两种罗氏培养基的临床应用比较

目的 分析ＷＨＯ推荐的无淀粉Ｌ－Ｊ培养基应用的可行性。方法 将无淀粉Ｌ－Ｊ培养基与改良Ｌ－Ｊ培养基做比较，分别从结核菌的分离率、生长速度及药物敏感试验等方面观察。结果 两种培养基应用于结核菌培养的初代分离率无显著性差异（Ｐ〉０．０５），生长速度基本接近，药物敏感试验总相关率为９７．３％。结论 改良Ｌ－Ｊ培养基的配制梧以不加马铃薯淀粉。     

一种新的吡嗪酰胺耐药测定培养基的研制

应用蛋黄琼脂培基测定结核菌对PZA药物敏感程度与应用改良罗氏培基相比,可保证培基pH稳定在5.50～5.65范围内,在此环境中结核菌可以生长,PZA也可以发挥抑菌作用,经对124株新分离的结核菌测定,6周时均能生长。在含PZA 50mg/L培基上仍生长株仅3株(2.4％)。说明此种培基可明显显示出PZA抑菌效果。     

Tween80培养基对分支杆菌临床分离培养的实验研究

本文应用Ｔｗｅｅｎ８０培养基和改良罗氏培养基，对临床３９０份标本作分离培养结核分支杆菌比较。结果表明在结核菌生长速度、生长量、阳性率等方面，Ｔｗｅｅｎ８０培养基均优于改良罗氏培养基，对提高涂阴标本培阳率尤为显著（Ｐ＜Ｏ．０１），并有利于部分劣势生长的分支干菌发育。     

Tween80培养基对分支杆菌临床分离培养的实验研究

本文应用Ｔｗｅｅｎ８０培养基和改良罗氏培养基，对临床３９０份标本作分离培养结核分支杆菌比较。结果表明在结核菌生长速度，生长量，阳性率等方面，Ｔｗｅｅｎ８０培养基均优于改良罗氏培养基，对提高涂阴标本培阳率尤为显著（Ｐ＜０．０１），并有利于部分劣势生长的分支干菌发育。     

二种结核分枝杆菌药物敏感试验方法的评估

结核分枝杆菌药物敏感试验通常采用L-J常规法中的绝对浓度法,即在固体改良罗氏培养基中加入各种抗结核药物,药物分低浓度和高浓度两种浓度,根据细菌在培养基上的生长情况判断药物敏感试验的结果。目前,许多单位采用BACTEC法,即在12B培养基中加入各种抗结核药物,根据结核分枝杆菌的生长指数 (GI值)判断药物敏感试验的结果,此法与比例法有所相同。本院实验室对300例住院初、复治病人的痰标本分离培养后的结核分枝杆菌,进行了上述二种方法的药物敏感试验,观察二种方法对抗结核药物耐药性的符合率及耐药性的检出率。     

分支干菌干燥培养基用于结核杆菌分离培养的研究

本文报道上海地区17所结核病院、所,应用分支杆菌干燥培养基作结核菌分离培养,统计临床标本8247例,与改良罗氏、丙酮酸钠培养基比较,其阳性率相当而生长速度优于两种传统的培养基,结果报告时间为40天左右,可提前2周(6周).     

酸化离子水配制吡嗪酰胺药敏培养基

目的：探讨满足吡嗪酰胺活性需要的同时，研制使结核菌生长良好的PZA药敏培养基。方法：以改良罗氏培养基为基础，加大镁离子浓度，去掉马铃薯淀粉，用PH2．34，氧化还原电位为1174mv的酸化离子水配制PZA药敏培养基，按《结核病诊断细菌学检验规程》，测试了120株结核分杆菌对PZA的敏感性。结果：门诊分离的60株分支杆菌，PZA耐药率为13．3％，住院患者和深圳市慢性病医院分离15株完全耐药的分支杆菌，在此培养基上对PZA耐药。结论：此培养基配制简单，可与其他药敏试验同步进行，易于推广应用。     

结核病

正1 结核病实验室检查结核菌检查是确诊肺结核最特异的方法。1.1 痰涂片痰涂片抗酸染色快速简便,一般涂片阳性肺结核诊断可基本确立。但随着我国非结核分枝杆菌病发病率的增加,需排除。1.2 结核菌培养除了能了解结核菌有无生长繁殖能力以外,尚可用作药物敏感试验及菌型鉴定,结核菌生长缓慢,使用改良罗氏培养基一般需要4～8周才能报告。培养虽费时,但精确可靠,培养的菌株进行药敏试验对复治结核病或者怀疑有耐药的的结核病尤为重要。     

