槐米对微粒体和神经细胞氧化损伤的保护作用

槐米是豆科植物槐树 (SophorajaponicaLinn .)的干燥花蕾 ,功能清热、凉血、止血 ,治肠风便血、痔血、尿血 ,风热目赤[1] 。槐米的主要有效成分芦丁 (芸香苷 )。芦丁及其衍生物具广泛的药理活性 ,临床用于防止脑溢血、高血压等心脑血管疾病[2 ] 。山东蓝宝绿蕊槐米茶厂已将槐米开发成具有保健功能的槐米茶、芦丁茶。文献对槐米的研究报道多集中在芦丁提取工艺方面 ,生理活性及保健功能方面的研究报道甚少 ,抗氧化方面未见报道。为了促进槐米的开发利用 ,我们研究了槐米对小鼠肝微粒体膜脂氧化及PC12神经细胞氧化损伤的抑制作用。1　材料与…     

川芎嗪烟酸酯对神经细胞氧化损伤的保护作用

 目的观察川芎嗪烟酸酯(TMPN)对H₂O₂引起的体外培养大鼠脑皮层神经细胞及人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧化性损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法H₂O₂诱导体外培养大鼠脑皮层神经元及SH-SY5Y细胞进入氧化应激状态,观察TMPN对神经细胞氧化损伤的保护作用。结果TMPN能显著升高氧化损伤神经细胞的存活率,减少乳酸脱氢酶(LDH)的漏出,对H₂O₂诱导的神经细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]_I)的升高有明显的抑制作用,并能减少胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成,提高谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结论TMPN可以有效保护活性氧对培养大鼠脑皮层神经元及SH-SY5Y细胞的氧化损伤,维持细胞的正常生理功能,其机制可能与TMPN抑制H₂O₂诱导的[Ca²⁺]_I异常升高,减少脂质过氧化物生成,增加抗氧化物质的含量有关。     

艾烟中可吸入颗粒诱发染色体畸变效应的实验研究

目的采用染色体畸变实验检测艾烟中可吸入颗粒物是否影响细胞DNA结构或改变信息的实现,进而判定艾烟的遗传毒性。方法通过四氮唑盐比色实验得出艾烟冷凝液(MSC)对中国仓鼠卵巢细胞染毒24 h的半数抑制率IC50为0.087 mg/mL,体外培养哺乳动物中国仓鼠卵巢细胞系(CHO),体外代谢活化(S9)及非活化的情况下染毒细胞24 h,随机分为空白组、丝裂霉素C组、1/2 IC50MSC组、1/4 IC50MSC组、1/8 IC50MSC组、空白+S9组、环磷酰胺+S9组、1/2 IC50MSC+S9组、1/4 IC50MSC+S9组、1/8 IC50MSC+S9组。秋水仙胺作用于中期染色体收获细胞,制备染色体标本,观察细胞染色体畸变情况,并进行分析。结果 MSC畸变细胞率和染色体总畸变率由高到低依次为环磷酰胺+S9组>MSC+S9组≥丝裂霉素C组>空白+S9组>MSC组≥空白组。结论艾烟具有生物活性,高浓度的艾烟表现出一定的细胞毒性。     

水翁花对微粒体和神经细胞氧化损伤的保护作用

目的 :研究水翁花对小鼠肝微粒体膜脂氧化及H₂O₂ 诱导的PC12神经细胞氧化损伤的保护作用。方法 :用小鼠肝微粒体膜脂氧化模型、细胞培养MTT法测定细胞的存活率等方法。结果 :水翁花水提物能强烈抑制小鼠肝微粒体膜脂氧化 ,IC₅₀为0.013g·L^-1,效果优于阳性对照维他命E(IC₅₀为 0.064 g·L^-1) ;对H₂O₂ 引起的PC12神经细胞氧化损伤亦显示出较强的抑制作用 ,对神经细胞表现出保护作用。结论 :水翁花对膜脂氧化及神经细胞的氧化损伤的保护作用 ,可能用于治疗与氧化损伤有关的脑疾。     

