阪崎肠杆菌生长特性及耐热耐酸碱性分析

目的 研究不同阪崎肠杆菌菌株的生长特性和耐热耐酸碱性.方法 采用光谱扫描仪培养22株阪崎肠杆菌,由扫描仪实时监测不同阪崎肠杆菌菌株生长特性;采用显色平板涂布方法观察高温和酸碱条件下阪崎肠杆菌存活情况.结果 传统平板计数法和微孔板光谱扫描仪建立的阪崎肠杆菌生长曲线具有良好相关性(R2=0.92);22株阪崎肠杆菌经75℃处理2 min后,尚有1株存活;经碱处理后(pH 12.55)立检测,所有菌株均已死亡;用酸处理1min后(pH 1.18)检测,尚有2株存活.结论 采用光谱扫描仪方法测定阪崎肠杆菌生长曲线方便快捷,不需要培养计数;不同的阪崎肠杆菌菌株具有不同的耐热、耐酸特性.     

分子信标-实时PCR法快速检测阪崎肠杆菌的研究

目的:建立分子信标-实时PCR检测婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌的快速方法。方法:根据GenBank公布的阪崎肠杆菌ATCC29544株ompA基因的保守序列,设计引物和分子信标探针,建立阪崎肠杆菌的分子信标-实时PCR技术快速检测,应用于食品检测。结果:检测方法特异性强,无非特异性扩增;分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为95fg/PCR反应体系,无交叉反应;以此反应体系检测23份样品,其中3份为阳性,余未检出,与传统检测方法结果一致。结论:分子信标-实时PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌的快速检测。     

PCR快速检测奶粉中阪崎肠杆菌研究

目的：针对当前国内外传统检测方法都存在时间长、检测结果假阳性突出等问题，建立阪崎肠杆菌快速检测法。方法：根据阪崎肠杆菌中寡-1，6-葡萄糖苷酶基因设计引物建立PCR方法，并进行PCR反应的灵敏度、特异性实验以及模拟实际样品的最低检出限测定。结果：纯菌检测灵敏度达10^2 cfu／ml，阪崎肠杆菌菌株PCR扩增均为阳性，阴性对照菌株未扩增出特异性条带；单独接种阪崎肠杆菌（3．5—4．5 cfu／100g）和混合接种大肠杆菌或沙门菌的人工模拟污染奶粉样品中分别在增菌26h和28h时，阪崎肠杆菌均可以检出。结论：该方法灵敏度高、快速、特异性强，可以很好地应用于奶粉以及其他食品中阪崎肠杆菌的检测与鉴定。     

1O类食品污染阪崎肠杆菌状况的调查研究

目的了解10类食品中阪崎肠杆菌的污染状况及污染数量,评估其风险性,为预防和控制阪崎肠杆菌的感染、传播、流行提供科学依据。方法按照GB4789．1—2010采抽样技术、GB4789．40—2010（食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》、实时荧光PCR法操作规程,对10类850份食品进行阪崎肠杆菌检验,标准菌株作对照。结果检出阪崎肠杆菌54株,总检出率为6．4％。该10类食品阪崎肠杆菌的检出率差异有统计学意义,由高至低排序为：冰淇淋〉巧克力坚果〉熟肉〉糖饼类〉面包糕点〉方便面〉奶类〉饮用水、生肉、调味品。染菌量〉30MPN／100g（ml）以上的有15份,占27．7％（15／54）。结论10类食品检出阪崎肠杆菌的有7类,应予必重视。     

2012 - 2016年陕西省897份婴幼儿食品中阪崎肠杆菌检测

目的 通过连续5年对陕西省婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的监测,调查陕西省婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的污染情况。方法 随机采集省内超市、零售店、农贸市场、网购场所的婴幼儿食品,依照食品微生物检验国家标准GB 4789.40—2010 对所采集的婴幼儿食品进行阪崎肠杆菌的检测。结果 2012 - 2016年共采集婴幼儿食品897份,总检出率为3.01%（27/897）。婴幼儿辅助食品的检出率（6.54%）高于婴儿配方食品（1.90%）,第二季度的检出率（3.82%）较高,0～6个月婴幼儿配方食品中也检出了阪崎肠杆菌,检出率为1.67%,羊奶粉的检出率（5.51%）高于牛奶粉的检出率（1.08%）。结论 陕西省婴幼儿食品存在阪崎肠杆菌污染,婴幼儿辅助食品、0～6个月婴幼儿食品以及羊奶粉中阪崎肠杆菌污染更为严重,需引起监管部门重视,加强监督和管理。     

