P2X受体在血细胞中的表达及意义

P2X是ATP配体门控离子通道，属P2受体族。与细胞外ATP结合时P2X通道开放，允许阳离子（Na^ ,Ca^2 等）通过。已克隆了7个哺乳动物的P2X（P2X1-7）受体。并阐明了其结构和功能。天然P2X可以同型或异聚体形式组成离子通道，在包括血液在内的多种组织中存在，与信号传导有关，P2X的异常与人类疾病的关系已引起关注，如慢性淋巴细胞白血病P2X的表达水平可能有预后意义。本文介绍P2X的结构，功能及其与血细胞关系的研究进展。     

P2X受体在白血病细胞系中的表达

P2受体是嘌呤受体的一个亚型，包括P2X、P2Y两类。核苷酸类物质是新近阐明的一类细胞间通讯的载体分子，可以与细胞表面的P2X受体结合，调控细胞的功能。以往P2X受体的研究多集中在神经、肌肉组织中的表达和作用。P2X家族多个受体在白血病细胞中的表达及意义未见报道，因此阐明P2X受体在白血病细胞系的表达情况，有助于进一步阐明核苷酸类物质介导的信号传递在白血病细胞中的作用。     

P2X3受体在疼痛机制中的作用

ATP是广泛存在于周围和中枢神经系统的神经递质.自损伤细胞或炎症组织释放至细胞外的ATP可激活初级传入神经元上的P2X和P2Y受体,引起疼痛.P2X受体中的P2X3亚单位高度选择性表达于感觉神经元,应用P2X3受体反义寡核苷酸、RNA干扰、基因敲除技术和选择性拮抗剂等研究表明,ATP和P2X3受体在多种疼痛的产生和维持中起重要作用.PGE2、NGF、SP和谷氨酸等可增强P2X3受体激动剂激发的内向电流,对P2X3受体的功能起急性上调作用.但是在一些慢性疼痛模型中,P2X3受体表达上调和活性增加的机制并不十分清楚.     

P2X家族受体在急性T淋巴细胞白血病小鼠腹腔巨噬细胞中的表达

本研究旨在探讨Notch1诱导的小鼠急性T淋巴细胞白血病模型中,腹腔巨噬细胞P2x家族受体的表达变化规律及其与巨噬细胞活化状态的相关性。建立小鼠急性T淋巴细胞白血病模型后,根据F4／80和CD206两个表面标记,用流式细胞术分别分选腹腔巨噬细胞以及CD206＋的M2样和CD206-的M1样腹腔巨噬细胞;用实时定量PCR法研究各亚群细胞中P2X家族受体的表达变化规律。结果表明：腹腔巨噬细胞、M2样和M1样腹腔巨噬细胞均表达除P2X5受体外的其他P2X家族受体,且表达强度中等。各受体的表达随白血病发展变化而有所不同,其中腹腔巨噬细胞中P2X1和P2X7受体的表达逐渐提高,P2X2和P2X3受体表达在白血病晚期显著降低,P2X4受体表达仅在中期有所降低,P2X6受体表达无显著变化。在白血病发展中期M2样和M1样腹腔巨噬细胞间P2X家族受体表达亦存在差异,其中M2样巨噬细胞P2X1受体的表达水平显著低于Mt样巨噬细胞,而M2样巨噬细胞P2X7受体表达水平显著高于M1样巨噬细胞,提示P2x家族受体表达与腹腔巨噬细胞活化状态相关。结论：白血病小鼠腹腔巨噬细胞P2x家族受体表达与白血病进程和巨噬细胞活化状态相关。本研究为深入探究巨噬细胞在白血病发展中的作用机制奠定基础。     

乙醇和锌离子对爪蟾卵母细胞表达的5 '-三磷酸腺苷门控P2X3受体的影响

目的 探讨乙醇和锌离子(Zn2+)对爪蟾卵母细胞表达的重组P2X3受体的影响.方法 使用双极电压钳技术检测乙醇和Zn2+对爪蟾卵母细胞表达的P2X3受体介导的5'-三磷酸腺苷(ATP)门控电流的影响.实验共分3组,第1组研究不同浓度乙醇对爪蟾卵母细胞表达的P2X3受体介导的ATP电流的影响,存在或不存在乙醇的情况下,P2X3受体的ATP量-效曲线;第2组研究不同浓度Zn2对爪蟾卵母细胞表达的P2X3受体介导的ATP电流的影响,存在或不存在Zn2+的情况下,P2X3受体的ATP量-效曲线;第3组研究乙醇和Zn2+共同作用于爪蟾卵母细胞表达的ATP门控P2X3受体的影响.结果 乙醇(5～ 200 mmoL/L)可逆性地增强了爪蟾卵母细胞中表达的P2X3受体的ATP门控功能,乙醇以变构的方式增强ATP效应,乙醇不会改变Hill系数或ATP最大效应(Emax).Zn2+(1 ～300 μmol/L)可逆性地增强了爪蟾卵母细胞中表达的P2X3受体的ATP门控功能,乙醇和Zn2+联合应用导致协同作用.乙醇增强了Zn2+对P2X3受体介导的ATP门控电流的最大效应,这表明乙醇和Zn2+作用于不同的位点.结论 乙醇和Zn2+可能作用于P2X3受体上的不同位点,但乙醇在P2X受体上起作用的机制和位点尚未明确,后续研究可以使用嵌合方法和定点突变来识别和分析P2X受体中乙醇潜在的作用位点.     