乌丹降脂方对脂肪肝大鼠脂肪肝细胞氧化损伤调节作用研究

目的观察乌丹降脂方对脂肪肝大鼠脂肪氧化损伤相关因子超氧化物歧化酶(SOD)、C反应蛋白(CRP)、活性氧(ROS)表达的影响。方法采用随机数字表法将大鼠分为正常组、模型组、多烯磷脂酰胆碱组、乌丹降脂组,正常组给予普通饲料喂养,其余组均采用高脂饲料喂养法复制大鼠脂肪肝模型。喂养6周后,乌丹降脂组给予乌丹降脂方0.07 g/(100 g·d)灌胃,多烯磷脂酰胆碱组给予多烯磷脂酰胆碱24.6 mg/(100 g·d)灌胃,模型组和正常组给予相同剂量生理盐水灌胃,连续6周。实验结束后采用ELISA法检测各组血清CRP含量及SOD活性,West-blot法检测肝组织中ROS表达情况,镜下观察肝组织病理变化。结果模型组血清CRP含量及肝组织中ROS表达量均明显高于正常组(P均0.05),SOD活性明显低于正常组(P0.05);多烯磷脂酰胆碱组与乌丹降脂组血清CRP含量及肝组织中ROS表达量均明显低于模型组(P均0.05),SOD活性均明显高于模型组(P均0.05),且乌丹降脂组血清CRP含量及SOD活性改善情况均明显优于多烯磷脂酰胆碱组(P均0.05)。结论乌丹降脂方通过调节肝细胞氧化损伤相关因子,改善肝细胞由于脂类代谢异常形成的过氧化损伤,促进肝细胞功能恢复,具备一定的改善脂肪变性效果。     

艾烟和香烟烟雾对弱精子症模型大鼠的影响

目的:研究艾烟和香烟烟雾对弱精子症模型大鼠的影响。方法:将32只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为溶剂组、模型组、艾烟组和香烟组4组,每组8只。通过灌胃给予奥硝唑溶液建立弱精子症大鼠模型。计算机辅助精子分析系统用于检测艾烟和香烟烟雾对于弱精子症模型大鼠的精子活力、活率和密度等指标的影响。结果:与模型组比较,艾烟干预可以明显改善弱精子症模型大鼠的精子活力、活率和曲线速度(VCL)、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)等功能指标;香烟组的精子活力、活率和VCL、VSL、VAP等功能指标均显著低于溶剂组和艾烟组。各组大鼠的精子密度无显著变化。结论:艾烟和香烟烟雾对机体产生的效应不同,艾烟可以提高弱精子症模型大鼠的精子活力、活率和运动能力,对弱精子症有一定的改善作用。     

西洋参茎叶皂甙对大鼠培养心肌细胞氧化损伤的保护作用

黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶可引起大鼠培养心肌细胞电参数变小、心肌细胞起搏比例减少及心肌细胞超微结构破坏。西洋参茎叶皂甙可使上述指标明显改善,说明其有抗氧化损伤作用。     

白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠胰岛细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:研究白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠胰岛细胞氧化应激损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:首先制备妊娠5 d SD大鼠,通过一次性ip链脲佐菌素(STZ)35 mg·kg~(-1)诱导妊娠期糖尿病大鼠模型,选取100只随机分为妊娠期糖尿病模型组,白藜芦醇(60,120,240 mg·kg~(-1))治疗组和盐酸二甲双胍阳性药组(200 mg·kg~(-1)),每组20只,另取12只妊娠5d SD大鼠作为正常妊娠组,20只同龄非妊娠雌性大鼠作为正常非妊娠组。分别于给药前和给药治疗第7,14天通过血糖仪检测空腹血糖、并采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测胰岛素水平;治疗满2周后,测定各组大鼠血清中丙二醛(MDA)和活性氧簇(ROS)含量;测定胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT)活性及MDA含量;通过苏木素-伊红(HE)染色观察胰腺组织病理学改变,通过原位末端转移酶标记法(TUNEL)染色观察胰岛细胞凋亡状况并计算凋亡指数(apoptosis index,AI)。结果:与正常非妊娠组比较,正常妊娠组大鼠空腹血糖和胰岛素水平、血清中MDA和ROS含量、胰腺组织中SOD,GSH-Px,CAT活性及MDA含量均无显著性差异,胰腺组织病理学改变及胰岛细胞凋亡状况均无明显差异。与正常妊娠组比较,妊娠期糖尿病模型组大鼠胰岛素水平显著降低、空腹血糖水平显著升高,血清中MDA和ROS含量显著升高,胰腺组织中SOD,GSH-Px,CAT活性显著降低,MDA含量显著升高,胰腺组织病理学改变明显、胰岛细胞凋亡现象突出、胰岛细胞凋亡率显著升高,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。与妊娠期糖尿病模型组比较,白藜芦醇(60,120,240 mg·kg~(-1))治疗组大鼠血清中MDA,ROS含量及胰腺组织中MDA含量均显著降低(P0.05,P0.01);白藜芦醇(120,240 mg·kg~(-1))治疗组大鼠胰岛素水平显著升高、血糖水平显著降低(P0.05,P0.01),胰腺组织中SOD,CAT活性显著升高(P0.05,P0.01),胰岛细胞凋亡率显著降低(P0.01);白藜芦醇240 mg·kg~(-1)治疗组大鼠胰腺组织中GSH-Px活性显著升高(P0.05);白藜芦醇各治疗组胰腺组织病理学改变和胰岛细胞凋亡状况均出现不同程度的改善,其中以白藜芦醇240 mg·kg~(-1)治疗组最为显著。结论:白藜芦醇能够有效提高胰岛素分泌水平、降低血糖、改善抗氧化酶活性、提高自由基清除能力、改善胰腺组织病变并抑制胰岛细胞凋亡,提示白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠胰岛氧化应激损伤具有剂量依赖性的保护作用,并且该作用优于盐酸二甲双胍。     

