阿霉素热化疗对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨阿霉素(ADM)加热化疗对人肝癌细胞HHCC及HepG2的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法:以体外培养的人肝癌细胞HHCC和HepG2为研究对象,采用水浴加温法,观察单纯热疗,ADM化疗和热化疗对细胞增殖和凋亡的影响。MTT法确定阿霉素的工作浓度并检测细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:热化疗组细胞的抑制率显著高于单纯热疗、单纯化疗组[HHCC细胞:(65.77±2.54)%vs(23.18±0.81)%、(38.35±2.23)%,P<0.05。HepG2细胞:(74.25±1.53)%vs(1 7.1 2±2.8 6)%、(30.35±5.90)%,P<0.05]。热化疗组细胞凋亡率显著高于单纯热疗组、单纯化疗组[HHCC细胞:(76.1±2.33)%vs(23.83±1.76)%、(45.57±2.81)%,P<0.05。HepG2细胞:(76.9±2.79)%vs(19.7±7.63)%、(37.43±1.88)%,P<0.05]。结论:加热能增强ADM对HHCC及HepG2的增殖抑制和诱导凋亡作用。     

番茄红素对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的 研究番茄红素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 取对数生长期人肝癌HepG2细胞,分别给予不同浓度番茄红素(5、10、20 μg/ml)和顺铂(40 μg/ml)进行干预,48 h后通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率,通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用Western blotting技术检测Bax、Bcl-2、激活型Caspase-3蛋白表达.结果 干预48 h后,空白对照组人肝癌HepG2细胞增殖抑制率为0,番茄红素(5、10、20 μg/ml)组和顺铂组分别为(21.3±4.2)％、(40.5±7.6)％、(63.8±9.1)％和(37.8±5.9)％,差异有统计学意义(F=37.905,P=0.000);它们分别与空白对照组比较,差异均具有统计学意义(t=208.124,P=0.000;t=394.637,P=0.000;t=628.592,P=0.000;t =257.168,P=0.000).番茄红素(10、20μg/ml)组细胞周期G0-G1期比例分别为(54.0±2.9)％、(67.3±3.6)％,与空白对照组(37.9±1.5)％比较,差异有统计学意义(t =4.508,P=0.024;t=10.673,P=0.006);番茄红素(10、20 μg/ml)组G2-M期比例分别为(8.5±0.6)％、(4.7±0.5)％,与空白对照组比较(18.4±0.8)％,差异有统计学意义(t=9.975,P=0.008;t=13.864,P=0.003).番茄红素组(5、10、20 μg/ml)和顺铂组细胞凋亡指数分别为(19.5±4.8)％、(43.0±9.2)％、(67.6±10.1)％和(36.9±6.8)％,与空白对照组[(3.6±1.7)％]比较均显著升高,差异有统计学意义(t=18.617,P=0.001;t=34.295,P=0.000;t=51.437,P=0.000;t =29.804,P=0.000).番茄红素(10、20 μg/ml)组和顺铂组Bel-2、Bax表达及Bax/Bcl-2比值分别为0.42±0.09、0.43 ±0.14、1.02±0.39,0.27±0.08、0.76 ±0.19、2.81 ±0.85和0.34 ±0.11、0.31 ±0.09、0.91 ±0.40,与空白对照组(0.59 ±0.17、0.18 ±0.06、0.31 ±0.12)比较,Bcl-2表达显著下调,差异具有统计学意义(t=4.327,P=0.023;t=11.064,P=0.006;t =5.182,P=0.018),Bax表达显著上调,差异具有统计学意义(t=9.837,P =0.008;t=17.349,P=0.001;t=10.165,P=0.007),Bax/Bcl-2比值显著升高,差异均具有统计学意义(t=11.521,P=0.006;t=18.194,P=0.001;t=9.537,P=0.008).番茄红素(5、10、20 μg/ml)组和顺铂组激活型Caspase-3蛋白表达分别为0.25 ±0.07、0.34 ±0.11、0.46 ±0.18和0.17 ±0.05,与空白对照组(0.08±0.03)比较,差异具有统计学意义(t=8.307,P=0.009;t=13.067,P=0.006;t=16.218,P=0.003;t=5.202,P=0.019).结论 番茄红素能够通过抑制细胞增殖并促进其凋亡而对人肝癌HepG2细胞生长起到一定的抑制作用,其机制可能与番茄红素能够影响细胞周期进程并调节凋亡相关基因蛋白表达有关.     

