性毒性最低。结论氯硝柳胺悬浮剂属微毒类药物，对鱼的毒性低于其乙醇胺盐可湿性粉剂，适合于现场应用。     

Assessment of quality of life of parents of children with juvenile chronic arthritis

The aim of the study was to assess the quality of life (QOL) and the psychological status of parents of children with juvenile chronic arthritis (JCA). The QOL, anxiety and depression of the parents of 28 children with JCA were evaluated and compared to those of the parents of 28 healthy children. Mothers of JCA children and mothers of healthy children reported similar QOL. The reported anxiety and depression levels were similar for mothers and fathers in both groups. The parents of children with pauciarticular-type JCA reported lower QOL and higher levels of anxiety and depression than the parents of children with other types, namely polyarticular and systemic JCA. These findings may be explained by the fact that the pauciarticular patients had shorter disease duration and were less frequently seen in the outpatient clinic. The QOL of mothers of children with JCA was found to be slightly impaired in the group of children with pauciarticular JCA. Future larger studies are needed to confirm these results, as the number of subjects in the three groups was rather low. Received: 26 September 2001 / Accepted: 8 February 2002     

治疗高血压药物的经济学评价

重视高血压治疗中的经济学评价,对利用我国有限的卫生资源来遏制高血压对人民群众的危害有着重要的现实意义。药物经济学对于药物治疗的成本和治疗的结果给予同样的关注。因为治疗高血压的费用,不仅涉及药物价格,还包括患者的危险水平,降压疗效和对临床终点事件的影响,以及治疗的依从性和安全性。因此药物经济学更强调整体成本和价-效比。低危病人,若非药价低廉,治疗的价-效比不够理想。而在高危的患者,价-效比越小越经济而不是药费越便宜越好。     

南通市老年人生命质量影响因素的因子分析

目的 了解南通市老年人的生命质量及其影响因素.方法 2010年7月应用欧洲五维健康量表(EQ-5D)对南通市994例＞60岁的老年人进行问卷调查,探索性因子分析生命质量的影响因素.结果 英国权重计算城市老年人生命质量指数得分均数(0.590±0.092)高于农村老年人(0.560±0.115),农村老年人得分高于养老院老年人(0.447 ±0.154).社会经济因素、闲暇生活方式、慢性病、睡眠食欲、婚姻家庭和社会支持是影响老年人生命质量的主要因子.结论 政府应完善养老保险和医疗保险制度,加强老年人慢性病的健康管理,促进居家养老服务体系建设.     

胆囊腺肌增生症23例临床分析

目的探讨胆囊腺肌增生症的病因、诊断和治疗方法。方法在1046例胆囊切除术中,对病理检查确诊的23例胆囊腺肌增生症的临床资料进行回顾性分析,患者术前均行超声、CT或MRI检查。结果23例胆囊腺肌增生症临床表现与慢性胆囊炎胆石症类似。病变大体形态:局限型13例(均位于胆囊底部)、节段型7例和弥漫型3例。23例均行胆囊切除,合并胆囊结石6例,合并胆囊炎14例。结论胆囊腺肌增生症是一种好发于成年人的胆囊壁增生性病变,此病常与慢性胆囊炎、胆石症并存,临床诊断困难,确诊需依赖病理检查。联合超声、CT和MRI等影像学检查可提高术前诊断准确度。目前手术是治疗的最好方法。     

糖尿病肾病血液透析护理效果分析

目的探讨糖尿病肾病血液透析中不同护理模式的护理效果。方法选择该院2018年3月—2019年3月收治的糖尿病肾病患者72例。该次选取的病例均拟行血液透析治疗,按照随机数表将患者分为对照组(35例)和观察组(37例),其中对照组在患者血液透析期间行常规基础护理,观察组行优质护理干预,观察两种不同的护理模式对患者血液透析的影响。结果观察组患者因低血压等中断透析的发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组透析期间并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的生活质量SF-36评分均高于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在糖尿病肾病患者透析期间行优质护理,有助于保障血液透析的顺利开展,同时降低各种并发症的风险,使得患者的生活质量有最基本的保障。     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.