HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定冰梅上清丸中儿茶素、表儿茶素、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E和桔梗皂苷D_3

目的建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定冰梅上清丸中的儿茶素、表儿茶素、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E和桔梗皂苷D_3。方法采用Kromasil C18色谱柱;流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液,进行梯度洗脱;流速:0.9 m L/min;柱温:30℃;检测波长分别规定为280 nm(儿茶素、表儿茶素)和210 nm(去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D_3)。结果儿茶素、表儿茶素、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E和桔梗皂苷D_3分别在18.16~363.20μg/m L(r=0.999 9)、14.89~297.80μg/m L(r=0.999 7)、5.35~107.00μg/m L(r=0.999 6)、4.92~98.40μg/m L(r=0.999 4)、4.15~83.00μg/m L(r=0.999 9)范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为98.74%、97.57%、99.37%、97.74%、98.13%,RSD分别为1.21%、0.96%、0.80%、1.10%、1.68%。结论本文建立的方法可作为冰梅上清丸的质量控制方法。     

HPLC法测定病毒合剂中黄芩苷、绿原酸和连翘酯苷A

目的建立HPLC法测定病毒合剂中黄芩苷、绿原酸和连翘酯苷A的方法。方法 Shim-pack VP-ODS色谱柱(150mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.5%磷酸水溶液–乙腈,采用梯度洗脱,检测波长为300 nm,体积流量为1.0 mL/min,进样量为10μL。结果黄芩苷、绿原酸和连翘酯苷A分别在9.84~82μg/mL(r=0.999 8)、2.64~22.0μg/mL(r=0.999 9)和4.32~36.0μg/mL(r=0.999 9)线性关系良好,平均回收率分别为99.94%、101.1%、99.77%,RSD值分别为1.44%、1.68%、1.44%(n=6)。结论本法操作简便、结果准确、重复性好,可用于病毒合剂的质量控制。     

基于HPLC梯度洗脱法同时测定止咳喘颗粒中7种成分的含量

摘要：目的:建立高效液相梯度洗脱法（HPLC-GEM）同时测定止咳喘颗粒中去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、甘草苷、甘草酸、金丝桃苷和槲皮素的含量。方法:色谱柱为Agilent TC-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温:30℃;流动相为乙腈-0.5%冰醋酸溶液,梯度洗脱,体积流量:1.0 ml·min-1;检测波长分别为210 nm（检测去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E和桔梗皂苷D3）、237 nm（检测甘草苷和甘草酸）和360 nm（检测金丝桃苷和槲皮素）。结果:去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、甘草苷、甘草酸、金丝桃苷和槲皮素质量浓度分别在0.74～14.80μg·ml-1（r=0.999 9）、1.16～23.20μg·ml-1（r=0.999 6）、0.53～10.60μg·ml-1（r=0.999 5）、1.39～27.80μg·ml-1（r=0.999 3）、6.47～129.40μg·ml-1（r=0.999 7）、4.18～83.60μg·ml-1（r=0.999 4）、1.06～21.20μg·ml-1（r=0.999 8）范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率分别为97.70%、98.69%、96.98%、99.23%、100.09%、99.47%和98.24%,RSD分别为1.33%、1.20%、1.03%、0.97%、0.69%、0.72%和1.49%（n=9）。结论:该方法操作简便、重复性好,可作为评价止咳喘颗粒的质量控制方法。     

反相高效液相色谱法测定桔梗中3种三萜皂苷类化合物的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定桔梗中去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E和桔梗皂苷D3的含量。方法以Hypersil-ODS(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1,检测波长210 nm,温度为室温。结果去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E和桔梗皂苷D3分别在4.160~83.2、10.75~215.0、4.080~81.6μg.mL-1与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为96.5%、97.0%和97.3%,RSD分别为1.2%、1.0%和1.3%。结论该方法快速稳定且分离度好,为桔梗的质量控制提供可借鉴的分析方法。     

HPLC-一测多评法测定连花清瘟胶囊中绿原酸、甘草苷、木犀草苷、连翘酯苷A、连翘苷和大黄酸

目的 建立高效液相色谱-一测多评法测定连花清瘟胶囊中绿原酸、甘草苷、木犀草苷、连翘酯苷A、连翘苷、大黄酸的方法。方法 使用Inertsil ODS-3色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈–0.4%磷酸水,梯度洗脱;体积流量：1.0 mL/min;柱温：25℃;检测波长：280 nm。以连翘苷为内参物,建立其他5种成分的相对校正因子,一测多评法计算各成分。结果 绿原酸、甘草苷、木犀草苷、连翘酯苷A、连翘苷、大黄酸分别在0.243～4.861、0.112～2.248、0.087～1.732、0.247～4.949、0.370～7.402、0.095～0.952μg/mL线性关系良好（r≥0.999 5）,平均回收率分别为99.40%、101.0%、104.5%、98.17%、99.70%、99.58%,RSD值分别为1.12%、2.53%、3.15%、2.94%、1.41%、2.84%(n=6)。结论 该法回收率高、重复性良好,为连花清瘟胶囊建立更全面的质量控制提供了新方法。     