核仁素表达下调对阿霉素所致乳腺癌细胞增殖抑制和凋亡的影响

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,我国的乳腺癌发病率呈急剧上升的趋势.核仁素是真核生物核仁中最主要的一种磷酸蛋白质,具有多种生物学功能,包括调控核糖体的合成与成熟,调控细胞的增殖、生长、胚胎发生、胞质分裂、染色体复制和核仁发生等过程.我们探讨了下调核仁素表达对乳腺癌细胞增殖抑制和凋亡的影响,现将结果报告如下.     

沉默SEPT9基因对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨SEPT9基因与肝癌的关系,进一步揭示SEPT9基因在肝癌发生发展过程中的作用.方法 将构建的针对SEPT9基因的shRNA表达载体通过脂质体LipofectamineTM 2000转染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜下观察细胞的转染效率,RT-PCR、Western blot法分别检测SEPT9 mRNA和蛋白质的表达抑制情况,CCK-8检测细胞的生长抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 荧光显微镜观察细胞的转染效率达到70％以上;SEPT9 mRNA及蛋白表达抑制率均受到明显抑制.CCK-8法检测结果显示,实验组HepG2细胞的生长受到明显抑制;流式细胞术检测结果显示实验组HepG2细胞凋亡明显(P＜0.05).结论 抑制SEPT9基因的表达可有效抑制HepG2细胞的增殖,并对细胞凋亡有明显的促进作用.     

阿霉素热化疗对肝癌细胞及其耐药株凋亡的影响与机制

目的探讨阿霉素(ADM)加热化疗对人肝癌细胞BEL7402(以下简称BEL7402细胞)及其耐药株BEL7402/ADM细胞(以下简称BEL7402/ADM细胞)的凋亡诱导作用。方法以体外培养的人肝癌细胞BEL7402和BEL7402/ADM细胞为研究对象,采用水浴加温法,观察单纯热疗、单纯ADM化疗与热化疗对细胞凋亡的影响。用AnnexinV-FITC和PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡;采用流式细胞技术检测加热对BEL7402细胞和BEL7402/ADM细胞胞内ADM浓度和细胞膜上P糖蛋白(P-gp),多药耐药性相关蛋白(MRP)的影响。结果热化疗组细胞凋亡率(%)显著高于单纯热疗、单纯ADM化疗组的同种细胞[BEL7402细胞:(79.21±0.54)vs(16.67±1.03),(48.91±0.05),P均<0.05;BEL7402/ADM细胞:(75.42±0.16)vs(14.79±0.61),(23.78±0.04),P均<0.05]。热化疗组细胞内ADM浓度显著高于单纯化疗组的同种细胞(P<0.05)。热化疗组和单纯热疗组细胞膜上P-gp、MRP的表达率显著低于单纯化疗组的同种细胞(P<0.05)。结论加热可能通过抑制细胞膜上P-gp、MRP的表达,从而提高BEL7402细胞及BEL7402/ADM细胞对ADM诱导凋亡作用的敏感性。     

热疗联合阿霉素和TRAIL对肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的:观察热疗（hyperthermia,HT）联合亚浓度阿霉素(adriamycin,ADM)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL）对肝癌HepG2细胞凋亡的影响,以确定联合方案是否具有协同作用。方法:采用CCK8法检测细胞的活性;Hoechst 33258染色实验检测细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡;Western blot实验检测细胞内蛋白的表达水平。结果:HT联合ADM和TRAIL可明显抑制肝癌HepG2细胞的活性（P＜0.05）,促进细胞染色质浓缩、核碎裂。流式细胞检测结果表明,HT联合ADM和TRAIL可促进细胞的早期凋亡（P＜0.001）和晚期凋亡（P＜0.01）。Western blot实验进一步证明,HT联合ADM和TRAIL通过上调DR4、DR5、caspase-3和caspase-8蛋白的表达来促进细胞的凋亡（P＜0.05）。结论:HT联合ADM和TRAIL具有协同作用,可明显增加细胞凋亡的敏感性,促进肝癌细胞的凋亡。     

