吲哚美辛抑制髓系白血病细胞增殖机制的研究

目的　探讨吲哚美辛 (IN)抗慢性髓系白血病 (CML)细胞增殖的作用机制。方法　用MTT法分析IN对慢性髓系白血病细胞系K5 6 2及CML患者骨髓细胞活力的影响 ;Westernblot分析CML细胞信号转导和转录活化蛋白 (STAT) 1、STAT5表达 ;免疫共沉淀 /Westernblot分析IN干预后CML细胞磷酸化的STAT1(p STAT1)和STAT5 (p STAT5 )表达 ,间接免疫荧光技术观察p STAT1和p STAT5在CML细胞中的分布及变化 ;Westernblot检测IN干预前后Bcl XL 及环氧化酶 2 (COX 2 )蛋白的表达。结果　IN可显著抑制CML细胞活力 ;4 0 0 μmol/LIN作用 72h ,CML细胞抑制率为 86 % ;0～ 4 0 0 μmol/LIN呈剂量反应性抑制p STAT1、p STAT5表达 ;p STAT主要呈散点状分布于胞核中 ;Bcl XL 蛋白呈IN浓度依赖性表达下调 ;K5 6 2细胞存在COX 2蛋白表达 ,IN可抑制COX 2蛋白表达。结论　IN可明显抑制CML细胞增殖 ;其机制可能与药物抑制STAT/Bcl XL 信号转导途径有关 ;K5 6 2细胞存在COX 2蛋白表达 ,IN的抗白血病细胞增殖效应可能是通过COX 2依赖性途径实现的。     

miR-181a靶向抑制ATM表达促进急性髓系白血病细胞增殖

目的:研究microRNA181a(miR-181a)在人急性髓系白血病(AML)中的作用及其调控机制。方法:采用miR-181a小分子类似物转染人AML细胞系HL-60细胞,采用CCK-8计数法检测miR-181a对细胞增殖的影响。利用生物信息学方法结合文献分析预测miR-181a潜在的靶基因,通过双荧光报告实验在HL-60细胞内以及白血病患者体内多方面对靶基因进行验证。结果:miR-181a能显著促进人HL-60细胞恶性增殖(P0.05);在线软件预测发现,抑癌基因ATM可能是白血病细胞miR-181a潜在的靶基因;双荧光报告实验结果表明,miR-181a能显著地抑制含3'-UTR的ATM报告基因活性,荧光素酶活性下降56.8%(P0.01),而对含3'-UTR突变位点的ATM报告基因载体没有抑制作用。在HL-60细胞中过表达miR-181a,Western blot检测显示可以显著抑制内源性ATM的表达(P0.01),而在白血病患者中miR-181a的表达增高,与ATM的表达呈负相关(r=-0.766)。结论:miR-181a通过抑制抑癌基因ATM表达以促进人AML细胞恶性增殖,从而在AML发病中起着类似"癌基因"的作用。     

灯盏花乙素对急性髓系白血病细胞增殖的影响及作用机制研究

目的:探讨灯盏花乙素(SCU)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖、周期与凋亡的影响及相关分子机制。方法:体外培养人AML HL-60细胞,分别以0、2、4、8、16、32、64μmol/L浓度的SCU处理HL-60细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。以4、8、16μmol/L浓度的SCU处理HL-60细胞,并设置阴性对照组(NC组),采用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡,Western blot法检测细胞周期、凋亡相关蛋白及JAK2/STAT3通路相关蛋白的表达。结果:SCU对HL-60细胞具有明显的增殖抑制作用,且增殖抑制作用呈浓度(r=0.958)、时间(r=0.971)依赖性。与NC组比较,SCU 4、8、16μmol/L组HL-60细胞G0/G1期比例、细胞凋亡率均显著升高,S期比例均显著降低(P <0.05); p21、p53、caspase-3、Bax蛋白相对表达量均显著升高,CDK2、cyclin E、Bcl-2蛋白相对表达量均显著降低(P <0.05),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均显著降低(P <0.05),且上述...     

重楼皂苷抑制卵巢癌细胞增殖和转移、诱导其凋亡分子机制研究

正卵巢癌近年来在妇科门诊和病房中发病率逐渐增多,属于女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一,病死率极高,严重危害了患者身体健康和生存质量。目前国内对卵巢恶性肿瘤的治疗主要还是以化疗、手术切除为主,研究显示,化疗的药物治疗效果和所用剂量呈正比[1]。但是,长期化疗,剂量在体内不断累     