针刺对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响

目的探讨针刺对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞（ENSCs）的诱导分化。方法 25只成年SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组和针刺治疗组。假手术组不损伤脊髓,模型组和针刺治疗组用改良Allen’s重物坠击法制备脊髓损伤模型。模型组不予任何处理;针刺治疗组予以针刺治疗,每日1次,7d为1疗程,共2个疗程。于2周后取材,对距离损伤中心5mm的脊髓行免疫组化染色,检测Nestin、Brdu、NSE、GFAP的表达。结果 Nestin和Brdu的表达针刺治疗组较模型组多,假手术组最少;NSE的表达针刺治疗组较模型组多,但少于假手术组;GFAP的表达模型组高于针刺治疗组,假手术组最低。结论针刺对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞有诱导分化作用。     

夏至草醇提物对休克大鼠自由基损伤的影响

目的观察夏至草醇提物对失血性休克大鼠多器官自由基损伤的影响。方法Wistar雄性大鼠18只，随机分为夏至草组、模型组和对照组（均n=6）。夏至草组和模型组复制失血性休克模型，维持90min，对照组仅手术。夏至草组自颈静脉缓慢推注夏至草醇提物（5g/ml，6g/kg．hw），其它两组以等量生理盐水代替。40min后，制备肝、肾、心肌、肺组织匀浆，观察组织匀浆自由基指标的变化。结果与对照组相比，模型组肝、肾、心肌、肺组织匀浆MDA含量显著升高，SOD活性降低；夏至草组各器官组织匀浆MDA含量显著低于模型组，SOD活性升高，除心肌组织匀浆SOD活性低于对照组外，其它各指标与对照组均无统计学意义。结论夏至草醇提物能明显减轻大鼠重症失血性休克后各器官的自由基损伤。     

黄芪多糖对过氧化氢诱导大鼠视网膜神经节细胞氧化损伤的保护作用

目的观察黄芪多糖(APS)对过氧化氢诱导的大鼠视网膜神经节细胞(RGC)氧化损伤的保护作用。方法将RGC-5细胞分为正常对照组、阴性对照组、过氧化氢损伤组、黄芪多糖干预组。正常对照组不做处理,阴性对照组和过氧化氢损伤组分别加入1 000μg/ml的黄芪多糖和100μmol/L的过氧化氢,黄芪多糖干预组加入不同浓度(1 000μg/ml、500μg/ml、250μg/ml)黄芪多糖后加入100μmol/L的过氧化氢。用倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化;MTT法检测细胞活性;DAPI染色观察细胞核形态学变化;实时细胞电子传感器(RT-CES)分析系统记录细胞生长状态。结果倒置相差显微镜下正常RGC-5细胞呈扁平梭形,边缘清晰,有较短突起,过氧化氢损伤组细胞皱缩,细胞密度减低,轴突缩短,其他各组细胞形态未见明显改变。MTT:各浓度黄芪多糖干预组的细胞活性均较过氧化氢损伤组升高,差异具有统计学意义(P0.01)。DAPI染色:过氧化氢处理后RGC-5细胞核可见染色质凝聚,边缘化;黄芪多糖干预后仅少量细胞出现染色质凝聚现象。RT-CES:与正常对照组相比,过氧化氢损伤组细胞生长受到抑制,其余各组细胞生长曲线基本正常。结论黄芪多糖可以抑制过氧化氢诱导的大鼠RGC凋亡,这为黄芪类药物治疗糖尿病视网膜病变提供了一定的实验基础。     