间歇和连续热灌注对兔 VX-2肿瘤内阿霉素浓度的影响

背景与目的:已证实阿霉素热化疗对体外兔 VX-2细胞的抑制作用比常温阿霉素的作用强,而热灌注对机体的生命体征有一定影响.本研究在兔 VX-2移 植瘤模型建立基础上,比较间歇性热灌注与连续性热灌注对兔呼吸、心率、体温及 VX-2肿瘤内阿霉素浓度的影响,验证间歇性热灌注的有效性和安全性,以寻找更安全有效的灌注方式.方法:在 30只新西兰大白兔后腿上建立 VX-2肿瘤模型,并随机分为常温灌注组、 60℃连续灌注组和 60℃间歇灌注组(每组 10只).经股动脉插管、 DSA证实为肿瘤供血动脉后,分别给予常温 100 ml盐水加阿霉素 (ADM)灌注、 60℃热盐水 100 ml加阿霉素连续灌注、 60℃热盐水 100 ml加阿霉素间歇性灌注.灌注过程中,测量 60℃热灌注组与 60℃间歇灌注组肿瘤组织内 43℃～ 45℃持续时间;灌注后即时检测各组兔呼吸(次 /分)、心率(次 /分)、体温(℃)及肿瘤组织内阿霉素浓度.结果:常温灌注组阿霉素浓度为( 7.115± 2.180)μ g/ml, 60℃连续灌注组为( 17.213± 1.657)μ g/ml, 60℃间歇性灌注组为( 16.545± 3.426)μ g/ml;60℃间歇灌注组阿霉素浓度与 60℃连续灌注组无显著性差异( P >0.05), 60℃连续组、间歇组阿霉素浓度与常温灌注组均有显著性差异( P< 0.05). 60℃间歇性灌注组 43℃～ 45℃持续时间为( 24.31± 2.45) min, 60℃连续灌注组为( 22.53± 1.44) min,两组之间无显著性差异( P >0.05).连续灌注组与常温灌注组兔的呼吸、心率、体温变化有显著性差异( P< 0.05),而间歇灌注组与常温灌注组兔的呼吸、心率、体温变化无显著性差异( P >0.05).结论:常温灌注组与连续灌注组的药物浓度无显著性差异;与连续性热灌注相比,经动脉间歇性热灌注化疗方法更安全.     

番茄红素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究番茄红素(Lycopene,LP)对人肝癌HepG2细胞生长的影响并初探其机制。方法取对数生长期HepG2细胞设空白对照组、LP(5 μg/mL)组、LP(10 μg/mL)组、LP(20 μg/mL)组和顺铂(40 μg/mL)组,每组设10个复孔;各组分别给药干预48 h后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡状况,RT-PCR法检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达,Western blot法检测Caspase-3蛋白表达。结果 与空白对照组比较,经LP(10 μg/mL、20 μg/mL)或顺铂40 μg/mL干预48 h能够显著提高HepG2细胞增殖抑制率,延长细胞周期中G₀/G₁期而缩短G₂/M期,提高细胞凋亡率,上调促凋亡Bax mRNA表达并下调抑凋亡Bcl-2 mRNA表达,提高Bax/Bcl-2比值,上调Caspase-3蛋白表达,LP上述作用具有一定的剂量依赖性。结论 LP具有抑制人肝癌HepG2细胞增殖并促进其凋亡的作用,其机制可能与LP干预细胞周期分布和调节凋亡相关基因蛋白表达有关。     

STAT5A基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡影响的观察

目的:研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,为其作为肝癌基因治疗的新分子靶点提供实验依据,并对RNAi实验方法的优化进行探讨.方法:构建2个针对STAT5A基因不同位点的RNA干扰(RNAi)真核表达载体,为减少脱靶效应和细胞毒性,采用两载体共转染的方法转染人肝癌细胞HepG2,分别采用半定量RT-PCR、蛋白质印迹法检测转染前后细胞中STAT5A mRNA和蛋白表达的变化;采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:酶切及测序结果显示,STAT5A基因两位点的shRNA表达载体均构建成功;两载体共转染HepG2细胞48 h后,与对照组相比,RT-PCR结果显示实验组细胞中STAT5A mRNA的抑制率约为66％,P＜0.05;蛋白质印迹法检测结果显示,STAT5A蛋白的抑制率约为58％,P＜0.05;同时MTT法显示实验组较对照组在转染后24～96 h内细胞生长速度减慢、增殖抑制明显(P＜0.05),流式细胞仪检测实验组细胞凋亡率为(34.68±0.78)％,明显高于阴性对照组(5.12±1.09)％和空白组(4.75±1.65)％,P＜0.05.结论:成功构建了针对STAT5A基因的RNA干扰真核表达载体,两载体共转染可有效抑制STAT5A基因的表达,并能抑制细胞生长、诱导细胞凋亡.     