ITF2357体外对急性髓系白血病细胞增殖的抑制作用及机制探讨

目的 探讨新型组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂ITF2357对急性髓系白血病(AML)细胞的增殖抑制及诱导分化和促凋亡作用及其机制.方法 以AML细胞系Kasumi-1细胞(AML1-ETO阳性)为模型,应用MTT比色法观察ITF2357对白血病细胞的增殖抑制作用,并与THPI细胞(AMLl-ETO阴性)进行比较;用流式细胞术分析细胞周期和分化抗原的表达;用Annexin V标记和流式细胞术分析细胞凋亡;Western blot法检测AMLl-ETO及乙酰化组蛋白、caspase蛋白水平.结果 0.5 umol/L ITF2357即能明显抑制Kasumi-1细胞增殖,48 h半数抑制浓度(IC50)为0.1 Ixmol/L,然而对于AMLl-ETO阴性的THPl细胞系的起始抑制浓度为5.0 umoL/L;ITF2357诱导Kasumi-1细胞凋亡呈时间、剂量依赖性,ITF2357处理24 h早期凋亡细胞由(1.44±1.52)%增加至(24.51±5.79)%,48 h晚期凋亡细胞由(2.37±2.80)%增加至(63.66±1.56)%.0.25 μmol/L ITF2357即可诱导Kasumi-1细胞髓系分化抗原CDl3及CDl5表达增加.并呈剂量和时间依赖性.经5.0μmoVL ITF2357作用后细胞阻滞于Go/G1期,Gn/G1期细胞由(39.69±6.56)%增加至(79.20±6.51)%,伴有S期细胞减少,由(60.12±3.29)%降低至(18.97±6.62)%.Western blot检测发现0.5斗moL/L ITF2357可降低AMLI-ETO蛋白水平,处理24 h开始减少,处理96 h后AMLl-ETO基本消失,并依赖于caspase途径.经ITF2357处理后,组蛋白H4及H3的乙酰化水平增加.结论 低剂量HDAC抑制剂ITF2357能有效抑制AML细胞的增殖,对于AMLl-ETO阳性AML细胞尤为有效,通过降解AMLl-ETO蛋白抑制Kasumi-1细胞增殖,使细胞阻滞于Go/G1期,诱导其发生凋亡及分化.     

老年急性髓系白血病

急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者的年龄因素不仅影响缓解率,还影响生存率,本文不老年ＡＭＬ的生物学和临床特征,治疗选择和展望作一简要叙述。     

老年急性髓系白血病

急性髓系白血病(AML)是最常见的急性白血病,生物学特征异质性很大.因此,不能单纯靠细胞形态学诊断,需要借助免疫学、细胞遗传学和分子生物学检查(即MICM诊断).AML的MICM诊断可以使预后判断更为准确,也有助于发现治疗靶点和新的治疗措施.AML的发病率随年龄增长而增加,中位年龄在65～70岁左右,30岁以下人群AML发病率不到1/10万,60岁时发病率为5/10万,至80岁时可超20/10万.多数学者主张以60岁为界划分老年AML,因此,老年AML是AML重要组成部分,占全部AML的5O%以上.     

老年急性髓系白血病

急性髓系白血病(AML)患者的年龄因素不仅影响缓解率,还影响生存率。本文就老年AML的生物学和临床特征、治疗选择和展望作一简要叙述。     

老年急性髓系白血病

老年急性髓系白血病（AML）是AML重要组成部分,占全部AML的50％以上。老年AML与年轻患者存在明显不同,具有独自的一些特征,而这些特征往往与不良预后有关。老年AML的治疗主要包括：①支持治疗;②传统的强烈化疗;③低剂量诱导化疗（如小剂量阿糖胞苷,LD-AraC）;④非骨髓抑制性药物;⑤临床试验（尤其是一些新药的试用）;⑥干细胞移植等。但整体疗效较差,多数报道完全缓解（CR）率在50％左右,长生存率在10％左右。本期杂志介绍了老年AML的生物学特点和化疗现状、NCCN关于老年AML治疗的指南,本刊编者希望读者阅后获得益处。     

急性髓系白血病cebpa基因突变研究

本研究旨在探讨急性髓系白血病(AML)患者中cebpa基因突变的发生率及突变情况。选取22例初发或复发的正常核型AML患者,其中M12例,M215例,M52例,M63例例,女性8例,中位年龄48岁(13-71岁)。以基因组DNA为模板,分两段扩增cebpa基因,PCR产物通过直接测序或克隆测序法检测cebpa突变情况。结果表明:22例AML患者中有4例检出cebpa基因突变,突变率为18.2%(4/22),均为M2,其中2例为初发AML患者,2例为复发AML患者。突变主要为N端的无义突变和C端的框内突变。结论:采用PCR扩增联合测序检测cebpa基因突变,主要见于M2型,其预后意义有待进一步研究。     

急性髓系白血病FANCG基因表达的研究

本研究探讨FANCG基因表达与成人散发性急性髓系白血病（AML）的相关性。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测54例AML初诊患者、46例AML完全缓解（CR）患者及36例对照样本骨髓中单个核细胞FANCG基因表达的情况,以β-Actin基因作为内参,根据相对定量公式2^-△△C_T计算AML初诊患者与对照样本、AML初诊患者与AMLCR患者、AMLCR患者与对照样本FANCG基因表达差异的倍数。结果表明,AML初诊组FANCGmRNA的相对表达量为0．56±0．27,AMLCR组为0．75±0．54,对照组为0．85±0．45;AML初诊组FANCGmRNA的表达量较对照组和AMLCR组明显降低（P〈0．05）;AMLCR组FANCGmRNA的表达量与对照组比较无统计学差异。结论：FANCG基因在初诊AML患者中表达降低,AMLCR患者的FANCG基因表达与对照组无明显差异,提示FANCG基因可能与AML的发病有相关性,同时在判断AML的化疗疗效方面具有一定的临床参考价值。     

