复合酶法制备小麦面筋蛋白多肽及其抗氧化活性研究

以小麦面筋蛋白粉为原料,采用复合酶法制备小麦面筋蛋白多肽,以小麦面筋蛋白酶解液的水解度(DH)、DPPH·清除率及Fe3+还原力为指标,对酶比例(碱性蛋白酶∶小麦蛋白水解专用酶)、反应时间、反应温度及反应pH四种因素各取3个水平,进行L9(34)正交试验,确定最优的制备工艺条件。最优工艺条件如下:酶比例为2∶1,反应时间为2 h,反应温度为50℃,反应pH 8.5。在此优化条件下进行验证实验,测得酶解液的DH为29.9%,DPPH·清除率为89.9%,Fe3+还原力为0.150。     

玉米蛋白酶水解物抗氧化活性的研究

采用碱性蛋白酶(Alcalase)对玉米蛋白进行水解,水解时间为0.5～6h,通过测定不同水解时间的水解物对卵磷脂氧化体系的抑制能力及其水解物的还原能力,研究玉米蛋白水解物的抗氧化活性。研究表明,采用底物浓度10%,加酶量与底物蛋白比为1∶100,水解时间为5h的水解物具有最强的抗氧化能力。采用凝胶层析法对5h水解物进行分离纯化,得出抗氧化最强部分的分子量范围为147～1745。      

不同蛋白酶水解棉籽蛋白制备抗氧化多肽的研究

利用6种蛋白酶对棉籽蛋白进行酶解,测定了各酶在水解过程中的水解度及其变化,对酶解产物的抗氧化活性进行了分析比较。研究表明,各蛋白酶在水解的前2h内,水解度迅速增加,2h之后水解曲线变得平缓。其中胃蛋白酶的水解能力最强,其4h水解产物水解度最大,为30.40%;胰蛋白酶的水解能力最差,最终水解产物的水解度为17.61%。中性蛋白酶水解产物的抗氧化活性较强,经测定其DPPH清除能力为54.95%,羟自由基清除能力为68.98%,超氧阴离子自由基清除能力为58.38%。     

茶籽多肽的制备及抗氧化活性研究

研究了茶籽蛋白酶解制备菜籽多肽的最佳条件，研究结果：茶籽蛋白水解的最适宜酶为2709碱性蛋白酶。蛋白酶最适宜作用条件为：pH值8．0，[E]／[S]10％，温度45℃，水解时间5h，此条件下氨基酸态氮生成率可这34．64％。该条件下制备的茶籽多肽时超氧自由基和羟基自由基具有强烈的清除作用。     

不同品种苦荞蛋白的复合酶解及其多肽抗氧化活性

为研究不同苦荞多肽的抗氧化活性,开发相关产品,提高苦荞的附加值。该试验通过碱提酸沉酶辅助的方法提取苦荞蛋白质,再经由胰蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶水解苦荞蛋白,利用响应面优化得到两种酶复合的最佳酶解条件为蛋白浓度5 mg/mL、酶添加量0.1%、碱性蛋白酶与胰蛋白酶质量比1∶3、酶解pH7.5、酶解温度55℃、酶解时间3 h。对复合酶解多肽产物进行抗氧化活性测定,结果表明,川荞1号和云苦3号的超氧阴离子自由基清除率较高,分别为97.23%、96.45%;而川荞1号和米荞对ABTS+自由基和DPPH自由基均表现出较高的清除能力。对ABTS+自由基清除能力分别为51.54%和54.41%;对DPPH自由基的清除能力分别为87.35%和84.91%。迪苦2号和川荞1号对羟基自由基清除率较高,分别为90.47%、91.32%。     

荞麦多肽的制备及其抗氧化活性的研究

本文以荞麦多肽浓度和水解度(DH)为评价指标,分别研究了木瓜蛋白酶、Protamex酶、Alcalase酶、Flavourzyme蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶酶解荞麦复合蛋白的最佳工艺,研究了超声波预处理对酶解效果的影响;并采用亚油酸-硫氰酸铁法对制得的荞麦多肽液在脂类中的抗氧化活性进行了测定。     