P2X7受体在癫痫相关研究中的应用

作为ATP门控离子通道之一,P2X7受体以其独特的生理结构在癫痫发病机制中颇受关注.在具体的动物模型可见该受体表达的变化,其机制有P2X7受体在炎症因子产生中的重要作用、与对谷氨酸递质的释放及再摄取的调节有关.     

P2X4受体在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达及意义

目的:观察P2X4受体(P2X4 receptor,P2X4R)在慢性偏头痛(chronic migraine,CM)大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在CM中的作用。方法:SD雄性大鼠随机分为5组,对照组(n=12)、模型组(n=12)、模型+溶剂组(n=6)、模型+TNP-ATP30 nmol组(n=6)、模型+TNP-ATP 60 nmol组(n=6)。硬脑膜反复滴注炎性汤(inflammatory soup,IS)建立CM模型。von Frey test检测眶周及后足机械痛阈值,Western blot检测P2X4R及神经元激活标志蛋白c-Fos的表达,免疫荧光检测P2X4R定位情况。结果:荧光染色显示P2X4R主要表达于TNC小胶质细胞。与对照组相比,模型组大鼠眶周及后足痛阈值显著降低(P<0.01),P2X4R及c-Fos表达量显著上调(P<0.05)。给予P2X4R抑制剂TNP-ATP后,大鼠眶周及后足痛阈值显著升高(P<0.05),c-Fos表达量显著降低(P<0.05)。结论:TNC小胶质细胞P2X4R表达上调,可能通过影响神经元的激活从而参与CM发病过程。     

P2X3受体在神经源性膀胱大鼠背根神经节及逼尿肌中的表达

目的探讨P2X3受体在不同平面脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠L6～S1背根神经节（DRG）和膀胱逼尿肌中的表达变化及临床意义。 方法共选取健康雌性SD大鼠80只，将其随机分为骶上脊髓（胸腰段）损伤组、骶髓损伤组及对照组。采用脊髓横断法制备大鼠不同平面脊髓损伤后神经源性膀胱模型，于模型制作20 d后采用Western blotting技术检测各组大鼠背根神经节和膀胱逼尿肌中P2X3受体表达情况，并进行组间比较。 结果骶上脊髓损伤组大鼠背根神经节、膀胱逼尿肌中P2X3受体表达水平较对照组、骶髓损伤组明显增高（P<0.01）；骶髓损伤组背根神经节、膀胱逼尿肌中P2X3受体表达水平较对照组明显降低（P<0.05）。 结论结合本课题前期研究的尿流动力学检查结果，推测P2X3受体表达水平与膀胱尿道功能障碍程度密切相关，有望通过影响P2X3受体表达水平为临床治疗脊髓损伤后神经源性膀胱提供新途径。     

P2X7受体在疼痛调制中作用

嘌呤信号在疼痛信息的调制中有重要作用。P2X7受体是ATP门控离子通道家族中的一个亚型,表达于多种组织,受多种因素的调控并具有独特的结构和功能。病理性疼痛时,外周和中枢神经系统P2X7受体表达上调,功能增强;通过受体特异性拮抗剂或基因干预技术调节P2X7受体的表达和功能可以对疼痛信息进行调制。阐明P2X7受体在病理性疼痛发生、维持中的作用有利于加深对疼痛调制机制的认识,同时P2X7受体也是治疗病理性疼痛潜在的新靶点。本文对近年P2X7受体在病理性疼痛中的作用及其相关机制的研究做一综述。     

法尼醇X受体在糖尿病肾病肾组织中的表达及意义

目的探讨法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾组织中的表达及其与巨噬细胞浸润、肾损伤之间的关系。方法免疫组织化学染色观察正常肾组织(正常组,n=5)和DN肾组织(DN组,n=15)中FXR、CD68阳性细胞表达。结果 FXR主要表达在肾小球内皮细胞、系膜细胞和肾小管上皮细胞。DN肾组织FXR阳性表达积分较正常肾组织升高(P<0.01),且与CD68阳性细胞数以及血清低密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯水平呈负相关(r分别为-0.742、-0.654、-0.632,P均<0.01),与肾小球系膜区扩张指数和肾小管-间质病变也呈负相关(r分别为-0.587、-0.636,P均<0.01),与24小时尿蛋白定量无相关性。结论 DN肾组织FXR阳性表达升高,可能参与DN炎症反应的发生,其具体表达机制和病理生理意义需要进一步研究。     

