泥蚶养殖技术

泥蚶是我省四大养殖贝类之一,营养价值极高,有"血蚶"之美称,近年来由于酷采滥捕造成野生资源几近枯竭,人工养殖已有一定规模.我区适宜泥蚶养殖的沿海滩涂资源丰富,现有泥蚶养殖面积200多hm2,居全市首位、全省前列.现将几年来泥蚶养殖成功的技术、经验介绍如下.     

毛蚶、泥蚶、橄榄蚶的核型比较分析

以毛蚶、泥蚶、橄榄蚶担轮幼虫为材料,采用热滴片法,进行染色体制备和核型分析,结果表明：毛蚶、泥蚶、橄榄蚶的二倍体染色体数目都为2N=38,核型公式分别为20m＋12sm＋6st,22m＋12sm＋4st,18m＋18sm＋2st,染色体臂数（NF）分别为70,72,74,未发现性染色体和随体。从三种蚶核型不对称性的比较推测泥蚶进化程度最高,类平均法聚类分析的结果显示橄榄蚶的进化程度在泥蚶和毛蚶之间,并在亲缘关系上更接近于毛蚶。     

毛蚶、泥蚶、橄榄蚶的核型比较分析

以毛蚶、泥蚶、橄榄蚶担轮幼虫为材料,采用热滴片法,进行染色体制备和核型分析,结果表明：毛蚶、泥蚶、橄榄蚶的二倍体染色体数目都为2N=38,核型公式分别为20m＋12sm＋6st,22m＋12sm＋4st,18m＋18sm＋2st,染色体臂数（NF）分别为70,72,74,未发现性染色体和随体。从三种蚶核型不对称性的比较推测泥蚶进化程度最高,类平均法聚类分析的结果显示橄榄蚶的进化程度在泥蚶和毛蚶之间,并在亲缘关系上更接近于毛蚶。     

云南光唇鱼仔鱼暂养与苗种培育试验

对初孵云南光唇鱼仔鱼进行暂养,平游下塘后进行苗种培育.该试验采取流水培育鱼苗与肥水培育天然饵料相结合的方式,既保证了苗种培育池水质,又为鱼苗提供天然饵料.经过240 d苗种培育,云南光唇鱼平均全长达98mm,成活率71.3％.试验结果显示：通过暂养的云南光唇鱼仔鱼体质好,成活率高;采用流水池塘肥水培育云南光唇鱼方法,解决了云南光唇鱼在培育过程中既要保持水质清新,又需要丰富天然饵料渡过开口摄食难关的矛盾,省去了人工收集天然饵料投喂的麻烦,具有操作简单、鱼苗成活率高、生长速度快、易于推广的特点.     

泥蚶人工育苗

本实验通过采用室内水泥池进行催产,浮游期,附着期和苗种早起培育结合室外土池培育工艺相结合方法,于2010年11月3日经现场检测,共培育出泥蚶苗3735.2万粒,蚶苗平均壳长9.70mm,平均体重0.117g/粒。     

泥螺人工杂交育苗及中间培育技术

对2002年和2003年的6～7月先后4次从朝鲜某滩涂养殖场引进的规格为8.3～12.5 g泥螺1 299 kg,以及采集自江苏启东当地自然海区规格为3.3～2.7 g的优质泥螺675 kg,进行亲贝育肥蓄养、人工催产、杂交繁育、浮游幼虫培育、附苗和利用土池进行稚贝大规模苗种中间培育试验。2年间除受灾损失稚贝1.045亿粒外,共对5.555亿粒经中间培育的幼贝进行滩涂围网及池塘养殖。至2003年10月31日,共捕获规格为6.3～7.1 g的商品螺1 147 t,,产值931.7万元,经济社会效益显著,是适宜在江苏沿海滩涂作为产业化规模贝类增养殖的优良品种,此技术在国内尚未开展。     