太行山区不同产地连翘中连翘苷、连翘酯苷A的含量测定

目的：采用HPLC法测定太行山区不同产地、不同采集时间连翘中连翘苷及连翘酯苷A的含量。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,测定连翘苷以乙腈-水（25∶75）为流动相,等度洗脱;流速为1.0ml·min-1;检测波长为277nm。测定连翘酯苷A以乙腈-0.4％冰醋酸溶液（15∶85）为流动相,等度洗脱,流速为1.0ml·min-1;检测波长为330nm。结果：连翘苷和连翘酯苷A线性范围分别为0.206～2.060μg和0.120～1.200μg,平均回收率分别为99.52%（RSD=1.74%）和99.63%（RSD=1.21%）。结论：太行山区不同产地连翘中连翘苷和连翘酯苷A含量差异较大,7月份采集连翘中连翘苷、连翘酯苷A含量最高。含量测定方法准确、快速,适用于连翘的质量控制。     

门氏护胃方中连翘与其他药材配伍煎煮前后连翘酯苷A和连翘苷提取率变化的研究

目的:考察门氏护胃方中连翘单药及与其他药材配伍煎煮前后连翘酯苷A和连翘苷提取率的变化。方法:采用高效液相色谱法测定连翘单味药材(5 g×7付)、连翘(5 g×7付)与姜半夏配伍、门氏护胃方[包括连翘(5 g×7付)、姜半夏等6味药材]经水煎煮后药液中连翘酯苷A和连翘苷的提取量并计算提取率。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,检测波长为278 nm,柱温为30℃,流速为1.0 m L/min。结果:连翘酯苷A与连翘苷进样量线性范围分别为0.61～6.1、0.246～2.46μg(r=0.999 7、0.999 9),在精密度、稳定性(20 h内)和重复性试验中RSD均<2%(n=6),平均回收率为96.10%～99.37%(RSD≤2.36%,n=6);在连翘单味药材中,连翘酯苷A和连翘苷的提取率分别为96.90%、66.67%;在连翘-姜半夏配伍样品水煎液中,二者的提取率分别为101.61%、54.55%;在门氏护胃方样品水煎液中,二者的提取率分别为98.39%、84.85%。结论:连翘与姜半夏配伍后连翘酯苷A的提取率增加、连翘苷的提取率略有减少;连翘与门氏护胃方中其他药材配伍后,二者的提取率均略有增加。     

HPLC法测定小儿肺热咳喘口服液中连翘苷和连翘酯苷A的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定小儿肺热咳喘口服液中连翘苷和连翘酯苷A的含量。方法采用Phe-nomen Luna C18(4.6 mm×250 mm5,μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长为280 nm,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃。结果连翘苷和连翘酯苷A与其相邻杂质峰能完全分离,连翘苷和连翘酯苷A进样量分别在0.030 3～0.545 4μgr,=0.999 5,0.019 8～0.356 4μgr,=0.999 6浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.35%,RSD=0.097%(n=6),99.48%,RSD=0.15%(n=6)。结论本法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC法测定市售连翘中连翘酯苷的含量

建立了连翘中连翘酯苷的HPLC测定方法 ,采用TIANHEC18柱 (15 0mm× 4 6mm) ,流动相为乙腈—水—醋酸 (15∶85∶0 2 ) ,检测波长为 332nm ,流速为 1 0ml·min-1。连翘酯苷在 0 2 0 2～ 16 2 μg范围内线性关系良好 (r =0 9999) ,平均回收率为 10 0 5 0 % ,RSD =1 6 1%。并测定了陕西市场上连翘药材中连翘酯苷的含量 ,对其质量进行评价。     

HPLC法测定双黄连胶囊中连翘酯苷A及连翘苷的含量

目的:建立中成药双黄连胶囊中连翘酯苷A及连翘苷的含量测定方法.方法:采用Phenomenex-ODS-C18(250 mm×4.6 mm,5 um)柱,以甲醇(含1%的四氢呋喃)-水(含0.01 mol·L-1磷酸二氢钾,PH 3.2)为流动相进行梯度洗脱,检测波长280 nm.结果:连翘酯苷A及连翘A的线性范围分别为7.8～139.5μg·ml-1和2.6～47.7μg·ml-1,其线性关系良好.连翘酯苷A平均回收率为100.3%,RSD为0.75%;连翘苷平均回收率为99.2%,RSD为1.03%.结论:该方法准确可靠,可用于本制剂的质量控制.     