急性髓系白血病与急性淋巴系白血病的蛋白质组比较研究

本研究通过对急性髓系白血病(AML)与急性淋巴系白血病(ALL)细胞比较蛋白质组分析,寻找亚型特异性的蛋白质表达谱。应用双向电泳分别分离AML不同亚型(M1、M2、M3)、ALL患者骨髓白血病细胞蛋白质,利用PDQuest 7.4软件分析双向电泳图谱差异蛋白质点,基质辅助的激光解析飞行时间质谱和生物信息学鉴定差异蛋白质。结果显示:经过电泳图谱分析得到21个差异蛋白质点,质谱鉴定提示15种蛋白有统计学意义。在AML中高表达的蛋白质包括髓过氧化物酶(MPO)、硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶(PRDX3),钙网蛋白(CALR)、烯酰辅酶A水合酶ECH1等7种,在ALL中高表达的蛋白质包括ARHGDIB、肌动蛋白抑制蛋白1(PFN1)、肌动蛋白(ACTG1)等8种。结论:AML与ALL细胞存在差异蛋白质表达谱,这将有助于发现早期诊断的分子标志物及特异性治疗靶标。     

重视老年急性髓系白血病的研究

急性髓系白血病(AML)是成人急性白血病中最常见的类型,其发病率随着年龄增长而增加.大多数学者主张以60岁为界划分老年AML患者,欧美发达国家成人AML患者中位年龄为67岁左右.近来美国SEER17项目发布的针对该国急性白血病发病率调查结果显示,40岁以下年龄标化年发病率为1.23/10万以下,而60岁以上患者年发病率高达10.92/10万,75岁以上患者年发病率更是高达20.89/10万,因此老年AML患者已成为成人AML的主要组成部分.随着国民医疗卫生保健水平的提高及社会老龄化程度的加剧,国内老年AML的发病率也呈上升趋势.     

SENEX基因对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨SENEX基因对急性髓细胞性白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞增殖和凋亡的影响.方法 选取20例成人初诊AML患者,5例复发AML,17例完全缓解AML以及7例对照的骨髓标本,qPCR检测SENEX基因的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡,CCK8检测细胞增殖.结果 (1)SEN...     

急性髓系白血病治疗进展

近年来的研究对于急性髓系白血病(AML)发病机制的理解已经有了显著的进步,导致AML发病的许多分子学异常逐渐明晰,因此对于AML的本质认识越来越深刻。与此同时大量临床试验的开展也获得了相当的成功,AML的诊治方案已经进展到了个体化阶段。     

儿童急性髓系白血病临床研究

目的：了解儿童急性髓系白血病的临床特点、治疗疗效及预后因素。方法：对１９７８年８月～１９９５年１２月２７４例儿童急性髓系白血病进行临床总结和分析。结果和结论：中位确诊年龄７岁３个月，男∶女＝１．６３∶１，Ｍ２、Ｍ３型占８０％，高白细胞血症２０例，髓外白血病２４例，有Ａｕｅｒ小体者占３２．９％。治疗２４４例，分别以三种方案进行治疗，完全缓解（ＣＲ）率５５．８８％～９２．３１％，证明采用ＤＡ或ＤＡ＋Ｖｍ２６或Ｖｐ１６是提高ＣＲ的关键。影响诱导缓解因素为病初白细胞计数和肝脾肿大程度。通过ＳＰＳＳ统计学软件分析，ＡＭＬ亚型、Ａｕｅｒ小体、诱导缓解时间、髓外白血病等因素对远期预后有影响。     

西罗莫司抑制急性髓系白血病细胞株Kasumi-1增殖的研究

目的探讨不同浓度西罗莫司对急性髓系白血病细胞株Kasumi-1增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法 MTT法检测西罗莫司对Kasumi-1细胞增殖的影响,流式细胞术检测西罗莫司对Kasumi-1细胞凋亡和细胞周期的变化,免疫荧光法观察西罗莫司处理前后Kasumi-1细胞核形态变化。结果不同浓度的西罗莫司均能抑制Kasumi-1细胞的增殖,促进其凋亡,并使细胞阻滞在G0/G1期。Kasumi-1细胞对西罗莫司表现为剂量依赖性,并在100 ng/mL左右达到最大效应。结论西罗莫司能够显著抑制Kasumi-1细胞增殖,并对凋亡起促进作用。     

难治复发急性髓系白血病

自上世纪中期化疗药物开始应用于急性髓系白血病（AML）治疗，近30年来AML的标准诱导治疗方案一直是蒽环类药物（如Daunorubicin—DNR）＋阿糖胞苷（DA方案）。该方案可使60％～80％的儿童和年轻成人AML达完全缓解（CR）。但仅有30％～40％的患者可以存活下来，达5年无病生存。老年患者尽管40％～55％的患者可达CR，但很少长生存者。也就是说相当比例的患者无法达CR，大多数CR患者最终要复发、死亡，这就要涉及难治复发急性白血病的问题。