二种不同方法对结核菌培养和药敏的优势互补

目的：探讨二种不同方法对结核菌培养及药敏的优势互补。方法：收集称院临床痰标本300份用BACTEC法与改良罗氏法（简称L－J法）分别对结核菌作初代培养，并收集BA CTEC法培养阳性菌75株分别进行BACETEC法和L－J法的四种药敏（INH SM RFP EMB）试验。结果：初代培养BACTEC法较L－J法阳性率提高17．3％，阳性生长时间提前23天。结论：结核菌初代培养可选择BACTEC法，药敏试验选择L－J法较好。     

分支干菌干燥培养基用于结核杆菌分离培养的研究

本文报道上海地区１７所结核病院，所，应用分支杆菌干燥培养基作结核菌分离培养，统计临床标本８２４７例，与改良罗氏，丙酮酸钠培养基比较，其阳性率相当而生长速度优于两种传统的培养基，结果报告时间为４０天左右，可提前２周。     

表型药物敏感性试验与GeneXpert MTB/RIF在耐药脊柱结核诊断中的作用

目的分析表型药物敏感性试验(简称"表型药敏试验")与GeneXpert MTB/RIF在耐药脊柱结核诊断中发挥的作用。方法回顾性分析2015-2018年首都医科大学附属北京胸科医院514例临床诊断为脊柱结核的患者资料,通过穿刺或外科手术获得病灶中的脓液、肉芽组织及干酪样坏死组织,并以无淀粉改良罗氏培养和浓度法进行结核分枝杆菌培养和表型药敏试验,同时进行GeneXpert MTB/RIF检测。结果 514例患者中,男260例(50. 6%),女254例(49. 4%);年龄1～86岁,平均(46. 2±18. 7)岁;腰椎结核200例(38. 9%),胸椎结核186例(36.2%),腰骶椎结核60例(11. 7%),胸腰段结核46例(8.9%),颈椎结核14例(2. 7%),颈胸段结核8例(1.6%)。109例培养阳性并获得表型药敏试验结果 ,阳性率为21. 2%;检出耐药患者25例(4. 9%,25/514),其中耐多药结核病(MDR-TB)和广泛耐药结核病(XDR-TB)患者9例,占阳性患者的8. 3%。GeneXpert MTB/RIF阳性383例(74.5%),其中发现rpoB突变47例(9. 1%, 47/514),包括表型药敏试验检出的9例MDR-TB和XDR-TB患者。结论脊柱结核病灶中耐药结核分枝杆菌通过表型药敏试验检出率偏低,不能及早发现耐药结核病患者,通过GeneXpert MTB/RIF方法可尽早发现更多耐药结核病患者。     

抗结核药物诱导结核分支杆菌形成L型及其特性的观察

目的 观察常用抗结核药物对结核分支杆菌L型的诱导作用以及结核分支菌L型在非高渗透压培养基内的某些特性及其抗菌药物敏感性,探讨结核分支菌L型形成的机制及其在结核病的发生、诊断及治疗上的意义。方法 将结核分支杆菌接种于含有利福平、异烟肼、乙胺丁醇的非高渗透压培养基内,逐日在显微镜下观察结构分支杆菌L型的形成情况。L型形成后将培养物过滤,获得结核分支杆菌L型纯培养物并对其形态、培养、抗菌药物敏感性、结核分支杆菌特异性基因等进行观察。结果 结核分支杆菌在常规药敏试验浓度的利福平、异烟肼、乙胺丁醇的作用下均可形成L型。结核分支杆菌L型对这些抗结核药物不再敏感,但对链霉素、红霉素、氧氟沙星、诺氟沙星等抗菌药物均敏感。结核分支杆菌L型在非高渗透压培养基内呈圆球或不规则形态的细胞,单个、成双或链状排列,沉于培养基底部生长,不粘附瓶壁,不运动,抗酸染色阴性,革兰染色阴性或阳性,保留了结核分支杆菌特异性PCR引物基因序列。结论 利福平、异烟肼、乙胺丁醇虽然能够杀灭结核分支杆菌细菌型,但也能够诱导其形成L型而造成这些抗结核药物对结核治疗无效。非高渗培养基传代培养的结核分支杆菌L型保留了与其亲代细菌型一致的PCR引物基因序列,以致可用结核分支杆菌特异性PCR鉴定。根据结核分支杆菌L型的药物敏感性特点,建议在使用抗结核药物治疗中须注意其L型的形成和联合使用结核分支杆菌L型敏感的抗菌药物进行治疗。     

