RP-HPLC测定小茴香中槲皮素和山奈酚含量

建立用反相高效液相色谱法同时测定小茴香中槲皮素和山奈酚含量的方法。采用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:甲醇-0.4%磷酸(50∶50);流速:1mL/min;检测波长:360nm。槲皮素、山奈酚分别在2.19~109.6μg/mL和2.28~114.0μg/mL范围内线性关系良好。槲皮素和山奈酚的平均回收率分别为95.61%,94.41%,RSD分别为2.4%,3.0%。此方法简便、准确、可靠,可作为小茴香中槲皮素和山奈酚的定量分析方法。测定出小茴香总黄酮水解物中槲皮素和山奈酚的含量分别为:槲皮素0.29 mg/g,n=3,RSD=2.60%;山奈酚含量为:0.36mg/g,n=3,RSD=3.25%。     

离子液体-超声辅助萃取-高效液相色谱测定桑叶中黄酮

目的:建立以离子液体1-丁基-3-甲基咪唑溴化盐([BMIM]Br)为萃取剂,结合超声辅助萃取,利用高效液相色谱法同时分离测定桑叶中的桑色素、槲皮素和山奈酚3种黄酮的方法。方法:采用Phenomenex C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液,采用梯度洗脱;流速1.0mL/min;紫外检测波长365nm;柱温为34℃。结果:该方法对桑色素、槲皮素和山奈酚分别在0.0065～130、0.0064～128、0.0042～84μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.9998,检出限(RSN=3)依次为0.99、1.31、0.64ng/mL;样品回收率为90.00%～95.31%。结论:本法操作简单快速、定量准确、灵敏度高、成本低、且对环境友好,为桑叶中黄酮化合物的检测及分离提供了一个有效的科学方法。     

不同秋果型树莓中槲皮素和山奈酚含量的测定

通过高效液相色谱法测定,不同秋果型树莓中槲皮素和山奈酚的含量。高效液相色谱法的测定条件:色谱柱为安捷伦18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-1%乙酸溶液为流动相,流速为1.000 mL/min,测定波长254 nm,进样量10μL。结果表明:槲皮素和山奈酚分别在0.11μg/mL～11μg/mL(R~2=0.999 8);0.11μg/mL～27.5μg/mL(R~2=0.999 7)呈良好的线性关系;加样回收率分别为为0.76%、0.91%。     

高效液相色谱-二极管阵列检测法同时测定不同品种巴旦杏中槲皮素、山奈酚的含量

目的:建立用高效液相色谱-二极管阵列检测法测定新疆不同品种巴旦杏仁中槲皮素、山奈酚含量的方法。方法:色谱柱:HC-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45,V/V);检测波长:360 nm;柱温:30℃;流速:1.00 mL/min。结果:槲皮素和山奈酚分别在1.0~30μg/mL(r=0.999 3)和0.5~40μg/mL(r=0.999 8)质量浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为102.0%(相对标准偏差为2.08%,n=5)和102.8%(相对标准偏差为2.21%,n=5)。结论:该方法简便、快速、有效、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为巴旦杏仁的质量控制和评价。     

HPLC双波长法测定豌豆尖中槲皮素和山奈酚的含量

目的:建立HPLC双波长法同时测定豌豆尖中类黄酮水解产物槲皮素和山奈酚含量的方法。方法:先用甲醇-15%盐酸(4:1,v/v)混合液把豌豆尖中的类黄酮水解成槲皮素和山奈酚,后采用HPLC双波长法测定槲皮素和山奈酚的含量。GRACE Vision HT C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%冰醋酸(50:50,v/v),流速为1.0 mL/min,槲皮素检测波长为371 nm,山奈酚检测波长为366 nm,柱温为30℃。结果:槲皮素和山奈酚分别在(0.05~0.3)μg、(0.025~0.15)μg范围内线性关系良好,平均加标回收率分别为99.30%(RSD=1.74%)、98.33%(RSD=1.21%)。结论:该方法操作简便、结果可靠、重现性好,可用于豌豆尖中槲皮素和山奈酚含量的同时测定。     

