机械牵张力对小鼠成骨细胞形态及BMP-2、碱性磷酸酶和胶原表达的影响

目的: 在正畸治疗过程中,牙齿在正畸力和机械牵引力下的移动必然伴随着积极的牙槽骨改建。骨形成蛋白-2（BMP-2）,ALP（碱性磷酸酶）和COL-I（I型胶原蛋白）是骨改建过程中非常重要的细胞因子,但目前对机械牵张力与BMP-2 ,ALP和COL-I之间的关系仍不甚了解。本实验的目的是研究不同大小机械牵张力对成骨细胞形态及其BMP-2,ALP和COL-I表达的影响。 方法: 对小鼠成骨样细胞分别施加0％、6％、12％和18％形变率的机械牵张力后,用RT-PCR方法检测BMP-2,ALP和COL-I的mRNA表达。其结果经SPSS13.0统计软件进行方差分析。 结果: 加力后细胞基本呈长梭形,排列更加有序,与加载牵张力的方向相一致;各实验组比对照组的BMP-2,ALP和COL-I mRNA表达量有明显增加,差别有统计学意义（p<0.05）,其中 12％拉伸形变组的增加量最大。 结论: 一定大小的机械牵张力可以促进成骨细胞BMP-2,ALP和COL-I的表达,并引起细胞的形态和排列方式发生改变,调控骨的形成,从而影响正畸治疗中的骨改建。     

压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酶活性的影响

目的 探讨不同压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法 采用酶动力学方法，比较不同压强的压力在不同的作用时间下对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果 压力增加导致牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低。结论 颌力过大将造成牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低。可能影响牙周组织健康。     

补肾健骨汤对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响

目的考察补肾健骨汤体外对大鼠成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响.方法采用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞,取第3代为实验模型,用常规计数法每日同时间检测成骨细胞增殖情况,连续7 d,观察补肾健骨汤提取液及载药血清对成骨细胞增殖的影响;以酶免法测定培养第5天细胞内骨钙素的含量.结果补肾健骨汤提取液及载药血清对体外培养的成骨细胞增殖均有显著的促进作用,其中提取液的作用在0～100 μg/mL浓度范围内呈剂量依赖性;提取液与载药血清均提高细胞内碱性磷酸酶和骨钙素含量,与空白对照组比较均有显著差异(P＜0.05).结论补肾健骨汤体外对成骨细胞的增殖及碱性磷酸酶、骨钙素的合成具有促进作用.     

白细胞介素-6、骨钙素和骨碱性磷酸酶在大鼠骨质疏松模型中的表达

目的　探讨白细胞介素 6 (IL 6 )、骨钙素 (BGP)和骨碱性磷酸酶 (B ALP)在大鼠骨质疏松模型中的表达。方法　通过切除大鼠双侧卵巢建立骨质疏松动物模型 ,分别于术后 2、3、4、5、6个月进行骨密度、IL 6、BGP及B ALP检测。结果　与空白组和对照组相比 ,去势组中骨密度显著降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,IL 6、BGP及B ALP显著升高 (P <0 .0 5 )。结论　IL 6、BGP及B ALP在骨质疏松中显著表达 ,与骨质疏松发生程度成正相关。     

压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的探讨不同压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法采用酶动力学方法,比较不同压强的压力在不同的作用时间下对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果压力增加导致牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低。结论颌力过大将造成牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低,可能影响牙周组织健康。     

成骨生长肽对成骨细胞样细胞的分化和成骨作用

目的"研究成骨生长肽(OGP)对大鼠成骨细胞样细胞的分化和成骨作用.方法"大鼠颅盖骨成骨细胞样细胞体外培养分实验组与对照组,实验组加OGP,分别测定细胞的Ⅰ型胶原mRNA和骨钙素mRNA表达、胶原和钙含量;测定细胞和培养液的碱性磷酸酶活性和骨钙素含量. 结果"实验组细胞的Ⅰ型胶原mRNA和骨钙素mRNA均高度表达,对照组相对较低;实验组细胞的胶原和钙含量、细胞和培养液的碱性磷酸酶活性和骨钙素含量均显著地高于对照组(P＜0.05,P＜0.001). 结论"OGP能上调成骨细胞样细胞的Ⅰ型胶原mRNA和骨钙素mRNA表达,增加细胞的胶原合成、分泌和钙盐沉积,由此促进成骨.     