趋化因子配体5及其受体趋化因子受体2在急性白血病髓外浸润中的表达和意义

目的观察趋化因子配体5(CXCL5)及其受体趋化因子受体2(CXCR2)在急性白血病(AL)髓外浸润(EI)中的表达,并探讨其临床意义。方法 60例初治成人AL患者,急性髓系白血病(AML)41例,急性淋巴系白血病(ALL)19例,骨穿取骨髓,ELISA法测定骨髓液中CXCL5含量,流式细胞术检测骨髓细胞CXCR2的相对荧光强度,统计分析其表达水平。结果 AL组、对照组的骨髓液CXCL5浓度[M(Q)]分别为3 173.93(1 392.22)pg/m L、349.88(178.67)pg/m L,差异有统计学意义(U=0.000,P0.05),CXCR2相对荧光强度分别为71.03(32.94)、19.68(8.90),差异有统计学意义(U=0.000,P0.05);伴有EI与无EI的骨髓CXCL5表达水平分别为3 687.81(885.05)pg/m L、2 305.32(781.85)pg/m L,差异有统计学意义(U=29,P0.05),骨髓细胞CXCR2相对荧光强度分别为80.72(21.11)、50.37(14.38),差异有统计学意义(U=16,P0.05);但AML组与ALL组的患者骨髓CXCL5/CXCR2表达差异无统计学意义(P0.05)。有效的化疗可以使AL患者获得完全缓解,使骨髓CXCL5、CXCR2表达水平明显下调;但在表达水平与完全缓解率方面,AML组与ALL组差异无统计学意义(P0.05)。AL患者骨髓液CXCL5浓度和骨髓细胞CXCR2的表达呈正相关(r=0.809,P=0.000);同时,骨髓CXCL5、CXCR2的表达与骨髓幼稚细胞百分比、外周血白细胞计数均呈正相关(P均0.05);与年龄、外周血小板计数均无明显相关性(P均0.05)。结论 AL患者的骨髓CXCL5、CXCR2表达均上调,在伴有EI的患者尤为明显,CXCL5、CXCR2轴的高表达可用于预测急性白血病的EI。     

针刺足三里穴对端粒酶基因敲除小鼠海马P2X受体及其表达的影响

目的观察针刺足三里穴对端粒酶基因敲除小鼠海马P2X受体表达的影响。 方法采用随机数字表法将端粒酶基因敲除的早衰模型纯合子小鼠分为空白组、手针组及电针组,每组各6只小鼠。3组小鼠均正常饲养,期间空白组不给予任何特殊处理,手针组及电针组小鼠分别给予手针或电针刺激足三里穴。于治疗7d后观察各组小鼠海马区P2X受体及cAMP应答元件结合蛋白(CREB)表达间差异。 结果①手针组及电针组海马区P2X4相对表达量［分别为（0.67±0.05）和（0.70±0.13）］均较空白组（0.79±0.03）有下降趋势,但各组间差异均无统计学意义（P>0.05）。②电针组及手针组海马区P2X7表达［分别为（1.00±0.04）和（1.07±0.02）］均较空白组（1.21±0.05）明显下降（P<0.05）,但电针组与手针组海马区P2X7表达组间差异无统计学意义（P>0.05）。③电针组小鼠海马区CREB表达（0.67±0.07）较空白组（0.82±0.05）及手针组（0.86±0.03）明显下降（P<0.05）。 结论电针可抑制端粒酶基因敲除小鼠海马区P2X4受体及CREB表达,其相关信号通路在针刺治疗神经退行性疾病的作用机制中可能发挥重要作用。     

P2X受体与膀胱功能障碍相关疾病的研究进展

P2X受体介导的信号转导在调控正常及病理状态下的膀胱均起到重要的作用,其具体的内在机制还未完全阐明。在膀胱收缩及充盈的过程中,P2X 受体充当关键角色,因此对该受体的研究已成为当前的热点,现将P2X受体与膀胱功能障碍相关疾病的研究进展予以综述。     

P2X7受体表达与结直肠癌术前辅助性化疗效果的关系

目的 探讨结直肠癌组织中P2X7受体表达与术前新辅助化疗效果的关系.方法 选取河北中石油中心医院2019-10-2020-10收集的120例无法手术切除需接受术前新辅助化疗的结直肠癌患者作为研究对象,患者首先接受结肠纤维镜检查并获取相应标本,进行免疫组化染色、Western-blot法检测,并根据术前新辅助化疗[采用亚...     