川芎嗪对脊髓急性损伤大鼠神经营养因子表达的影响

目的探讨川芎嗪(TMP)对大鼠脊髓急性损伤(ASCI)模型脊髓神经生长因子(NGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响及其对脊髓损伤后脊髓功能的保护作用。方法取SD大鼠随机分为正常对照组、假治疗组和川芎嗪组并给予相应处理。采用改良Allen’s法造模,BBB评分对实验大鼠脊髓功能进行行为学评分;SABC法检测造模后大鼠损伤段脊髓NGF和BDNF的表达。结果随时间延长,术后SD大鼠BBB评分逐渐升高,术后7 d、14 d和21 d川芎嗪组BBB评分值均较假治疗组高(P均0.05);川芎嗪组术后3 d7、d和14 d时NGF、BDNF阳性细胞数表达均较假治疗组明显增加(P均0.05)。结论川芎嗪对脊髓继发性损伤有保护作用,这种保护作用可能与其能促进损伤段脊髓NGF、BDNF的表达有关。     

醒脑通络片对脑缺血损伤大鼠内源性神经干细胞的影响

目的观察醒脑通络片(黄芪、川芎、桃仁、红花、鸡血藤等)对脑缺血损伤大鼠内源性神经干细胞的影响。方法将120只SD大鼠随机分为假手术组和模型组(生理盐水灌胃),醒脑通络片小、中、大剂量组5组,每组各24只,采用线栓法致大鼠脑缺血再灌注损伤模型。脑缺血再灌注后3、7、14、28 d时,神经功能评分后处死动物,用免疫组化法观察缺血侧海马溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)、巢蛋白(Nestin)的表达。结果假手术组海马区仅有少量Brd U、Nestin阳性细胞表达,模型组及醒脑通络片各组再灌注3 d后Brd U、Nestin阳性细胞表达开始增多,7~14 d达高峰,28 d明显下降。和模型组比较,醒脑通络片各组Brd U、Nestin阳性细胞明显增多(P0.05或0.01)。醒脑通络片各组在再灌注14和28 d神经功能均显示恢复,和模型组比较有显著性意义(P0.05或0.01)。结论醒脑通络片可以促进内源性神经干细胞增殖、分化,可能为其治疗缺血性脑血管病的机制之一。     

一指禅推拿对坐骨神经损伤大鼠神经形态及功能的影响

目的观察一指禅推拿对坐骨神经损伤大鼠神经形态及功能的影响。方法暴露坐骨神经,用显微持针器钳夹坐骨神经制作坐骨神经损伤模型。SD大鼠随机分为假手术组、模型组和推拿组,假手术组暴露神经但不夹持。造模7 d后,推拿组大鼠一指禅推法治疗30 d,每日1次。30 d后,检测大鼠坐骨神经功能指数(SFI)、右下肢运动功能指数(BBB),HE染色、免疫组化检测和电镜观察大鼠患侧坐骨神经变化。结果与模型组比较,推拿组可有效加快SFI恢复,升高BBB,促进坐骨神经形态结构恢复,S-100β蛋白含量升高,促进新生神经超微结构生长及恢复。结论一指禅推拿可有效促进大鼠坐骨神经损伤后神经形态及功能恢复。     

龟板醇提物对大鼠骨髓间充质干细胞氧化损伤的修复及其抗脂质过氧化作用

目的研究龟板95%乙醇提取物(醇提物)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)氧化损伤修复及其抗脂质过氧化作用。方法使用密度梯度法分离大鼠MSC进行培养,经CD44鉴定后以H2O2作用于MSC3h,建立MSC氧化损伤模型,通过MTT法检测不同质量浓度龟板醇提物(0.166、0.833、1.66、3.32、4.98mg/mL)对MSC损伤的修复。50只SD大鼠,随机分为5组,受试组分别ig0.01、0.03、0.09g/(kg.d)龟板醇提物;阳性对照组ig维生素E200mg/(kg.d);对照组ig等量的蒸馏水。每天1次,共7d,分别用TBA比色法、亚硝酸盐法测定大鼠肝中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与H2O2(1∶10)损伤组比较,龟板醇提物各组具有显著性差异(P<0.01、0.05);与对照组比较,龟板醇提物低、中、高剂量组MDA水平均明显降低(P<0.01),同时能明显提高SOD活力(P<0.01、0.05)。结论龟板醇提物对大鼠MSC氧化损伤具有明显修复作用,同时,具有抗脂质过氧化作用。     