骨巨细胞瘤中成纤维样基质细胞体外钙化能力的研究

目的：探讨骨巨细胞瘤的组织来源。方法：体外培养。Ｇｏｍｏｒｉ法碱性磷酸酶染色,生化检测细胞培养上清液中的碱性磷酸酶含量。免疫组织化学染色检测骨钙素在成纤维样基质细胞中的表达。使用含Ｂ甘油磷酸钠和ＣａＣｌ２的培养液,观察成纤维样基质细胞体外钙化能力。结果：成纤维样基质细胞中碱性磷酸酶和骨钙素呈阳性表达,在体外具有钙化能力。在细胞培养上清液中有碱性磷酸酶。结论：骨巨细胞瘤中的成纤维样基质细胞具有某些成骨细胞的特点,为进一步探讨其组织来源提供了实验依据。     

类风湿性关节炎患者血清骨钙素、骨源性碱性磷酸酶及肿瘤坏死因子水平的观察

目的:探讨类风湿性关节炎(RA)患者血清骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(BAP)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平。方法:将在我院治疗的RA患者29例设为观察组,健康体检者29例设为对照组,于治疗前后检测两组患者BGP、BAP及TNF-α水平并进行对比。结果:治疗前观察组患者BGP水平明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组患者BGP水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前观察组患者BAP、TNF-α水平明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组患者BAP、TNF-α水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BGP、BAP、TNF-α三者在RA患者的早期诊断以及预测病情进展、观察临床治疗效果方面具有重要的意义。     

人脂肪干细胞复合珊瑚支架在三维培养下成骨活性的初步研究

目的探讨人脂肪干细胞（ADSCs）作为种子细胞复合珊瑚支架材料在体外三维培养下的成骨活性。方法取行脂肪抽吸术患者的脂肪组织,I型胶原酶消化进行培养,贴壁细胞传代,取第2代细胞进行诱导,培养基中添加成骨诱导剂地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸和维生素D3。成骨诱导后复合珊瑚继续培养,以未诱导的ADSCs复合物为对照,进行生长曲线、DIO染色后的共聚焦荧光显微镜、碱性磷酸酶（AKP）和骨钙蛋白（OCN）生物化学定量检测。结果7～8d后ADSCs在材料上生长进入平台期,诱导ADSCs复合珊瑚7d后生长良好。诱导ADSCsAKP表达随着时间的推移不断增强,而且在检测的各个时间点,诱导ADSCsAKP表达水平均明显高于未诱导ADSCs（均P〈0．05）。诱导ADSCs在珊瑚支架上第7天后检测到OCN表达,并一直增高,且从第7天开始OCN表达均明显高于未诱导ADSCs（均P〈0.05）。结论脂肪干细胞复合珊瑚支架在三维培养下能够向成骨细胞表型分化。     

实时定量反转录-聚合酶链反应检测机械力对人牙周膜细胞骨钙素表达的影响

目的观察周期性牵张力作用下人牙周膜细胞(HPDLCs)成骨分化关键基因骨钙素的表达变化,以明确周期性牵张力对HPDLCs成骨分化的诱导作用。方法利用自行研制的多通道细胞牵张应力加载系统对体外培养的HPDLCs施加12%形变率、0.1Hz周期性牵张力1,2,3,5d,实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其成骨分化基因骨钙素(BGLAP)表达的时序性变化。结果体外培养HPDLCs骨钙素基因表达量极低,加力1、2、3、5d后骨钙素基因表达依次升高,并且在加力5d时表达量明显增高为对照组的71.6倍。结论周期性牵张力可以诱导HPDLCs向成骨方向分化,骨钙素在机械力诱导成骨分化的后期发挥作用。     

雌激素受体β对牙周膜成纤维细胞骨钙素含量的影响

目的研究雌激素受体β（ERβ）对人牙周膜成纤维（HPLF）细胞骨钙素（OCN）含量的影响。方法采用基因干涉方法抑制了HPLF细胞中ERβ基因的表达,用雌激素干预ERβ抑制的和未抑制的HPLF细胞,研究细胞骨钙素含量的变化情况。结果测序鉴定重组质粒后,蛋白质印迹法及RT-PCR结果显示ERβsiRNA载体可特异地抑制HPLF细胞中ERβ的表达。经雌激素干预后,HPLF细胞OCN含量明显高于对照组（P〈0.01）,但ERβsiRNA载体稳定转染的HPLF细胞OCN含量与对照组相比无统计学意义。结论雌激素可能通过ERβ亚基促进人牙周膜成纤维细胞的骨钙素含量增加。     