慢性乙型肝炎重叠戊型肝炎感染60例临床分析

目的 观察慢性乙型肝炎患者重叠感染戊型肝炎病毒临床特点及戊型肝炎病毒对慢性乙型肝炎患者的影响.方法 对60例慢性乙型肝炎病毒重叠戊型肝炎病毒感染组患者与60例单纯慢性乙型肝炎病毒感染组的临床资料进行对照分析.结果 2组的临床生化指标,总胆红素、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、凝血酶原活动度、血白蛋白差异有统计学意...     

用RP-HPLC法同时测定珍珠维E乳膏中维生素B6和维生素E的含量

目的:建立同时测定珍珠维E乳膏中维生素B6和维生素E的RP-HPLC法。方法:色谱柱为Kromasil-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长285 nm,流速1.0 ml/min。样品在90%乙醇中用超声破碎仪破碎10 min,然后50℃水浴加热5 min处理。结果:维生素B6和维生素E的线性范围分别为1~50μg/ml(r=0.999 9,n=5)和1~50μg/ml(r=0.999 8,n=5);平均回收率分别为(95.32±0.27)%(n=9)和(96.91±0.85)%(n=9)。3批样品中维生素B6和维生素E的含量分别为标示量的(94.91±0.77)%和(96.87±0.85)%。结论:该方法适用于珍珠维E乳膏中维生素B6和维生素E的含量测定。     

慢性乙型肝炎患者载脂蛋白E基因多态性与干扰素-γ及其受体的研究

目的分析载脂蛋白(Apo)E基因多态性与慢性乙型肝炎感染后免疫的关系。方法ApoE基因采用聚合酶链反应(PCR)法,用荧光偏振法检测ApoE基因型。干扰素(IFN)-γ、Ⅰ型γ-干扰素受体(IFN-γR1)检测分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和流式细胞仪技术。结果ApoEε4表达水平在慢性肝炎组中较高,重型肝炎组较低;重型肝炎组血清中IFN-γ含量显著增高,与健康组相比差异具有统计学意义;外周淋巴细胞和中性粒细胞表面IFN-γR1表达水平随着肝炎活动程度其表达显著上调。结论ApoEε4基因表达低的肝脏炎症反应重,IFN-γ参与免疫损伤,ApoEε4可能对外周白细胞膜表面的IFN-γR1的表达具有调控作用。     

载脂蛋白E基因多态性在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的分析载脂蛋白E(apoE)基因多态性与慢性乙型肝炎病毒感染发生发展的关系。方法ApoE基因多态性检测采用PCR法及荧光偏振法,外周血白细胞膜表面干扰素(IFN)-γR1检测采用流式细胞技术。结果在慢性乙型肝炎组apoEε4基因型频率较高;重型乙型肝炎组apoEε4基因型频率降低,且INF-γR1表达升高。结论apoEε4不影响人体对乙型肝炎病毒的易感程度,但对肝损伤起一定的保护作用。     

载脂蛋白E基因多态性与慢性乙型肝炎病毒感染分析

目的分析载脂蛋白E(ApoE)基因多态性及其对慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染性免疫的影响。方法白细胞介素(IL)-2检测采用放射免疫法,聚合酶链反应(PCR)法扩增ApoE基因片段,用荧光偏振的方法检测ApoE基因型。结果轻度组ApoEε4高于正常值范围,并与中度、重度组相比差异有统计学意义(P均<0.05),与ApoEε3、ApoEε2组相比ApoEε4组有较高的IL-2和总胆固醇水平。结论高水平的ApoEε4基因可通过调节IL-2和血脂水平减轻HBV感染后引起的肝细胞炎症反应及肝损伤。     