泥蚶与牡蛎净化工艺优化初探

应用臭氧与二氧化氯对活体泥蚶和牡蛎进行微生物净化处理。首先对泥蚶和牡蛎进行暂养吐泥,每5 h换水一次,收集排泄物经离心计算相对吐泥量;臭氧净化处理浓度分别为0.4、0.8、1.6 mg/L,二氧化氯浓度分别为5、10、20 mg/L。结果表明：经5 h暂养吐泥即基本完成;用臭氧浓度0.4～1.6 mg/L或二氧化氯浓度5～20 mg/L净化处理24 h,细菌总数减少90%左右,大肠菌群与致病菌则由净化前的超标变成净化后的全面达标;净化处理后的泥蚶与牡蛎在5 ℃的条件下保存,10 d以内存活率为100%,净化处理后的泥蚶保存10 d再进行微生物检测依然达标。得出简便可行的净化工艺流程为：暂养吐泥5 h,再用0.4 mg/L臭氧净化24 h,然后用尼龙袋密封在5 ℃条件下保存。     

盐度胁迫对泥蚶存活率及3种酶活力的影响

为了探究贝类对盐度胁迫的适应机制,本试验以泥蚶为试验材料,将泥蚶置于不同盐度(0~4.0%)中进行胁迫试验,在试验过程中测定血浆渗透压、过氧化物酶(POD)活力、总超氧化物歧化酶(TSOD)活力及组织Na⁺/K⁺-ATP酶活力,结果显示,不同盐度胁迫对泥蚶存活率影响可表示为低盐度组(0、0.5%、1.0%)>对照组(1.5%)和中盐度组(2.0%、2.5%)>高盐度组(3.0%、3.5%、4.0%);对照组血浆渗透压变化不显著,中高盐度渗透压值较开始变化明显且高于对照组,泥蚶对低盐环境的适应能力优于高盐环境;在试验结束时泥蚶血浆中POD活力呈低盐度组>对照组>中高盐度组,高盐度组较开始时降低,低盐度组较开始时增加;血浆中TSOD活力和组织中Na⁺/K⁺-ATP酶活性均较开始呈下降趋势。     

响应面法优化泥蚶多糖的提取工艺

[目的]利用响应面分析法优化泥蚶多糖的提取工艺。[方法]根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理,以提取温度、提取时间、乙醇浓度3个因素为自变量,多糖得率为响应值,设计了3因素3水平响应面分析试验,以优化泥蚶多糖提取的工艺条件。[结果]乙醇浓度是对响应值影响最大的因素,泥蚶多糖提取的最佳工艺条件为提取温度69.6℃,提取时间6.2 h,乙醇浓度78%,在此条件下,泥蚶多糖的提取率为1.635%。[结论]研究优化了泥蚶多糖的提取工艺,为大规模制备泥蚶多糖提供参考。     

3个地理居群泥蚶核糖体DNA ITS区的RFLP分析

利用PCR-RFLP方法对3个地理居群泥蚶的核糖体DNAITS区进行分析,从分子水平探讨三者的遗传多样性及亲缘关系。结果表明：在选用的6种限制性内切酶中,BstHHI、HaeIII和Sse9I为多态性的限制性内切酶,MspI、RsaI和TaqI为单态性限制性内切酶。对酶切图谱进行数理统计后发现宁波海区泥蚶群体内核苷酸多样性指数π值为0.0017,温州海区泥蚶π值为0.0016,而莆田海区泥蚶π值为0.0011,说明宁波海区泥蚶群体内遗传多样性最大,温州海区群体内遗传多样性次之,莆田海区群体内遗传多样性最小。依据3个地理居群泥蚶间的净遗传距离Pnet值及聚类分析结果可知,莆田与温州海区泥蚶间亲缘关系最远,宁波与温州海区泥蚶间亲缘关系最近,宁波与莆田海区泥蚶间亲缘关系介于以上二者之间。     

青蚶人工育苗的初步研究

2009-2010年,进行了青蚶繁殖习性的观察和人工育苗的初步研究,揭示了青蚶繁殖和胚胎发育的过程。本实验筛选了受精卵孵化、幼虫生长和稚贝附着的适宜环境条件。浙南沿海青蚶的自然繁殖盛期是每年的6-7月,水温为24~28 ℃。受精卵发育的适宜温度为24~28 ℃,盐度为22~26,在适宜条件下经过18 h左右发育至D形幼虫。幼虫生长发育的最适宜温度为24~28 ℃,最适宜盐度为26;幼虫的前期培育饵料以球等鞭金藻为宜;经10~12 d培育幼虫进入变态附着期。质地坚硬表面粗糙的水泥砖较适合稚贝的附着和生长。     