Evaluation of cycloserine in the treatment of infections caused by nontuberculous mycobacteria viewed from in vitro experiments

Evaluation of cycloserine as a drug in the treatment of infections caused by nontuberculous mycobacteria was made from in-vitro studies, in which Mycobacterium tuberculosis strains were used as the standard of the evaluation. The susceptibility testing to cycloserine was made using Ogawa egg medium. Bacterial suspensions, 10 mg wet weight/ml, prepared from 10 day-old cultures (M. tuberculosis, 14 day-old cultures) growing on Ogawa egg medium were used as the source of inoculation. A 0.02 ml-sample of the suspensions was inoculated onto Ogawa egg medium containing cycloserine or containing no drug, and the media inoculated were incubated at 37 degrees C. The minimal inhibitory concentration (MIC) was determined after incubation for 14 days (M. tuberculosis, for 21 days). The MIC was determined as the lowest concentration of the drug, on which the growth of test strains was completely inhibited. However, residual growth was sometimes observed. This was regarded as growth inhibition, because control medium containing no drug showed always abundant, membraneous growth. The results are shown in Fig.. The growth of M. tuberculosis strains was inhibited by the concentrations of 6.25 to 25 micrograms/ml. However, considering our previous observations on the relationship between the cycloserine resistance and the drug efficacy (reference 1), we regarded the MIC 12.5 micrograms/ml as critical concentration for presumable clinical efficacy. The ratios of strains of various mycobacterial species showing the MICs lower than the critical concentration are shown in Table. As seen in this table, clinical efficacy of cycloserine was expected in the treatment of infections caused by Mycobacterium kansasii, M. malmoense, M. simiae, M. scrofulaceum and M. marinum.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

70例MDR-TB病例抗结核二线药物敏感性检测结果分析

了解耐多药结核分枝杆菌临床分离株对二线药物耐药情况,评价BACTEC MGIT960系统在抗结核二线药敏试验中的临床应用价值。方法 收集本院的痰培养阳性、经菌种鉴定和一线药物的药物敏感性试验确定为耐多药的结核分枝杆菌菌株。采用BACTEC MGIT960对4种二线药氧氟沙星（OFLX）、左氧氟沙星（LVFX）、阿米卡星（AMK）和卷曲霉素（CPM）进行药物敏感性检测,并与改良 L-J罗氏培养法相比较。结果 (1)2008年10月-2009年4月,70例MDR-TB分离到的菌株,包括初治病例26例、复治病例44例,对四种药的总耐药率为61.4%（43/70）。对OFLX、LVFX、AMK和CPM耐药率分别为48.6%、40.0%、17.1%、7.1%。初治耐药率为57.7%（15/26）,复治耐药率达63.6%（28/44）。符合XDR-TB诊断者5例（7.1%）,包括初治者1例（1.4%）,复治者4例（5.7%）。（2）BACTEC MGIT960二线药物敏感试验与改良L-J法相比,平均报告时间仅10.2天,明显短于L-J法,符合率在90%以上。结论 （1） 在住院耐多药结核病患者中对这四种抗结核二线药物的耐药率已经到了一个较高水平;同时,当地存在XDR-TB,应该引起重视。（2）BACTEC MGIT960系统可以准确而快速地检测结核分枝杆菌对二线药物的耐受性.     