普鲁卡因对人肝癌HepG2细胞增殖影响的实验研究

目的：探讨普鲁卡因（procaine）对体外人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法：应用不同浓度（0-10）mmol/L普鲁卡因处理HepG2细胞,倒置显微镜观察细胞形态学改变、四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞存活率、流式细胞术（FCM）观察细胞周期变化情况。结果：倒置显微镜观察普鲁卡因处理后的HepG2细胞呈现缩小、空泡、脱壁等形态学特征。MTT结果分析表明普鲁卡因能显著抑制HepG2细胞增殖,其抑制率呈药物浓度及时间依赖性。FCM结果显示普鲁卡因可以使HepG2细胞的G0/G1延长,S期缩短。结论：盐酸普鲁卡因能够使HepG2细胞的生长阻滞在G0/G1期,从而显著抑制HepG2细胞的增殖,并且具有剂量、时间依赖效应。     

干扰NBS1表达抑制肝癌HepG2细胞增殖并促进凋亡

目的:探讨干扰NBS1基因表达对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响。方法:应用Lipofectamine 2000将NBS1特异性小干扰RNA（siNBS1）转染至肝癌细胞HepG2中,以空载脂质体作为对照组。采用RT-PCR及Western blot法检测NBS1基因表达情况,采用CCK-8法检测转染质粒后siNBS1对HepG2细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术检测siNBS1对HepG2细胞凋亡的影响。结果:不同浓度siNBS1（10 nmol/L、20 nmol/L、50 nmol/L）均能抑制HepG2细胞中的NBS1基因在mRNA水平上的表达（P＜0.05或P＜0.01）。最高浓度siNBS1（50 nmol/L）能抑制NSB1蛋白产物的表达水平（P＜0.05）。CCK-8实验显示,转染不同浓度siNBS1的HepG2细胞与对照组相比,细胞活力明显减弱（P＜0.05或P＜0.01）,转染48 h后增殖率下降最为显著;流式细胞检测结果显示,细胞凋亡的比率在转染后明显升高（P＜0.05或P＜0.01）,并随浓度增加而更为显著。结论:干扰NBS1基因的表达可以明显抑制HepG2细胞的增殖,并促进癌细胞凋亡。     

STAT5A基因有效siRNA序列的筛选及其对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响北大核心CSCD

目的筛选针对STAT5A基因有效的siRNA,研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨STAT5A基因在肝癌发生发展中的作用。方法设计并化学合成针对STAT5A基因三个靶点的siRNA,采用脂质体法转染人肝癌细胞HepG2,分别用半定量RT-PCR、Western blot技术检测转染后HepG2细胞STAT5A mRNA和蛋白表达的变化,从中筛选出一段干扰效率最显著的siRNA;用该siRNA转染HepG2细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果三段STAT5A基因的siRNA均对HepG2细胞中STAT5A mRNA和蛋白表达产生了不同程度的抑制作用,其中以siRNA-3697的干扰效率最高,STAT5A mRNA和蛋白的表达抑制率分别为72.03%和66.27%(P<0.05);转染后1～4 d细胞生长速度减慢、增殖显著抑制(P<0.05);转染后48 h细胞凋亡率为37.33%(P<0.05)。结论成功筛选出针对STAT5A基因有效的siRNA;该siRNA可特异地阻断HepG2细胞STAT5A基因的表达,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡。     

锰离子对肝癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨锰离子(Mn²⁺)在肝癌细胞增殖及凋亡中的作用。方法采用不同浓度(1、4、16、64、256、1 024μmol/L)锰离子溶液处理肝癌Huh7、HepG2.2.15细胞,以未经锰离子溶液处理的相应细胞为对照组。采用CCK-8实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果CCK-8实验结果显示,与对照组相比,Huh7细胞在除1μmol/L浓度外的其余浓度锰离子溶液处理下细胞增殖活力均降低(均P<0.05),HepG2.2.15细胞在除1μmol/L和4μmol/L浓度外的其余浓度锰离子溶液处理下细胞增殖活力均降低(均P<0.0001),且随着锰离子浓度增大,对两组细胞增殖活力的抑制作用越显著;平板克隆形成实验结果显示,Huh7细胞在除1μmol/L和4μmol/L浓度外的其余浓度锰离子溶液处理下细胞克隆形成数均降低(均P<0.01),HepG2.2.15细胞在除1μmol/L浓度外的其余浓度锰离子溶液处理下细胞克隆形成数均降低(均P<0.0001),且随着锰离子浓度的增大,细胞克隆形成数量降低越明显;流式细...     