HPLC法测定蜂蜜中槲皮素和山奈酚

目的建立同时测定蜂蜜中槲皮素和山奈酚含量的方法。方法以Hpersil BDS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,流动相为甲醇 0.4%磷酸水溶液(45 55)并用三乙胺调节pH至4.2,流速为1.0 ml/min,检测波长为375 nm。结果槲皮素的线性范围为0.045-2.25μg,山奈酚的线性范围为0.052-2.600μg,相关系数均为0.999 1;平均回收率分别为95.9%,97.6%。5种蜂蜜中均含微量槲皮素(18.62-189.26μg/g)和山奈酚(5.97-22.54μg/g),其含量与蜜源有关,桉树蜜中槲皮素含量最高(189.26μg/g),红树林蜜中山奈酚含量最大(22.54μg/g)。结论该方法简便、准确,可以用于同时测定蜂蜜中槲皮素和山奈酚的含量。     

UPLC测定豌豆尖中槲皮素和山奈酚的含量

目的:采用超高效液相色谱法(UPLC)测定豌豆尖中类黄酮水解产物槲皮素和山奈酚的含量。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%冰醋酸水溶液(60:40)为流动相,流速为0.4 m L/min,槲皮素检测波长为371 nm,山奈酚检测波长为366 nm,柱温为30℃,进样量2.0μL。结果:槲皮素和山奈酚在1.5 min时间内达到基线分离,分别在(0.03~0.18)mg/m L、(0.015~0.15)mg/m L范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为101.37%、100.64%,RSD分别为0.84%、0.37%。结论:该方法快速、准确、稳定,可用于豌豆尖中槲皮素和山奈酚的含量测定。     

反相高效液相色谱法同时测定马铃薯块茎中酚酸类物质

目的：运用反相高效液相色谱法同时测定马铃薯中的绿原酸、咖啡酸、对香豆酸和阿魏酸。方法：色谱柱为YMC-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(30:70:1,V/V)等度洗脱,柱温25℃,检测波长327nm。结果：绿原酸、咖啡酸、对香豆酸和阿魏酸在进样质量浓度分别为7.80～1000、0.78～100、0.312～40、0.078～10μg/mL范围内线性关系良好(r值范围0.9968～0.9999),平均回收率为92.38%～101.73%。结论：本法分析快速准确、灵敏度高、重现性好,江西、北京和新疆3个地域的环境条件对马铃薯的酚酸含量有一定的影响。     

快速高效液相色谱法测定烟草中的多酚

为实现烟草中多酚类物质的高通量准确测定,设计了具有固相萃取功能的样品萃取瓶,并将其作为前处理装置,建立了测定烟草中5-O-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、4-O-咖啡酰奎尼酸、咖啡酸、莨菪葶、芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷和槲皮素等8种多酚的快速高效液相色谱方法。结果表明:(1)设计的样品萃取瓶可以集样品提取、固相萃取净化、过滤和转移为一体,大大提高了样品前处理制备速度;(2)以0.1%(体积比)甲酸水溶液和乙腈为流动相,C_(18)色谱柱(50 mm×4.6 mm,1.8μm)为色谱分离柱,8种多酚类物质在0.05～350μg/mL范围内具有较好的线性关系(r0.999);检出限为0.35～1.03μg/g;不同添加水平下的平均回收率为91.1%～101.5%,日内和日间RSD均小于5%。(3)5个烟草样品中8种多酚的含量在0.43～15.22 mg/g之间,与行业标准方法检测结果基本一致。该方法前处理简单快捷,灵敏度高,重复性较好,可以满足烟草样品中多酚类物质的高通量检测要求。     

液相色谱-串联质谱法同时测定黄酒中20种多酚含量

目的 建立液液萃取-液相色谱-串联质谱法同时测定黄酒中20种多酚(没食子酸、儿茶素、香草酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、槲皮素、香豆酸、原儿茶酸、山奈酚、绿原酸、牡荆素、槲皮苷、金丝桃苷、芦丁、表儿茶素、鞣花酸、肉桂酸、芥子酸)含量的分析方法。方法 样品经浓盐酸酸化后用乙酸乙酯、乙醚提取。目标物经Waters ACQUITY HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,电喷雾离子源负离子多反应监测模式采集,以质量数和保留时间定性,峰面积(外标法)定量。结果 在5～500μg/L范围内,20种多酚的线性关系良好,标准曲线相关系数大于0.997,方法定量限为0.4～7.8μg/L,加标回收率为71.1%～111.0%,相对标准偏差为0.63%～9.42%。结论 采用该方法对黄酒中的20种多酚进行检测,前处理步骤简单,测定快速,准确度和灵敏度高。     