P2X4受体在大鼠胫骨癌痛中的变化及可能机制

目的:观察骨癌痛大鼠脊髓P2X4受体表达的变化,并探讨其可能机制.方法:72只SD大鼠随机分为两部分(6组),第一部分:空白对照组(K组,n=14)、假手术组(J组,n=14)、模型组(M组,n=20).K组不给予任何处理,J组和M组分别在左胫骨上端注射PBS液和Walker256乳腺癌细胞5 μl(2×107/ml).各组分别于术前1天,术后3、6、9、12、15、18天时随机各取8只大鼠测定左后肢机械缩足反射阈值(MWT).K组和J组于术后12天,M组于术后6、12、18天时各处死6只大鼠,取L4～6脊髓组织,用免疫组化法检测P2X4受体表达;第二部分:溶媒对照组、TNP-ATP组、PPADS组,每组8只.各组从骨癌痛造模术后第7天起,连续5天分别鞘内给予双蒸水(ddH2O)、PPADS(100nmol)、TNP-ATP(30nmol)各10μl,并于建模后第12天取L4～6脊髓,用免疫组织化学方法检测脊髓P2X4受体及p-ERK的表达.结果:与K组和J组比较,M组大鼠术后第6～18天,左后肢MWT进行性下降,P2X4受体(P2X4R)阳性细胞数明显增加(P<0.01).连续5天鞘内注射TNP-ATP可抑制由胫骨癌痛引起的脊髓P2X4受体及p-ERK表达增加(P<0.05),而PPADS组和ddH2O溶剂组却没有此种效应(P>0.05).结论:脊髓P2X4受体表达上调可能参与了大鼠胫骨癌痛的产生和维持,其机制可能与激活下游ERK通路有关.     

中脑导水管周围灰质P2X7受体在大鼠电针耐受中的作用

目的:观察电针耐受大鼠中脑导水管周围灰质外侧区(lateral periaqueductal gray,l PAG)中P2X7受体表达变化并探讨其拮抗剂(A-740003)在电针耐受中的作用。方法:SD大鼠分为对照组、假电针组、电针耐受组、正常+生理盐水组、正常+A-740003组、电针耐受+生理盐水组、电针耐受+A-740003(1、10、100 nmol)组。电针耐受组大鼠给予连续电针刺激6天,首先检测大鼠机械痛阈变化百分数,并应用免疫组化法检测电针后第6天大鼠l PAG中P2X7受体蛋白表达情况;在电针耐受大鼠l PAG中注射不同剂量的A-740003后再次电针刺激,观察A-740003对电针耐受的影响。结果:多次电针刺激后,大鼠机械痛阈变化百分数逐渐减少伴l PAG中P2X7受体的表达增多;A-740003可翻转电针耐受的形成。结论:l PAG中P2X7受体活化促进大鼠电针耐受形成。     

P2z／P2x7受体检测的研究进展

P2z/P2x7嘌呤能受体是P2受体的一个亚型，存在于多种细胞膜上，有其特异的激动剂和拮抗剂。P2z/P2x7受体功能独特，如参与炎症和免疫反应，介导细胞死亡等。检测P2z/P2x7受体的方法很多，包括荧光染料法，分子生物学方法及免疫学方法等。其分析方法与原理各不相同，特点各异。本文将对检测P2z/P2x7受体的方法及其研究进展予以综述。     

大鼠背根神经节P2Y1与P2Y4嘌呤受体的表达比较

目的:探讨P2Y1和P2Y4亚基在大鼠背根神经节(D R G)神经元的表达。方法:应用组织水平和多细胞水平R T-PC R方法从不同角度检测了P2Y1和P2Y4受体的表达情况。结果:两种R T-PC R扩增结果均显示:P2Y1亚型有特异性表达阳性条带出现,而P2Y4亚型则无特异性表达条带出现。结论:大鼠D R G的大、中、小细胞中均有P2Y1亚型表达,而无P2Y4亚型的表达。     

P2z/P2x7受体检测的研究进展

P2z/P2x7嘌呤能受体是P2受体的一个亚型 ,存在于多种细胞膜上 ,有其特异的激动剂和拮抗剂。P2z/P2x7受体功能独特 ,如参与炎症和免疫反应 ,介导细胞死亡等。检测P2z/P2x7受体的方法很多 ,包括荧光染料法、分子生物学方法及免疫学方法等。其分析方法与原理各不相同 ,特点各异。本文将对检测P2z/P2x7受体的方法及其研究进展予以综述。