双酶酶解葵花籽粕蛋白制备抗氧化多肽的研究

本文以葵花籽粕蛋白粉为原料,获取双酶酶解葵花籽粕蛋白制备抗氧化活性多肽的最优工艺。分别采用碱性蛋白酶等七种蛋白酶对葵花籽粕蛋白进行酶解,以抗氧化性及水解度为指标对酶制剂进行筛选。以抗氧化性为指标,通过单因素及响应面法对酶解条件进行优化,获取最佳酶解工艺。结果表明,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶为最适酶制剂且最佳酶解工艺为:p H7.6、复合酶比例为2.5∶1、底物浓度2%、[E]/[S]为2%、酶解温度50℃、酶解时间200min,在此条件下,葵花籽粕多肽对O-2·和·OH清除能力分别为68.06%和50.12%。      

亚麻多肽制备及其抗氧化活性分析

该研究以脱脂亚麻籽粕为原料,比较不同酸性蛋白酶和中性蛋白酶的酶解多肽的得率,评价了酶解多肽的抗氧化活性。结果表明:3.350黑曲酸性蛋白酶的酶解效果最好,多肽得率可达28.52%。通过蛋白酶的单因素和正交试验,确定亚麻多肽制备的最佳工艺条件为:酶解温度60℃、pH2.7、加酶量6 500 U/g,酶解时间2.5 h,此条件下亚麻多肽得率为38.80%。凝胶色谱分析表明,该酶多肽的分子量主要分布在1 000 Da～7 600 Da范围内。酶解后的亚麻多肽具有良好的还原力,当酶解液质量浓度为1.5 mg/mL时,DPPH自由基清除率为89.99%,当酶解液质量浓度为0.6 mg/mL时,超氧阴离子的清除率为85.57%。     

玉米多肽的制备

以玉米蛋白粉为原料,经蛋白酶酶解、分离和提纯可制得玉米多肤.试验通过中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合酶来水解玉米蛋白粉制备多肽,对此工艺进行了研究,试验以水解度(DH)为指标,确定了复合酶解的最佳工艺条件为复合配比2:1、底物质量分数10%、pH值7.5、温度45℃、水解时间2 h,在此条件下水解度为20.38%.     

文蛤多肽的制备及抗氧化活性的研究

通过蛋白酶解的方法制备文蛤多肽(Meretrix meretrix L. peptide,MMP),并对其抗氧化活性进行研究。以蛋白回收率和水解度为指标,对酶解条件进行优化。得到其最佳酶解条件为,胰蛋白酶加酶量0.6%、料液比1∶15(g/mL)、酶解时间6 h。此时,其蛋白回收率与水解度分别为93.55%与29.55%。体外抗氧化试验结果显示,MMP的清除DPPH自由基和羟自由基活性、以及总还原力,随浓度增加而明显增加。其中,MMP清除DPPH自由基活性和清除羟自由基活性的IC_(50)值分别为0.56、7.26 mg/mL。同时,MMP与维生素C在清除DPPH自由基作用方面表现出明显的协同增效作用。在二者质量配比为10∶1时,其协同增效作用达到最佳。     

酶法水解麦胚蛋白及其产物的抗氧化活性研究

选择碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对麦胚蛋白进行水解,并考察其水解产物的抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶为制备麦胚抗氧化肽的最适蛋白酶,其最佳水解条件为:底物质量分数4%,酶添加量6 000U/g,酶解温度50℃,pH值7.5,水解至270min时抗氧化活性最大。     

麦胚蛋白水解度与麦胚抗氧化肽活性关系

用固定化碱性蛋白酶水解冻干麦胚蛋白粉制备麦胚抗氧化肽,研究麦胚蛋白的水解度与抗氧化肽活性的关系。在单因素实验基础上,利用Box‐Behnken实验设计对影响因素进行优化试验和统计分析。结果显示,酶解麦胚蛋白的水解度和麦胚抗氧化肽的活性密切相关;响应面分析试验得到麦胚抗氧化肽对自由基清除率的回归方程,方程达到极显著水平,拟和度较高。固定化蛋白酶水解麦胚蛋白获取抗氧化肽优化工艺参数：pH值为9．0、酶解温度56℃和酶解时间230 min。在此条件下,麦胚蛋白的水解度为17．85％,抗氧化肽对自由基的清除率达到57．42％。     