贮藏温度对泥蚶存活率和营养成分的影响

研究不同贮藏温度条件下泥蚶的存活率、营养成分(水分、粗蛋白、糖原和粗脂肪)的变化规律及特征。结果表明,(0±1)℃无水保活期泥蚶营养损失和生化特性变化较缓慢,泥蚶保持良好的鲜活状态。不同贮藏温度下,泥蚶的水分均有所增加,粗蛋白、糖原含量整体有所降低,与(0±1)℃变化情况不同,其他贮藏温度下粗脂肪含量均有所降低且变化幅度大于(0±1)℃。     

青蚶人工育苗的初步研究

2009-2010年,进行了青蚶繁殖习性的观察和人工育苗的初步研究,揭示了青蚶繁殖和胚胎发育的过程。本实验筛选了受精卵孵化、幼虫生长和稚贝附着的适宜环境条件。浙南沿海青蚶的自然繁殖盛期是每年的6-7月,水温为24～28℃。受精卵发育的适宜温度为24～28℃,盐度为22～26,在适宜条件下经过18 h左右发育至D形幼虫。幼虫生长发育的最适宜温度为24～28℃,最适宜盐度为26;幼虫的前期培育饵料以球等鞭金藻为宜;经10～12 d培育幼虫进入变态附着期。质地坚硬表面粗糙的水泥砖较适合稚贝的附着和生长。     

3个地理居群泥蚶核糖体DNA ITS区的RFLP分析(英文)

利用PCR-RFLP方法对3个地理居群泥蚶的核糖体DNAITS区进行分析,从分子水平探讨三者的遗传多样性及亲缘关系。结果表明:在选用的6种限制性内切酶中,BstHHI、HaeIII和Sse9I为多态性的限制性内切酶,MspI、RsaI和TaqI为单态性限制性内切酶。对酶切图谱进行数理统计后发现宁波海区泥蚶群体内核苷酸多样性指数π值为0.0017,温州海区泥蚶π值为0.0016,而莆田海区泥蚶π值为0.0011,说明宁波海区泥蚶群体内遗传多样性最大,温州海区群体内遗传多样性次之,莆田海区群体内遗传多样性最小。对所有酶切图谱的复合单倍型进行统计,共发现10种复合单倍型,其中宁波海区泥蚶群体内所含的复合单倍型类型最多为7种,其他2个海区均为6种,进一步证实宁波海区泥蚶群体内遗传多样性最大。另外,通过比较发现每个地理居群都有其特有的复合单倍型,如ABBABA型和BAABAA型复合单倍型是宁波海区泥蚶样本特有的,AAABBA型复合单倍型是莆田海区泥蚶样本特有的,温州海区泥蚶样本则具有AAACAA、BCAABA2种特有的复合单倍型。依据3个地理居群泥蚶间的净遗传距离Pnet值及聚类分析结果可知,莆田与温州海区泥蚶间亲缘关系最远(Pnet=0.0008),宁波与温州海区泥蚶间亲缘关系最近(Pnet=0.0003),宁波与莆田海区泥蚶间亲缘关系介于以上二者之间(Pnet=0.0004)。     