转录因子XBP1S对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨人剪接型X盒结合蛋白1(X-box binding protein1spliced,XBP1S)对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法:应用衣霉素(tunicamycin,Tm)和毒胡萝卜素(thapsigargin,Tg)建立HepG2细胞的内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)模型。将XBP1S真核表达载体pcDNA3.1(-)-XBP1S和靶向XBP1S的RNA干扰质粒pSUPER-XBP1S转染HepG2细胞,MTT法检测细胞的增殖能力,荧光显微镜下观察细胞的形态学变化,FCM法检测细胞凋亡率,Western印迹法检测caspase12的表达。结果:转染pSUPER-XBP1S可有效抑制细胞增殖,而转染pcDNA3.1(-)-XBP1S可促进细胞增殖。荧光显微镜下可见Tm处理组细胞出现细胞凋亡的形态学改变,进一步下调XBP1S的表达可使这一改变增强。对照组、Tm组、Tm+pSUPER-XBP1S转染组和Tm+pcDNA3.1(-)-XBP1S转染组细胞的凋亡率分别为5.21%、41.51%、52.15%和35.87%,差异有统计学意义(P<0.05)。HepG2细胞中caspase12的表达,Tm组高于对照组,Tm+pSUPER-XBP1S转染组高于Tm组,Tm+pcDNA3.1(-)-XBP1S转染组低于Tm组。结论:XBP1S可以促进肝癌HepG2细胞增殖,抑制或促进XBP1S表达可调节ERS介导的细胞凋亡。     

丹皮酚联合阿霉素对HepG2细胞株的增殖抑制作用

目的 探讨丹皮酚联合阿霉素对HepG2细胞株的增殖抑制作用。方法 采用MTT法测定丹皮酚、阿霉素及丹皮酚联合阿霉素体外对HepG2细胞的增殖抑制率;采用两药相互作用指数评价两药相互作用性质;流式细胞仪检测细胞凋亡;原位细胞凋亡检测法观察细胞凋亡形态学变化;Western blot分析Bcl 2、Bax变化。结果 不同浓度的丹皮酚、阿霉素及联合用药对HepG2细胞株均有增殖抑制作用,呈剂量依赖性。丹皮酚在31.25mg/L分别与阿霉素在0.16、0.31mg/L联合应用时协同作用最为显著（CDI<0.7）。流式细胞仪检测联合用药组凋亡率(37%)明显高于对照组和单独用药组。TUNEL染色可见典型的凋亡形态学特征。Western blot分析表明单独用药和联合用药组Bcl 2表达降低,Bax表达上调,Bcl 2/Bax比值降低。结论 一定浓度的丹皮酚能增强阿霉素在体外对HepG2细胞株的增殖抑制作用,其作用机制为通过降低Bcl 2表达,上调Bax表达,使得Bcl 2/Bax比值降低诱导凋亡实现的。     

槲皮素、姜黄素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡作用的比较

目的:探讨槲皮素和姜黄素对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的作用。方法:不同质量浓度的槲皮素(0、10、20、50、100μmol/L)和姜黄素(0、2、5、10、20μmol/L)分别作用HepG2细胞24、48、72 h,以As2O3(0、2、5、10、20μmol/L)为阳性对照,MTT法检测HepG2细胞的增殖,流式细胞术检测HepG2细胞的凋亡。结果:槲皮素、姜黄素及As2O3作用后,HepG2细胞形态发生变化、生长速率变慢,HepG2增殖率随着时间和药物浓度的增加逐渐减低,72 h时3种药物高浓度组HepG2细胞增殖率分别为(31±5.8)%、(51±4.6)%、(54±5.8)%。槲皮素和姜黄素均有明显的促凋亡作用,并呈时间和浓度依赖性;高浓度(100μmol/L)槲皮素作用最强,相同浓度下的姜黄素与As2O3作用相当。结论:槲皮素和姜黄素能明显抑制HepG2细胞增殖,促进其凋亡,并且这种作用强于As2O3。     