人大肠癌中Ⅰ型膜型金属蛋白酶mRNA的表达

目的:探讨Ⅰ型膜型金属蛋白酶(membrane-type matrix metalloproteinase 1,MT1-MMP)mRNA的表达与人类大肠癌的关系.方法:用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对38例大肠癌中MT1-MMP mRNA的表达进行检测.结果:86.8%(33/38)的大肠癌中MT1-MMP mRNA的表达高于相应正常黏膜(P＜0.01),癌/ 膜的中位数为1.63(Min=0.70,Max=11.00),其表达水平与大肠癌的浸润深度呈正相关(P＜0.05).结论:MT1-MMP高表达可能在大肠癌对周围组织的浸润过程中具有重要作用,可以作为反映大肠癌侵袭能力的生物学标志物.     

子宫肌瘤孕激素受体A、B亚型的表达

目的 :探讨两种孕激素受体亚型 (hPR A和hPR B)在子宫肌瘤发生、发展中的意义 ,为临床药物治疗子宫肌瘤提供理论依据。方法 :选取 30例因子宫肌瘤行全子宫切除术的标本 ,取肌瘤组织和正常肌层组织分别制成石蜡切片和冰冻标本。前者经免疫组化定位研究孕激素受体亚型 ;后者经蛋白质提取和Western印迹定量研究孕激素受体亚型的蛋白表达 ;从冰冻组织中提取RNA ,通过逆转录 多聚酶链反应 ,半定量研究孕激素受体亚型的mRNA表达。结果 :(1)免疫组化显示子宫肌瘤和正常肌层细胞的细胞核中 ,可见hPR阳性颗粒 ;(2 )蛋白定量中hPR (A +B)和hPR A在子宫肌瘤的表达均高于正常肌层 ;子宫肌瘤和正常肌层中 ,hPR B表达均明显高于hPR A ;(3)hPR A、hPR B和hPR (A +B)的mRNA在肌瘤的表达量均高于周围正常肌层 ;(4 )无论在子宫肌瘤还是在正常肌层组织中 ,hPR A与hPR B的mRNA表达量差异无显著性 ,与A、B亚型受体蛋白在子宫肌瘤和正常肌层的分布差异有显著性的情况不平行 ,提示可能存在转录后调控的差异。结论 :hPR A、hPR B为核受体 ;A亚型蛋白表达在子宫肌瘤高于正常肌层 ;A、B亚型的mRNA在子宫肌瘤表达均高于正常肌层 ;孕激素受体亚型 ,特别是hPR A与子宫肌瘤的发生有关     

人大肠癌中基质金属蛋白酶-7 mRNA的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase 7,MMP-7)与大肠癌浸润和转移的关系.方法:用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大肠癌和正常黏膜、炎性息肉、腺瘤及淋巴结中MMP-7 mRNA的表达.结果:97.4%(37/38)的大肠癌和1例肝转移中MMP-7 mRNA表达阳性,而相应正常黏膜几乎不表达;大肠癌中MMP-7 mRNA的表达水平随Dukes分期的进展而逐渐升高(P＜0.01),A期(0.28±0.08),B期(0.54±0.17),C期(0.55±0.09),D期(0.73±0.06).5例腺瘤MMP-7均为阳性,但表达水平低于癌组织(P＜0.01);3例炎性息肉均未见MMP-7表达.传统组织学检查有癌转移的13个淋巴结MMP-7表达均为阳性;组织学检查未见转移的12个淋巴结MMP-7表达6个阴性、6个阳性,再次行组织学检查于6个MMP-7阳性者中发现3个有微转移.结论:MMP-7的高表达可能在大肠癌的浸润和转移过程中具有重要作用;用RT-PCR方法检测淋巴结中MMP-7mRNA的表达是诊断大肠癌淋巴结微转移的敏感方法.     