应用免疫磁珠分离-改良罗氏培养技术检测痰结核分枝杆菌的研究

目的通过免疫磁珠分离技术(immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)富集痰液中的结核分枝杆菌,提高痰液培养的阳性率,以期用于结核病的快速诊断。方法制备兔抗结核杆菌IgG抗体,并将其结合于免疫磁珠表面。采集71例确诊结核病患者的痰液标本,通过免疫磁珠分离技术捕获、富集吸附结核分枝杆菌后用改良罗氏培养基培养,并与传统改良罗氏(L-J)培养法和痰涂片抗酸染色法作比较。结果 71例结核病患者痰涂片抗酸染色检查阳性26例,阳性率36.6%;传统改良L-J培养阳性34例,阳性率47.9%;免疫磁珠分离技术捕获、富集结核分枝杆菌后进行改良L-J培养阳性48例,阳性率67.6%。三者阳性率差异有统计学意义(P<0.05),改良L-J培养和痰涂片检查阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用免疫磁珠分离技术捕获、富集痰液中的结核分枝杆菌后进行培养,可显著提高痰培养的阳性率,该方法可用于结核病的快速诊断。     

A simple method to differentiate between Mycobacterium tuberculosis and non-tuberculous mycobacteria directly on clinical specimens

We report the applicability of testing susceptibility to paranitrobenzoic acid (PNB) directly on clinical samples as a rapid screening assay, to detect M. tuberculosis and differentiate it from non-tuberculous mycobacteria (NTM). One hundred smear positive sputum samples from patients with pulmonary tuberculosis attending the Department of Respiratory Medicine at VP Chest Institute, Delhi, were cultured on L?wenstein Jensen medium with and without 0.5 mg/ml paranitrobenzoic acid. Serial concentrations of known cultures of H37Rv, M. fortuitum, M. scrofulaceum and M. avium were used as controls in the study. After 3 weeks of incubation, growth was observed on all the drug free L?wenstein Jensen slants but none of the slants containing PNB, which inhibited the growth of M. tuberculosis. The cultures were further confirmed to be M. tuberculosis by niacin, nitrate and catalase tests. Direct susceptibility to PNB was thus found to be a simple, cheap and technically feasible method of preliminary identification of M. tuberculosis and its effective differentiation from NTM, which may be adapted for use at Level II laboratories, especially in developing countries.     

铜陵地区结核与非结核分枝杆菌菌型鉴定及耐药性分析

目的通过检测本地区分枝杆菌感染菌株类型以及耐药性,制订化疗方案提供依据。方法采取两种试剂鉴定菌株,绝对浓度法检测药敏耐药性。结果 80株分枝杆菌中人型结核分枝杆菌58例,占72.5%;牛型结核分枝杆菌15例,占18.8%;非结核分枝杆菌7例,占8.7%。结核分枝杆菌复合群耐多药率9.6%。非结核分枝杆菌耐多药率85.7%。牛型结核分枝杆菌对药物敏感性大于人型结核分枝杆菌,人型结核分枝杆菌对药物敏感性大于非结核分枝杆菌。耐药以耐R、H、TH1321、Rtf、PAS多见。结论本地区肺部感染分枝杆菌菌株以结核分枝杆菌复合群为主,耐多药率及非结核分枝杆菌感染率略高于全国水平。     

Pyrazinamidase activity of Mycobacterium tuberculosis--a test of sensitivity to pyrazinamide

Pyrazinamidase activity has been found to correlate with pyrazinamide sensitivity in strains of Mycobacterium tuberculosis. In vitro sensitivity to pyrazinamide in acidified L?wenstein-Jensen medium, and pyrazinamidase activity by the Wayne method, were determined in 378 clinical isolates of M. tuberculosis. A close correlation was observed between the results of both tests. This method of detecting pyrazinamidase activity was found to be a rapid, simple and reliable substitute for pyrazinamide sensitivity testing, and it overcomes the difficulty of growing M. tuberculosis at pH 5.5, as required in the standard method.     

手工MGIT法检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药的效果评价

目的 评价MGIT手工荧光判读法在检测结核分枝杆菌耐药的基层应用价值。方法 以常规L-J比例法为参照方法,比较分析手工荧光MGIT液体药敏法检测300株临床结核分离株异烟肼和利福平药敏效果。结果 手工MGIT液体药敏法检测异烟肼和利福平灵敏度和特异度分别为94.7%和92.6%、95.6%和98.8%。两种药敏方法的异烟肼符合率95.7%,利福平符合率97.7%,两种方法检测异烟肼和利福平敏感性的差异无统计学意义(P>0.05)。液体药敏阳性报告时间平均7.6 d,比传统比例法报告时间提前20.4 d。结论 手工MGIT液体药敏法与常规L-J比例法检测异烟肼和利福平敏感性结果一致性高,能快速、准确检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药,适合基层推广。