沉默Gli2 基因对肝癌SMMC-7721 细胞增殖和凋亡的影响

目的: 探讨沉默胶质瘤相关癌基因同源蛋白2 基因（glioma associated oncogene homolog 2,Gli2)对肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:以重组shRNA-Gli2 慢病毒感染SMMC-7721 细胞,筛选沉默效果最佳干扰序列。以携最佳干扰序列重组慢病毒感染SMMC-7721 细胞为干扰组,shRNA-NC慢病毒感染SMMC-7721 细胞为对照组,不作处理SMMC-7721 细胞为空白组。采用CCK-8 法与集落形成实验检测各组细胞的增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率;用qPCR 和Western blotting 法检测各组细胞Gli2、cyclinD1、Bax 和Bcl-2 mRNA及其蛋白质的表达。结果:重组慢病毒感染率约为90%,重组shRNA-Gli2-1 慢病毒沉默效果最佳;干扰组SMMC-7721 细胞Gli2 mRNA和蛋白质表达显著低于对照组与空白组（均P<0.05）,而对照组与空白组之间Gli2 mRNA和蛋白质表达差异不显著（P>0.05）。干扰组SMMC-7721 细胞的增殖和细胞集落形成数明显少于对照组和空白组（均P<0.05）;干扰组SMMC-7721 细胞凋亡率显著高于对照组和空白组（均P<0.01）;干扰组SMMC-7721 细胞cyclinD1 及Bax mRNA和蛋白质表达显著低于对照组和空白组,而Bcl-2 mRNA和蛋白质表达则显著高于对照组和空白组（均P<0.05）。结论: 沉默Gli2 基因的表达能够抑制肝癌SMMC-7721 细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡,其机制可能与cyclinD1、Bax的下调和Bcl-2 上调有关。     

阿霉素加热化疗对抗人肝癌耐药细胞多药耐药性的实验研究

 目的　观察比较阿霉素 ( ADM)化疗与 43℃加热化疗对耐药人肝癌细胞模型 - 772 1 /Adm(以下简称 772 1 /Adm细胞 )的敏感性及细胞内药物浓度的影响。方法　以人肝癌细胞模型 -772 1 /Adm为研究对象 ,采用水浴加温法、体外细胞毒试验 ( MTT法 )、流式细胞技术 ,观察阿霉素( ADM)化疗与加热化疗后细胞的存活率及细胞内阿霉素浓度的变化。结果　 ( 1 )阿霉素化疗、加热化疗 30、60 min后 772 1 /Adm细胞存活率分别为 70 .2 %、40 .8%和 60 .2 %、37.4% ;( 2 )流式细胞仪检测显示阿霉素化疗、加热化疗 30 min后细胞内阿霉素浓度分别为 41 .3%、92 .0 %。结论　加热可以显著对抗 772 1 /Adm的耐药性 ,提高其对阿霉素的敏感性 ,这与加热提高了细胞内药物浓度有关。     

氨基葡萄糖对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究氨基葡萄糖对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子机制。方法:CCK-8法检测人肝癌HepG2细胞的增殖情况。流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。Western blot检测ERK及P-ERK蛋白的表达水平。结果:氨基葡萄糖可以抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,且该作用随着药物浓度的增加而逐渐增强。1.0mmol/L氨基葡萄糖作用72h可以使G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低。同时,2.0mmol/L及4.0mmol/L氨基葡萄糖处理72h可以使人肝癌HepG2细胞发生凋亡。另外,随着药物浓度的增加,人肝癌HepG2细胞中ERK蛋白的磷酸化水平逐渐降低。结论:氨基葡萄糖可能是通过降低ERK1/2蛋白的磷酸化水平影响细胞周期,从而抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并诱导其发生凋亡。     

YM155对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨YM155对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:采用CCK-8法检测细胞生长抑制率；应用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化；Western blot法检测细胞中蛋白表达的变化，实时定量RT-PCR检测survivin mRNA表达的变化。结果:YM155对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用呈现剂量和时间依赖性。流式细胞术结果显示，HepG2细胞凋亡率明显升高,呈现剂量依赖性。YM155可引起survivin mRNA及蛋白表达下降，而caspase-3、caspase-9和PARP蛋白表达上升。结论:YM155可以抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并促进其凋亡，其机制可能是通过激活caspase凋亡途径来实现。