翻白草中7 种黄酮和有机酸的超声提取及含量测定

目的：建立高效液相色谱法分离测定翻白草中绿原酸、咖啡酸、金丝桃苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚和芹菜素7 种成分的方法。方法：采用Phenomenex C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）分离7 种成分;流动相为甲醇和pH 3的乙酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL/min,紫外检测波长350 nm,柱温40 ℃。结果：7 种成分在20 min内均达到基线分离,线性关系良好（r＞0.999 5）,平均回收率为84.61%～104.06%（相对标准偏差小于4.77%,n=3）。结论：翻白草中7 种活性成分的最佳提取条件为80%甲醇溶液、固液比1∶50（g/mL）、超声功率160 W、超声时间20 min。实际样品的测定结果表明,翻白草中7 种活性成分的含量为：绿原酸121.5 μg/g、咖啡酸60.5 μg/g、金丝桃苷127.2 μg/g、槲皮素108.6 μg/g、柚皮素294.0 μg/g、山柰酚61.1 μg/g和芹菜素114.0 μg/g。     

反相高效液相色谱法测定雪莲果叶中的绿原酸

采用反相高效液相色谱法对雪莲果叶中的有效成分绿原酸进行分离,并对其含量进行测定,建立反相高效液相色谱法测定雪莲果叶中绿原酸含量的方法。色谱柱为Hypersil ODS-2 C18 柱(4.6mm × 300mm,5μm),流动相为乙腈- 体积分数0.5% 磷酸溶液(8:92,V/V),流速为1.0mL/min,检测波长为325nm,柱温为25℃。绿原酸在10～100μg/mL 范围内呈良好线性关系,相关系数为0.9999,加标回收率为97.0%,RSD 为1.10%。本法快速、简单、准确、分离度好,可用于实际样品的检测。     

反相液相色谱法测定杜仲叶中绿原酸

通过正交试验选择杜仲叶中绿原酸的最佳提取条件:30%甲醇回流20min,用反相液相色谱法测定绿原酸含量:色谱柱为KromasilC18柱,流动相为甲醇-0.02%磷酸溶液(体积比22:78),波长327nm,流速1.0ml/min。绿原酸在9.68～242μg/ml呈良好线性关系,相关系数r为0.9999,本法快速、简单、准确、分离度好、回收率大于95.9%。     

高效液相色谱法测定结石通胶囊中绿原酸含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定结石通胶囊中绿原酸含量的方法。方法采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.5%磷酸溶液(7:93)为流动相,柱温35℃,流速1.0 mL/min,检测波长326 nm。结果绿原酸在0.020 42~1.0210μg范围内,峰面积与进样量线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为99.00%,RSD 2.54%(n=9)。结论该方法重复性、准确性良好,可用于测定结石通胶囊中绿原酸含量。     

Polyphenol input to the antioxidant activity of yerba mate (Ilex paraguariensis) extracts

Industrial processing modified the polyphenol content, composition and antioxidant activity of the yerba mate extracts. Pre-dried leaves were the most appropriate raw material combining maximum activity with high polyphenol content. Chlorogenic acid and its derivatives were the major components of the phenolic fraction but we also identified caffeic, rutin and quercetin.Yerba mate extracts inhibited malonedialdehyde formation in sunflower oil (20 μmol/kg) and conjugated dienes production in oil/water emulsions (60 μmol/kg). Enhancing the dose to 60 μmol/kg reduced 27.8% the extract’s activity in oil.The relationship between polyphenol composition and antioxidant activity of a mixture of caffeic, chlorogenic, kaempferol, quercetin and rutin was satisfactorily predicted with a polynomial model. Results showed that quercetin was the highest contributor to the linear term followed by kaempferol and caffeic acid while rutin and chlorogenic acid inputs were the lowest. The model detected five synergistic and six antagonistic effects.     