麦胚蛋白的双酶分步水解及其产物的抗氧化活性研究

前期实验确定中性蛋白酶为水解麦胚蛋白制备抗氧化肽的最适单酶,在此基础上进行了双酶组合水解麦胚蛋白的酶解工艺及酶解产物的抗氧化活性的探讨性研究。结果表明,双酶最佳组合为中性蛋白酶和碱性蛋白酶。经中性蛋白酶酶解270min的酶解液加入碱性蛋白酶后,水解至300min和420min时酶解产物还原能力和肽含量有不同程度增加,但DPPH·清除率始终是呈下降趋势。因此双酶水解比单酶水解麦胚蛋白没有明显优势。     

玉米胚芽蛋白水解物的抗氧化活性研究

以玉米胚芽蛋白水解物为底物,通过对其羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、二苯基苦味酸基苯肼(DPPH)自由基清除能力、Cu2+螯合能力、在亚油酸体系中的抗氧化性、油脂过氧化值(POV)等指标的测定,研究玉米胚芽蛋白水解物的抗氧化活性.结果表明,玉米胚芽蛋白水解物对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基具有一定的清除能力,且浓度为6mg/mL时,清除效果最好;对Cu2+具有螯合能力,并且螯合能力随着玉米胚芽蛋白水解物浓度的增加而呈上升趋势;对亚油酸氧化具有抑制作用,作用效果与剂量成正相关,同时对油脂的POV值具有抑制作用,浓度为0.1％时抑制作用最强.     

酶解方式对核桃蛋白肽及其抗氧化活性的影响

分别采用7种蛋白酶对核桃蛋白进行单酶水解,并与双酶复合酶解进行比较,考察不同酶解方式对酶解产物水解度、短肽得率和抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶单酶酶解核桃蛋白,产物的水解度和短肽得率显著高于其它单酶处理,分别达到18.94%和76.37%,对DPPH自由基清除能力的IC50值仅为3.23mg/mL,抗氧化活性显著高于其它处理;将碱性蛋白酶分别与其它蛋白酶组合酶解,核桃蛋白酶解产物的水解度和短肽得率均有所提高,其中与木瓜蛋白酶组合处理的水解度可达28.36%,短肽得率可提高至85.62%。双酶酶解产物对提高清除DPPH自由基和羟自由基的活性不显著,碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的组合可以显著提高酶解产物清除超氧阴离子自由基的活性。     

胰蛋白酶水解玉米胚芽蛋白的研究

研究了胰蛋白酶对玉米胚芽蛋白的水解作用,分析了酶浓度、pH、反应温度、底物浓度等因素对水解度的影响。结果表明:最佳水解条件为酶与底物比2%、温度40℃、pH8.0、底物浓度8%。在此条件下水解4 h,水解度可达10.4%。高效凝胶过滤色谱(HPSEC)分析酶解产物分子量分布发现,酶解产物的分子量主要集中在200~4 000 Da。     

玉米谷蛋白水解物抗氧化活性及其对香肠品质改善的研究

以玉米谷蛋白为原料,采用碱性蛋白酶进行酶解,得到玉米谷蛋白水解物.先对玉米谷蛋白水解物的抗氧化活性进行测定,再以pH值、硫代巴比妥酸反应物、酸价、质构、色差及感官评价为指标,评价其对中式香肠品质的改善效果.结果表明,玉米谷蛋白水解物具有良好的Fe2+螯合能力以及DPPH自由基和羟基自由基清除能力,其EC50分别为0.3...     

玉米胚芽分步酶解法提油工艺的研究

研究了分步酶解法提取玉米胚芽油工艺的实验室条件,确定最佳提取参数为料液比1∶0.77,玉米胚芽颗粒大小为105目,纤维素酶添加量6870 U/g,蛋白酶添加量1648 U/g,纤维素酶酶解时间7.4 h,蛋白酶酶解时间2.8 h。在最佳条件下,清油提取率可达75.38%。     

水酶法提取湿磨法玉米胚芽油的研究

以玉米胚芽为原料,对同时提取蛋白和水酶法提油的工艺条件进行了研究.研究结果表明,玉米胚芽首先在碱性条件下提取分离其中的蛋白质,剩下的料液(渣和乳化层)再用水酶法提取其中的油脂.纤维素酶可显著提高玉米胚芽油的收率,其最适参数为:料液比为1:3,蒸汽预处理时间为20min,酶添加量为1%,反应pH为5.5,温度为55℃,酶解时间为6 h.