稳心颗粒对心肌细胞氧化应激及凋亡损伤的影响

目的探讨稳心颗粒对过氧化氢(H_2O_2)诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的影响。方法实验分为3组,对照组H9c2细胞不加药物培养,H_2O_2组H9c2细胞加H_2O_2培养2 h,稳心颗粒组H9c2细胞加稳心颗粒溶液培养24 h后再给予H_2O_2培养2 h,检测各组心肌细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)水平、DHE染色阳性细胞量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平、细胞凋亡率及Bcl-2、Bax、Caspase-3、phosphorylated Akt(p-Akt)、phosphorylated PI3K(p-PI3K)、蛋白表达水平。结果与H_2O_2组比较,稳心颗粒组培养24 h和48 h后的细胞活力OD值明显升高(P均0.05),LDH、MDA水平和Bax、 Caspase-3蛋白表达水平均明显降低(P均0.05),SOD水平和Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平均明显升高(P均0.05),细胞内DHE染色阳性细胞数明显减少(P0.05),细胞凋亡率明显降低(P0.05)。结论稳心颗粒可能通过PI3K/Akt途径对H_2O_2诱导的大鼠H9c2心肌细胞损伤起到保护作用。     

临床诊室浓度的艾烟暴露12周对雄性Wistar大鼠血常规的影响

目的观察临床诊室浓度的艾烟暴露12周对雄性大鼠血常规影响。方法应用全自动动式染毒柜,艾烟的浓度以遮光率SR表示。将Wistar雄性大鼠48只随机分成4个艾烟浓度梯度组(n=12):对照组(C,SR 0%)、低浓度组(L,SR0.4%)、中浓度组(M,SR 2%)、高浓度组(H,SR 15%),分别为无艾烟组,1×,3×和9×临床浓度艾烟组。每天暴露200min,5 d/周,连续暴露12周。应用全自动血细胞分析仪检测大鼠血常规指标。结果艾烟暴露各组WBC,PLT等均未见明显影响。艾烟暴露各组HCT升高,中剂量组RBC、HGB、EO%升高(P0.05),高剂量组MCV升高(P0.05),余未见显著改变(p0.05)。结论临床诊室浓度的艾烟暴露未对雄性大鼠血常规指标产生毒性影响     

过氧化物酶体增殖物激活受体对大鼠脊髓损伤后神经干细胞分化为神经前体细胞影响的实验研究

目的：观察PPARy对大鼠脊髓损伤后神经干细胞分化为神经前体细胞影响,为脊髓损伤的防治提供理论基础。方法：使用清洁级sD大鼠108只,随机分成SCI组、RT组和GT治疗组。在不同时期内取材,行免疫荧光染色,观察PPAR？对大鼠脊髓损伤后神经干细胞分化为神经前体细胞的影响。结果：PPARy激动剂罗格列酮治疗组巢蛋白的表达较脊髓损伤组的巢蛋白表达在1～4w时间点内表达增加（P〈0．05）,PPAR？拮抗剂GW9662组巢蛋白的表达较SCl组的巢蛋白表达在1～4w时间点内表达减少（P〈0．05）,单因素方差分析表明三组之间具有统计学差异。结论：PPAR？能够促进神经干细胞分化为神经前体细胞,起到神经保护作用。     

锁阳黄酮对甲醛诱导的大鼠肝星状细胞氧化损伤的保护作用

目的:考察锁阳黄酮对甲醛诱导所致的大鼠肝星状细胞氧化损伤的保护作用。方法:以甲醛诱导建立大鼠肝星状细胞氧化损伤模型,采用MTT法检测细胞活性,测定大鼠肝星状细胞培养液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力变化。结果:锁阳黄酮浓度在0、12.5、25、50、100、200μg/mL时,大鼠肝星状细胞生长率分别52.55%、76.62%、85.05%、91.32%、92.99%、59.12%;与模型组相比,给药组细胞中的GSH-PX和SOD活力显著升高(P0.01)。结论:锁阳黄酮在一定浓度范围内对甲醛氧化损伤的大鼠肝星状细胞具有保护作用。     

广枣总黄酮对红细胞氧化损伤的抑制作用

目的：研究广枣总黄酮(TFFC)的抗氧化作用。方法：以红细胞(RBC)为靶细胞，利用自氧化和激活氧化的方法。结果；TFFC可抑制RBC的自氧化和激活氧化，保护氧合血红蛋白、抑制过氧化物(LPO)和绿色素的生成。结论：TFFC具有抗自由基及抗氧化作用，可能与其分子结构中的酚羟基团有关。