截短的HCV核心蛋白在小鼠中诱导强的细胞免疫应答

丙型肝炎病毒 (HCV)是慢性肝炎、肝硬化等慢性肝病的主要致病因子之一 ,亟需发展有效的疫苗以防止其传播。HCV的高突变率使之在感染过程中易产生变异株是 HCV持续感染的重要原因之一。核心蛋白在各种基因型 HCV中最为保守 ,其诱导的细胞免疫应答对于 HCV感染的恢复起重要作用 ,对研制 HCV疫苗有潜在的应用价值。作者用 BAL B/ c和 C5 7BL 6小鼠为模型观察了大肠杆菌重组 HCV核心蛋白 1～ 12 0位氨基酸 Co.12 0的免疫原性。　　 BAL B/ c和 C5 7BL 6小鼠均随机分为 5组 ,Co.12 0溶解于 PBS直接注射或分别与不完全弗氏佐剂、…     

GM-CSF基因增强HCV非结构蛋白DNA疫苗诱导的细胞免疫应答

作者分别构建了编码丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）非结构蛋白ＮＳ３、ＮＳ４和ＮＳ５的质粒ｐＴＶ－ＮＳ３４５、编码粒细胞－巨噬细胞－集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的质粒ｐＴＶ－ＧＭＣＳＦ以及编码ＮＳ３４５和ＧＭ－ＣＳＦ的双顺反子质粒ｐＴＶ－ＮＳ３４５／ＧＭＣＳＦ，分别将这三种质粒转染ＣＯＳ－７细胞，用免疫沉淀法检测ＨＣＶＮＳ３４５蛋白的表达，用ＥＬＩＳＡ检测培养上清中的ＧＭ－ＣＳＦ。将Ｂｕｆｆａｌｏ大鼠分为４组，第１、２、４组分别肌注ｐＴＶ－ＮＳ３４５、ｐＴＶ－ＮＳ３４５／ＧＭＣＳＦ和对照载体ｇＴＶ ４００μ…     

DNA免疫诱导抗HCV核心抗原的体液与细胞免疫应答的鉴定

丙型肝炎病毒 (HCV)是引起急、慢性非甲非乙型肝炎的主要原因。目前尚无有效的预防制剂。序列分析表明 ,HCV的核心基因是高度保守的区段 ,故近年来人们的研究集中在以含有核心及包膜基因的质粒进行的DNA免疫上。本文报告了以插入 HCV核心基因片段的重组质粒 p CI- HCV- C免疫小鼠所诱导的免疫应答情况。　　将编码 1～ 1 91氨基酸的 HCV核心基因插入 p CI质粒的 Mlu 及 Xba 酶切位点之间 ,构建携带 HCV核心基因的重组质粒p CI- HCV- C。将纯化的 p CI- HCV- C质粒1 0 0μg注入 6～ 8周龄雌性 BAL B/c小鼠胫骨肌肉内 ,以 p…     

DNA疫苗接种诱导抗丙型肝炎病毒蛋白的免疫应答

最近对丙型肝炎病毒(HCV)感染的临床和实验病例的分析提示,病毒核壳(C)、非结构蛋白3(NS3)和包膜糖蛋白E1和/或E2在控制该病毒感染的免疫应答中可能有作用。作者运用DNA免疫接种研究了注射编码C区和E2区的DNA诱导的免疫应答。采用pCMVβ(Clontech)或pCI(Promega)载体构建的非嵌合体载体分别带有C区和E2区     

多价小基因DNA疫苗诱导免疫应答的定量定性分析

作者比较了多价小基因 DNA疫苗与全长蛋白疫苗诱导的 CD8+T细胞应答及保护效力 ,并证实了位于翻译起始密码子侧翼的Kozak序列对小基因疫苗的重要性。　　作者用淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒( LCMV)感染 8～ 1 2周龄 CB/ 6小鼠后 7天 ,取小鼠脾细胞与转染了 p CMV- SV(具有Kozak- GCCATGA序列的质粒 )、p CMV-SV- (具有 GCCCATG序列的质粒 )或p CMV- β(表达 β-半乳糖苷酶的质粒 ,阴性对照 )的组织培养细胞 BAL B c1 7( H- 2 d)和 KO(H- 2 b)一起培育。细胞毒性试验结果显示 :转染了 p CMV- SV的 KO细胞被细胞毒性 T…     

粘膜免疫DNA疫苗可在粘膜部位诱导抗HIV-1免疫应答

粘膜免疫是机体抵抗病原体以防全身感染,尤其是性传播疾病的第一道防线。本文报告了经阴道接种DNA质粒pCMN160的小鼠产生抗人类免疫缺陷症病毒(HIV)分泌性IgA和中和抗体的结果。     