不同基因型慢性乙型肝炎患者体内黄嘌呤氧化酶和维生素E水平的研究

目的:探讨不同基因型(GT)慢性乙型肝炎(乙肝)患者体内黄嘌呤氧化酶和维生素E水平,阐明患者体内氧化损伤的情况。方法:检测30例慢性乙肝患者的基因型、氧化损伤指标(黄嘌呤氧化酶和维生素E)、肝功能、乙型肝炎病毒(HBV)DNA,并做出统计分析。结果:慢性乙肝患者基因型C型组与B型组比较:血清中ALT水平高,黄嘌呤氧化酶水平明显升高,维生素E水平明显降低。在基因型B型、C型及全部乙肝患者体内,黄嘌呤氧化酶浓度与ALT水平呈明显正相关,维生素E浓度与ALT水平呈明显负相关;黄嘌呤氧化酶浓度与维生素E浓度与HBVDNA水平无明显相关。结论:基因型C型患者较基因型B型患者体内存在较严重的氧化损伤。氧化损伤是引起基因型C型患者出现较重临床表现的重要机制。HBVDNA的水平与患者的基因型及氧化损伤水平无明显关系。     

刺五加苷B、苷E在体外大鼠肠道菌群中的代谢

目的：观察体外大鼠肠道菌群对刺五加苷B、苷E的代谢。方法：收集大鼠新鲜粪便在厌氧培养基37℃培养24h,分别加入刺五加苷B、刺五加苷E,培养后加甲醇提取离心,取上清液采用HPLC及UPLC/MS方法对代谢成分进行分离和定性分析。结果：刺五加苷B、苷E在大鼠粪便孵育液中代谢,24h后样本中能检测出较高浓度代谢物。在离体条件下,刺五加苷B、苷E可以被大鼠的肠道菌群代谢,经过UPLC/MS的检测,刺五加苷B代谢物的分子离子峰[M＋H]~＋为193.08,推测为刺五加苷B的苷元再脱一分子水;刺五加苷E代谢物的分子离子峰[M＋H]~＋为417.17,推测为刺五加苷B的苷元。结论：刺五加苷B、苷E可以被大鼠肠道菌群代谢。     

拉米夫定联合维生素E治疗慢性乙型肝炎临床观察

目的探讨拉米夫定联合维生素E对慢性乙型肝炎患者的治疗效果。方法将120例慢性乙型肝炎患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予拉米夫定,治疗组在对照组基础上加用维生素E,疗程6个月,比较两组治疗前后ALT、HBV DNA及HBsAg、HBeAg、HBeAb的变化。结果慢性乙型肝炎治疗组的ALT复常率、HBV DNA的转阴率与HBeAg的阴转率及HBeAb的阳转率均较对照组明显增高(P＜0．05)。结论维生素E可作为治疗慢性乙型肝炎的辅助药物。     

复合维生素E,C,B组合物面膜治疗寻常痤疮117例的疗效和安全性(英文)

目的:了解维生素E,C,B组合物面膜治疗寻常痤疮的疗效及安全性。方法:117例13a以上、痤疮严重程度分级在2级以上且主要表现于脸部的病人,予维生素E,C,B组合物面膜治疗,每日1次,共8wk。观察治疗前后痤疮数量及性质,包括粉刺、丘疹、脓疱及囊肿之数目,并评估整体疗效。结果:治疗后,粉刺、丘疹、脓疱及囊肿数目下降了13±s13,10±12,5±7及3±3,均P<0.01。7例(6.0%)病人症状完全改善,44例(37.6%)中度改善,56例(47.9%)轻度改善,10例(8.6%)无改善。59例(50.4%)病人无红肿、搔痒、灼热及脱皮等现象发生。结论:维生素E,C,B组合物面膜治疗痤疮有效,超过半数的受试者无不良反应发生,可作为传统治疗寻常痤疮药物的替代。     

Structural Analysis of Botulinum Neurotoxins Type B and E by Cryo-EM

Botulinum neurotoxins (BoNTs) are the causative agents of a potentially lethal paralytic disease targeting cholinergic nerve terminals. Multiple BoNT serotypes exist, with types A, B and E being the main cause of human botulism. Their extreme toxicity has been exploited for cosmetic and therapeutic uses to treat a wide range of neuromuscular disorders. Although naturally occurring BoNT types share a common end effect, their activity varies significantly based on the neuronal cell-surface receptors and intracellular SNARE substrates they target. These properties are the result of structural variations that have traditionally been studied using biophysical methods such as X-ray crystallography. Here, we determined the first structures of botulinum neurotoxins using single-particle cryogenic electron microscopy. The maps obtained at 3.6 and 3.7 Å for BoNT/B and /E, respectively, highlight the subtle structural dynamism between domains, and of the binding domain in particular. This study demonstrates how the recent advances made in the field of single-particle electron microscopy can be applied to bacterial toxins of clinical relevance and the botulinum neurotoxin family in particular.