体外不同动态力学应变对人牙周膜成纤维细胞增殖和功能活性的影响

目的探讨体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)在动态力学微应变范围内细胞增殖和功能活性的变化。方法采用四点弯曲细胞力学加载装置对体外培养的HPDLF进行加载,通过流式细胞术(FCM)分析细胞周期的改变和定量分析细胞总蛋白含量和碱性磷酸酶(ALP)活性,研究不同作用方式、大小和时间的动态力学应变对细胞增殖和功能活性的影响。结果加载装置所产生的动态力学微应变范围对HPDLF的G0/G1期、S期细胞百分比、增殖指数PI、总蛋白含量及ALP活性产生明显的影响(P<0.05),其中G0/G1期细胞百分比减少,S期细胞百分比、PI、总蛋白含量及ALP活性增高,且此影响均与应变的大小和作用时间密切相关;动态力学应变加载方式的不同对HPDLF的G0/G1期、S期、G2/M期细胞百分比、PI、总蛋白含量及ALP活性均有明显的影响(P<0.05),梯度加载组的促增殖和对总蛋白含量及ALP活性的上调作用均明显高于1000、4000μstrain两组。结论HPDLF细胞增殖和功能活性增加与动态力学应变的作用方式、应变大小、作用时间密切相关。     

生长停滞特异性蛋白6在人牙周膜细胞迁移及成骨分化中的作用

探讨AXL受体酪氨酸激酶配体——生长停滞特异性蛋白6(growth arrest-specific protein 6,Gas6)在人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)迁移及成骨诱导液培养下成骨分化中发挥的作用。方法: 在对hPDLCs进行体外培养的培养液中加入...     

促排卵治疗对黄体中期子宫内膜雌、孕激素受体及其mRNA表达的影响

目的 :了解促排卵治疗对黄体中期子宫内膜雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)、孕激素受体 (progesteronereceptor,PR)及其mRNA表达的影响。方法 :应用光学显微镜检测着床窗口子宫内膜、采用免疫组化及原位杂交方法检测正常及多囊卵巢综合征 (polycysticovariansyndrome ,PCOS)妇女促排卵治疗后子宫内膜黄体中期ER、PR及其mRNA的表达 ,放射免疫法测定同期血中雌激素 (estradiol,E2 )及孕激素 (progesterone,P)水平。 结果 :正常妇女黄体中期子宫内膜组织形态 2 2例中有 2 0例为分泌中期改变 ,2例为分泌早期改变。ER、PR弱表达 ,ERmR NA及PRmRNA的表达也较弱 ,而PCOS妇女治疗后黄体中期氯米芬 9/人绒毛膜促性腺激素组及氯米芬 /绝经期促性腺激素 /人绒毛膜促性腺激素组各 15例分别有 8/ 15及 7/ 15光镜下为分泌中期改变 ,其它为分泌早期改变。ER、PR的表达增强 ,其基因的表达也明显增强 ,血清P的水平相对较低。促性腺激素释放激素激动剂 /绝经期促性腺激素 /人绒毛膜促性腺激素组共 10例 ,E2 、P及P/E2 接近对照组 ,上述标志物的表达与对照组相似。但 3组PCOS分泌中期子宫内膜均有不同程度的间质增生、致密 ,腺体与间质发育不同步 ,且间质致密处ER、PR及其mR NA表达均下降。结论 :氯米芬 /人绒毛膜促性腺     

一氧化氮对肺动脉平滑肌细胞HO-1 mRNA表达的影响

目的:研究一氧化氮(NO)供体sodium nitroprusside (SNP)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)HO-1 mRNA的表达及CO含量影响,以探讨NO对血红素加氧酶/一氧化碳(HO/CO)体系的调节作用.方法:体外培养大鼠肺动脉平滑肌细胞,分别与10-3 molL-1和10-4 mol*L-1的SNP在常氧及低氧12和24 h条件下共同孵育.用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)对大鼠PASMC HO-1 mRNA表达进行检测,并用分光光度计检测PASMC培养液中CO与NO相对含量的变化.结果:低氧使大鼠PASMC HO-1 mRNA的表达及CO含量呈一致性增高.给予SNP,HO-1 mRNA的表达在常氧及低氧时呈剂量和时间依赖性增高趋势,并伴随CO含量的一致性改变.结论:外源性NO能够诱导常氧及低氧大鼠PASMC HO-1 mRNA的表达,使PASMC CO释放增多,上调HO/CO体系功能.