Selenium increases chlorogenic acid,chlorophyll and carotenoids of Lycium chinense leaves

BACKGROUND: Leaves of Lycium chinense L. are widely used in traditional Chinese medicine and as functional food in China and south‐east Asia. Polyphenols are important active compounds in leaves of L. chinense L, but their compositions are still not very clear. Selenium has been reported to increase some components of plants. In this study, the composition of polyphenols of L. chinense leaves were analysed, and the effects of selenium on the polyphenols and other components were studied. RESULTS: The main polyphenols were identified as rutin, chlorogenic acid, quercetin, kaempferol and apigenin‐7‐O‐(6′‐O‐acetyl) glucose‐rhamnose. Chlorogenic acid showed the highest average content of 78.36 g kg^?1. Rutin, quercetin and kaempferol were determined at low contents from 3.85 g kg^?1 to 7.08 g kg^?1. Correlation coefficients between selenium and chlorogenic acid, chlorophyll a, chlorophyll b and carotenoids were: R² = 0.963 (P = 0.002), 0.943 (P = 0.005), 0.957 (P = 0.003) and 0.943 (P = 0.005), respectively. Selenium (0.01–0.05 g kg^?1) significantly increased chlorogenic acid, chlorophyll and carotenoids by 200–400% and reduced rutin by 400–900%. CONCLUSION: L. chinense can be an alternative source of chlorogenic acid. Selenium significantly increased chlorogenic acid, chlorophyll a, chlorophyll b and carotenoids, hence increasing the medicinal value of L. chinense leaves. Rutin, quercetin, kaempferol and apigenin‐7‐O‐(6′‐O‐acetyl) glucose‐rhamnose proved to be not significantly influenced by selenium. Copyright © 2012 Society of Chemical Industry     

免疫亲和柱净化-HPLC法同时测定玉米制品中的赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮

建立了同时测定玉米制品中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的免疫亲和柱净化高效液相色谱方法。试样经乙腈-水溶液(体积比80?20)提取,复合免疫亲和柱富集和净化后,采用Syncronis C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)固定相,以0.5%冰乙酸-乙腈-甲醇(体积比10?45?45)为流动相,等度洗脱,荧光检测器检测(Ex:333 nm,Em:470 nm)。结果表明:赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮检出限分别为5.65×10-2μg/kg和4.53×10-1-μg/kg;标准曲线的线性范围分别为1~50 ng/mL(r=0.9999)和10~500 ng/mL(r=0.9999);3个不同水平的加标平均回收率为95.81%~98.31%,RSD值为1.24%~1.65%。20批试样中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮测定值分别为0.59~0.69μg/kg和3.84~5.22μg/kg,均无过量残留。该方法具有操作简便、灵敏度高、重现性佳等优点,适用于同时检测玉米制品中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮。     

银杏类黄酮O-甲基转移酶活性的高效液相色谱分析

首次明确了银杏叶片类黄酮生物代谢关键酶O-甲基转移酶(flavonoid O-methyltransferase,FOMT)活性的HPLC测定技术与方法。采集扬州大学银杏种质资源圃银杏雄株成熟叶片,提取粗酶液,根据FOMT催化反应生成S-腺苷-L-高半胱氨酸(SAH)的原理,以山奈酚、槲皮素和异鼠李素等3种黄酮苷元为反应底物,采用优化的HPLC体系检测样品中FOMT催化反应生成的SAH峰面积,通过标准曲线求得不同反应底物的FOMT相对活性。FOMT活性反应生成物SAH在1.5～20μg/mL内呈良好的线性关系,RSD为2.1%(n=5),建立了FOMT活性测定优化体系。不同反应底物的FOMT活性表现不同,山奈酚与异鼠李素显著高于槲皮素。FOMT活性HPLC测定方法准确、快速、可靠、灵敏度高。     

超高效液相色谱-波长切换法同时测定健脾丸(浓缩丸)中4种成分的含量

目的建立同时测定健脾丸(浓缩丸)中党参炔苷、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III 4种成分含量的方法。方法采用超高效液相色谱法(UPLC),色谱柱为Poroshell 120 SB-C18(4.6 mm×100 mm,2.7μm),流动相为乙腈-0.1%乙酸,梯度洗脱,流速为0.5 ml/min,检测波长为270 nm(党参炔苷和白术内酯III)和220 nm(白术内酯I和白术内酯II),柱温为30℃,进样量为5μl。结果党参炔苷、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III检测线性范围分别为10.157~203.14μg/ml(r=0.9998),1.641~32.82μg/ml(r=0.9997),1.066~21.32μg/ml(r=0.9999),1.859~37.18μg/ml(r=0.9999),平均回收率分别为96.91%(RSD=1.71%,n=6),96.56%(RSD=1.39%,n=6),93.93%(RSD=1.71%,n=6),96.00%(RSD=1.66%,n=6),精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%。结论该方法重复性好、结果准确,可用于健脾丸(浓缩丸)的质量控制。