野生株阪崎肠杆菌的生化分型与耐药性研究

目的:对从婴儿奶粉中分离得到的23株野生株阪崎肠杆菌进行生化分型,对各型阪崎肠杆菌及非阪崎肠杆菌代表株进行耐药性分析.方法:阪崎肠杆菌生化分型使用APl20E鉴定条,定性耐药性分析采用WS/T125-1999标准中纸片法,定量耐药性分析采用细胞培养板梯度稀释法.结果:23株野生株阪崎肠杆菌根据生化实验结果分成了7型,通过耐药性分析筛选出的对阪崎肠杆菌耐药而对其他非阪崎肠杆菌敏感的抗生素有万古霉素、头孢噻吩.结论:通过对野生株阪崎肠杆菌的生化分型与耐药性研究,可对因阪崎肠杆菌引起的婴儿感染的治疗提供帮助,有利于研制新的阪崎肠杆菌选择性培养基,用于食品安全检测.     

婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌分子检测方法探讨

目的：对婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分子检测方法进行探讨。方法：分别用常规PCR方法和实时荧光PCR方法对32份奶粉样品进行阪崎肠杆菌鉴定。结果：32份样品中检出2株阳性株,阳性率为6.25%,两种检测方法结果相符。结论：市售婴幼儿配方奶粉中存在阪崎肠杆菌污染,应尽快制订婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的检测标准,分子检测方法可快速准确检测阪崎肠杆菌。     

免疫磁珠与荧光定量PCR联合检测乳制品中阪崎肠杆菌的实验研究

[目的]建立一种免疫磁珠吸附-荧光定量PCR(IMB-FPCR)快速检测阪崎肠杆菌的方法,探讨在乳制品污染监测及食物中毒快速诊断中的应用。[方法]根据阪崎肠杆菌rpsU-dnaG基因序列设计引物和探针,采用基因重组技术构建用于金黄色色葡萄球菌检测的定量标准品,建立阪崎肠杆菌IMB-FPCR检测方法。[结果]成功构建了阪崎肠杆菌重组质粒标准品和阪崎肠杆菌IMB-FPCR方法。阪崎肠杆菌的免疫磁珠吸附试验显示磁珠对奶粉中的阪崎肠杆菌吸附率达77.7%。通过特异性、敏感性、稳定性和重复性验证,结果表明具有较好的特异性,最低检测限为10cfu/ml的菌细胞,并具有良好的稳定性和重复性。整个检测仅需时1d。[结论]IMB-FPCR简便快速、灵敏度高及特异性强,为准确检测乳制品中阪崎肠杆菌提供了一个新的途径,可广泛应用于食品卫生监管、商品检验检疫以及临床诊断等。     

寿司制品中阪崎肠杆菌污染情况调查

目的:了解寿司制品中阪崎肠杆菌的污染状况。方法:采用常规培养鉴定方法、实时荧光PCR方法对40份样品进行阪崎肠杆菌分离鉴定。结果:从40份市售寿司制品中检出4株阳性株,阳性率为10%。2种鉴定方法结果相符。结论:阪崎肠杆菌的污染造成寿司制品存在安全隐患。     

从酱腌菜中检出一株阪崎肠杆菌

目的 了解我市酱腌菜中阪崎肠杆菌的污染状况.方法 按照GB 4789.40-2010《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》对30份酱腌菜进行阪崎肠杆菌分离培养.结果 检出1株阪崎肠杆菌,检出率为3.3％.结论 说明阪崎肠杆菌不仅存在于婴幼儿奶粉中,其他食品中也存在,对人体存在较大的安全隐患.