缢蛏苗水泥池中间培育试验

为了缩短缢蛏中间培育周期,快速培育大规格商品苗种,试验稚贝放养的适宜规格和密度,2016年11月至2016年12月,在250 m~2的露天大型水泥池培育稚贝,并混养少量脊尾白虾。研究了不同泥土厚度(3cm、6 cm),养殖密度对大、小2种规格稚贝的壳长、壳高、体质量和存活率的影响。底泥厚度影响稚贝体形的生长,规格越大所需底泥厚度越厚,大规格稚贝在6.0 cm和3.0 cm的壳长分别为20.25±0.03 mm、18.58±0.06 mm(P0.05)。大、小规格稚贝的存活率分别为81.83%±0.69%、65.74%±0.83%;养殖密度影响稚贝的生长速度,稚贝规格和养殖密度的综合效果显示,大规格稚贝(10万粒/kg、壳长0.890±0.024 cm)适宜的放养密度为1.0~1.5万粒/m~2;小规格稚贝(20万粒/kg、壳长0.488±0.035 cm)适宜的放养密度为3.0~5.0万粒/m~2。培育30 d后,14.4 kg大规格稚贝收获196.4 kg,96.6%达到1.5~2.0 cm商品苗种;8.8 kg小规格稚贝收获苗种144.6 kg,68.4%达到1.5~2.0 cm商品苗种。探究了稚贝在水泥池进行中间培育的可行性,缩短了中间培育周期,能为缢蛏的规模化、集约化养殖提供优质、健康的大规格苗种。     

泥蚶和南美白对虾综合养殖池塘氮磷收支研究

为了研究池塘虾贝混养模式中不同养殖密度氮磷收支变化,设置2个养殖密度(低密度组TL,高密度组TH),通过定期采样计算综合养殖池塘的氮磷输入和输出。结果表明,饲料是氮元素的最大来源,在TL中占氮总输入量的55.31%,低于TH的61.71%;补充水是氮元素的第二大来源,在TL中占氮总输入量的23.87%,高于TH的17.68%;系统中磷元素的输入主要来源于饲料,在TL中占磷总输入量的75.93%,低于TH的80.26%;肥料是系统中磷元素的第二大来源,在TL中占磷总输入量的13.30%,高于TH的9.33%。系统氮的输出中,养殖生物移出、底泥沉积、排水是氮输出的主要方式,TL养殖生物移出占氮总输出量的30.43%,低于TH的35.9%;TL底泥沉积占氮总输出量的30.95%,高于TH的27.35%;TL排水占氮总输出量的25.35%,高于TH的21.17%。系统磷的输出中,底泥沉积是主要的输出方式,TL底泥沉积占磷总输出量的51.16%,低于TH的52.29%;其次是养殖生物移出,TL养殖生物移出占磷总输出量的22.68%,低于TH的26.06%。在氮、磷利用率方面,TL低于TH。     

对虾、泥蚶池塘混养

1 池塘选择 1.1 池塘条件 对虾与泥蚶混养,应选择排灌方便、能配备水泵、能正常纳潮使用、池塘涂面平缓、背风向阳、塘底平整的池塘,面积以5～10亩(667m2,下同)为宜.     

不同温度条件下氨氮对泥蚶的急性毒性影响

在不同的温度条件下,采用实验生态学方法,研究了氨氮对不同年龄阶段泥蚶的急性毒性试验。经双因子方差分析表明：氨氮浓度、温度以及氨氮浓度和温度的相互作用均极显著地影响二龄和三龄泥蚶96 h的成活率。在24℃、28℃、32℃时,总氨氮对二龄泥蚶的96 h LC50分别为348.40、312.99、219.06 mg/L,SC分别为34.84、31.30、21.91 mg/L;总氨氮对三龄泥蚶的96 h LC50分别为681.25、443.20、285.84 mg/L,SC分别为68.13、44.32、28.58 mg/L。     

泥蚶受精和早期卵裂过程核行为的细胞学观察

利用石蜡切片技术,对泥蚶受精和早期卵裂过程核行为进行了系统地细胞学观察。泥蚶成熟未受精卵核相处于第一次成熟分裂中期;精卵混合后,精子迅速附着于卵子周围,受精后3 min左右精子入卵,启动成熟分裂,9~12 min排出第一极体、18~20 min排出第二极体,完成第一次和第二次成熟分裂;受精后25 min左右雌、雄性原核形成;受精后30 min左右雌、雄原核以原核联合的方式结合;受精后35 min左右第一次卵裂结束,形成2个大小不等的卵裂球;受精后45 min左右第二次卵裂结束,形成1大3小4个卵裂球。本研究发现了多精入卵现象,多个精子入卵可启动成熟分裂,排出第一、第二极体,形成多个雄性原核并与雌性原核联合,染色体分离紊乱形成多极纺锤体;对多精入卵的成因、发育结局进行了初步探讨。