疟疾DNA疫苗在夜猴中的最佳免疫应答

为了开发能对恶性疟原虫红细胞内期抗原产生保护性抗体的DNA疫苗,本实验选用夜猴为模型进行编码尤氏疟原虫环子孢子蛋白(PyCSP)DNA疫苗免疫后最佳抗体应答的研究。     

DNA疫苗诱导的抗结核病保护性免疫应答

BCG是公认的结核病预防疫苗,但其保护力从0%~80%不等,因而印度德里大学南校的Khera等分别以pAK3和pAK4为载体制备了6种表达结核杆菌(MTB)ESAT-6蛋白(E6)、α晶体蛋白(αcry)或超氧化物歧化酶(sod)的DNA疫苗(pAK3-E6、pAK4-E6、pAK3-αcry、pAK4-αcry、pAK3-sod和pAK4-sod),并评估了疫苗诱导小鼠体液和细胞免疫应答的能力及对MTB感染豚鼠的保护效力。分别用100μg pAK3-E6、pAK4-E6、pAK3-αcry、pAK4-αcry、pAK3-sod、pAK4-sod、pAK3或pAK4肌肉免疫Balb/c小鼠,每3周1次,共免疫3次。末次免疫后3周检测免疫小鼠的特异…     

鞭毛蛋白融合蛋白作为佐剂或疫苗诱导的特异性免疫应答

研究表明鞭毛蛋白能够激发宿主免疫应答。据报道鞭毛蛋白是有效的佐剂，在体内能增强T细胞应答，推测可将鞭毛蛋白作为疫苗佐剂来诱导和加强免疫应答。为了评价鞭毛蛋白能否作为一种载体用于佐剂或疫苗的研制，美国Sidney Kimmel癌症中心Cuadros制备了鞭毛蛋白一增强性绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白，并报告了其诱导特异性免疫应答的结果。     

流感血凝素DNA疫苗诱导体液免疫应答的检定

作者向小鼠股四头肌注射流感病毒A/PR/8/34株的血凝素(HA)DNA10ng～100μg,共1～3次,每次间隔3周.用血凝抑制(HI)试验和ELISA检测免疫后小鼠体内抗HA抗体水平.两项试验结果都显示HA DNA注射剂量和注射次数与产生的抗体水平直接相关.注射lμg HA DNA三次或一次注射10～100μg HA DNA的小鼠体内均可测到抗体,而100μg HA DNA诱导的抗体水平至少与感染活流感病毒(A/PR/8/34)后产生的抗体水平相仿.免疫后抗体水平至少可维持18个月.注射次数对抗体水平影响不大.     

C群脑膜炎球菌多糖-蛋白结合疫苗在小鼠中的黏膜免疫应答

目前大部分疫苗接种仍采作注射方式，然而，黏膜免疫接种的优点多于注射途径免疫。古巴Finlay研究所的Cuello评估了其制备的C群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗（MGCP-TT）在小鼠中的黏膜免疫应答。     

细胞因子基因与DNA疫苗共接种能调节对DNA疫苗的免疫应答

作者在绵羊中进行了大规模的 DNA疫苗接种试验 ,用以研究细胞因子白细胞介素4(IL- 4 )、IL- 5、IL- 1 5、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)或 γ干扰素 (IFN- γ)基因与 DNA疫苗共注射能否调节由 DNA疫苗初免、重组蛋白加强所诱生的对抗原的免疫应答。　　前期研究证实重组 EG95蛋白接种可诱导绵羊产生抵抗细粒棘球绦虫感染的保护作用。作者将编码 EG95前 1 3 5个氨基酸的基因片段和编码细胞因子 IL- 4、IL- 5、IL- 1 5、GM- CSF和 IFN- γ的基因分别克隆到 p CI真核表达载体中 ,并将 p CI- EG95构建体和编码各种细…     

肿瘤DNA疫苗:诱导抗肿瘤抗原的CTL应答

CD8 T细胞可以识别肿瘤抗原,因此促使DNA疫苗诱导抗肿瘤抗原的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答至关重要。本文主要介绍了DNA疫苗在免疫学方面的最新进展,以及一些增强DNA疫苗诱导CTL应答的方法。     

人对无DNA单纯疱疹疫苗的免疫应答

鉴于单纯疱疹病毒(HSV)有致肿瘤性,作者将2型HSV在鸡胚成纤维细胞上培育后,经NP40破碎,并用超速离心与蔗糖梯度纯化,制备成无DNA的亚单位疫苗。这个病毒株在各种细胞系中均不能引起转化,动物实验证明能引起体液与细胞免疫应答。共免疫40名志愿者,其中15名在免前未感染过HSV,血清中不能检出HSV抗体,另外25名则有严重复发性感染。全程免疫为3针,每针间隔2周。第2针后2周,有10人产生抗体。全程免疫后2周开始全部可检出中和(NT)抗体、补体结合(CF)抗体和补体依赖性细胞毒抗体(CDCA)。15名无感染史的志愿者NT抗体